高短肽得率羊骨酶解物的制备及其体外抗氧化活性

以短肽得率为指标,响应面法优化羊骨碱性蛋白酶水解工艺,对酶解物的抗氧化活性进行研究,为羊骨的高值利用奠定基础。结果表明,以所得最优工艺即骨粉浓度8.24%,p H值9,加酶量4.35%,46℃水解5 h制备酶解物,短肽得率达71.19%;酶解物对3种自由基的清除率随浓度的增加而增加,对3种活性氧的清除能力为DPPH·O_2~-··OH;0.3 mg/m L酶解物对DPPH·,O_2~-·,·OH的清除率分别为46.21%,29.82%和24.16%。由此可见,以最优工艺制备的、富含短肽的羊骨碱性蛋白酶解物具有体外抗氧化活性,有望应用于饲料、食品、医药等领域。     

响应面法优化青蛤降血压肽酶解制备工艺

[目的]采用响应面法优化青蛤降血压肽的酶解制备工艺。[方法]以青蛤肉为原料,木瓜蛋白酶为酶种,血管紧张素转换酶抑制率为指标,在单因素试验的基础上,选择pH、酶解时间和料液比为影响因素,进行3因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应面法分析3个因素对青蛤降血压肽制备工艺的影响。[结果]木瓜蛋白酶酶解制备青蛤降血压肽的最佳工艺条件为pH 5.8、酶解时间8.4 h、料液比1∶3.1,该条件下酶解产物对血管紧张素转换酶抑制率达93.58%。[结论]该研究为青蛤的高值化利用和降血压肽的制备提供了新思路。     

制备米糠蛋白降血压肽最佳用酶的筛选

试验以筛选制备米糠蛋白降压肽最佳用酶为目的。选用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、蛋白酶K和双酶复合水解米糠蛋白,以血管紧张素转化酶（ACE）抑制率为主要指标,筛选出制备米糠蛋白降压肽的最佳用酶。结果表明,米糠降压肽ACE抑制率的大小与酶的种类及配比有关,筛选出碱性蛋白酶Alcalase为试验用酶,在酶解温度45℃,加酶量3 000 U.g-1,酶解pH8.5,米糠蛋白底物浓度3%酶解2 h时达到最大抑制率为71.1%。     

鲶鱼骨酶解物的降血压肽活性研究

以鲶鱼骨蛋白为原料制备ACE抑制肽,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶进行酶解,通过体外检测法测定其抑制率,优选出最佳用酶。通过单因素试验和正交试验,确定了碱性蛋白酶酶用量、pH、酶解温度、酶解时间、底物浓度等因素对ACE活性抑制效果的影响。结果表明:利用碱性蛋白酶水解鲶鱼骨,酶用量为500U/g、pH值8.5、温度为60℃、底物浓度为0.33kg/L、时间6h时酶解液对ACE的抑制活性最强,抑制率为88.36%。通过比较,最佳酶解条件下得到的降血压肽的ACE抑制率要高于降血压药尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。     

扇贝裙边ACE抑制肽的分离鉴定及其降血压活性研究

为研究扇贝裙边ACE抑制肽的结构及其降血压效果,以虾夷扇贝Patinopecten yessoensis裙边酶解液为研究对象,采用凝胶色谱及反相高效液相色谱对ACE抑制肽组分进行分离纯化、ESI MS/MS鉴定和动物试验。结果表明:经Sephadex LH-20分离得到的组分F5和F7具有ACE抑制活性,其半抑制浓度(IC_(50))分别为1.4、1.7 mg/m L;通过两次反相高效液相色谱分离得到F5-3-3,经质谱解析筛选出的肽段Val-Trp(VW)具有ACE抑制活性,其IC_(50)为86.9μmol/L;用扇贝酶解液经超滤获得的相对分子量小于3000的组分灌胃雄性原发性高血压大鼠(SHR)28 d,灌胃第9天时,SHR的心脏收缩压(SBP)达到172 mm Hg,之后心脏收缩压基本保持恒定且极显著低于空白对照组(P<0.01),停止灌胃7 d内,多肽处理组SHR的心脏收缩压与空白对照组相比仍表现出极显著性差异(P<0.01)。研究表明,扇贝裙边酶解产物具有较好的降血压效果,可作为研发降压药物或保健食品的良好原料。     

