Na２CO３ 胁迫下星星草幼苗叶片电解质外渗率与PSⅡ光能耗散的关系

 用荧光动力学的方法探讨Ｎａ_２ＣＯ_３ 胁迫下星星草幼苗叶片电解质外渗率与ＰＳⅡ 光能耗散的关系。结果表明,随着星星草幼苗叶片电解质外渗率的增大,ＰＳⅡ 的最大光化学效率（Fu／Fm）和潜在光化学效率（Fv／Fo）呈逐渐减小的趋势。同时,当电解质外渗率小于０．２时,ＰＳⅡ 实际光化学效率（ΦＰＳⅡ）、电子传递速率（ＥＴＲ）、光化学淬灭系数（qP）、光化学速率（ＰＲ）、捕光色素的光能被用于热耗散的相对份额（ＨＤ）、热耗散速率（ＨＤＲ）都随着电解质外渗率的增大而增大;而当电解质外渗率超过０．２ 时,ＰＳⅡ 实际光化学效率（ΦＰＳⅡ）、电子传递速率（ＥＴＲ）、光化学淬灭系数（qP）、光化学速率（ＰＲ）却随着电解质外渗率的增大而减小。另一方面,电解质外渗率在小于０．１５时,非光化学淬灭系数（qNP）一直在增加,但是当电解质外渗率超过０．１５时,qNP却减少。本试验结果说明当电解质外渗率在一定范围内,星星草通过增加热耗散以及增加捕光色素吸收的光能被用于热耗散的相对份额（ＨＤ）和热耗散速率（ＨＤＲ）来改善ＰＳⅡ的功能,由此引起的活性氧增加则由体内较高的保护酶来清除,若超过了一定阈值则抑制了ＰＳⅡ的功能,或者说ＰＳⅡ系统可能遭受了不可逆损伤。     

Na_2CO_3胁迫下星星草幼苗叶片电解质外渗率与PSⅡ光能耗散的关系

用荧光动力学的方法探讨Na2CO3胁迫下星星草幼苗叶片电解质外渗率与PSⅡ光能耗散的关系。结果表明,随着星星草幼苗叶片电解质外渗率的增大,PSⅡ的最大光化学效率（Fv/Fm）和潜在光化学效率（Fv/Fo）呈逐渐减小的趋势。同时,当电解质外渗率小于0.2时,PSⅡ实际光化学效率（ΦPSⅡ）、电子传递速率（ETR）、光化学淬灭系数（qP）、光化学速率（PR）、捕光色素的光能被用于热耗散的相对份额（HD）、热耗散速率（HDR）都随着电解质外渗率的增大而增大;而当电解质外渗率超过0.2时,PSⅡ实际光化学效率（ΦPSⅡ）、电子传递速率（ETR）、光化学淬灭系数（qP）、光化学速率（PR）却随着电解质外渗率的增大而减小。另一方面,电解质外渗率在小于0.15时,非光化学淬灭系数（qNP）一直在增加,但是当电解质外渗率超过0.15时,qNP却减少。本试验结果说明当电解质外渗率在一定范围内,星星草通过增加热耗散以及增加捕光色素吸收的光能被用于热耗散的相对份额（HD）和热耗散速率（HDR）来改善PSⅡ的功能,由此引起的活性氧增加则由体内较高的保护酶来清除,若超过了一定阈值则抑制了PSⅡ的功能,或者说PSⅡ系统可能遭受了不可逆损伤。     

O通量特征及排放贡献

：２００３年５月－２００４年４月,利用静态箱－气相色谱法对生长季与非生长季三江平原小叶章湿地N₂O 通量特征及排放贡献进行了研究。结果表明,生长季N₂O 呈脉冲式排放,通量介于０．００５～０．１１１ｍｇ／（ｍ^２·ｈ）,５月较低通量与降水较多有关,６月通量骤然增加与冻层融通有关,７－８月与降水少及蒸发旺盛有关,９月与土壤中较多氮有关。N₂O 通量与５ｃｍ 地温呈显著正相关（P＜０．０１）;非生长季N₂O 表现为“吸收－排放”,通量介于－０．００１５～０．０４９７ｍｇ／（ｍ^２·ｈ）。N₂O 通量与气温、土壤融化时间均呈指数关系（P＜０．０１）,说明在冻结期,温度仍是控制微生物活性的主要因素,而在融化期,温度和冻层融通是导致N₂O 通量迅速增加的重要原因。总之,生长季N₂O 排放量为２０５．５４ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 的“源”,非生长季N₂O 排放量为－２６．９７ ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 的“汇”,全年N₂O 排放量为１７８．５７ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 重要释放“源”。     

