甘肃省党参根结线虫病发生、分布及病原种类鉴定

为明确甘肃省党参根结线虫病的发生、分布及病原种类,在甘肃省党参主产区调查、统计田间根结线虫病发生情况,并通过形态学和分子生物学方法进行种类鉴定。结果表明,甘肃省6个党参主产区均有根结线虫病发生,病田率、病株率分别为40.7%、13.2%,病情指数为10.4。依据根结线虫各虫态的形态测量值和雌虫会阴花纹等特征,将危害党参的根结线虫初步鉴定为北方根结线虫Meloidogyne hapla Chitwood, 1949。rDNA-ITS区段和28S rDNA D2D3区段序列比对和系统发育树显示,6个根结线虫群体无核苷酸差异,与多个北方根结线虫聚为一支且有较高的置信度。利用特异性引物Mh-F/Mh-R扩增得到北方根结线虫的特异性片段,大小为462 bp。故综合形态学和分子生物学特征,将危害甘肃省党参的根结线虫鉴定为北方根结线虫。     

云南省紫茎泽兰根结线虫病病原种类鉴定

为明确云南省紫茎泽兰根结线虫病的病原种类,于2019年2月在云南省澜沧县林下三七种植区采集根部带有明显根结的紫茎泽兰根系进行根结线虫分离,通过观察所分离根结线虫的2龄幼虫、雌成虫、会阴花纹特征对其进行形态学鉴定,并利用序列比对、系统发育树分析、序列特异性扩增区段(sequence characterized amplified region,SCAR)对其进行分子生物学鉴定。结果表明,该病原线虫雌成虫会阴花纹呈圆形至卵圆形,背弓中等高或低平,侧区一侧或两侧延伸形成翼状,尾区有刻点,2龄幼虫、雌成虫形态特征及形态测量指标与北方根结线虫Meloidogyne hapla相似;该病原线虫rDNA的ITS序列和mtDNA的COI序列与NCBI数据库中已登录的北方根结线虫相应序列相似度较高,分别达99.35%和98.05%以上;该病原线虫rDNA的ITS序列、mtDNA的COI序列分别以99%、100%的支持率与北方根结线虫聚为同一分支;利用SCAR特异性引物,该病原线虫均能扩增出大小约1 500 bp的基因特异性条带。综合形态学和分子生物学鉴定结果将云南省紫茎泽兰根结线虫病病原种类鉴定为北方根结线虫。     

四川省茂县花椒根结线虫病病原鉴定

为明确四川省茂县花椒根结线虫的种类,通过根结线虫雌虫和2龄幼虫的形态特征及雌成虫的会阴花纹、雌虫酯酶同工酶及分子生物学检测（rDNA-ITS区和rRNA-IGS区）,对花椒根结线虫进行了种类鉴定。三种方法的结果均表明在茂县地区花椒上发现的根结线虫为北方根结线虫（Meloidogynehapla）,这是我国首次报道在花椒上发现北方根结线虫病,四川省是北方根结线虫新的分布区。     

粗茎秦艽根结线虫病的病原鉴定

粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.是一种重要的中药材, 近年来根结线虫病发生严重?为明确粗茎秦艽根结线虫病病原种类, 对其病原线虫进行种类鉴定, 以期为该病的防治提供理论依据, 采用雌成虫?2龄幼虫?会阴花纹形态特征及形态测量值进行形态学鉴定, 结合分子鉴定方法(比对rDNA-ITS和mtDNA-COⅠ序列?构建系统进化树, 序列特异性扩增区段比对)对病原线虫进行种类鉴定?结果表明, 该病原线虫雌成虫和2龄幼虫形态特征及测量值与北方根结线虫Meloidogyne hapla极为相似; 该病原线虫rDNA-ITS序列和mtDNA-COⅠ序列均与NCBI数据库中登录的北方根结线虫相似性达100%; 采用北方根结线虫特异性引物, 该病原线虫能扩增出1 500 bp的特异性条带, 与北方根结线虫特异性条带大小相同?上述结果表明, 云南省丽江市鲁甸乡粗茎秦艽根结线虫病的病原为北方根结线虫, 为首次发现北方根结线虫危害粗茎秦艽, 研究结果为进一步制定有效防治策略提供了理论依据?     

