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用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV,M41)作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞,经ELISA筛选,获得了4株能分泌特异性抗IBV单克隆抗体的细胞系,分别命名为4AC1、4AF1、6DH8及2DH10。4株单抗的亚类都属于IgG2b,在Westernblotting试验中,4AF1、6DH82株单抗特异性地识别IBV的核衣壳蛋白(N);经ELISA测定,各株单抗40h培养上清效价达10-2~10-4,第7天腹水效价达10-5~10-6,4AF1、6DH8与所试7个IBV标准株及2个IBV分离株都发生反应 相似文献
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对广东肾变病型鸡中分离致弱的IBV D41株S1基因PCR产物作了Hae Ⅲ酶切分析,发现其酶切产物与IBV M41的一样,而与美国肾变型标准株Gray、Holte不同。根据国外用RFLP区分IBV血清型的判定标准,D41株应归属于马萨诸塞血清型,综合此分离株的其它特性,说明华南地区存在着IBV变异株的流行。 相似文献
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基因探针技术检测血清1型马立克氏病病毒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
选用马立克氏病病毒(MDV)GA株BamHI基因文库中LDNA片段,制成DIG-标记的MDV核酸探针,分别对I型MDV强毒株(BJ-1株)和弱毒株(Md11/75c株)感染材料的核酸进行dot blot杂交检测,结果显示均有阳性呈色反应;而对MDV血清2型(SB-1株)、3型(Fc126株)及禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)和淋巴细胞性白血病病毒(LLV)感染细胞的核酸,作上述同样检测,则均未见 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定 总被引:1,自引:1,他引:1
用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV,M41)作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规淋巴细胞发校瘤技术产生杂交瘤细胞,经ELISA筛选,获得了4株能分泌特异性抗IBV单克隆抗体的细胞系,分别命名为4AC、4AF1、6DH及2DH10。4株单抗的亚类都属于IgG2b,在Western blotting试验中,4AF1、6DH62株单抗牧场卉性地识别IBV的核衣壳蛋白(N);经ELI 相似文献
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本实验在对内蒙古呼和浩特和包头的7个鸡场进行MD流行情况调查的基础上,通过病毒分离实验,首次自内蒙古呼和浩特、包头地区经MD疫苗免疫过的5个发病鸡群和1个健康鸡群中分离到6株马立克氏病毒(分别命名为HA、HB、HC、HE、HF和BG),并对6株病毒在鸡胚成纤维细胞(EF)上的增殖特性、蚀斑形成、形态和毒力等生物学特性进行了鉴定。结果表明,MD在呼和浩特、包头地区鸡群中广泛流行。自然感染鸡羽囊中MDV抗原与病毒血症呈正相关。雏鸡接种法和组织培养法用于分离MDV时,敏感性无显著差异。应用CEF分离MDV是1种快速、简便、敏感、经济的方法;6株MDV在CEF上能良好地增殖,并引起比较规则的细胞病变,还能在CEF上产生圆形或椭圆形的小细胞蚀斑、大小为1.08~1.42mm。6株MDV对雏鸡均有致病性,其中HB、HE、HF和BG4株之间毒力差异显著,HB和BG株的毒力比京—1株MDV强。根据以上结果判定6株MDV均属血清Ⅰ型MDV强毒。结合接种雏鸡的病理学检查结果确定,HA、HB、和HE为内脏型MDV,属Ⅰ生物组;HC、HF和BG为神经型MDV,属Ⅱ生物组。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性比较 总被引:4,自引:0,他引:4
将6株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分别接种鸡胚肾细胞(CEKC)和气管环培养(TOC)。6株病毒无论是否已经适应于鸡胚,都在气管环培养中能引起病变。病毒适应于CEKC,是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用SPF鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备的TOC测定IBV-M41株的ID50,结果用SPF鸡胚和非免疫鸡胚制备的TOC测定的ID50都获得较高滴度,而在普通鸡胚制备的TOC中ID50明显低。 相似文献
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传染性囊病病毒CJ801 VP2基因cDNA的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
用RT-PCR从传染性囊病病毒CJ801的第14代囊毒中扩增编码VP2蛋白的cDNA基因片断,长度为1500bp,并对该片断进行了DNA序列分析。结果表明,CJ801与IBDV标准Ⅰ型毒株52/70、STC和Cul的同源性最高,分别为974%、976%和969%,与变异株A、E、GLS的同源性稍低,分别为965%、963%和967%。而与Ⅱ型毒株的同源性只有81%左右。从遗传进化树上看,CJ801处于标准Ⅰ型毒株和变异株之间。根据cDNA序列推导出蛋白质序列,比较蛋白质序列发现,CJ801与Ⅰ型IBDV毒株的同源性均在96%以上,其中与52/70的同源性最高,为982%。CJ801VP2高可变区的七肽区(S-W-S-A-S-G-S)未发生变化。以上结果说明CJ801为IBDVⅠ型强毒株。另外,CJ801和所有IBDV强毒株在VP2的253、279和284位上的氨基酸均相同,分别为Q、D和A;而CJ801的细胞适应株CJ801BKF和所有弱毒株一样,其相应位置的氨基酸分别为H、N和T。这3个氨基酸可能和IBDV的毒力有关。 相似文献
10.
RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用2对已发表的引物和1对自行设计的引物对同一IBVH120株进行RT-PCR,分别获得了S1基因上与引物设计相一致的1720bp,228bp,602bp,的扩增片段。用自行设计的引物对7个毒株(H120,H52,M41,Conn,Gray,T,Holte)和5个分离株(宜毒,上毒,云毒,HK,118)的含毒尿囊液或纯化病毒进行RT-PCR。结果除Holte株,2个分离株(宜毒,云毒)外,其余均被成功地扩增出602bp的片段。将IBVH120株06kbPCR产物用Digoxigenin标记为探针,分别与上述各IBV毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交,均呈现阳性反应,而该探针不与IBDV和NDV的DNA,EDS-76病毒的DNA及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。RT-PCR和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒,作为诊断IBV的新方法。 相似文献