感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后局部粘膜免疫功能的变化

雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒（CAV），8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测其哈德尔腺和盲肠扁桃体T细胞及IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度的动态变化。揭示了感染CAV雏鸡接种ND疫苗免疫后哈德尔腺、盲肠扁桃体的T细胞和IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度，均较未感染免疫雏鸡明显减少。表明眼部、呼吸道和消化道局部粘膜免疫防御能力减弱。     

鸡眼区相关淋巴组织对ND疫苗点眼免疫应答Ⅱ.眼区局部T淋巴细胞亚群的变化

本研究采用流式细胞仪技术对鸡眼区相关淋巴组织(HALT)在鸡新城疫疫苗点眼免疫后的局部T淋巴细胞亚群的变化进行了研究。研究发现,LaSota 系ND疫苗点眼免疫后眼区相关淋巴组织对ND疫苗可产生良好的细胞免疫应答。免疫组结膜相关淋巴组织(CALT)和哈氏腺(HG)中CD4 T及CD8 T淋巴细胞数量于首免后迅速升高。免疫期间其百分比含量明显高于非免疫组,到40 日龄时,有恢复到正常值的趋势。     

鸡眼区相关淋巴组织对ND疫苗的点眼免疫应答 Ⅰ.局部体液免疫应答

本研究采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ、免疫组织化学方法、病理组织学方法对鸡眼区相关淋巴组织在鸡新城疫（ Ｎｅｗ ｃａｓｔｌｅ Ｄｉｓｅａｓｅ， Ｎ Ｄ）疫苗点眼免疫后的局部体液免疫应答进行了研究。研究发现， Ｌａｓｏｔａ 系 Ｎ Ｄ 疫苗点眼免疫后鸡眼区相关淋巴组织（ Ｈｅａｄａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｌｙｍ ｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ， Ｈ Ａ Ｌ Ｔ）对 Ｎ Ｄ 疫苗可产生高效的局部体液免疫应答：①免疫组泪液和血清中 Ｎ Ｄ Ｖ特异性 Ｉｇ Ａ、 Ｉｇ Ｍ 抗体及哈氏腺（ Ｈａｒｄｅｒｉａｎ Ｇｉａｎｄ， Ｈ Ｇ）中 Ｉｇ Ａ、 Ｉｇ Ｍ 型浆细胞出现较对照组早，且抗体滴度及浆细胞数量均极显著高于对照组（ Ｐ＜ ０．０１）。免疫组泪液和血清中 Ｎ Ｄ Ｖ特异性 Ｉｇ Ｇ 抗体滴度及哈氏腺中 Ｉｇ Ｇ 型浆细胞数量也均极显著高于对照组（ Ｐ＜ ０．０１），且哈氏腺中 Ｉｇ Ｇ 型浆细胞的出现早于对照组；②点眼免疫后泪液中 Ｎ Ｄ Ｖ特异性 Ｉｇ Ａ、 Ｉｇ Ｍ抗体出现较血清中的早，且抗体滴度也显著高于血清中（ Ｐ＜ ０．０５）；③ Ｌａｓｏｔａ 系 Ｎ Ｄ苗点眼免疫后可使结膜相关淋巴组织的形成和发育明显提前，免疫组结膜相关淋巴组织中的淋巴滤泡数量极显著高于对照组（ Ｐ＜ ０．     

切除结膜结合淋巴组织鸡对新城疫疫苗的免疫反应I.局部与循环抗体检测

实验将60只1日龄健康雏鸡随机分为A、B、C3组。A组为CALT缺失组，B组为免疫组，C组为非免疫对照组。A组于1日龄手术切除下眼睑结膜，A、B两组于12日龄结扎鼻泪管后进行点眼免疫接种新城疫克隆30疫苗。23日龄时，收集A、B、C各实验组鸡的血清和泪液，做红细胞凝集抑制试验（HI试验）、酶联免疫吸附试验（ELISA）。比较观察各实验组雏鸡血清和泪液抗体HI效价与IgA、IgG、IgM含量的变化特点。结果，1日龄手术切除下眼睑结膜后造成鸡CALT缺失，CALT缺失鸡点眼免疫后，泪液抗体HI效价与IgA、IgG、IgM含量比免疫组雏鸡低。但对雏鸡的抗体生成的规律并不产影响。故实验证实了CALT对眼区局部抗体的产生及其种类有重要的调控作用，协同哈氏腺完成局部免疫的功能。     

