环境条件对月季黑斑病病原的影响

采用组织分离、稀释纯化的方法,从月季黑斑病病斑上分离出病原,再通过设置不同的温度条件、光照条件和不同的酸碱环境,研究环境条件对月季黑斑病病原的影响。结果表明:全黑暗(0h光照)等不良光照条件下有利于病原的生长;病原适宜生长的温度范围为15～30℃,低于10℃或高于35℃生长均受到抑制;适宜生长的酸碱环境为pH 7～9的中性和弱碱性环境。     

不同杀菌剂对2种板栗内腐病菌的室内毒力测定

为更加高效和有针对性的防治板栗内腐病,本试验选用7种低毒的杀菌剂,采用生长速率法对分别引起板栗内腐病的可可毛色二孢菌（）和茄病镰刀菌（）进行室内药剂筛选和毒力测定。结果表明：7种杀菌剂对2种致病菌均有一定的抑制作用,其中对抑制效果较好的药剂为丙硫菌唑、咯菌腈、苯醚甲环唑,抑菌率分别为：92.52%、100%、79.49%,其EC50浓度分别为0.076、5.511、8.445 mg/L。对抑制效果较好的药剂为丙硫菌唑和苯醚甲环唑,抑菌效果为82.25%和62.59%,EC50浓度分别为：1.327、53.853 mg/L。     

红灯樱桃采后主要病原真菌的鉴定及Bacillus velezensis G-1天然产物的广谱抑菌效果

【目的】明确Bacillus velezensis G-1天然产物在樱桃采后抗真菌病害中的抑菌效果,为樱桃采后病害广谱生物防治药剂研发提供新型开发源。【方法】首先,以红灯樱桃采后病果为材料,通过组织块分离、纯化、形态特征、ITS序列鉴定、特异基因和科赫法则确定樱桃采后病原真菌种类;其次,以获得的病原菌为靶标,通过生长速率法和平板对扣法研究了B. velezensis G-1脂肽和2, 4-二叔丁基苯酚的广谱抑菌效果。【结果】米根霉YT-1(Rhizopus oryzae)、镰刀菌YT-2(Fusarium dlaminii)、藤仓镰刀菌YT-4(Fusarium fujikuroi)、链格孢属YT-5与YT-7(Alternaria sp.)、天竺葵葡萄孢YT-6(Botrytis pelargonii)、冻土毛霉YT-8(Mucor hiemalis f. hiemalis)和皮壳青霉YT-9(Penicillium crustosum)为红灯樱桃采后主要病原真菌;8株病原真菌中以菌株YT-1、YT-6和YT-8致病性较强;B. velezensis G-1脂肽物质(500μg·mL-1)除对M. hiemalis f. hiemalis和P. crustosum的抑菌率低于60%外,对其余各病原真菌抑菌率均高于70%;100μL挥发性物质2, 4-二叔丁基苯酚(10μg·μL-1)除对P. crustosum的抑菌率为0.41%外,对其余各病原真菌的抑菌率均高于90%。【结论】首次在红灯樱桃中发现了镰刀菌(F. dlaminii)和藤仓镰刀菌(F. fujikuroi),说明近年来红灯樱桃采后病害发生了变化,新增了镰刀菌属病原真菌;发现B. velezensis G-1脂肽物质和挥发性物质2, 4-二叔丁基苯酚可用于防治樱桃上述采后病害。     

月季盘二孢黑斑病的发病规律及防治技术

由蔷薇盘二孢(Marssonina rosae(Lib.)Fr.)引起的月季黑斑病是一种世界性病害,直接影响了月季的观赏价值和植株的生长。该试验对月季黑斑病的症状、病原菌的形态特征、发病规律以及防治技术等方面进行了研究,以期为月季黑斑病的有效防治以及进一步的研究提供理论依据。     