复合蛋白酶水解大豆制备大豆肽工艺的研究

以大豆蛋白为底物,加入复合蛋白酶进行水解,对反应温度、底物浓度、反应时间、pH值、酶用量等工艺参数进行了系统地研究,并分析了大豆肽含量及大豆蛋白水解度与各影响因子之间的关系;研究结果表明:最适温度为30℃、最适pH值为5.5、最适底物浓度为4.5 mg/ml、最适加酶量为8%(W/V)、最适反应时间为5 h,在此条件下酶解液中可溶性蛋白含量为3.05 mg/ml、水解度为73.11%。     

低苯丙氨酸紫苏肽制备工艺研究

为丰富低苯丙氨酸特殊医学用途配方食品,本研究以紫苏籽粕（脱脂）为原料,通过单因素及响应面分析法优化双酶水解工艺,同时探究活性炭吸附游离苯丙氨酸的条件。结果表明,双酶法水解紫苏蛋白以制备低苯丙氨酸紫苏肽的最佳工艺为：选择中性复合蛋白酶（pH 7.0）和氨基肽酶（p H 8.0）,分别在55℃条件下依次水解紫苏籽粕5.0、5.5 h。采用200目活性炭吸附水解后游离的苯丙氨酸,经高效液相色谱检测,紫苏蛋白中苯丙氨酸释放率为96.54%,苯丙氨酸去除率为97.64%,产物中苯丙氨酸质量分数为1.10 mg/g,满足《食品安全国家标准特殊医学用途配方食品通则》（GB29922—2013）中对苯丙氨酸含量的要求。本研究为低苯丙氨酸特殊医学用途配方食品的制备提供了一种有效的方法,对于推广这类食品有重要的现实意义。     

羊骨蛋白酶解物免疫活性及酶解条件的研究

【目的】利用羊骨中胶原蛋白以获得免疫调节活性肽。【方法】利用木瓜蛋白酶对羊骨蛋白进行酶解,采用四元二次通用旋转设计,考察酶用量（E/S）、水解温度（Temp）、水解时间（t）和底物浓度（S）对免疫活性的影响,并选出最佳的酶解条件。同时采用Folin-酚法测定了酶解产物中可溶性肽的含量,采用SAS软件分析可溶性肽含量与免疫活性之间的相关关系。经Design expert 7.1.2软件优选最佳酶解条件。【结果】得出木瓜蛋白酶的最佳水解条件为：酶用量（E/S）1 576 U&#8226;g-1,水解温度为（Temp）64.05℃,水解时间（t）7.22 h,底物浓度为（S）0.271 kg&#8226;L-1。可溶性肽含量与免疫活性之间的相关系数r=0.045相似文献   

复合酶解法制备乳清蛋白肽工艺条件的研究

乳清蛋白经蛋白酶酶解得到小分子乳清蛋白肽,它具有多种生理活性功能,可以广泛应用于食品和医药等行业.采用复合蛋白酶酶解乳清蛋白,并通过正交试验,确定其优化工艺条件.结果表明,采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶酶解乳清蛋白制取乳清蛋白肽的最佳工艺条件是酶比底物值1:12,底物浓度6.0%,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例2:1,pH值7.5,在45℃条件下酶解7h,其最高水解度可以达到46.5%.     