雏鸡哈氏腺的组织化学特点

采用常规组织化学方法对ＳＰＦ鸡的哈氏腺进行了一系列研究。结果表明，哈氏腺各级管腔上皮中有大量的杯状细胞，其分泌物主要是中性和酸性粘液物质的混合物，而腺泡上皮的分泌物主要是酸性粘液物质。改良甲苯胺蓝染色发现间质的淋巴细胞区域分布有少量的肥大细胞，管腔上皮及腺泡上皮胞浆中存在有大量异染性颗粒，预示肥大细胞在哈氏腺的局部免疫应答中起到一定的作用。苏丹黑Ｂ染色发现脂肪颗粒主要分布在上皮下。酶组织化学染色表明：各级管腔上皮及腺上皮分别为ＡＴＰ酶阳性，ＡＫＰ、ＡＣＰ及ＡＮＡＥ阴性。间质中淋巴细胞区域ＡＣＰ为强阳性，ＡＴＰ、ＡＫＰ为弱阳性，ＡＮＡＥ染色发现间质中有大量的Ｔ淋巴细胞和一定数量的巨噬细胞。此结果证明：哈氏腺是一个功能活跃的外分泌器官，Ｔ淋巴细胞和巨噬细胞在哈氏腺的局部免疫应答的调控中起到一定的作用。     

切除结膜结合淋巴组织鸡对新城疫疫苗的免疫反应Ⅰ.局部与循环抗体检测

实验将 60只 1日龄健康雏鸡随机分为A、B、C 3组。A组为CALT缺失组 ,B组为免疫组 ,C组为非免疫对照组。A组于 1日龄手术切除下眼睑结膜 ,A、B两组于 1 2日龄结扎鼻泪管后进行点眼免疫接种新城疫克隆 30疫苗。2 3日龄时 ,收集A、B、C各实验组鸡的血清和泪液 ,做红细胞凝集抑制试验 (HI试验 )、酶联免疫吸附试验(ELISA)。比较观察各实验组雏鸡血清和泪液抗体HI效价与IgA、IgG、IgM含量的变化特点。结果 ,1日龄手术切除下眼睑结膜后造成鸡CALT缺失 ,CALT缺失鸡点眼免疫后 ,泪液抗体HI效价与IgA、IgG、IgM含量比免疫组雏鸡低。但对雏鸡的抗体生成的规律并不产影响。故实验证实了CALT对眼区局部抗体的产生及其种类有重要的调控作用 ,协同哈氏腺完成局部免疫的功能     

感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后免疫功能和免疫调节的变化

雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒，8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,在凝抑制抗体（HI）滴度；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、IgG^ 、IgM^ 、IgA^ ,抗体生成细胞数量及T、B细胞增殖反应；胸腺、脾脏细胞因子IL－2、IFN活性的变化。结果发现，感染CAV雏鸡Lasota疫苗免疫后，其血清IgG、IgM、IgA免疫球蛋白含量明显减少，HI抗体滴度降低；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、抗体生成细胞数量降低及T、B细胞增殖反应减弱，胸腺、脾脏IL－2及TNF诱生活性降低，表明其细胞免疫和体流免疫功能以及细胞因子免疫调节作用均未感染免疫雏鸡明显减弱。     

药物治愈传染性法氏囊病后鸡体对新城疫免疫应答的测定

传染性法氏囊炎（IBD）与新城疫是养禽业危害较大的两种传染病,IBD病毒的致病作用主要是造成鸡体免疫器官的损害,造成鸡的免疫控制,对新城疫的ND的免疫的影响也较大。中草药制剂可以治愈IBD。中草药的抗病作用主要是抗菌、抗病毒,提高机体免疫能力。在生产实践中感染IBD的鸡群,用中草药制剂治愈后,应采取何种方式免疫ND效果较好,在本试验中加以研究,试验过程如下：1动物与材料1．1试验鸡群自育雏鸡90只,育雏至55日龄,育雏期间7日龄用Lasota系疫苗滴鼻点眼进行首免;25日龄用Lasota系进行二免,两次免疫均用正羽份进行免疫…     