红枣黑斑病发病研究及药剂防治试验

以骏枣为试材,对红枣黑斑病病菌进行了分离鉴定研究,并进行了室内抑菌及田间防治试验,结果表明,所分离的骏枣黑斑病菌为链格孢菌,室内条件下80%的多抗菌素对其抑制效果最好,田间防治效果最好的药剂是43％的戊唑醇5000倍液和多抗霉索1500倍液。     

枇杷炭疽病的室内抑菌试验

选用7种药剂对枇杷炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)进行平板抑菌试验,结果表明:7种药剂均具有一定的抑制作用,世高表现出最好的抑菌效果,其EC50为1.52 mg.L-1,EC90仅为36.47 mg.L-1,极显著低于其它供试药剂,浓度100 mg.L-1的抑菌率达94%,具有潜在的应用价值。     

火龙果溃疡病菌的鉴定及室内药剂筛选

为了有效防治火龙果溃疡病,通过病原菌分离纯化、致病性测定、形态学观察、rDNA-ITS序列分析和药剂室内毒力测定,对火龙果溃疡病病菌进行鉴定及抑菌药剂室内筛选。结果表明,菌株P1与新暗色柱节孢相似性达100%,结合形态学分析确定该菌株就是火龙果溃疡病病原菌;13种药剂中40%氟硅唑乳油、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、50%多菌灵可湿性粉剂和12.5%烯唑醇乳油的抑菌效果最好,EC50分别为0.050 7、0.131 7、0.183 2和0.173 1mg/L。     

大蒜干腐病原菌分离鉴定及室内药剂筛选

以采自于黑龙江省双城、大同、甘南、五常等地的大蒜干腐病病样为供试材料,采用组织分离法分离病原菌,进行形态学鉴定和ITS序列测定,同时进行4种药剂的室内筛选;并选取这2种药剂配制不同浓度梯度的含药培养基,进行抑菌试验,制作毒力回归方程。结果表明:大蒜干腐病致病菌为尖孢镰刀菌(Fusariwn oxysporum Schlecht),60%纯白多菌灵和根萎停对大蒜干腐病尖孢镰刀菌的抑菌效果最好。经毒力回归方程计算,防治尖孢镰刀菌时根萎停的EC50值为29.65mg/L,60%纯白多菌灵的EC50值为69.82mg/L,表明根萎停对尖孢镰刀菌的抑制效果更好。     

丝瓜伤流液对三种常见真菌抑制作用的研究

以"绿胜1号"丝瓜为试材,采用平板培养法研究了丝瓜伤流液对3种常见真菌的抑菌活性。结果表明:丝瓜伤流液对于小麦赤霉菌、菜豆链格孢菌、尖孢镰孢菌均具有明显的抑菌活性,且随着丝瓜伤流液体积分数的增大,抑菌效果愈加显著,其中,0.6倍的丝瓜伤流液对3种供试真菌抑菌率均达100%。     

林芝11种大型真菌子实体粗提取物的抑菌作用研究

为探究大型真菌的抑菌活性,更深层次地为利用大型真菌资源制作无污染微生物制剂做指导。以菌丝生长速率为指标,利用11种大型真菌子实体粗提取物(减压浓缩液及其冷冻干燥物),分别对小麦赤霉病菌、马铃薯干腐病菌、油菜菌核病菌、小麦根腐病菌、小麦纹枯病、番茄早疫病菌6种植物病原真菌进行了抑菌试验和毒力测定试验。研究结果表明,11种大型真菌中,在子实体粗提取物(冷冻干燥物)浓度为100 mg·mL-1时,有4种大型真菌子实体粗提取物对植物病原真菌有较好的抑菌效果,分别为白乳菇、桦附毛孔菌、硫磺菌和金黄喇叭菌,抑菌率均达到80%以上。可利用其子实体提取物制成微生物制剂用于植物病原真菌的生物防治。     