8批调运入京草莓种苗根结线虫病的病原鉴定

对调入北京的草莓种苗根结线虫病的为害症状及病原进行了观察和鉴定,其症状为草莓种苗根部有明显而密集的根结,直径1~3 mm。通过根结长度百分数分级法明确根结指数为55.42;通过雌虫显微形态观察以及ITS序列测定,初步明确病原物为北方根结线虫(Meloidogyne hapla)。     

一年蓬根结线虫病的病原线虫鉴定

2021年11月在陕西省汉中市佛坪县采集到有明显根结症状的一年蓬植株样品,从其根部分离得到根结线虫雌虫,观察会阴花纹,并利用特异性引物扩增和ITS序列系统进化分析进行分子生物学鉴定。结果显示,根结线虫雌虫的会阴具有较为明显侧线,尾端具有刻点,与北方根结线虫相似。利用北方根结线虫特异性引物对分离到的线虫DNA进行扩增,能够得到610bp的特异性扩增条带。系统进化分析显示分离到的线虫ITS序列与NCBI数据库中已报道的北方根结线虫相应序列聚为一支。一年蓬根结线虫病在我国为首次报道,而侵染佛坪县一年蓬的根结线虫为北方根结线虫。     

甘肃省白银市保护地蔬菜根结线虫病病原鉴定

2012年5月-7月在甘肃省白银市采集了番茄、黄瓜、豇豆等几种保护地蔬菜的25个根结线虫群体.直接解剖获得雌虫,通过雌虫会阴花纹观察,结合酯酶和苹果酸脱氢酶(MDH-EST)测定,鉴定出所收集的25个群体中有16个为南方根结线虫[Meloidogyne incognita (Kofoid&White)],9个为爪哇根结线虫[M.javanica (Treub)].南方根结线虫为优势种群,本次试验也是首次在甘肃省发现爪哇根结线虫.     

香蕉根结线虫病及其病原鉴定

香蕉根结线虫病在福建省香蕉种植区发生较普遍,1988年在南靖县金山乡调查,发生面积占当地蕉园总面积的64％,平均株发病率为53.4％,严重度一般为3～4级。香蕉根结线虫病在我国除台湾省外,其他地区尚未见报道。为此,我们对病害症状和病原线虫种进行了观察研究。     

新疆设施蔬菜根结线虫病发生调查及病原鉴定

对新疆蔬菜根结线虫病的发生情况进行了调查,发现蔬菜根结线虫在和田、阿克苏、库尔勒、吐鲁番、伊犁等南北疆设施蔬菜上均有分布和发生危害,露地蔬菜尚未见发生。从各发生地温室中采集14份蔬菜根结线虫样本,寄主主要是番茄,另外还有豇豆、黄瓜、生菜、香芹、苦瓜。采用形态学以及根结线虫特异性引物PCR相结合的方法进行鉴定,结果表明新疆设施蔬菜上有南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和北方根结线虫(M.hapla)两种,优势种群为南方根结线虫。     

黄花倒水莲根结线虫病的病原鉴定

2019年在福建省多个地方发现黄花倒水莲Polygala fallax遭受根结线虫的严重侵染,为明确病原线虫种类,运用形态学、rDNA-ITS序列分析及特异引物PCR扩增的方法对分离获得的根结线虫进行种类鉴定。结果表明,该病原线虫为南方根结线虫Meloidogyne incognita。黄花倒水莲根结线虫病在我国为首次报道。     

福建省毛豆根结线虫种类鉴定及初侵染来源

福建省漳州市一基地毛豆(品种:‘毛豆64’)苗期发生严重根结线虫病, 发病株率为78%。为明确其病原的种类及其初侵染来源, 通过形态学、分子生物学方法进行了种类鉴定。研究结果表明, 该线虫雌虫、雄虫、2龄幼虫(J2)的形态学特征与测量值和拟禾本科根结线虫Meloidogyne graminicola相吻合;基于线虫rDNA-ITS序列和28S rDNA D2D3序列构建的系统发育树进一步确定其为拟禾本科根结线虫;室内接种试验确定了其致病性。这是首次在福建省毛豆上发现拟禾本科根结线虫。在毛豆基地畦地残留的前作水稻稻茬根内和根际土壤中均分离到大量J2s, 经特异性引物扩增确定为拟禾本科根结线虫, 研究认为前作水稻根系受拟禾本科根结线虫侵染, 在灌溉淹水状态下线虫2龄幼虫和卵在根内与土壤中长期存活, 成为轮作毛豆根结线虫病的初侵染源。     