接种IBDV雏鸡在接种ND疫苗后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

无IBDV母源抗体的健康滨白1日龄公雏接种IBDV,同时设健康对照鸡。接种鸡及对照鸡均分成两组。接种鸡中的一组在14日龄时经点眼、滴鼻免疫接种La Sota苗,对照鸡的一组也进行同样免疫,称为感染一次免疫鸡和对照一次免疫鸡;感染鸡的另一组在首次免疫(14日龄)后2周(28日龄)进行ND二次免疫,对照鸡的另一组也进行同样处理,称为感染二次免疫鸡和对照二次免疫鸡。在免疫后不同时期检测各组鸡法氏囊、胸腺、脾脏、直肠扁桃体及哈德尔腺IgG、IgM及IgA生成细胞数量动态变化。结果表明,感染一次免疫鸡免疫器官组织抗体生成细胞数量明显低于对照一次免疫鸡;感染二次免疫鸡免疫器官组织抗体生成细胞数量仍明显低于对照二次免疫鸡,但高于感染一次免疫鸡,表明IBDV感染鸡对ND疫苗呈现全身及局部体液免疫应答抑制,而二次免疫具有免疫增强效应。     

免疫增强剂对IBD疫苗免疫雏鸡局部黏膜免疫功能的影响

分别将免疫增强剂“禽福”和“Inmunair”与鸡传染性法氏囊病（IBD）中等毒力活疫苗配合使用,检测免疫雏鸡哈德尔氏腺和盲肠扁桃体T细胞及IgA、IgM和IgG抗体生成细胞数量。泪液、气管液、胆汁、肠液中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量的动态变化,结果发现,应用免疫增强剂IBD疫苗免疫雏鸡上述局部免疫组织及四种局部体液的相应各项免疫检测指标均较IBD疫苗单独免疫雏鸡不同程度地增高,表明免疫增强剂与疫苗联合应用,能显著提高疫苗免疫雏鸡眼部、呼吸道和消化道局部黏膜免疫功能;而IBD强毒攻击后,疫苗单独免疫雏鸡上述指标明显低于应用免疫增强剂的疫苗免疫雏鸡,同时。后者对IBD强毒攻击的有效抵抗力明显高于前者。     

结膜相关淋巴组织和哈氏腺免疫协同关系的研究Ⅰ．结膜相关淋巴组织缺失对哈氏腺点眼免疫应答的影响

采用ＥＬＩＳＡ、免疫组织化学方法、手术切除结膜相关淋巴组织（Ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ，ＣＡＬＴ）法对结膜相关淋巴组织和哈氏腺（Ｈａｒｄｅｒｉａｎ Ｇｌａｎｄ，ＨＧ）在点眼免疫应答过程中的相互协同关系进行了研究。研究发现，采用外科手术于１日龄切除结 膜相关淋巴组织后切除组点眼免疫后泪液中ＮＤＶ－特异性ＩｇＡ、ＩｇＭ型抗体滴度及哈氏腺中ＩｇＡ、ＩｇＭ     

鸡贫血因子病局部粘膜免疫功能变化的研究

用鸡贫血病毒感染１日龄ＡＡ雏鸡,以未感染同龄ＡＡ雏鸡的对照,在感染后７,１４,２１,２８,３５,４２,４９日龄检测其哈德尔腺及盲肠扁桃体Ｔ细胞和ＩｇＧ＾＋、ＩｇＭ＾＋、ＩｇＡ＾＋抗体生成细胞数量,泪液,气管液、肠液中ＩｇＭ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量的动态变化。     

