晋北 晋中 晋南地区冬季舍饲羊场真菌气溶胶差异分析

应用Andersen 6级空气生物采样器和AGI-30液体采样器于冬季分别采集晋北、晋中、晋南3个地区的9栋半封闭式羊舍内、外环境的空气样本,测定并分析气载真菌浓度、组成和粒径分布差异,鉴定优势菌属,并应用ERIC-PCR技术对羊场空气、饲料、粪土中真菌菌群多样性进行分析,以期为羊场真菌气溶胶危害评估和环境控制提供依据。结果显示,羊舍外环境气载真菌浓度由北向南逐渐升高,舍内气载真菌浓度为外环境的2.1～9.4倍,但南北差异不显著(P0.05)。舍内、外真菌粒子均集中分布在采样器Ⅲ～Ⅴ级(1.1～4.7μm),所占比例为63.4%～81.5%,峰值均出现在Ⅳ级(2.1～3.3μm),由北向南逐渐增高;带菌粒子中值直径(CMD)由北向南逐渐减小;共鉴定出25个菌属,其中晋北优势菌属为Cladosporium、Trichophyton、Penicillium和Aspergillus,晋中优势菌属为Penicillium、Aspergillus和Alternaria,晋南优势菌属为Penicillium和Aspergillus;ERIC-PCR图谱分析结果显示,3个地区羊舍内、外环境中气载真菌、粪土中真菌菌群的Shannon-wiener指数均由北向南增大,Simpson优势度指数由北向南逐渐减小,饲草中则呈现相反规律;各舍内气载真菌种类与该舍内粪土相似度最高。     

笼养肉鸭舍内微生物气溶胶的检测

为评估笼养鸭舍环境卫生质量和不同笼养鸭舍微生物气溶胶浓度的变化规律,采用FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器分别对三个笼养肉鸭舍环境中气载需氧菌、气载真菌、气载金黄色葡萄球菌气溶胶的含量进行了检测。结果显示:鸭舍环境中气载需氧菌浓度可达7.24×10~3cfu/m~3,气载金黄色葡萄球菌浓度可达0.56×10~3cfu/m~3,气载真菌浓度可达1.66×10~3cfu/m~3;整个养殖周期中鸭舍内气载需氧菌、气载金黄色葡萄球菌和气载真菌的浓度在鸭14日龄时最高,然后开始下降;三个鸭舍内在消毒前后均未检出金黄色葡萄球菌,但随鸭日龄增长开始出现。通过对笼养鸭舍内微生物气溶胶的浓度、变化规律进行研究,可为笼养肉鸭场生物安全体系的制定提供依据。     

鹿舍内空气微生物气溶胶的检测

采用国际标准的Andersen-6级空气微生物样品收集器在5个养鹿舍(A、B、C、D、E)空气中收集微生物气溶胶。通过对养鹿舍环境中气载需氧菌、空气中大肠杆菌、空气中肠球菌含量的检测及其在Andersen-6级采样器上的分布情况,评估养鹿舍的环境卫生质量以及推断微生物气溶胶对饲养人员及鹿自身可能造成的危害。结果表明:鹿舍环境中微生物气溶胶的浓度较高,而且大部分空气微生物气溶胶粒子的空气动力学直径较小,很容易进入人和鹿的呼吸道深部,对机体造成危害;5个鹿舍内气载需氧菌含量在鹿舍C中最高,为4.06×105cfu/m~3,鹿舍E内气载需氧菌含量最低,为7.80×104cfu/m~3,5个鹿舍内空气需氧菌含量之间差异均不显著(P0.05),但是,鹿舍C和D中可吸入的需氧菌含量与其他鹿舍之间差异显著(P0.05)。     