生姜根结线虫病原鉴定及发生规律

采用田间调查、接种试验、电镜与显微镜观察以及酯酶同工酶电泳等方法,对引发生姜癞皮病的病原及发生规律进行了研究.结果表明,引起生姜癞皮病的病原为南方根结线虫Meloidogyne incognita.该病在每年6月中旬开始发生,8、9月份危害严重.病原在生姜上一年可发生完整的4代,完成1代平均约需35天.病原主要在0～40cm的土层内分布和危害,但具体分布情况依寄主生长状况而稍有差异.南方根结线虫繁殖速率受初始接种密度的影响也很大,当初始接种密度较低时,线虫繁殖速率较高,初始接种密度增大,繁殖速率降低,其平衡密度为每100g干土746.20个卵.     

甘肃河西地区番茄根结线虫病病原鉴定

利用形态特征对甘肃省河西地区番茄根结线虫病病原线虫进行鉴定,其重要的形态特征如下：雌虫体长L=599.0（510.0～690.0）μm,体宽W=439.0（409.0～473.0）μm,口针长ST=15.4(15.0～16.0)μm,背食道腺开口到口针基部球的距离DGO=3.6(2.0～4.3)μm。雌虫梨形,排泄孔位于口针基球处,会阴花纹背弓明显高,线纹由平滑到波浪状,有些线纹向侧面分叉,但无明显的侧线;2龄幼虫L=376.0（360.0～393.0）μm,W=14.8（14.2～15.2）μm,ST=11.7(11.2～12.5)μm,DGO=3.6(2.1～4.0)μm,头部前端平,口针基部球明显,半月体邻近分泌和排泄孔,尾透明且纤细,尾尖尖圆;雄虫L=1 411.0（532.0～1 720.0）μm,W=32.0（28.0～38.0）μm,ST=24.5(23.0～26.0)μm,DGO=3.2(2.0～4.1)μm,头区不缢缩,有不完全的头环,没有侧唇,口针基球圆形至扁圆形。综合以上雌虫、2龄幼虫和雄虫的形态特征,确定了该地区的番茄根结线虫病病原线虫为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）。     

湖南柑橘根结线虫种类鉴定及特异性PCR检测

根结线虫病是严重危害湖南柑橘生产的主要病害,快速准确地进行病原线虫鉴定,从而制定针对性的防治措施,对柑橘产业的稳定发展至关重要。运用形态学和分子生物学技术对湖南永州地区柑橘根结线虫进行病原种类鉴定,确定其为番禺根结线虫Meloidogyne panyuensis。通过引物设计与筛选,建立了番禺根结线虫特异性PCR检测技术。结果表明,该检测方法特异性好,灵敏度高,操作简单,能有效地从多种根结线虫中特异性检测出番禺根结线虫,为柑橘病原线虫的快速检测鉴定提供技术支撑。     

九叶青花椒根结线虫病的病原鉴定

为确定四川省蓬溪县九叶青花椒种植区发病植株花椒根结线虫的种类, 进而为九叶青花椒根结线虫病防治提供依据, 本文根据根结线虫雌虫与2龄幼虫的形态特征及雌成虫的会阴花纹、雌虫酯酶同工酶图谱, 并结合特异性扩增及rDNA-ITS扩增, 根据ITS序列构建系统发育树, 对该地区九叶青花椒根结线虫病的病原进行了种类鉴定。结果表明该病原为南方根结线虫Meloidogyne incognita (Kofold & White) Chitwood。这是我国首次在九叶青花椒上发现南方根结线虫。     

甘肃省保护地蔬菜根结线虫种类鉴定及其rDNA-ITS序列分析

为明确甘肃省保护地蔬菜根结线虫的种类,采用rDNA-ITS-PCR方法结合其2龄幼虫、雌虫会阴花纹等形态学特征对采自甘肃省9个市的主要蔬菜生产基地保护地蔬菜根结线虫的11个种群样本进行了种类鉴定,并对其ITS区域进行序列测定及分析比对.结果表明:11个根结线虫种群的ITS区域序列与GenBank数据库已知南方根结线虫(Meloidogyne incognita)ITS区域序列的相似性达到99％,其ITS片段大小介于690～695 bp之间,表明甘肃省保护地中蔬菜根结线虫为南方根结线虫.