的响应

以蚕豆品种临蚕２号为试验材料,采用土培法,研究了在镉胁迫期间蚕豆幼苗抗氧化酶（ＳＯＤ、ＣＡＴ 和ＰＯＤ）活性、脯氨酸、丙二醛和活性氧含量的动态变化过程,以探讨外源ＮＯ 和Ｈ_２Ｏ_２ 对镉毒害下蚕豆幼苗的保护效应。结果表明,０．１ｍｍｏｌ／ＬＳＮＰ（外源ＮＯ 供体）和０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ Ｈ_２Ｏ_２ 单独处理均可缓解０．１ｍｍｏｌ／Ｌ 镉对蚕豆幼苗的氧化损伤,而二者互作处理存在正协同效应,主要表现在增强了蚕豆幼苗的保护酶活性,其中ＳＯＤ 在镉胁迫７２ｈ后活性达到峰值,比对照提高５７．８９％,ＣＡＴ 和ＰＯＤ 均在镉胁迫４８ｈ 后活性达到最大值,分别比对照提高６９．６０％和１０１．１８％;镉胁迫１２０ｈ时,与单镉胁迫处理相比,互作处理的脯氨酸含量提高了１３４．８８％,而ＭＤＡ 含量、内源Ｈ_２Ｏ_２ 含量和体内Ｏ_２· － 的产生速率下降,有效地增强了蚕豆幼苗在镉胁迫期间的抗氧化能力。     

镉胁迫下蚕豆幼苗抗氧化能力对外源NO和H2O2 的响应

 以蚕豆品种临蚕２号为试验材料,采用土培法,研究了在镉胁迫期间蚕豆幼苗抗氧化酶（ＳＯＤ、ＣＡＴ 和ＰＯＤ）活性、脯氨酸、丙二醛和活性氧含量的动态变化过程,以探讨外源ＮＯ 和Ｈ_２Ｏ_２ 对镉毒害下蚕豆幼苗的保护效应。结果表明,０．１ｍｍｏｌ／ＬＳＮＰ（外源ＮＯ 供体）和０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ Ｈ_２Ｏ_２ 单独处理均可缓解０．１ｍｍｏｌ／Ｌ 镉对蚕豆幼苗的氧化损伤,而二者互作处理存在正协同效应,主要表现在增强了蚕豆幼苗的保护酶活性,其中ＳＯＤ 在镉胁迫７２ｈ后活性达到峰值,比对照提高５７．８９％,ＣＡＴ 和ＰＯＤ 均在镉胁迫４８ｈ 后活性达到最大值,分别比对照提高６９．６０％和１０１．１８％;镉胁迫１２０ｈ时,与单镉胁迫处理相比,互作处理的脯氨酸含量提高了１３４．８８％,而ＭＤＡ 含量、内源Ｈ_２Ｏ_２ 含量和体内Ｏ_２· － 的产生速率下降,有效地增强了蚕豆幼苗在镉胁迫期间的抗氧化能力。     

生长季与非生长季小叶章湿地N2O通量特征及排放贡献

 ：２００３年５月－２００４年４月,利用静态箱－气相色谱法对生长季与非生长季三江平原小叶章湿地N₂O 通量特征及排放贡献进行了研究。结果表明,生长季N₂O 呈脉冲式排放,通量介于０．００５～０．１１１ｍｇ／（ｍ^２·ｈ）,５月较低通量与降水较多有关,６月通量骤然增加与冻层融通有关,７－８月与降水少及蒸发旺盛有关,９月与土壤中较多氮有关。N₂O 通量与５ｃｍ 地温呈显著正相关（P＜０．０１）;非生长季N₂O 表现为“吸收－排放”,通量介于－０．００１５～０．０４９７ｍｇ／（ｍ^２·ｈ）。N₂O 通量与气温、土壤融化时间均呈指数关系（P＜０．０１）,说明在冻结期,温度仍是控制微生物活性的主要因素,而在融化期,温度和冻层融通是导致N₂O 通量迅速增加的重要原因。总之,生长季N₂O 排放量为２０５．５４ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 的“源”,非生长季N₂O 排放量为－２６．９７ ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 的“汇”,全年N₂O 排放量为１７８．５７ｍｇN₂O／ｍ^２,为N₂O 重要释放“源”。     

