PEG-磷酸盐双水相体系纯化黑加仑种子中Cu·Zn-SOD的研究

利用聚乙二醇(PEG)与磷酸盐的合理配比组成的双水相体系能够使黑加仑种子中超氧化物歧化酶(SOD)粗酶得到进一步纯化。经8%PEG-6000与24%磷酸盐(pH7.0)组成的双水相体系萃取法纯化后SOD的比活力为20.69 U/mg.pr,纯化倍数为5.43,回收率为76.60%。研究结果表明,使用双水相处理粗酶能有效、快速、大量地使样品达到较高纯度。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取果胶酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵双水相系统对果胶酶进行萃取分离,研究了聚乙二醇分子量、pH、成相物质浓度、NaCl浓度、温度等因素对果胶酶分配系数的影响,结果表明：双水相体系质量组成为聚乙二醇1 00027%,硫酸铵19%,氯化钠0.002%,pH 5.0时果胶酶的萃取效率较好,实验中分配系数最高可达为14.0。     

萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白的抑菌活性及其特性

【目的】研究萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)XW2胞外蛋白的抑菌活性及其特性,探索植物病害生物防治的新途径。【方法】采用滤纸片法和叶盘法,检测XW2胞外蛋白对杨树炭疽病菌的最小抑菌浓度(MIC)和叶盘抑菌活性,以及对该病菌菌丝和孢子萌发的影响;研究其对另外5种植物病原真菌(尖孢镰刀菌、金黄壳囊孢、犁头霉、细极链格孢和黑腐皮壳菌)的抑菌活性,并分析其抑菌活性在不同的pH(2,3,4,5,6,7,8,9,10和11)、温度(30,40,50,60,70,80,90,100,110和121℃)、蛋白酶(木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K)、紫外线作用时间(1,2,3和4h)、金属离子(Li~+、Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(3+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)和Ag~+)、表面活性剂(Tween 20和SDS)、抑制剂(EDTA)、氧化剂(H2O2)和常温保存时间(0.5,1,2,3,4,5和6个月)下的稳定性,最后分析XW2产细胞壁裂解酶的特性。【结果】萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白对杨树炭疽病菌的最小抑菌浓度为0.01mg/disc(5号滤纸片),能明显抑制杨树炭疽病菌在平板和杨树叶片上的生长,有效抑制孢子的萌发和附着孢的形成,并导致菌丝和萌发芽管产生膨大畸形;对尖孢镰刀菌、金黄壳囊孢、犁头霉、细极链格孢和黑腐皮壳菌均有明显的拮抗活性。XW2胞外蛋白在110℃下处理30min及pH 6.0~9.0下均能保持较高的抑菌活性;对蛋白酶、紫外光照、金属离子(Li~+、Na~+、K~+、Ag~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)和Cu~(2+))、SDS和EDTA均不敏感,但Mn~(2+)和Fe~(3+)会抑制蛋白的抑菌活性,而Tween 20和H_2O_2则能提高其抑菌活性;在常温条件下保存6个月后,其抑菌活性并未发生明显丧失。细胞壁裂解酶检测发现,XW2能产生蛋白酶和β-1,3-葡聚糖酶。【结论】萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白的抑菌活性强、稳定性好且抑菌谱广,具有潜在的工业开发和田间应用前景。     

长牡蛎蛋白双酶水解工艺及其产物的抗氧化活性

使用中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解长牡蛎(Crasostrea gigas)蛋白,采用单因素试验分析了水解时间、pH和酶用量比对水解度的影响,并在此基础上设计正交试验优化酶解的工艺条件,并测定了酶解产物的还原能力和对DPPH自由基的清除能力.结果表明,中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解牡蛎蛋白的最佳工艺条件为酶解时间3h、pH 7、U中性蛋白酶∶U 胰蛋白酶=1∶3,此时水解度为27.09％;酶解产物具一定的还原能力并对DPPH自由基有较强的清除作用.     

镉对双齿围沙蚕类金属硫蛋白诱导的初步研究

为评估重金属污染对海洋底栖多毛类的影响,选取镉(Cd)作为目标污染物,初步研究了镉对广泛分布于我国河口和海湾的双齿围沙蚕(Pernereis aibuhitensis)体内类金属硫蛋白(MTLP)诱导规律。结果表明,镉污染胁迫下,其暴露浓度对双齿围沙蚕体内MTLP含量影响极显著(P<0.01);与对照组相比,MTLP的含量在暴露4、7、14 d时的各暴露浓度下均显著升高,且低浓度的镉对MTLP的诱导作用更为明显。本研究表明,双齿围沙蚕体内MTLP含量与镉浓度具有显著的正相关性。     

双水相体系萃取油楠种子总皂苷的研究

利用双水相萃取技术提取分离油楠种子中的总皂苷,以乙醇/硫酸铵为双水相萃取体系,研究乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、p H值、温度等因素对萃取效果的影响。结果表明:在乙醇质量分数为30%,硫酸铵质量分数为20%,p H6.0,温度为30℃的萃取条件下,油楠总皂苷在两相的分配系数为12.60,回收率为94.8%。该方法可用于油楠种子中总皂苷的提取分离。     

