非免疫鸡血清中鸡新城疫病毒抗体的测定

对重庆市荣昌县6个乡镇的41个散养养鸡户,按常规方法采取并分离未经鸡新城疫疫苗免疫的1264份成年鸡血清,采用微量法进行红细胞凝集（HA）试验和红细胞凝集抑制（HI）试验检测鸡新城疫病毒抗体的滴度。其结果表明：鸡新城疫阳性率为8．73％,可疑率为4．76％,阴性率为86．51％,从而证明该地区新城疫病毒感染较严重。     

小鹅瘟卵黄抗体效价与攻毒保护相关性试验

将实验室试制的3批小鹅瘟卵黄抗体,琼扩效价为1:16,分别稀释成琼扩效价为1:4、1:8,分别按每只0.5 m L接种3日龄易感雏鹅,24 h后,试验组与对照组攻击小鹅瘟病毒。结果显示:雏鹅注射相同剂量不同琼扩效价的卵黄抗体,随着卵黄抗体琼扩效价的升高,对雏鹅的保护率也随之升高。     

重组新城疫病毒载体疫苗研究进展

新城疫病毒(NDV)作为疫苗载体可以在宿主的呼吸道组织细胞中有效复制,诱导产生针对外来抗原的局部和全身免疫反应。NDV的基因组较大,可以很好地容纳外源基因。作为RNA病毒,与宿主细胞发生DNA重组的可能性较小。由于宿主范围的限制,人群中没有预先存在的NDV抗体,NDV对人类来说相对安全。因此,NDV作为一种疫苗载体颇受关注。论文简要论述了NDV的生物学特征,外源基因的插入方式,重点阐述了重组新城疫病毒载体疫苗的研究进展,以期为设计其他有效的兽用和人用活载体疫苗提供参考。     

禽腺病毒免疫后抗体水平分析及与攻毒保护相关性研究

本文采用推荐剂量和低于推荐剂量腺病毒相关疫苗（腺病毒+ND联苗）免疫鸡,寻找不同抗体效价的鸡进行攻毒实验,界定抗体效价和攻毒保护的相关性,确定能使禽群抵御Ⅳ型腺病毒感染的抗体临界值。对空白对照组禽群,定期采血,监测母源抗体情况,以期为禽腺病毒病的研究和防控提供参考。     

鹅源新城疫病毒云南流行株免疫交叉保护试验

用分离的鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液制成油乳剂灭活苗,和NDV油乳剂灭活苗分别接种10日龄未免疫雏鸡和未免疫雏鹅,并设非免疫对照组。免疫后21 d,试验组和对照组每只鸡和鹅分别注射0.1 mL鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液10-1稀释液,结果对照组鹅和鸡分别出现典型的鹅新城疫和鸡新城疫的症状和病理变化,而试验组鹅和鸡全部健活。结果表明,鹅新城疫病毒KM2007株油乳剂灭活苗及NDV油乳剂灭活苗均可保护鹅和鸡免受鹅新城疫病毒野毒的攻击。     

VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒灭活疫苗的增效作用研究

试验旨在探究VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒（NDV）灭活疫苗（ND4416株）的免疫增效作用。选取160只健康鸽随机分为4组：ND4416株灭活疫苗组（NDV组）、ND4416株灭活疫苗与免疫增强剂（VA5）混合组（NDV+VA5组）、La Sota灭活疫苗组（La Sota组）及生理盐水空白对照组（C组）,进行免疫效力及免疫持续期试验。采用血凝抑制试验检测各组鸽免疫后不同时间点的血清抗体效价,结果显示,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗血清抗体水平（P<0.05）。脾脏淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能够有效刺激免疫鸽的淋巴细胞转化。在免疫后第30、90、180天,各组鸽子采用ND4416株进行攻毒试验,结果显示,NDV+VA5组在3个时间点的攻毒保护率均为100%,均高于La Sota组。免疫持续期试验结果显示,NDV+VA5组血清抗体水平在免疫后第21天达峰值11.20log₂,第180天仍能达到7.50log₂,攻毒保护率达100%,表明VA5免疫增强剂可延长鸽新城疫疫苗的免疫效力持续期至180 d。攻毒后体外排毒检测结果表明,VA5免疫增强剂能够缩短攻毒后鸽的体外排毒周期,减少体外排毒。综上,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗的免疫效果,为研制效果更好的鸽NDV疫苗提供了基础依据,同时也为免疫增强剂的应用增加了试验数据。     