干旱胁迫及复水对玉簪生长和光合作用的影响简

 以东北玉簪和紫萼玉簪为材料,研究了干旱胁迫及复水对玉簪干物质量、部分形态指标、叶绿素含量、气体交换和叶绿素荧光参数的影响,结果表明,随干旱胁迫时间的延长和干旱程度的增加,干旱胁迫处理对２种玉簪干物质量、部分形态指标、叶绿素含量的抑制作用逐渐增大。此外,干旱胁迫处理能够降低或显著降低２种玉簪的净光合速率（Pｎ）、气孔导度（Gｓ）、蒸腾速率（Tｒ）,降低或升高胞间ＣＯ_２ 浓度（Cｉ）;降低或显著降低ＰＳＩＩ最大光能转化效率（Fｖ／Fｍ）、光适应下ＰＳＩＩ最大光能转化效率（Fｖ′／Fｍ′）、ＰＳＩＩ电子传递量子效率（ΦＰＳＩＩ）和光化学猝灭系数（qP）,显著提高非光化学猝灭系数（NPQ）。而干旱胁迫处理１５或３０ｄ后复水１５ｄ,各指标均能得到不同程度的恢复;３０ｄ的干旱胁迫未造成光合细胞器的不可逆损伤。２种玉簪相关生理指标的比较分析结果显示,东北玉簪抗旱能力强于紫萼玉簪。     

三聚氰胺等4种物质的毒性比较研究

试验旨在通过细胞毒性试验、急性毒性试验对三聚氰胺及其类似物的毒性进行了初步研究。结果表明,三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺、单氰胺的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为10.11、3.17、22.56、0.305 mg/ml,而三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺的半数致死量（LD₅₀）均大于5000 mg/kg,单氰胺的半数致死量（LD₅₀）小于500 mg/kg。表明三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺为微毒或基本无毒,单氰胺为高毒。     

信号分子H2O2 调节抗氧化系统提高高羊茅耐热性研究

 采用盆栽试验,利用１０ｍｍｏｌ／Ｌ 的Ｈ_２Ｏ_２ 对冷季型草坪草高羊茅进行叶面喷施处理,研究外源低浓度Ｈ_２Ｏ_２对高羊茅叶片中抗氧化系统的调控作用及其对高羊茅抗热性的影响。结果表明,Ｈ_２Ｏ_２ 可能作为信号分子预先增加抗氧化酶的活性,改变抗氧化剂的浓度,从而减轻随后发生的热胁迫对草坪草造成的氧化伤害;在胁迫过程中ＰＯＤ 和ＣＡＴ 活性在Ｈ_２Ｏ_２ 预处理后增加不显著,热胁迫本身增加了ＰＯＤ 的活性,但是降低了ＣＡＴ 活性,ＰＯＤ 对于提高高羊茅的耐热性可能具有更重要的作用;外源Ｈ_２Ｏ_２ 显著影响了高羊茅叶片中的ＡｓＡ－ＧＳＨ 循环,其中处理植株中的ＡＰＸ、ＧＰＸ 和ＧＲ 的活性在热胁迫过程中增加２０％ ～１１０％,ＧＳＨ／ＧＳＳＧ 下降了８０％,与高羊茅抗热性的提高密切相关。可见信号分子Ｈ２Ｏ２ 可以通过调控高羊茅的抗氧化系统提高其抗热性。     

猪卵母细胞的体外成熟影响因素的研究

本试验研究了猪卵母细胞的体外成熟体系，着重研究了季节因素、FCS、pFF、胰岛素和17β-E₂对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：①3月~4月和10月~11月卵母细胞成熟率最高，与其它月份相比差异显著（P<0.05）；②卵泡期卵母细胞成熟率和卵裂率均显著高于黄体期；③添加10%FCS、10% pFF、20% FCS和10% FCS+10% pFF的卵裂率差异不显著（P>0.05），添加10% FCS或10% pFF的成熟率差异不显著，与添加20% FCS或10% FCS+10% pFF成熟率差异显著；④培养液中添加一定量的胰岛素和17β-E₂有助于提高成熟率和卵裂率。     

基因表达的影响

 试验旨在研究不同日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积及脂蛋白酯酶（LPL）基因mRNA表达影响。试验以3周龄北京油鸡公鸡为研究对象，将480只公鸡随机分为4组，分别饲喂4个代谢能水平的日粮（12.122、12.540、12.958和13.376 MJ/kg），每个处理组5个重复，每个重复24只鸡。试验期为10周。采用荧光定量PCR方法检测LPL基因mRNA表达水平。结果表明，日粮代谢能水平对鸡体脂沉积各项指标和LPL基因mRNA表达水平影响极显著，随日粮代谢能水平提高，各项体脂沉积指标极显著上升，胸肌和腿肌IMF、皮脂重和皮脂率在ME3达到峰值，LPL基因mRNA表达水平在ME2组达到峰值（P＜0.01）。LPL基因mRNA表达水平与腹脂率、皮脂重和皮脂率呈显著正相关（P＜0.05）。研究结果提示，日粮代谢能水平显著影响北京油鸡体脂沉积和LPL基因mRNA表达；LPL基因表达影响北京油鸡体脂沉积状况。     