养殖环境真菌气溶胶的研究

用Andersen-6级采样器、虎红氯霉素琼脂(RBC)在养殖环境采样,培养后分级计数,按形态学鉴定,并进行空气动力学分析.结果共捕获活性真菌粒子7.77×103CFU.鸡、猪、兔、牛舍气溶胶真菌浓度分别为2.39×103CFU/m3、2.51×103CFU/m3、1.76×103CFU/m3和1.66×103CFU/m3;平均CMD值分别为3.02μm、3.52 μm、3.29 μm和3.39 μm;GSD分别为2.03、1.71、1.70和1.69.养殖环境中每分钟可沉积到支气管、直接侵入肺泡和极细粒子的活性真菌量分别是居室的3.4倍、1.4倍和1.9倍;鉴定出21个属,各采样点优势菌群主要有曲霉属、青霉属、链格孢属、枝孢霉属、镰刀菌属等.表明所测养殖环境活性真菌粒子浓度高于原野或居室环境,且其浓度可以通过采用开放式或半开放式结构、合理降低饲养密度及调整舍内温湿度等人为措施来控制;真菌粒子比细菌更易进入呼吸道深部;养殖环境优势真菌属与真菌感染及毒素中毒密切相关.     

网上平养肉鸡舍养殖期空气消毒频次的研究

为探讨网上平养肉鸡舍养殖期空气消毒频次,在诸城某商品肉鸡场选择A、B两栋鸡舍,A舍养殖期第8、15天分别进行喷雾消毒,B舍养殖期第15天喷雾消毒1次,采用六级筛孔撞击式空气微生物采样器分别对两栋鸡舍中气载需氧菌、气载大肠菌群、气载霉菌的含量进行检测。结果表明:随着养殖期的进行,A、B舍内气载需氧菌、气载大肠菌群、气载霉菌的含量逐渐升高,第5天气载需氧菌的浓度分别达到2.52×10~4cfu/m~3、2.63×10~4cfu/m~3,两舍内气载需氧菌的浓度从第5天到消毒前均超过了《畜禽场环境质量标准》中的有关规定;气载大肠菌群分别达到0.63×10~3cfu/m~3、0.61×10~3cfu/m~3;气载霉菌分别达到2.21×10~3cfu/m~3、2.11×10~3cfu/m~3。喷雾消毒后,气载需氧菌、气载大肠菌群、气载霉菌浓度显著降低,并符合要求;养殖期21 d内A舍气载需氧菌、气载大肠菌群、气载霉菌的平均浓度低于B舍。说明及时喷雾消毒、采用良好的消毒频次是必要的,网上平养肉鸡舍内养殖期空气消毒推荐每5天喷雾消毒1次。     

山西省东南部羊舍气载真菌浓度变化及空气动力学特征

试验研究了山西省东南部羊舍气载真菌浓度变化规律和真菌气溶胶的空气动力学特征,以期为羊场的环境控制提供依据。应用Andersen-6级空气微生物采样器,以孟加拉红培养基为采样介质,于春、夏、秋、冬分别采集了山西省东南部3个羊场羊舍的真菌气溶胶,分析其气载真菌浓度和真菌气溶胶的粒径特点。结果表明,羊舍气载真菌一年中以秋季浓度最高,显著高于其他季节(P0.05),且秋季一天上午、中午、下午3个时间段中,浓度差异显著(P0.05);羊舍真菌气溶胶粒子4个季节在采样器上的分布基本相同,高峰出现在第Ⅳ级,主要分布在Ⅲ~Ⅴ级,占各级总数的72.66%~83.87%,可进入人和动物的肺泡;羊舍真菌气溶胶粒子计数中值直径(CMD)为1.3~2.9μm,粒径分布的离散度(GSD)为1.6~2.7μm;夏季CMD显著低于其他季节(P0.05)。综合以上结果,羊舍气载真菌浓度与季节密切相关,80%左右气溶胶粒子可进入人和动物肺泡,且CMD小于其他动物圈舍,潜在危害较大。     

