四川各地黑山羊品种(群体)乳的生化组成与酪蛋白多态性研究

采用常规方法测定四川9个黑山羊品种(群体)乳常规营养组分含量.采用碱性尿素电泳方法分析酪蛋白多态性.结果表明,四川9个黑山羊乳蛋白含量范围为41.36～46.37 g/L,以营山黑山羊最低(41.36 g/L),金堂黑山羊最高(46.37g/L),差异极显著(P＜0.01);乳糖含量范围为44.00～47.30 g/L,以建昌黑山羊最低(44.00 g/L),金堂黑山羊最高(47.30g/L),差异不显著(P＜0.05);乳脂率范围为55.45～60.52 g/L,其中以白玉黑山羊最低(55.45 g/L),自贡黑山羊最高(60.52 g/L),差异极显著(P＜0.01).乳蛋白组分:CN(68.42%～71.01%),β-Lg(14.46%～15.87%),IgG(7.04%～7.34%),α-La(5.35%～5.96%),SA(2.02%～2.40%).各蛋白组分经显著性检验,营山黑山羊和嘉陵黑山羊的CN相对含量显著低于其他黑山羊品种(群体)(P＜0.01).在9个山羊品种(群体)中α-酪蛋白基因型存在多态性,多态型对乳脂率影响显著,其中α-酪蛋白DD型乳脂率显著低于CC型、CD型(P＜0.05).     

脂肪酸添加剂抑制奶牛对环境污染的效果分析

将21头荷斯坦奶牛随机分为对照组和试验Ⅰ～Ⅵ组,每组3头,对照组饲喂TMR,试验Ⅰ～Ⅵ组饲喂TMR加50.0g、100.0g、150.0g、200.0g、250.0g、300.0g/头/d复合脂肪酸日粮.主要探讨复合脂肪酸对奶牛粪尿、N、P的排泄量和CH4释放量的影响.结果表明,TMR加150.0g/头/日～300.0g/头/d复合脂肪酸,比对照组CH4释放量减少11.40%～18.38%(P<0.01),粪尿和N及总P的排泄量分别降低1.38%～5.32%(P>0.05),11.84%～26.68%(P<0.01)和2.32%～4.86%(P>0.05),乳脂率提高10.76%～14.17%(P<0.05),有效抑制奶牛对周围土壤水源和空气的污染,显著提高奶牛的生态效益和经济效益.     

HPLC法检测饲料中4种硝基呋喃类药物

时饲料中四种硝基呋喃类药物呋喃西林(NFZ)、呋喃妥因(NFT)、呋喃它酮(FTD)和呋喃唑酮(FZD)的高效液相色谱(HPLC)检测方法进行了研究.采用50 mL乙腈于65℃下超声提取药物.经MCX固相萃取小柱净化后进行液相色谱-紫外检测,检测波长为370 nm对饲料进行10～500μg/g硝基呋喃类药物的添加回收实验,结果表明,4种药物的平均回收率为80.6%～99.9%(n=4),日内变异系数为0.68%～8.99%(n=4),日间变异系数为1.85%～8.44%(n=3).配合饲料中NFZ、NFT、FTD、FZD的检测限分别90、69、56μg/g和148 μg/g,定量限分别为180、137、112μg/g和296 μg/g;预混合饲料中NFZ、NFT、FTD、FZD的检测限分别为59、132、66μg/g和88 μg/g,定量限分别118、265、132μg/g和176μg/g.     

鸡蛋和鸡肉中尼卡巴嗪残留检测高效液相色谱 串联质谱法研究

建立了鸡蛋和鸡肉中尼卡巴嗪残留标示物4,4'-二硝基碳酰替苯胺(DNC)检测的高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS).液相色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇 0.1 mol/L的乙酸铵水溶液(75 25,V/V),柱温30 ℃,流速0.2 mL/min,进样量20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI-),多反应监测(MRM)方式进行采集;DNC-D8同位素内标法定量.结果表明,DNC在10～500 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,R2为0.999 7;鸡蛋和鸡肉中DNC残留检测方法检测限均为0.5 ng/g,定量限均为1 ng/g;鸡蛋中从2、5和10 ng/g三个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为95.9%～102.2%,批内RSD为0.9%～4.4%,批间RSD为0.3%～2.1%.鸡肉组织从100、200和300 ng/g三个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为94.0%～103.3%,批内RSD为2.0%～6.3%,批间RSD为3.1%～5.2%.     

