片状载体固定化胰蛋白酶的研究

以片状载体作为固定化载体,戊二醛为交联剂,制备固定化胰蛋白酶。以固定化时间、固定化温度、固定化pH值和固定化酶质量分数对固定化效果进行评估。结果表明,在固定化时间1.5 h,固定化温度40℃,固定化pH值8.0,胰蛋白酶质量分数2%时,固定化效果最好,回收率最高。在最佳固定化条件下,固定化酶活力回收率可达46.89%,固定化胰蛋白酶表现出较好的热稳定性和酸碱稳定性。     

以壳聚糖微球为载体对β-葡萄糖苷酶固定化的研究

以壳聚糖微球为载体,采用包埋—交联法固定化β-葡萄糖苷酶。通过单因素和正交试验确定了最佳固定化方法。研究结果表明,β-葡萄糖苷酶的最佳固定化条件为:pH值4.6,温度65℃,酶用量166.88IU/g(以绝干壳聚糖计,下同)的β-葡萄糖苷酶经质量分数为2.5%的壳聚糖微球包埋2h,在25℃下质量分数为4.0%的戊二醛下交联2h,得到酶活力为152IU/g和酶活回收率为90.60%的固定化酶。     

酶法制备复合氨基酸钙工艺的研究

初步研究了酶法分步水解鸡块、鸡骨来制备复合氨基酸钙的工艺,讨论了酶水解的最佳条件以及复合氨基酸溶液与游离钙的最佳螯合工艺条件,确定酶水解的最佳工艺条件为:第一步添加胰蛋白酶200u/g,pH值为7,酶解温度为50℃,固液比为1∶6,时间为2h;第二步添加木瓜蛋白酶1200u/g,pH值为7.0,酶解温度为70℃,固液比为1∶6,时间为4h,水解度可达32.29%,钙溶率为25.3%。螯合最佳工艺条件为:pH值为8.0,酶解温度为70℃,配体摩尔比(AA/Ca)为1∶2。     

交联壳聚糖磁性微球的制备及固定化果胶酶研究

以交联壳聚糖磁性微球为载体制备固定化果胶酶,并研究固定化酶的酶学性质与操作稳定性。通过Fe3O4磁核与壳聚糖制备磁性微球载体,戊二醛交联后对果胶酶进行固定,利用正交试验确定固定化酶制备条件,比较研究了固定化酶与游离酶的酶学性质。结果表明：在Fe2+:Fe3+体积比为1:1的溶液中,制得Fe3O4磁核;1 g Fe3O4磁核,3.0%壳聚糖,在3.0%戊二醛中交联4 h,3.0 mg/mL果胶酶在pH 4.0下固定化反应1 h,制备的固定化酶酶活力的回收率高达68.4%。对固定化酶酶学特性研究表明：最适pH 4.0,最适温度50℃,酸碱稳定性范围为pH 2.6~5.6,温度稳定性得到提高,70℃下剩余酶活力为82.8%,米氏常数Kmapp值为1.38 mg/mL,固定化酶连续使用6次还保留61.0%酶活力。说明以交联壳聚糖磁性微球为载体制备的固定化果胶酶,机械强度大、弹性好,酶活力回收率较高,操作稳定性好。     

黑曲霉J6有机磷农药降解酶固定化条件的研究

为了制备有机磷农药水体或土壤污染修复剂,对黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液固定化条件进行优化研究,首先制备黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液,然后分别对海藻酸钠和CaCL2浓度以及固定化时间等固定化条件进行优化,得出其粗酶液的最佳包埋条件。研究结果表明其粗酶液最佳固定化条件为：2%海藻酸钠,4% CaCl2,包酶量20%,（其中蛋白含量为0.15 mg/mL）,固定化时间4 h,在最佳条件下固定化粗酶液成球较易,比较规则,弹性好,强度较高,并且相对酶活最高。本研究成功地对黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液的固定化条件进行了优化研究,得出了最佳包埋条件。     

木瓜蛋白酶水解大豆蛋白工艺条件的优化

以大豆浓缩蛋白为原料,研究了酶用量、固液比、水解时间、水解温度及pH值对氨基酸提取率的影响。最佳酶解条件为:酶用量为5%,固液比为1∶8,水解时间为5h,水解温度为55℃,pH值为6.7。得到了用木瓜蛋白酶水解大豆蛋白质的最佳酶解工艺。     

奶牛粪便酶解混合菌群的构建及产酶条件研究

为了确立酶解混合菌群的最佳培养条件,达到最好的降解效果,有效利用奶牛粪便。以筛选的几株菌株构建酶解混合菌群并研究其产酶条件。结果表明：F3-F9组合的纤维素降解率达到44.02%,比单一菌株提高了12.47%。温度、培养时间、起始pH值、培养基固液比、添加麸皮和氮源等因素都会对产酶有较大影响。在培养基中添加0.1%尿素,固液比为1:2,接种量为5%,起始pH 7,培养基中添加0.1%的尿素和40%的麸皮,温度为24℃,培养3天时,F3-F9混合菌株滤纸酶活和CMC酶活分别达到相对较高的值,分别为114.25 U和1617.92 U。     