鹿舍环境气载内毒素与革兰阴性菌检测

为了客观的评估气载内毒素和革兰阴性菌对鹿舍环境的污染及对饲养员和动物体健康的危害,本试验采用国际标准的AGI-30(All Glass Impinger,AGI-30)液体冲击式空气微生物收集器和Andersen-6级撞击式空气微生物收集器对山东省境内5处不同的鹿场舍内气载内毒素进行了检测。结果表明,鹿舍空气中气载内毒素的浓度介于0.085×10~3 EU/m~3~1.380×103 EU/m~3,鹿舍内气载内毒素含量在鹿舍C中最高,在鹿舍B中最低。这5处鹿场舍内气载内毒素的浓度均部分超出了内毒素对人体无影响的标准(100EU/m~3)。鹿舍空气中气载革兰阴性菌的浓度介于0.019×10~3 CFU/m~3~1.580×10~3 CFU/m~3之间。其中优势菌群是肠杆菌,大肠埃希菌最常见。气载需氧菌的浓度介于4.580×10~3 CFU/m3~5.240×104 CFU/m~3之间。气载革兰阴性菌在需氧菌含量中的比例为0.41%~3.02%。通过该研究,可以对鹿舍的环境有一个客观的认识,可作为鹿舍环境评定的一种重要参考指标。     

羊舍气载真菌的浓度及分布特征

采用6级Andersen空气生物采样器,以孟加拉红培养基为培养介质,测定并分析羊舍气载真菌浓度、分布特征及与环境的关系,以期为羊舍的环境控制提供依据。结果表明,羊舍内真菌气溶胶浓度为2 855(±1 806)~3 698(±3 087)CFU/m3;9∶00左右浓度最低,显著低于13∶00和17∶00(P<0.05);真菌粒子主要分布在采样器第3~5级,粒径<5μm的真菌粒子约占80%,可侵入肺泡;与环境因素的相关性分析表明,空气真菌含量与环境因素有显著的线性关系,与温度呈正相关,与相对湿度呈负相关。     

养殖环境真菌气溶胶的研究

用Andersen-6级采样器、虎红氯霉素琼脂(RBC)在养殖环境采样,培养后分级计数,按形态学鉴定,并进行空气动力学分析。结果共捕获活性真菌粒子7．77×103CFU。鸡、猪、兔、牛舍气溶胶真菌浓度分别为2．39×103CFU/m3、2．51×103CFU/m3、1．76×103CFU/m3和 1．66×103CFU/m3;平均CMD值分别为3．02 μm、3．52 μm、3．29 μm和3．39 μm;GSD分别为2．03、1．71、1．70和1．69。养殖环境中每分钟可沉积到支气管、直接侵入肺泡和极细粒子的活性真菌量分别是居室的3．4倍、1．4倍和1．9倍;鉴定出21个属,各采样点优势菌群主要有曲霉属、青霉属、链格孢属、枝孢霉属、镰刀菌属等。表明所测养殖环境活性真菌粒子浓度高于原野或居室环境,且其浓度可以通过采用开放式或半开放式结构、合理降低饲养密度及调整舍内温湿度等人为措施来控制;真菌粒子比细菌更易进入呼吸道深部;养殖环境优势真菌属与真菌感染及毒素中毒密切相关。     

水貂养殖舍中细菌气溶胶与气载内毒素检测

摘 要：[目的]本研究旨在了解水貂舍细菌气溶胶和气载内毒素对环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害。[方法]采用Andersen-6空气收集器和AGI-30液体冲击式采样器对市郊不同饲养条件的2个水貂场6栋养殖舍内的细菌气溶胶和气载内毒素进行定期检测。[结果]两个场舍内气载需氧革兰氏阴性菌浓度分别介于4.17×101~2.43×103 CFU/m3之间和4.27×101~5.1×103 CFU/m3之间,以大肠杆菌科为主,假单胞菌属和巴斯德氏菌属次之;从革兰氏阴性菌在Andersen-6空气收集器层级上的分布规律来看,主要分布在Ⅲ级（36.9%）,气溶胶颗粒直径在2~6 mm之间。两个场舍内的气载内毒素浓度分别介于2.92×102~2.15×103 EU/m3之间和2.67×101~2.56×102 EU/m3之间。[结论]水貂舍内气溶胶颗粒可以进入到动物和人的支气管、细支气管,甚至肺泡,在一定程度上增加了水貂和饲养人员呼吸道疾病发生的可能性;气载内毒素的浓度部分超出了对人体无影响的推荐标准（1.0×102 EU/m3）,可对水貂饲养人员的健康造成一定的危害;舍内气载革兰氏阴性菌与内毒素之间没有必然的相关性,表明空气中气载内毒素含量不能用空气中气载革兰氏阴性菌的含量来评估。     