马立克氏病疫苗免疫后鸡免疫器官组织抗体生成细胞的变化

本实验分别用马立克氏病（ＭＤ）三价苗和ＨＶＴ疫苗肌肉注射免疫１日龄雏鸡，在１０、２０、４０、６０和９０日龄以兔抗鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ重链抗血清为一抗，用彩色免疫金银染色法检测法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺的ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞的动态变化。结果发现：雏鸡ＭＤ疫苗免疫后，法氏囊和脾脏的ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞较对照鸡显著增多，盲肠扁桃体以ＩｇＡ抗体生成细胞为主、哈德尔腺以ＩｇＧ抗体生成细胞居多的三种抗体生成细胞数量均明显升高；三价苗免疫鸡的抗体生成细胞显著多于ＨＶＴ疫苗免疫鸡。说明ＭＤ疫苗免疫鸡全身免疫器官、呼吸道和消化道相关局部免疫组织的体液免疫反应显著增强，三价苗免疫鸡的体液免疫应答水平明显高于ＨＶＴ疫苗免疫鸡。     

Role of the harderian gland in immunoglobulin A production in chicken lacrimal fluid

The role of the Harderian gland (HG) in the production of immunoglobulin, especially IgA, was investigated. Lacrimal immunoglobulin almost disappeared after surgical removal of the HG and immunoglobulin produced by HG cells was detected in saliva but not in the trachea. Immunoglobulin production occurred in HG cell culture in vitro and it consisted mostly of IgA; the production of IgM and IgG was very low. These findings indicate that lacrimal IgA is produced locally in the HG and lacrimal IgG and IgM are mostly transported from the blood.     

鸡贫血病—法氏囊病疫苗免疫母鸡后子代雏鸡的免疫学变化

本项目应用现代免疫学新技术对鸡传染性贫血病（CIA）-传染性法氏囊病（IBD）疫苗联合免疫母鸡后,其子代雏鸡外周血液T、B细胞数量和IgG、IgM、IgA含量法及法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺的T细胞和IgG、IgM、IgA抗体生成细胞数量以及泪液、气管液、胆汁、肠液的IgA、IgM、IgG含量的变化进行了动态研究。结果发现,CIA-IBD疫苗联合免疫母鸡后,其子代雏鸡外周血液、免疫器官组织和局部体液的上述各项指标均不同程度地高于未免疫的相应对照雏鸡。表明CIA-IBD疫苗免疫母鸡后,其子代雏鸡的体液免疫和细胞免疫功能明显增强,而CIAV-IBDV强毒攻击后,未免疫的子代雏鸡,其外周血液,免疫器官组织和局部体液的各项免疫学指标均明显低于疫苗免疫攻毒的子代雏鸡,这与未免疫雏鸡缺乏特异性抗体,强毒攻击后,雏鸡免疫器官组织广泛损害,淋巴细胞变性坏死等有关。     

鸡贫血病—法氏囊病联合免疫母鸡后子代雏鸡免疫器官T细胞和抗体生成细胞数量的动态变化

对鸡传染性贫血病（CIA）－传染性法氏囊病（IBD）联合免疫母鸡后的子代雏鸡免疫器官的免疫学化变化进行了研究。结果发现,混合感染CIAV、IBDV雏鸡免疫器官T细胞和IgG,IgM,IgA抗体生成细胞数量在27日龄内明显未免疫对照组、联合免疫组和联合免疫攻毒组,表明感染CIAV、IBDV的雏鸡全身免疫功能显著下降,CAI－IBD联合免疫母鸡后,子代雏鸡T细胞胞和IgG,IgM,IgA抗体生成细胞数量在27日龄内,较未免疫对照组明显增加,表明CIA－IBD联合免疫母鸡可使子代雏鸡免疫器官的免疫功能增强,能抵御强毒攻击。     

IBD疫苗免疫SPF雏鸡局部黏膜组织的免疫学变化

应用组织化学染色法和免疫酶组织化学法,研究IBD疫苗免疫SPF雏鸡后,雏鸡哈德氏腺和盲肠扁桃体的T细胞及IgA、IgM和IgG抗体生成细胞数量的动态变化。结果发现,免疫雏鸡上述局部免疫组织的各项免疫指标较对照雏鸡均不同程度地增高,表明疫苗免疫能显著提高雏鸡眼部、消化道局部黏膜免疫功能;IBD强毒攻击后,对照雏鸡上述指标明显低于疫苗免疫雏鸡,且发生典型IBD全部死亡,而疫苗免疫雏鸡免疫保护率达60%。