响应面法优化牡蛎多肽酶解工艺的研究

测定了牡蛎的基本组成和氨基酸分析,采用蛋白酶水解其蛋白制备牡蛎多肽,以水解度和氮素回收率为指标,并以DPPH·清除率为优化指标,确定中性蛋白酶为最佳用酶。研究了温度、pH值、酶解时间、料液比和加酶量对DPPH·清除率的影响。用Design Expert 8.0软件进行响应面最佳条件优化,确定最适酶解条件为50℃,pH值7.0,酶解时间4 h,料液比1∶10,加酶量1 400 U/g,优化后DPPH·清除率达到74.43%,为牡蛎的综合利用提供了一种新方法。     

不同提取方法对半叶马尾藻多糖提取率的影响研究

应用热水提取法、酶解法、超声波提取法3种方法,从半叶马尾藻中提取多糖,以多糖提取率为指标,通过单因素和正交优化实验分别确立提取多糖的最佳工艺条件。结果表明,热水提取法的最佳工艺为：水浴温度85℃,pH值2．0,水浴时间5h,料液比1：30;酶解提取法的最佳工艺为：酶解温度50℃,时间2．5h,酶用量l％,pH值4．8,料液比1：30;超声波提取法的最佳工艺条件为：超声时间30min,温度80℃,功率300W,pH值2．0,料液比1：30。3种工艺的多糖提取率分别为：热水提取法4．50％,酶解法6．13％,超声波法10．55％。     

无核白浓缩汁加工工艺

以无核白葡萄干为原料,对无核白浓缩汁的生产工艺进行研究,确定最佳的工艺条件。结果表明,料液比1∶3,复水温度50℃,复水时间4 h为无核白葡萄干最佳复水条件;酶解最佳工艺条件酶解时间60 min,pH值3,酶解温度40℃;旋转蒸发最佳条件温度80℃,浓缩无核白汁可溶性固形物为40 Brix。     

改性核桃壳固定化猪肉内源性脂肪酶及其对鸡肉风味的影响

脂肪酶作为一种绿色生物催化剂,在食品工业中有着广泛的应用。但其结构容易破坏,稳定性差,固定化脂肪酶是提高其稳定性的关键。采用微球酶、改性核桃壳固定化脂肪酶和LX-1000HA树脂固定化脂肪酶3种固定化方法,固定化猪肉内源性脂肪酶,利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术（HS-SPME-GC-MS）和电子鼻检测鸡肉经固定化猪肉内源性脂肪酶处理前后的风味变化,并分析鸡肉样品中挥发性成分的变化情况。结果表明：在同一条件下,3种脂肪酶固定化方法中以改性核桃壳固定化脂肪酶的活力最高,达169.8 U/mL;电子鼻结合HS-SPME-GC-MS技术共检测出53种挥发性成分,主要包括醛类、烯烃类、芳香族类、酯类、醇类和含硫化合物等,脂肪酶经固定化后可以有效改善鸡肉的风味。     

脂肪酶固定化及固定化脂肪酶的应用研究进展

脂肪酶(lipase,E.C.3.1.1.3,甘油酯水解酶)是一类特殊的酯键水解酶,能在异相系统(油—水)界面上水解特殊酯(脂肪酸甘油酯)类,具有重要而广泛的工业用途。综述了脂肪酶的固定化以及固定化脂肪酶的应用研究进展。     

大孔吸附树脂对虎杖中白藜芦醇的分离纯化研究

旨在筛选出分离纯化虎杖中白藜芦醇的最佳大孔吸附树脂以及工艺条件。静态吸附与解吸、动态吸附与解吸通相结合的方法,以树脂的最大吸附量、解析率为考察指标,确定最佳的纯化工艺。H103树脂对白藜芦醇有较好的吸附与解吸效果,其最佳的工艺条件为粗提液中白藜芦醇的质量浓度为0.72 mg/mL、上样流速2 BV/h,吸附饱和后先用4 BV的蒸馏水进行洗涤,然后用8 BV、75%的乙醇溶液以1.5 BV/h的流速进行洗脱,白藜芦醇的含量可由纯化前的12.8%提升至53.5%。应用H103树脂对虎杖中的白藜芦醇进行纯化,其工艺稳定可行,具有吸附快、解吸容易、解吸液安全低毒且回收容易,具有较高的应用价值。     

海藻酸钠固定化包埋对枯草芽孢杆菌有机磷降解效果的影响

为了得到菌株最佳的固定化包埋条件,采用海藻酸钠和氯化钙对枯草芽孢杆菌包埋固定化,以固定化枯草芽孢杆菌对有机磷降解率为主要指标,通过与未固定化细胞有机磷降解效果的比较,研究枯草芽孢杆菌的最佳固定化包埋条件。结果表明：当海藻酸钠浓度为4%、CaCl2浓度为3%、包菌量为2%、固定化时间为2 h、达到最佳包埋效果,此时细胞表现出较好的降解性能。并且与没有包埋的细胞相比,包埋固定化细胞对pH、温度表现出很强的环境耐受性。     