山西省东南部羊舍气载真菌浓度变化及空气动力学特征

试验研究了山西省东南部羊舍气载真菌浓度变化规律和真菌气溶胶的空气动力学特征,以期为羊场的环境控制提供依据。应用Andersen-6级空气微生物采样器,以孟加拉红培养基为采样介质,于春、夏、秋、冬分别采集了山西省东南部3个羊场羊舍的真菌气溶胶,分析其气载真菌浓度和真菌气溶胶的粒径特点。结果表明,羊舍气载真菌一年中以秋季浓度最高,显著高于其他季节（P<0.05）,且秋季一天上午、中午、下午3个时间段中,浓度差异显著（P<0.05）;羊舍真菌气溶胶粒子4个季节在采样器上的分布基本相同,高峰出现在第Ⅳ级,主要分布在Ⅲ~Ⅴ级,占各级总数的72.66%~83.87%,可进入人和动物的肺泡;羊舍真菌气溶胶粒子计数中值直径（CMD）为1.3~2.9 μm,粒径分布的离散度（GSD）为1.6~2.7 μm;夏季CMD显著低于其他季节（P<0.05）。综合以上结果,羊舍气载真菌浓度与季节密切相关,80%左右气溶胶粒子可进入人和动物肺泡,且CMD小于其他动物圈舍,潜在危害较大。     

鸡舍内空气与周围环境基质中的真菌相关性分析

采用曝皿法收集某养鸡场鸡舍内空气真菌,并与舍内四种基质(土壤、粪便、饲料、灰尘)样本进行实验室分离、纯化、鉴定和计数.23份样品中共获得2 229分离株.空气中真菌浓度是1.12×104cfu/m3,其中优势真菌属为青霉属(Penicillium)、酵母菌属(Saccharomyces)扣木霉属(Trichoderma);基质中总真菌浓度是1.49×106cfu/g,其中土壤中优势菌为酵母菌(Saccharomyces),灰尘中优势菌为镰孢菌(Fusarium)和酵母菌(Saccharomyces),粪便中优势菌为镰孢菌属(Fusarium)和木霉属(Trichoderma),饲料中优势菌为镰孢菌(Fusarium)、青霉属(Penicillium)和木霉属(Trichoderma).通过SPSS13.0软件分析不同样本中真菌浓度的相关性.结果表明,空气与土壤、灰尘与粪便、灰尘与饲料、粪便与饲料真菌的相关性极大(sig<0.01),相关系数分别为0.838、0.944、0.923和0.933.对变量进行线性回归分析,得到空气与基质的相关方程y=242.40+0.017x1.     

笼养肉鸡舍内空气微生物气溶胶的研究

为评估笼养鸡舍环境卫生质量及推断微生物气溶胶对饲养人员及肉鸡可能造成的危害,本试验采用FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器分别对3个笼养肉鸡场鸡舍环境中气载需氧菌、气载大肠杆菌、气载金黄色葡萄球菌、气载真菌气溶胶的含量进行检测,并对其气溶胶粒子分布情况进行分析。结果表明:鸡舍环境中气载需氧菌浓度可达21.4×10~3 CFU/m~3,气载大肠杆菌浓度可达0.71×10~3 CFU/m~3,气载金黄色葡萄球菌浓度均值可达2.52×10~3 CFU/m~3,气载真菌浓度可达7.28×10~3 CFU/m~3;鸡舍内环境气载需氧菌在FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器第1层级分布比例显著高于其他层级(P0.05),气载大肠杆菌在第4层级分布比例显著高于其他层级(P0.05),气载金黄色葡萄球菌在第5层级分布比例显著高于其他层级(P0.05),气载真菌在第4层级分布比例显著高于其他层级(P0.05)。     