苦瓜种子蛋白的双水相提取及抑菌性研究

筛选优化了聚乙二醇(PEG)/硫酸铵双水相的质量分数、分配系数、回收率等影响因素,得到了苦瓜种子蛋白的最佳萃取条件:在26%硫酸铵、22%聚乙二醇条件下,分配系数最小,达0.089,回收率为96%,得到分子量为35.6 kD和12.3kD的苦瓜纯化蛋白。抑菌试验表明,苦瓜种子蛋白对细菌、真菌均有不同程度的抑制作用,且纯化蛋白的抑菌性大于粗提蛋白。     

回心草多酚的双水相与超声耦合提取

利用丙醇-硫酸铵双水相体系与超声耦合对回心草中多酚进行提取分离.通过单因素试验与正交试验得出提取回心草多酚的最佳条件为丙醇用量7 mL,硫酸铵用量5.5 g,超声时间30 min.多酚得率为0.081%.将该方法与有机溶剂回流提取法进行了比较,结果表明两种方法提取率相当.但本法提取时间短.操作简单,条件温和.     

菜子冷榨饼蛋白质和油脂的水酶法提取工艺初探

比较了4种酶对提取脱皮菜子冷榨饼中的蛋白质与油脂的影响.结果表明,复合酶提取蛋白质与油脂的得率最高,蛋白酶次之,戊聚糖复合酶较差,且三者皆高于无酶水浸提,果胶酶作用不明显.同时探索了酶处理时加酶量、酶反应时间、液固比、物料粒径、反应搅拌速度等因素对蛋白和油脂提取率的影响.     

利用EOPO/盐温度诱导双水相体系分离纯化苦参碱的研究

[目的]研究苦参碱在温度诱导的EOPO/无机盐体系中的分配行为。[方法]利用紫外分光光度计对苦参碱进行定性定量测量。利用双水相分配技术研究不同的EOPO的分子量（SDP28、SDP30,SDP35）、不同种类的盐（KH2PO4、K2HPO4.3H2O、Na2SO4、NH4C l）对双水相分配的影响,并利用正交试验确定最佳的分离纯化的条件。[结果]苦参碱在EOPO 3种分子量和3种盐温度诱导双水相的分配特性研究表明,EOPO分子量为SDP28时,最大收率为77.59%,盐为K2HPO4时,最大收率为77.59%,分离效果最好。L9（33）正交试验研究表明,最佳的分离条件为：K2HPO4用量2 g;水量10 m l;SDP28用量15 m l时,最大收率为86.39%。[结论]盐的种类对双水相的分配行为影响最大。     

超声与双水相体系耦合提取竹叶总黄酮研究

[目的]探讨超声提取法和双水相分离技术相结合提取竹叶黄酮的新方法。[方法]利用超声与丙醇-硫酸铵双水相体系耦合对竹叶总黄酮进行提取和分离,并研究硫酸铵和丙醇含量、超声时间和液固比对黄酮提取率的影响。[结果]利用超声与丙醇-硫酸铵双水相体系耦合对竹叶总黄酮进行提取分离的最佳提取条件为：丙醇体积分数60%;（NH4）2SO4用量为0.35g/ml,超声提取25min、液固比为30∶1,在此条件下,竹叶总黄酮提取率为2.03%,提取物中总黄酮纯度为31.3%,明显高于常规超声法。[结论]超声与丙醇-硫酸铵双水相体系耦合对竹叶总黄酮提取的方法简便,值得推广应用。     

碱法提取东亚飞蝗蛋白质的工艺条件

采用稀碱法对东亚飞蝗蛋白质的提取条件进行了研究,主要讨论了碱浓度、料液比、粒度、浸提时间、沉淀pH、沉淀时间等条件对蛋白质提取率的影响.单因素试验结果表明,较优的提取工艺条件为稀碱浓度1.5%(W/V),浸提时间2 h,虫粉粒度80目,料液比1:20,沉淀pH值4.5,沉淀时间1 h.     

超声波辅助提取芦荟活性成分的研究

[目的]建立新的芦荟活性成分提取方法。[方法]采用超声波萃取技术对芦荟活性成分进行提取,对超声波萃取工艺中料液比、萃取温度、超声波萃取时间、超声波功率进行了正交试验优化。[结果]得到超声波萃取芦荟活性成分的最佳工艺条件：料液比1∶1.0,萃取温度30℃,萃取时间4 h,超声波功率490 W。[结论]超声波辅助萃取法具有时间短、温度低、节省溶剂、萃取油质量高等优点,用于提取芦荟活性成分是可行的。     

原发性开角型青光眼房水蛋白含量的检测及其与中医证型关系的研究

目的 探讨原发性开角型青光眼患者眼房水蛋白含量的改变及其与中医辨证分型之间的关系。方法 采用溴甲酚绿比色法对128例128只眼原发性开角型青光眼和64例64只眼老年性白内障患者的房水蛋白进行了测定。结果 开角型青光眼疾病分类各组及中医证型（肝郁气滞证、痰湿犯目证、肝肾阴虚证）各组均表现为房水白蛋白和总蛋白含量增高,与老年性白内障组相比,各组均有非常显著性差异（P<0.01）。开角型青光眼疾病分类组间比较及中医证型组间比较,房水白蛋白和总蛋白含量亦均有显著性差异（P<0.05）或非常显著性差异（P<0.01）。结论 原发性开角型青光眼患者的血-房水屏障功能遭到破坏,房水的粘度增加,房水淤积于眼内。