油菜菠里马雄性不育胞质特异性orf224基因在大肠杆菌中表达…

本研究利用表达油菜波里马胞质雄性不育相关线粒体基因ｏｒｆ２２４ ３＇端（Ｂ）片段的大肠杆菌，通过分级分离纯化得到了ＧＳＴ－Ｂ蛋白，并和亲和层析纯化的ＧＳＴ蛋白一起分别制备了抗血清。利用纯化的抗血清对在ｐＢＶ２２０和ｐＧＥＸ－５Ｘ－１系统表达的ｏｒｆ２２４各基因片段产物进行了分析，结果表明纯化的ＧＳＴ－Ｂ抗体具有ＯＲＦ２２４蛋白专一性，同时也证实了ｏｒｆ２２４全基因及其３＇端片段的表达。研究结果为进     

植物细胞质雄性不育分子机理研究进展（综述）

本文综述了几种主要植物细胞质雄性不育分子机理的研究进展，着重强调了对可能与细胞质雄性不育有关的线粒体ＤＮＡ座位的分析。同时总结了研究植物细胞质雄性不育的一些策略。     

用AFLP技术分离辣椒mtDNA中与雄性不育相关的基因片段

采用AFLP技术对辣椒胞质雄性不育系‘北A’、相应保持系‘北B’及其杂种F1的m tDNA进行了比较分析,获得了9条差异谱带,对全部差异谱带进行了克隆测序和同源性比对分析。结果表明,部分序列同烟草NADH脱氢酶亚基1和核糖体蛋白L2基因、矮牵牛线粒体嵌合基因nad4L-orf25等核苷酸序列存在90%以上的相似性。推断这些差异片段可能与辣椒细胞质雄性不育相关。     

油菜新雄性不育系Xin1的不育性与恢复性

本文比较了新不育系Xin1 CMS(cytoplsmic male sterility)与我国主要的细胞质雄性不育类型Pol(Polima)CMS、Shan2A CMS、Ogu CMS的花器形态,F1代育性情况及其恢保关系,研究分析了orf224基因Xin1 CMS与Pol CMS等在线粒体基因组上的差异。结果表明新不育系Xin1 CMS花器形态与Pol CMS、Shan2A CMS和Ogu CMS的花器有显著差别。与RF01杂交,得到有正常结构的花器,花粉生活力为90.8%。所试26个测交材料中,有13对(50%)测交F1表现出育性反应不同,在14个Pol CMS和Shan2A CMS的保持系测交Xin1 CMS的F1中,6个Pol CMS和Shan2A CMS的恢复系测交Xin1 CMS的F1中,有5个材料能保持Xin1 CMS,有1个表现为半不育,1个材料能半恢复Xin1 mtRNA CMS。测交结果表明Xin1 CMS与Pol和Shan2A的恢保关系不同。对新不育系Xin1、Polima和Ogu的orf224基因的扩增结果表明Xin1有1条与Pol相同的谱带,缺失Pol的另一条谱带;说明Xin1 CMS是不同于Pol CMS的新不育系。     

大葱(Allium fistulosumL.)胞质雄性不育基因的RAPD标记

利用220个随机引物分析了大葱不育系（209A0和保持系（209B）的cpDNA,mtDNA。其中引物S13、S38、S72、S73、S200在叶绿体或线粒全基因组中扩增出了多态性片段S132800、S38950、S7230S731100、S2002400；单株检测表明，它们与育性连锁S132800能在“章丘大葱”、“莱芜鸡腿”、“韩国大葱”等群体中区分N、S胞质，S2002400能在所有供试材料中区分两种胞质因而具有更大的利用价值。筛选的标记在测交，杂交，自交后代中仍能检测到，可用于分子标记辅助育种。     

甘蓝Ogura胞质雄性不育基因的RAPD标记筛选*

有关利用RAPD[1]技术进行分子标记的研究报道很多,如王俊霞等[1]对甘蓝型油菜Pel CMS育性恢复基因和王晓武等[2]对甘蓝的一个显性核雄性不育基因均进行了RAPD标记.我们经过多年的选育,已经成功把外源胞质雄性不育基因转育到甘蓝自交不亲和系上,现已成功选育出不育性稳定和经济性状优良的甘蓝雄性不育系.为了更深入的研究其不育机理,利用RAPD分子标记技术对其不育基因进行了标记,为以后开展甘蓝杂优育种提供标记基因打下基础.     