笼养肉鸡舍内气载微生物数量变化的检测

为了解不同笼养肉鸡舍内气载微生物浓度的变化规律,采用FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器分别对3个笼养肉鸡场鸡舍环境中气载需氧菌、气载大肠埃希菌、气载金黄色葡萄球菌、气载真菌气溶胶的浓度进行了检测。结果表明,整个养殖周期中鸡舍内气载需氧菌、气载大肠埃希菌和气载金黄色葡萄球菌浓度在鸡14日龄时最高,然后开始下降;气载需氧菌、气载大肠埃希菌和气载金黄色葡萄球菌浓度与通风条件、空舍期消毒模式、粪便清理方式等因素有关;3个鸡舍舍内气载真菌在空舍期消毒后均未检出,随着鸡日龄增长开始递增。论文为笼养鸡舍生物安全技术规程的制定奠定了基础。     

奶牛舍内外环境夏季气载微生物的检测

旨在比较夏季不同建筑类型奶牛舍内外气载细菌和真菌数量的变化。选择3种建筑类型的奶牛舍,采用定点采样和平板计数法对舍内、运动场、净道以及场外上风向和下风向处的气载微生物进行同期检测。结果表明:不同建筑类型和不同时间段牛舍内微生物数量均表现出显著性差异(P0.05),气载细菌和真菌总数范围分别为1.7×103~6.9×103和175~483 cfu/m3,通风好的牛舍细菌和真菌总数均较低,且一天中中午的细菌和真菌总数最高。此外,舍内细菌数量显著高于净道和运动场(P0.05),但舍内真菌总数与净道之间未表现出显著性差异(P0.05),仅显著高于运动场;多数牛场外下风向5~50 m处的细菌和真菌总数显著高于上风向处(P0.05)。本研究结果可为奶牛舍环境改善和疾病预防提供参考。     

固体甲醛熏蒸消毒对畜禽舍微生物气溶胶的影响

使用国际标准的Anderson-6级空气微生物收集器检测消毒前后牛、羊、鸡、猪舍内和舍外的气载需氧菌、气载真菌和气载大肠杆菌浓度变化,并分析以上各菌种在上述收集器不同层级中的比例变化。结果显示,消毒后的动物舍内的气载需氧菌、气载真菌和气载大肠杆菌浓度均显著低于消毒前的浓度(P0.05或P0.01),消毒后的舍内以上微生物气溶胶浓度与舍外的浓度差异不显著(P0.05),且消毒后舍内的气载需氧菌、气载真菌和气载大肠杆菌在收集器5,6层级上的比例整体上呈现大幅下降的趋势。由此可见,固体甲醛熏蒸的消毒方式可有效降低畜禽舍内的微生物气溶胶浓度,且对可进入肺泡的小颗粒微生物气溶胶消毒效果更佳。     

饲料厂空气细菌和真菌的分布特点

本研究的目的是为了调查韩国3个饲料厂空气细菌和真菌的分布特点。在饲料粒化和粉碎工艺中空气细菌和真菌的几何平均数分别为113（±18）cfu／m^3和89（±5）cfu／m^3、198（±5）cfu／m^2和124（±12）cfu／m^3。饲料厂空气中可吸入性（0．65—4．7μm）及总（〉4．7μm）细菌和真菌的百分含量为60％～90％．且粒化工艺高于粉碎工艺。但不管在饲料生产的哪个工艺,空气细菌和真菌在室内与空气流通处的百分含量的比值都大于1．0。饲料厂空气中主要细菌微生物是葡萄球菌属、微球菌属、棒状杆菌属和杆菌属：主要真菌微生物是牙枝霉菌属、青霉菌属和曲霉菌属。研究表明,空气微生物的生物活性与环境的相对湿度相关。     