株血清学和免疫学特性的研究

 在鸡胚肾细胞上对HN₉₉株病毒进行了克隆纯化，经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBV HN₉₉株的血清型，并用免疫保护试验进行了验证，结果证明HN₉₉株与T株属同一血清型，与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN₉₉灭活苗接种试验鸡，能够对HN₉₉攻毒提供100%的保护，证明HN₉₉株具有良好的免疫原性。     

胞外区基因的克隆、可溶性表达和纯化

 从鸡脾脏中提取总 RNA,以总RNA为模板,5’-ATC TAG AGG TAC CGG ATC C-(T)₁₅-3’为反转录引物,采用TaKaRa AMV反转录酶合成First-strand cDNA (fcDNA)。根据GenBank中登录的鸡的BF2基因胞外区序列,设计了含EcoRⅠ和 HindⅢ 酶切位点的2对引物,分别扩增鸡BF2的胞外区基因。PCR产物经纯化回收后,插入到含LacZ基因的原核克隆载体pGEM-T Easy中,转化至大肠杆菌JM109感受态细胞,经EcoRⅠ和Hind Ⅲ双酶切及PCR鉴定,筛选出阳性克隆。再把所克隆的片段亚克隆到表达载体pMAL-p2X vector,构建重组质粒p2X/BF2（1-5）。将重组表达质粒转化入大肠杆菌TB1感受态细胞,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明,本研究克隆了5类鸡BF2的胞外区基因序列,试验结果证明本研究已成功克隆并可溶性表达了5类BF2胞外区蛋白质分子,全长约807~819 bp,编码约269~273个氨基酸。采用淀粉树脂柱亲和层析和DEAE凝胶过滤方法对表达产物进行了纯化,并对纯化的表达产物进行了western blot鉴定。本研究为进一步利用BF2的胞外区在体外构建MHC Ⅰ类分子结合筛选抗原表位肽平台奠定了基础。     

逆向转运蛋白基因的克隆及序列分析

根据同源序列区域设计简并引物，利用ＲＴ－ＰＣＲ 及ＲＡＣＥ 方法从盐生植物大叶补血草中分离了Ｎａ^＋／Ｈ^＋逆向运输蛋白基因的ｃＤＮＡ（LgNHX1，ＧｅｎＢａｎｋ登录号ＥＵ７８０４５７）。LgNHX1的ｃＤＮＡ 全长为２３９７ｂｐ，５′端非翻译区长度为５１２ｂｐ，３′端非翻译区长度为２２９ｂｐ，其中包括１２ｂｐ的ｐｏｌｙ（Ａ）尾巴，中间的开放读码框为１６５６ｂｐ，编码１个５５０个氨基酸的多肽，推测分子量为６１ｋＤ。氨基酸同源性分析表明，ＬｇＮＨＸ１与北滨藜、小麦、盐角草和拟南芥液泡Ｎａ^＋／Ｈ^＋ 逆向运输蛋白的一致性分别为８２．６２％，８２．０１％，８０．６４％ 和７５．８６％。预测分析表明，ＬｇＮＨＸ１具有１１～１２个跨膜结构区域。系统发育分析表明该蛋白（ＬｇＮＨＸ１）与液泡型的Ｎａ^＋／Ｈ^＋ 逆向转运蛋白的亲缘关系较近，与质膜型的Ｎａ＋／Ｈ＋ 逆向转运蛋白亲缘关系较远。     

水牛生长性能研究

 对摩本杂F₁水牛在昆明小哨的全放牧条件下3年的生长性能进行研究，结果表明：初生体重平均36.40 kg，成年牛平均体重558.90 kg。     

高碘日粮对蛋鸡生产性能,体内代谢和蛋品质的影响

日粮加碘６５ｐｐｍ饲喂蛋鸡，破壳率减少（Ｐ＜０．０５），饲料消耗降低（Ｐ＜０．０１），采食量、产蛋量和蛋重无明显影响（Ｐ＜０．０５），肝中ＧＯＴ和ＧＰＴ酶活性显著上升（Ｐ＜０．０１），ＡＫＰ明显升高（Ｐ＜０．０５），血清中ＡＫＰ明显增加（Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ提高显著（Ｐ＜０．０５），而肝中ＣＤＨ和ＣＫ，血清中ＬＤＨ，ＧＯＴ、ＧＰＴ和ＣＫ无显著差异（Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ提高显著（Ｐ＜０．０５），     