植物CMS与线粒体基因的亚化学计量位移

细胞质雄性不育(Cytoplasmic Male Sterility,CMS)是在经典遗传学时代即被发现的尤为普遍的生物学现象,其主要表现为雄配子异常,花粉败育,但是雌配子可以正常发育.细胞质雄性不育不仅为植物生殖发育、核质互作、线粒体基因组等方面提供了基础生物科学研究系统,也在农作物杂种优势利用方面展现出了重大的经济...     

雄性不育烟草atp6基因育性相关生物信息学分析

线粒体基因atp6与多种植物细胞质雄性不育(CMS)关系密切。为探索atp6基因致烟草CMS的潜能,以2对烟草不育系和相应保持系为材料克隆atp6基因,测序结果显示不育系与保持系atp6基因间有6个碱基差异。进一步的生物信息学分析结果表明,6个碱基差异导致4个预测氨基酸残基差异及差异残基所处区域的亲/疏水性改变,不育系atp6基因预测蛋白在二级结构和结构域上均呈现出周期结构(主要为α-螺旋)增加而非周期结构(主要为无规卷曲)减少的趋势,不育系atp6基因的碱基差异能在一定程度上引起编码亚基空间结构类型发生改变。推测atp6编码亚基尤其是亚基结构域空间结构类型的改变可能干扰线粒体F₀F₁-ATP合成酶的功能,从而成为影响烟草育性的因素之一。     

油菜叶片衰老相关基因的分离：细胞色素P450cDNA的克隆和序列 …

通过绿叶和衰老叶片ｃＤＮＡ的缩减杂交和差别筛选，富集并分离了缩减ｃＤＮＡ文库中与油菜叶片衰老有关的基因片段。以目的基因片段为探针，通过筛选油菜衰老叶片的ｃＤＮＡ文库，分离了油菜叶片衰老阶段表达增强的全长ｃＤＮＡＬＳＣ４６。     

在猪链球菌2型江苏分离株中发现新的orf2毒力相关基因

摘要： 根据文献报道的猪链球菌（Streptococcus suis ）2型一种新的毒力基因相关序列,设计和合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株HA9801的DNA为模板,扩增推导的毒力基因的完整阅读框,并定向克隆到质粒载体pET-32a（+）中,经测序表明,与国外推测的毒力基因完全同源。此外,以猪链球菌和其它链球菌猪源的国内分离株的基因组DNA为模板,通过PCR技术,检测这一推测毒力基因的出现率。该基因在猪链球菌2型的阳性率为7/8,在其它猪源链球菌的阳性率为9/23,在猪源链球菌的总检出率为51.6%（16/31）。     

人工合成苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因cryI A（c）在大肠杆菌中…

用化学合成法和分子生物学技术合成了ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ）基因编码杀虫蛋白中决定杀虫活性的第２９至６１３氨基酸部分的１７５５ｂｐ ＤＮＡ。合成中改变了多处ＡＴ富集区和可能引起该基因转录提前终止或引起ｍＲＮＡ不稳定的序列。与野生型基因相比，新合成基因的ＧＣ比例由野生型的３８％增加到４７％，更接近于植物基因的特点。有５２％的氨基酸密码子改变为植物偏爱密码子。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析及虫试结果表明合成的ｃｒｙ     

丁香假单胞菌大豆致病变种ICMP2189中乙烯合成酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

本论文通过PCR的方法从丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv. glycinea)ICMP2189中克隆到了乙烯合成酶基因efe，并且在大肠杆菌BL21（DE3）中利用T7强启动子进行了高效表达，表达蛋白占总蛋白的45%。气相色谱分析表明含有efe基因的大肠杆菌可以高效的产生乙烯。研究结果为生物乙烯的研究和应用奠定了基础。     

中慢生型天山根瘤菌胞外多糖相关基因exo5及其在根毛吸附和生物膜形成中作用的研究

用质粒pKGL 3上的转座子随机插入失活的方法得到两个中慢生型天山根瘤菌胞外多糖缺失菌株,并通过随机引物PCR的方法确定了转座子插入的基因位点,该基因与豌豆根瘤菌的UDP-葡萄糖脱氢酶基因有高度的同源性.根毛吸附实验发现该基因缺失,导致胞外多糖缺失突变菌株在其宿主植物甘草上的根毛吸附量大大降低,同时生物膜的形成实验发现中慢生型天山根瘤菌的exo5-菌株不能像野生型菌株一样形成丰富的生物膜,也从侧面证明了根毛吸附实验的结果,初步推测胞外多糖可能通过影响中慢生型天山根瘤菌的根毛吸附过程来影响其与豆科植物的共生固氮.