O型口蹄疫抗体金标试纸盒检测免疫动物抗体效价与攻毒保护关系

本研究目的在于用O型口蹄疫金标试纸条研究免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的对应关系以及免疫牛抗体消长规律.用金标试纸条检测了口蹄疫O型疫苗质量标准规定的牛、羊和猪免疫和攻毒血清抗体效价及不同免疫程序的牛血清效价.结果显示,当牛、猪和羊免疫血清稀释≥1∶8时,试纸条是阳性结果,表示有99％的被免疫动物属于抗体水平保护范围;被检测血清稀释≤1∶2时,是阴性结果,表示被免疫动物抗体水平属于不保护范围;血清稀释1∶2～1∶8时,是阳性结果,表示有50％的被免疫动物属于抗体水平保护范围.牛在首次免疫8周后加强免疫可以获得良好的保护率和保护时间.通过本试验确定了金标试纸条检测免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的关系及牛加强免疫最佳的时间.     

不同新城疫弱毒苗对新城疫病毒强毒的免疫保护试验

用NDV的LaSota株、VG/GA 株、VH 株、PHY LMV 42株及Clone 30株弱毒疫苗免疫SPF鸡后 ,通过对雏鸡免疫后的血清抗体监测表明 ,4种弱毒疫苗激发雏鸡的抗新城疫病毒抗体滴度在 7log2水平以下 ,且差异不显著。通过以上 4种新城疫弱毒疫苗对新城疫病毒东台强毒株的免疫保护试验表明 :至少单独使用弱毒疫苗 ,不能对东台地区流行的新城疫病毒强毒株提供有效保护 ,保护率在 60 %～ 74%     

基因Ⅶ型新城疫病毒样颗粒作为疫苗候选株的免疫效果

利用昆虫细胞/杆状病毒表达载体系统,将已构建编码新城疫病毒(NDV)M、F和HN结构基因的3种单顺反子重组杆粒共感染悬浮培养的Sf9细胞以大量制备新城疫病毒样颗粒(ND VLPs)。收集细胞培养上清经超速离心浓缩,蔗糖密度梯度纯化后,利用Western blot检测和透射电镜观察。结果显示,3种目的蛋白均正确表达且组装形成与原病毒粒子形态相似的颗粒,测定其血凝活性效价可达12log2。动物试验结果表明,与LaSota灭活油乳苗相比,将纯化后的病毒样颗粒以含25μg蛋白的剂量或联合佐剂免疫商品蛋鸡后能产生较高水平的HI抗体,且可有效减少攻毒鸡只口咽、泄殖腔途径的排毒时间,从而减少病毒在健康鸡群中的传播感染机会;表明所研制的基因Ⅶ型ND VLPs可作为疫苗候选株具有很大的防控优势。     

新城疫不同母源抗体水平对分离强毒攻毒临界保护值测定

新城疫（ND）是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病,以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征,具有很高的发病率和病死率,是危害养禽业的一种主要传染病,OIE将其列为A类疫病。当前对新城疫的防控还是以疫苗免疫为主,接种过新城疫疫苗的母鸡,     

新城疫不同母源抗体水平对分离强毒攻毒临界保护值测定

新城疫（ND）是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病,以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征,具有很高的发病率和病死率,是危害养禽业的一种主要传染病,OIE将其列为A类疫病。当前对新城疫的防控还是以疫苗免疫为主,接种过新城疫疫苗的母鸡,     