桑树不同叶位的气体交换和光合效率初探

研究了桑树不同叶位的气体交换参数、叶绿素荧光参数、光合色素含量、磷含量的变化。结果表明：随着叶位的下降,净光合速率、气孔导度、蒸腾速率显著降低;在低光强下（800μmol·m^-2·s^-1以下）,胞间CO2浓度随着光强增加而降低,在高光强下（800μmol·m^-2·s^-1以上）,桑树基部叶片表现出强劲的上升趋势,说明叶片衰老时净光合速率下降的主要原因不是由气孔因素引起的;初始荧光的升高和光系统Ⅱ最大光化学量子产量的降低表明光系统Ⅱ中心遭受失活或破坏;光系统Ⅱ有效光化学量子产量、光系统Ⅱ实际光化学量子产量、光化学淬灭和表观电子传递速率的下降,说明无论是光能的吸收、还是光能的转化和传递均严重受抑,尽管非光化学淬灭和类胡萝卜素含量持续升高,但仍无法阻止叶绿素的降解和氮、磷含量的下降。     

重金属离子对２种草坪草荧光特性及根系形态的影响

 以高羊茅和多年生黑麦草为试验材料,分别设置Ｃｄ^２＋ 、Ｃｕ^２＋ 、Ｚｎ^２＋ 、Ｐｂ^２＋ 不同浓度处理,研究４种重金属离子对其荧光特性及根系形态的影响。结果表明,高羊茅在４种重金属离子处理下,其最大量子产量（F_ｖ／F_ｍ）值均低于对照,说明高羊茅在受到重金属离子胁迫后,其ＰＳⅡ 活性受到伤害;多年生黑麦草在Ｃｄ^２＋ 不同浓度处理下,其F_ｖ／F_ｍ 值均略高于对照,但差异不显著,说明Ｃｄ^２＋ 胁迫对多年生黑麦草的ＰＳⅡ系统的活性影响不大;但是Ｃｕ^２＋ 和Ｚｎ^２＋ 浓度分别达到５００ｍｇ／ｋｇ及以上时,对多年生黑麦草F_ｖ／F_ｍ 值影响较大,均显著低于对照;同时,多年生黑麦草还表现出低浓度Ｚｎ^２＋ 促进ＰＳⅡ系统活性的作用,但随着浓度升高,表现出对ＰＳⅡ系统越来越强的抑制作用;在４种重金属离子不同浓度处理下,２种草坪草的光化学淬灭系数（qP）和电子传递速率（ＥＴＲ）值均低于对照,说明其光合活性和电子传递效率均受到影响;经过４种重金属离子处理后,除部分离子低浓度处理外,高羊茅总根长、根表面积、总分叉数和总根尖数均显著低于对照,并且有随着离子处理浓度升高而逐渐降低的趋势;多年生黑麦草根系则表现出对低浓度重金属离子抗性较强,对高浓度重离子抗性较差,并且也有随浓度升高而不断降低的趋势。     

SA、H2O2 和6-BA预处理对沟叶结缕草耐寒性的影响

 通过对沟叶结缕草进行叶面喷施信号化合物ＳＡ、H₂O₂ 和6-BA,研究了预处理对沟叶结缕草耐寒性的影响。结果表明,ＳＡ、H₂O₂ 和6-BA预处理可以有效控制或者防止结缕草叶片中活性氧的积累和氧化伤害的发生,从而提高其抗寒性;预处理植株中ＰＯＤ、ＣＡＴ 和ＡＰＸ 活性在胁迫过程中显著高于对照,冷胁迫本身可以诱导ＳＯＤ 的活性避免O₂ ^-的积累,ＧＲ 在抗寒胁迫过程中可能起到负反馈的作用,抗氧化酶活性升高与沟叶结缕草耐寒性的获得密切相关;在这３种信号化合物中,ＳＡ 预处理植株中ＳＯＤ,ＣＡＴ 和ＧＲ 活性高于对照和其他化合物预处理植株,并且具有最小的ＭＤＡ 浓度,因此,ＳＡ 对于提高沟叶结缕草的耐寒性最有效。     

1基因对菊苣的转化和耐盐性研究

用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得４２株卡那霉素（Ｋａｎ）抗性再生植株。经过ＰＣＲ 检测、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ 检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度ＮａＣｌ胁迫后,植株叶片Ｋ^＋ 和Ｎａ^＋ 含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Ｎａ^＋ 和Ｋ^＋ ,维持较高的Ｋ^＋／Ｎａ^＋ ;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。