蜂王浆中氯霉素残留量的LC-MS/MS与ELISA检测方法研究

介绍了利用LC-MS/MS与ELISA方法快速、准确地测定蜂王浆中氯霉素残留量.前处理方法包括用酸沉淀蛋白、乙酸乙酯提取、自制硅胶柱、Oasis(HLB)小柱等净化步骤.同时,在LC-MS/MS测定方法中使用了同位素内标氯霉素-d5.建立的LC-MS/MS方法,多反应监测了氯霉素3对离子(321.0/256.9、321.0/194.0、321.0/175.8)和同位素内标氯霉素-d5 1对离子(326.0/157.1),检测低限为0.2μg/kg,线性范围为0.2～0.8μg/kg,加标回收率为97%～102%,RSD为1.9%～7.1%;ELISA方法检测低限为0.1μg/kg,该水平添加回收率为108.2%,RSD为12.2%.     

猪饲料中莱克多巴胺的GC/MS快速测定

本实验对猪饲料中莱克多巴胺的气相色谱-质谱快速检测方法进行了研究.采用酸性甲醇-水提取饲料中的莱克多巴胺,经乙酸乙酯萃取和酸性氧化铝固相萃取柱净化,衍生化后用气相色谱-质谱法检测和确证.结果表明,方法平均回收率为70.8%～83.8%,日间变异系数为4.5%～11.1%(n=3),配合饲料检测限和定量限分别为0.5μg/g和1.0 μg/g,预混合饲料检测限和定量限分别为0.3 μg/g和0.7 μg/g.该方法适合饲料中莱克多巴胺的确证和定量分析.     

反相离子对色谱法测定蜂蜜中氟哌酸残留量

研究建立蜂蜜中氟哌酸残留量的反相离子对高效液相色谱测定方法.样品用水相提取,经C18固相萃取柱净化,在273 nm波长下用二极管矩阵检测器检测.色谱柱为Agilent ZORBOX SBC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇/磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L磷酸二氢钾)/四丁基溴化胺(0.05 mol/L)=24/73/3(V/V/V),用磷酸调节pH=2.75.流速1.0 ml/min.氟哌酸浓度在0.3～4.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为81.3%～94.7%,变异系数为1.52%～3.31%,最低检测限为0.1μg/ml.本方法简便、快速、准确.     

猪肉组织中四环素类药物残留检测——高效液相色谱-串联质谱法研究

建立了猪肉组织中四环素类药物残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法.色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为0.3%甲酸乙腈溶液 0.3%甲酸水溶液;柱温 20 ℃,流速0.2 mL/min;进样量20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI );多反应监测(MRM)方式采集.外标法定量.结果表明,四环素、土霉素和金霉素在10～400 ng/mL浓度范围内呈现良好线性,相关指数R2均大于0.999;方法检测限为5 ng/g,定量限为10 ng/g.50、100和200 ng/g三个添加浓度的平均回收率为72.3%～94.6%,批内批间RSD均小于20%.     

RP-HPLC法检测安替比林血药浓度

建立了安替比林血药浓度检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC).血浆经乙腈提取后进样测定,色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为0.025 mol/L醋酸钠溶液-乙腈(74:26,V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm,进样量20μL.安替比林血药浓度在0.1～30μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为93.44%～97.21%,日内和日间变异系数小于4.26%.     

RP-HPLC法测定阿莫西林-盐酸环丙沙星可溶性粉的含量

应用RP-HPLC法测定阿莫西林-盐酸环丙沙星可溶性粉的含量.采用Shim-pack CLC-ODS C18柱(150 mm×6 mm, 5 μm),以1.5×10-2 mol/L三乙胺溶液(用磷酸调pH至3.0)-乙腈 (体积比85∶ 15)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为229 nm,柱温为40 ℃.在此色谱条件下两者能完全分离,阿莫西林、盐酸环丙沙星分别在22～108 μg/mL和29～146 μg/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数均为0.999 9.阿莫西林、盐酸环丙沙星的回收率分别为99.50%～100.20%和99.30%～99.86%(n=5);RSD分别为0.60%～1.00%和0.86%～1.02%(n=5).本法可用于阿莫西林-盐酸环丙沙星可溶性粉的质量控制.     