鸡新城疫病毒基因Ⅶ型和LaSota株灭活疫苗免疫保护效力观察

新城疫是危害我国养禽业的重要疫病之一,新城疫病毒(NDV)流行毒株有多种基因型,其中基因Ⅶ型毒株流行较为普遍。本研究利用流行病学调查中筛选出的NDV LY1分离株(基因Ⅶ型)和传统的LaSota株(基因Ⅱ型)与油佐剂按1∶3比例混合乳化,分别制成油包水型LY1、LY1+LaSota和LaSota油乳剂灭活苗。免疫试验结果显示,LY1灭活疫苗组HI抗体效价较低,LY1+LaSota疫苗组HI抗体水平稍高于商品化LaSota疫苗组(P>0.05),抗体产生规律相似;利用LY1分离株攻击,LY1+LaSota株组免疫保护率达100%,明显高于LY1分离株灭活疫苗组及商品化灭活疫苗组。本试验为新城疫新的疫苗研究开发奠定了基础。     

ND疫苗饮水免疫及抗体与保护相关性的研究

ＮＤ疫苗饮水免疫接种效果差，其ＨＩ效价在免疫个体间参差不齐，无一定规律性；而ＨＩ效价与ＮＤＶ保护之间具有相关性。其中ＨＩ价１：１６是保护与否的重要相关倍数，具有隐性感染带病的危险性。     

稳定表达RKIP对新城疫病毒复制的影响

为了研究Raf激酶抑制蛋白（RKIP）对新城疫病毒（NDV）复制的影响,从鸡胚成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增RKIP基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,经PCR、双酶切和测序鉴定,采用Fu-GENEHD法将阳性质粒转染Vero细胞,经G418筛选,有限稀释法获取单克隆细胞株,Western-blotting检测RKIP的表达。利用Real-time PCR测定病毒感染细胞后培养上清的病毒量。结果表明：成功构建鸡RKIP真核表达质粒;转染Vero细胞后经克隆化培养获得稳定表达鸡RKIP的细胞株Vero-RKIP;感染初期,NDV在Vero-RKIP上表现出了更强的复制能力。     

山羊抗鸡新城疫病毒抗体的提纯及免疫效果的研究

目前用于防治鸵鸟、火鸡、孔雀等ND的特异抗体制剂,大都为高免卵黄经生理盐水稀释后加适量抗生素制成。制品中含大量的卵黄磷蛋白和脂肪,注射后常因难以吸收造成局部肿胀、出血和过敏等应激反应,扰乱正常的免疫机制,降低疗效;而且还引起蛋源性多种病原体垂直传播感染。提纯的ND     

鸡新城疫疫苗免疫鸽血清抗体水平与攻毒保护关系初步研究

本试验使用鸡新城疫耐热保护剂活疫苗和鸡新城疫灭活疫苗联合免疫乳鸽(30日龄以内)及成鸽,免疫后依据抗体水平不同将乳鸽、成年鸽分成不同抗体组水平,分别用鸡源新城疫强毒和鸽副黏病毒颈部皮下攻毒,观察乳鸽与成鸽的存活率。同时在攻毒后第3d、6d、9d、12d和15d分别采集喉头、肛门拭子,接种SPF鸡胚,测定排毒情况。试验结果显示乳鸽针对鸡源NDV和鸽源NDV的临界抗体值分别为:1∶32、1∶16;成鸽针对鸡源NDV和鸽源NDV的临界抗体值分别为:1∶32、1∶16;临界抗体值组鸽未出现排毒现象。该结果表明鸡新城疫耐热保护剂活疫苗和鸡新城疫灭活疫苗联合免疫控制鸽Ⅰ型副黏病毒病,既可以抵抗鸡源NDV病毒的攻击,也可以抵抗鸽源NDV病毒的攻击。     

仔猪副伤寒血清抗体水平与其保护力的相关性研究

用已经建立的检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot—PPA—ELISA，对不同仔猪副伤寒抗体水平试验组14头仔猪和对照组4头仔猪进行了血清抗体效价测定，并以沙门菌强毒攻击受试猪，测定血清抗体效价与保护力的关系。试验结果表明，以Dot—PPA—ELISA检测的仔猪副伤寒血清抗体几何平均效价不低于28^8.2时，85．7％的猪能够抵抗沙门菌强毒的攻击。试验初步确定以Dot—PPA—ELISA进行猪群免疫监测时，血清抗体的几何平均效价2^8.0。为仔猪副伤寒的保护临界标准，该标准的确定为集约化猪场用Dot—PPA—ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体，进行仔猪副伤寒的诊断、免疫监测及流行病学调查提供了科学依据。