兔舍中气载内毒素的测定

本试验采用ANDERSEN-6级和AGI-30(AGI=All Glass Impinger)空气微生物样品收集器分别对三个不同兔场环境中气载内毒素及革兰氏阴性菌含量进行了测定,并对二者在数量上的关系进行了探讨。此外,还对兔舍内环境中气载内毒素和气载革兰氏阴性菌的来源进行了初步分析。结果表明,兔舍内气载内毒素含量介于22~774 EU/m3空气之间;气载需氧革兰氏阴性菌含量在0.39~10.3×102CFU/m3之间,没有检测出专性厌氧的革兰氏阴性活菌。在三个兔场中,革兰氏阴性菌含量与内毒素含量之间存在弱的正相关(rA=0.23;rB=0.29;rC=0.24),所以不能通过测定气载革兰氏阴性细菌含量来估计气载内毒素的含量。通过对气载内毒素来源的分析,可以推测饲料和粪便可能是其主要的来源。     

冬季大棚养鸭模式中微生物气溶胶对肉鸭应激和生产性能的影响

本研究通过评估不同饲养卫生清洁状况下微生物气溶胶的浓度对肉鸭生产性能的影响,为建立家禽养殖环境微生物气溶胶标准提供参考。选用600只1日龄的樱桃谷肉鸭,随机平均分配到1个对照组(A组)和4个清洁卫生条件逐步变差的试验组(B、C、D、E组),每组3个重复,每个重复40只。使用国际标准的Andersen-6级和AGI-30空气微生物采集器收集各组空气样品,检测微生物气溶胶浓度。检测鸭血清促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度变化,评估其应激强度。与此相应地对肉鸭生长性能、屠宰指标等进行检测与评定,分析微生物气溶胶对肉鸭机体的影响。结果显示:当肉鸭舍的微生物气溶胶浓度升高至气载需氧菌为2.96×105CFU/m3、气载真菌为2.63×104CFU/m3、气载革兰氏阴性菌为3.09×104CFU/m3、气载内毒素为41.78×103EU/m3时(D组),该组肉鸭的血清ACTH浓度、料重比、死淘率显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01),该组肉鸭的平均日增重、胸肌率、胸肌重、屠宰率、屠体重显著或极显著低于对照组(P0.05或P0.01)。由此可见,微生物气溶胶可显著降低肉鸭的生产性能,气载需氧菌2.96×105CFU/m3、气载真菌2.63×104CFU/m3、气载革兰氏阴性菌3.09×104CFU/m3、气载内毒素41.78×103EU/m3可初步作为肉鸭养殖环境中的微生物气溶胶上限标准。     

鸡舍气溶胶真菌的种类及浓度动态

为评估鸡舍空气的卫生质量,用Andersen-6级采样器采集鸡舍空气样本,计算各级培养基的菌落总数,分析真菌气溶胶颗粒大小和浓度,用ITS基因序列分析结合形态学的方法对分离菌株进行鉴定。结果显示:鸡舍气溶胶真菌浓度与季节、养殖模式、日龄和品种有关,其气溶胶真菌浓度在夏季、秋季、冬季和春季由高到低依次为(1.78±0.26)×103,(1.43±0.2 2)×103,(1.31±0.31)×103,(1.06±0.22)×103 CFU/m3。在不同的养殖模式中,地下最高,为(1.50±0.36)×103 CFU/m3;半封闭最低,为(0.98±0.25)×103 CFU/m3;封闭介于两者之间,为(1.04±0.14)×103 CFU/m3。肉鸡舍(3.12±0.48)×103 CFU/m3明显高于蛋鸡舍(0.98±0.11)×103 CFU/m3,并随日龄的增加而提高。在真菌气溶胶颗粒中,C-F级(0.65~4.70μm)颗粒占88%。获得26 703菌落,分离出153个菌株,鉴定出13个属,25种真菌;优势菌属为曲霉菌属(37株)和青霉菌属(44株),占菌落总数的52.93%(81/153);优势菌种为芽枝状枝孢菌(16株)、黑曲霉(15株)、草酸青霉(12株)、黄曲霉(10株)和链格孢(10株)。分离烟曲霉和热带念珠菌2种常见致病菌。这对鸡舍气溶胶真菌浓度、种类和颗粒大小有了一个全面的认识,为评估环境质量奠定基础,对环境卫生控制有指导意义。