木聚糖酶对蛋鸡生产性能、营养物质利用率及相关理化指标的影响

试验旨在探讨木聚糖酶对玉米-豆粕-杂粕型日粮蛋鸡生产性能影响机理及适宜添加量。选择290日龄海兰褐蛋鸡480只,随机分为4个处理,每个处理分6个重复,每个重复20只。日粮中分别添加0g/t、100g/t、150g/t、200g/t木聚糖酶(15000u/g),试验时间30d。结果表明,在杂粕型蛋鸡日粮中添加木聚糖酶有如下优势:①有提高产蛋率和蛋重的趋势(P>0.05),对料蛋比影响不明显;②提高了营养物质利用率,与对照组比较,试验组能量利用率提高了2.15%～2.81%(P<0.05),粗蛋白提高了0.57%～6.64%(P<0.05),粗纤维提高了57.04%～82.01%(P<0.01),粗脂肪提高了0.55%～2.18%(P<0.05),钙提高了2.67%～10.91%(P<0.05),磷提高了10.52%～14.27%(P<0.05);③与对照组相比,试验组回肠食糜黏度下降了8.12%～10.25%(P<0.05);结肠食糜黏度亦有降低趋势(P>0.05)。综合考虑,玉米-豆粕-杂粕型蛋鸡日粮中木聚糖酶(15000u/g)的适宜添加量是100～150g/t。     

链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法

建立了链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法.样品用10%(W/V)三氯乙酸提取,通过冷冻离心使牛奶中残留的链霉素得到分离,再用枯草芽孢杆菌作为检定菌进行含量测定.结果显示,链霉素在0.10～3. 20 μg/mL的浓度范围内具有良好线性关系(r=0.998 1),牛奶中3种添加浓度0.20、0.80、1.60 μg/g的平均回收率为97.6%(n=9),RSD分别为1.6 %、3.7 %、1.2 %(n=3).     

饲料中三聚氰胺测定方法的比较

对饲料中三聚氰胺的两种测定方法即高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱质谱联用法(GC-MS)进行比较分析.采用HPLC法测定三聚氰胺在1.0～50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2=0.9999),平均回收率为98.9%,RSD为0.4%.采用GC-MS法测定三聚氰胺在0.05～1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2-0.9965),回收率为91.0%,RSD 1.7%.结果表明,采用HPLC法测定操作简便,结果更精确,但易出现假阳性:采用GC-MS法测定操作复杂,但是确证法且定量限更低.     

离子对高效液相色谱法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B6含量

建立了同时测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B6含量的离子对HPLC方法.采用ODS色谱柱,流动相为磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠水溶液(每1L中含磷酸二氢钾13.6 g与庚烷磺酸钠1.0 g)-甲醇-三乙胺(85∶15∶0.4),用磷酸调pH至2.8;检测波长290 nm,以峰面积计算,外标法定量.甲硝唑和维生素B6的线性范围分别为100～300 μg/mL(r=0.999 9)和5～50 μg/mL(r=0.999 9);平均回收率分别为100.2%(RSD=1.0%,n=6),99.8%(RSD=1.2%,n=6).该方法测定结果准确,操作简便,回收率高.     

氢化物发生-原子荧光法测定饲料中的镉

本实验采用氢化物发生-原子荧光光谱(HG-AFS)法,用盐酸、硝酸和高氯酸消解样品,以钴离子作为镉荧光信号增强剂,测定饲料及饲料添加荆中的镉.在本实验条件下测定,镉在0～2.0μg/L线性关系良好,回归方程y=1317.8x+78.203(r=0.9995),方法的相对标准偏差(RSD)为1.6%(n=11.2μ/L),检出限为0.08μg/L,加标回收率为78.3%～106.7%.用本方法测定饲料及饲料添加剂中的镉,操作简单快速.灵敏度高,重现性好,适合饲料及饲料添加剂中镉的检测分析.     

虎杖乙醇提取物的抗炎及免疫活性初探

目的:探讨虎杖乙醇提取物(HZ)的抗炎及免疫活性。方法:以地塞米松为阳性对照,通过对小鼠灌胃HZ 7 d,检测不同剂量的HZ对二甲苯所致小鼠耳肿胀及纸片诱导的肉芽肿的抑制作用。结果:与对照组相比,地塞米松与HZ均可显著抑制耳肿胀及肉芽肿(P0.01),0.50～1.00 g/mL HZ对耳肿胀的抑制效果均显著优于地塞米松(P0.05),其中1.00 g/mL HZ可使小鼠耳肿胀度比阳性组降低44.36%(P0.05);0. 50 g/mL HZ对肉芽肿的抑制率比阳性组提高57. 14%(P 0. 05)。各药物组小鼠体质量均显著降低(P0.01),其中地塞米松和高剂量HZ使小鼠体质量增重分别降低了122.07%和106.27%;0.25～0.50 g/mL HZ可显著提高小鼠脾脏指数,其中0.25 g/mL HZ可使脾脏指数比对照组提高32.35%(P0.01);地塞米松与0.50～1.00 g/mL HZ均可显著降低胸腺指数(P0.01)。结论:中、高剂量HZ抗炎效果显著,而低剂量可能对小鼠免疫功能有促进作用。     