酶法制备活性肽的讨论

酶解蛋白质产生的短肽混合物中,一些肽段不仅提供营养,而且具有特殊生理功 能,称为活性肽。目前,由于蛋白酶解制备法可实现规模化大生产,活性肽的主要生产方法是酶 法制备活性肽。本文讨论了酶法制备活性肽工艺流程的主要步骤,判定酶解效果的指标,酶的 选用,酶解各种影响因素如温度、酸度、加酶量、底物浓度、水解时间等对应参数的确定。对当前 存在的问题提出了理论上的的解决方法,并对在新的技术背景下,如何更高效率地生产活性肽 进行了展望。     

A Novel Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitory Peptide from the Milk Casein: Virtual Screening and Docking Studies

Angiotensin I converting enzyme (ACE) plays an important physiological role in the regulation of hypertension. In this study, we applied virtual screening to discover a novel angiotensin I converting enzyme inhibitory peptides from milk casein. One potential hit was identified based on docking scores, subsequently confirmed by activity studies in vitro (IC50=20.85 μmol L-1). The proposed peptide in this study contains a unique sequence, Lys-Val-Leu-Ile-Leu-Ala. Moreover,we performed the docking studies to understand the binding mode between the enzyme and peptide hit.     

Drying Technology of Angiotensin Converting Enzyme Inhibitory Peptide Derived from Bovine Casein

Drying technology of angiotensin converting enzyme （ACE） inhibitory peptides derived from bovine casein was investigated. No significance was observed on ACE inhibitory activity of products prepared by spay drying and freeze drying （P〉0.05）. Spay drying was the best drying process for practical industry production. The inlet temperature ranged from 140℃ to 160℃ and the exit temperature ranged from 70 ℃ to 90 ℃ during the spay drying process. Under the optimal conditions, scale-up of angiotensin converted enzyme inhibitory peptide from 1 L to 10 L and the experiment was successively conducted. Peptide yield was 29% and half inhibitory concentration （IC50） was 0.53 g. L^-1.     

植物源血管紧张素转换酶抑制剂的研究进展

血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)通过肾素-血管紧张素系统(RAS)和激肽释放酶-肽酶系统(KKS),抑制血管紧张素II的生成,减少缓激肽的降解,从而达到降血压的目的;植物来源的天然化合物具有来源广泛、结构多样、特异性高、毒性低等特点,因而从植物中筛选安全有效的ACEI成为研究热点。在此综述了血管紧张素转换酶(ACE)的活性测定方法以及植物来源的不同结构类型的ACEI研究进展。     

昆嵛山血管紧张素转换酶抑制剂原料植物资源调查

血管紧张素转换酶抑制剂是近年来正迅速发展的一类心血管药物。对昆嵛山血管紧张素转换酶抑制剂原料植物资源进行调查,为该资源的开发利用提供基础资料。     

美洲鲥鱼消化系统消化酶活性研究

[目的]研究美洲鲥鱼消化酶的理化特性,为人工养殖美洲鲥鱼的饲料配方提供理论依据。[方法]用福林-酚法和3,5-二硝基水杨酸法分别测定美洲鲥鱼消化器官蛋白酶和淀粉酶活性,试验数据用SISS软件进行统计分析。[结果]结果表明：在37℃、pH值7．34条件下,美洲鲥鱼蛋白酶活性的大小顺序依次为：胃〉幽门垂〉肠道,其中,肝脏和胃盲囊没有检测到蛋白酶活性。除肝脏和胃盲囊、胃和幽门垂蛋白酶的活性差异不显著（P〉0．05）外,其他组织间蛋白酶活性差异板显著（P〈0．01）;在37℃、pH值5．68～8．85条件下,美洲鲥鱼淀粉酶活性的大小顺序依次为：肝脏〉幽门垂〉肠道〉胃〉胃盲囊,其中,幽门垂和肠道、胃和胃盲囊淀粉酶的活性差异不显著（P〉0．05）,其他组织间差异极显著（P〈0．01）;美洲鲥鱼幽门垂蛋白酶的最适pH值为8．48,最适pH值范围为8．10～8．85;幽门垂和肝脏中淀粉酶的最适pH值均为8．10;肝脏中淀粉酶的最适pH值范围为8．10～8．48。     