低温脂肪酶产生菌的筛选及发酵条件研究

通过使用RodamineB平板筛选法,从新疆具有典型低温环境地区的近200份土样中筛选分离到11株产低温脂肪酶的菌株。其中1株酶活较高的菌株L22,根据形态观察初步断定为假丝酵母,该酶的最适反应温度为30℃,属低温脂肪酶。摇瓶发酵确定该菌株产脂肪酶的最适发酵培养条件为:葡萄糖0.5%,豆饼粉2%,玉米浆2%,KB2BHPOB4B0.5%,NaNOB3B0.5%,橄榄油0.25%,初始pH值为7,发酵温度为20℃,摇床培养48h,酶活最高可达7.17U/mL,添加适量的油脂对产脂肪酶有诱导作用。     

葡萄皮渣中白藜芦醇动态吸附试验的研究

利用大孔吸附树脂分离纯化葡萄皮渣中的白藜芦醇。实验结果表明,选取上样液流速为1.5BV/h,上样液质量浓度为10mg/mL,上样液pH值为4,解吸液体积分数为80%的乙醇和解吸流速0.75BV/h,以及树脂的再生等众多因素直接影响到层析的效果,经高效液相色谱测定,纯化所得白藜芦醇的得率为0.81%。     

米曲霉HDF-7固定化菌体发酵产蛋白酶条件的优化

为了在工业化生产豆酱的过程中,缩短发酵周期,提高原料利用率,并降低生产成本,保证产品质量,利用从传统豆酱中分离得到的米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7作为出发菌株,经过海藻酸钠包埋法固定后,对其最佳固定化菌球的发酵产蛋白酶条件进行了优化。结果表明,固定化菌球以3%的接种量接入到中性蛋白酶发酵培养液中增殖至168 h后,其蛋白酶酶活力最高,为18.49±0.65 U/mL,利用该增殖菌球单批次发酵到24 h时,其蛋白酶活力表现最高。并可以重复分批发酵7次而蛋白酶活力保持不变。本研究通过固定化米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7菌体并优化其发酵生产蛋白酶的条件,可以缩短发酵时间,提高菌体的利用效率,并保持酶活稳定。该研究为蛋白酶的规模化生产提供了试验基础。     

紫苏籽壳原花青素纯化及抗氧化性研究

旨在研究紫苏籽壳原花青素的纯化工艺及其体外抗氧化活性。采用大孔吸附树脂法,通过静态、动态实验,确定最佳纯化参数;采用分光光度法检测原花青素清除DPPH、ABTS自由基的能力,评价其抗氧化活性。结果表明,XDA-8是纯化紫苏籽壳原花青素的最优树脂,吸附率为63.41%,解吸率为78.98%。其最佳工艺为：上样流速4 BV/h、上样浓度4 mg/mL、洗脱剂乙醇体积分数70%、洗脱流速4 BV/h。在此条件下,原花青素纯度由5.25%提高到12.10%。紫苏籽壳原花青素纯化物对DPPH、ABTS自由基的半数抑制浓度IC50分别为2.138、0.3699 μg/mL,清除能力强于Vc。因此,XDA-8树脂纯化法简单、高效,可用于紫苏籽壳原花青素的纯化,且紫苏籽壳原花青素具有较强的体外抗氧化活性。     

大孔树脂纯化柠条花中总生物碱的工艺研究

以柠条花为原料,采用大孔树脂分离纯化柠条花中总生物碱。通过对比6种不同型号大孔树脂对总生物碱吸附-解吸效果及静态动力学研究,确定AB-8大孔树脂为柠条花中总生物碱最佳纯化材料。通过单因素试验确定其对柠条花中总生物碱动态吸附-解吸最佳工艺条件为：上样液浓度为 2 mg/mL,上样pH为6.0,上样流速为2 BV/h;解吸剂为90%乙醇,解吸流速1.5 BV/h,解吸剂用量3 BV。在此条件下,柠条花中总生物碱分离纯化效果最佳,纯度为12.57%,表明AB-8大孔树脂对柠条花总生物碱具有较好的纯化效果。     

基于BP神经网络研究儿茶素在ADS-8树脂固定床中的洗脱过程

摘要：以信阳毛尖茶叶浸提液为原料,研究ADS-8树脂固定床吸附儿茶素后的洗脱过程,建立模型并优化工艺。基于BP神经网络建立洗脱模型,利用模型对因素进行仿真分析。模型误差为0.00108523,测试样本的试验值和模拟值的相关系数r=0.984,最佳工艺条件是温度20℃、流速1.0mL/min、乙醇浓度30%。基于BP神经网络建立的模型具有很强的逼近能力,为儿茶素在ADS-8树脂固定床中洗脱过程的预测、控制提供一定参考。