饲料中油脂和盐分含量对黑水虻幼虫生长性能的影响

试验利用调和油、氯化钠探究饲料中油脂及盐分含量对黑水虻幼虫生长性能的影响。在人工饲料中添加不同比例的调和油(3.0%～21.0%,W/W)和氯化钠(0～6.0%,W/W),对比分析黑水虻幼虫存活率、幼虫干重总增重、饲料转化率(ECD)、表观消化率(AD)、饲料利用率(ECI)和料重比(FCR)等指标的差异。结果表明,当饲料油脂含量为3.0%～12.0%时,幼虫存活率(93.83%)、总增重(2.69 g)、ECD(0.34 g/g)、AD(0.54 g/g)、ECI(0.15 g/g)及FCR(1.77 g/g)最优。饲料氯化钠含量在3.0%以内对黑水虻幼虫存活率、增重及ECD的影响不显著;饲料氯化钠含量为2.0%时,幼虫存活率高至100.00%,增重高至2.52 g,ECD高至0.26 g/g,FCR低至1.42 g/g。因此,饲养黑水虻时,油脂含量不宜超过12.0%,氯化钠含量不宜超过3.0%。     

色质联用技术测定鸡蛋和鸡蛋粉中的三聚氰胺

用三氯乙酸溶液提取鸡蛋和鸡蛋粉中三聚氰胺的同时,也去除了蛋白质的干扰,样液经MCX固相萃取柱分离、高效液相色谱分离和质谱进行检测.在2～200μg/kg范围内线性关系良好,r=0.999 9.检出限(LOD)为2μg/kg,定量限(LOQ)为10μg/kg.在10～100μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为81.8%～94.9%,相对标准偏差为0.93%～4.77%.方法有良好的精密度和重现性,适用于鸡蛋和鸡蛋粉中低含量的三聚氰胺检测.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量

该试验建立了使用超高效液相色谱-串联四极杆质谱测定原料乳和奶粉中三聚氰胺含量的检测方法.用三氯乙酸溶液和乙酸铅提取,提取液经MCX固相萃取柱净化后用UPLC-MS-MS进行检测.色谱条件:CAPCELL PAK CR1:4柱(2.0 mm×100 mmi.d.,5 μm),流动相:乙腈-0.01 mol/L乙酸铵溶液,梯度洗脱流速0.3ml/min.采用正离子模式的电喷雾质谱检测,以一级质谱得到的准分子离子m/z 126.8作为母离子,进行碰撞诱导解离(CID)二级质谱(MS2)分析,选择母离子和MS2的碎片离子m/z 84.9、67.8定性确证.提取m/z 84.9离子质量色谱峰面积定量.基质标准线性范围为0.01～1.00 μg/ml,检出限10 μg/kg(S/N=10),原料乳回收率为82.4%～97.8%,奶粉回收率为80.7%～95.7%.     

高效液相色谱-串联质谱法测定动物尿液中8种利尿剂残留量

建立了动物尿液中氯噻嗪、氢氯噻嗪、氢氟噻嗪、氯噻酮、三氯噻嗪、甲氯噻嗪、呋噻米和依他尼酸等8种利尿剂残留检测的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法.尿液样品经乙酸乙酯提取、阴离子交换固相萃取柱(PAX)净化、C18色谱柱分离、电喷雾离子化(ESI-)和选择反应监测(SRM)方式采集,外标法定量.该方法的检测限和定量限分别为10 μg/L和20 μg/L;利尿剂的测定在20～200 μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2大于0.99;猪尿在20、50和100 μg/L三个添加浓度的平均回收率为74.0%～107.7%,批内RSD为5.2%～10.8%,批间RSD为5.7%～15.6%;牛尿在20、50和100 μg/L三个添加浓度的平均回收率为71.1%～109.0%,批内RSD为3.9%～10.1%,批间RSD为6.4%～15.6%.