酶法降解白肋烟中蛋白质含量研究

[目的]研究不同酶制剂及其组合对白肋烟叶中蛋白质的降解作用。[方法]在烟丝中添加不同种类及不同配比的酶制剂,利用醋酸抽提法测定烟叶中的蛋白质含量。[结果]3种酶的最佳添加量为：中性蛋白酶160 U/g,内切蛋白酶120 U/g,纤维素酶80 U/g。在45℃,25%水分,4 h条件下用上述混合酶降解白肋烟中蛋白质的效果最好。处理过的烟丝香气变好,杂气减轻,刺激性减小,余味干净,尤其对白肋烟中的苦味和辛辣味的消除有明显的效果。[结论]利用中性蛋白酶、内切蛋白酶、纤维素酶3种酶的最佳比例搭配出的复合酶制剂可以有效降低白肋烟中的蛋白质含量,为提高白肋烟的品质和安全性提供了有效的方法。     

酶法转化人参皂苷Re为Rg1的研究

研究了酶法转化人参皂苷Re为人参皂苷Rg1的酶反应条件和产率。用含人参皂苷-α-鼠李糖苷酶的Sp39、Sp00、Sp48菌种水解Re得到Rg1,其中AbsidiaSp39的酶活力最高。最适培养基为人参浸出物浓度是30%。该菌产酶作用于底物Re的最佳反应条件是:pH=6时酶活力最高,酶反应最适温度为45℃,酶反应20h,酶法转化Re为Rg1的转化率为56%。     

淡水小龙虾下脚料酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]研究以淡水小龙虾下脚料为原料酶解制备龙虾抗氧化肽的工艺。[方法]以酶水解产物清除羟自由基能力为指标,采用单因素和响应面试验考察了制备淡水小龙虾抗氧化肽的最佳蛋白酶种类及其酶解工艺。[结果]碱性蛋白酶是制备淡水小龙虾抗氧化肽的优选蛋白酶;最佳酶解工艺条件为：料液比1.0∶1.0（g∶ml）、酶解温度59℃、pH 8.9、加酶量2 000 U/g,水解时间3 h。[结论]此工艺所得酶解液对羟自由基的清除效果最好,清除率为74.66%。     

氯嘧磺隆对土壤酶活性的影响

[目的]探讨不同浓度的氯嘧磺隆对6种土壤酶活性的影响。[方法]在供试土壤中加入不同浓度梯度的氯嘧磺隆溶液,使氯嘧磺隆的终浓度分别为（A0）0、田间低用量5 g/kg干土、正常用量10 g/kg干土和高用量20 g/kg干土,定期取样测定酶活性。[结果]各浓度条件下的氯嘧磺隆均对过氧化氢酶有激活作用;不同浓度的氯嘧磺隆可在前期抑制多酚氧化酶、脱氢酶和蔗糖酶活性,但后期又具备激活作用,其中低浓度在整个过程中影响较小;低浓度的氯嘧磺隆对土壤蛋白酶与脲酶活性有一定的刺激作用,而高浓度又对以上2种酶产生抑制作用。[结论]低浓度的氯嘧磺隆对各种酶的影响小,酶活性能够恢复,高浓度处理后土壤酶活性不容易恢复。     

海洋生物源抗高血压肽的制备和构效关系研究进展

高血压已成为全球最常见的心血管疾病,其中肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)发挥着重要的血压调节作用,血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)催化血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ,并使缓激肽失活,因此,其抑制剂成为抗高血压药物研究的靶点.许多研究表明小肽具有ACE活性抑制作用,存在调控高血压的潜力.海洋生物种类丰富,具有潜在的生物活性肽的开发价值.对来自海洋生物的抗高血压生物活性肽的生产和构效关系(Structure-Activity Relationship,SAR)的研究现状进行综述.