茎瘤芥（榨菜）黑斑病菌的分离与鉴定

对茎瘤芥黑斑病进行分离鉴定,以明确其分类地位。通过致病性测定、形态学观察及PCR鉴定,试验结果表明,茎瘤芥黑斑病的病原菌为半知菌亚门链格孢属芸薹链格孢Alternaria brassicae。     

山东牡丹黑斑病的病原菌鉴定与ITS序列分析

牡丹黑斑病的致病菌尚不明确。通过对泰安地区的牡丹病叶进行组织分离,利用分子生物学技术结合形态学方法对病原菌进行鉴定,并利用Mega5软件对链格孢属的22个种进行系统发育树分析,进一步明确其分类地位。结果表明：该病致病菌ITS序列与GenBank中登录的Alternaria alternata、A. tenuissima、A. metachromatica相似性均为100%,利用DNAMAN软件对核苷酸一致性进行比较,发现样品菌株与A. alternata的一致性最高,结合形态学方法鉴定该病致病菌为链格孢A. alternata（GenBank登录号为：KJ682317）。回接鉴定后分离得到的菌株,菌饼刺伤接种的病叶与无伤接种的病叶均发病,但刺伤叶片病斑扩展快。     

病害对3个砂梨品种早期落叶的影响

由于一些侵染性病害的影响,浙江省主要梨产区出现早期落叶严重的现象,严重影响了砂梨产业的发展。通过对浙江省杭州市商业梨园主栽品种的田间调查发现,不同品种对病菌的抵抗能力不同。圆黄为黑斑病的易感品种,但对炭疽病的抗性较强;黄花和翠冠较抗黑斑病,但黄花炭疽病的发病率较高;3个品种的锈病发病率没有显著差异。病菌侵染和落叶时间的相关性分析表明,病菌侵染后翠冠和圆黄落叶较黄花早;受黑斑病菌侵染的叶片最易脱落,而梨炭疽病菌和梨锈病菌不易引起落叶,仅在后期形成穿孔。总体上圆黄早期落叶现象最为严重。受梨黑斑病菌侵染后,叶片诱导POD活性的增加来抵御病原菌的侵染。     

大樱桃黑斑病病原鉴定及其致病性研究

 针对大樱桃黑斑病进行了病原菌鉴定及致病性测定,通过形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析,确定其病原菌为链格孢（Alternaria alternata）。致病性测定结果表明：该菌可以直接侵染或通过自然孔口和伤口侵染大樱桃果实,伤口接种的果实发病较重;病原菌对有伤叶片具有一定的致病能力,不侵染无伤叶片;该菌对梨、杏、李等果实致病性较强,对山楂果实的致病能力相对较弱。     

瑞典常春藤漆斑病病原鉴定

 通过病原菌的形态特征、培养性状和致病性测定的方法对引起瑞典常春藤漆斑病的病原菌进行了分离鉴定, 采用PCR技术扩增病菌rDNA2ITS基因, 获得一长度为523 bp的DNA片段, 序列测定结果表明该片段序列与GenBank已有的露湿漆斑菌序列的同源性达到了99%。综合两种方法鉴定结果, 露湿漆斑菌是引起瑞典常春藤漆斑病的致病菌, 露湿漆斑菌为该寄主上的真菌新病害。     

怀黄菊黑斑病病原的分离及鉴定

对怀黄菊（Chrysanthemum morifolium Ramat.‘Huaihuang’）上发生的一种叶片变黑枯死的主要病害进行了病原分离和鉴定,通过形态观察、产孢表型分析、致病力检测和rDNA-ITS序列分析,初步确定该病是由链格孢属（Alternaria）的交链孢菌（Alternaria sp.）引起的怀黄菊黑斑病。从发病植株中分离纯化得到2个致病菌株A1和A2;PDA培养基上的2个致病菌株菌落质地、颜色、边缘整齐度等特征存在一定差异,显微镜下产孢表型也存在差异,但致病力没有差异,其rDNA-ITS序列一致性达100%,序列已在GenBank上登录,登录号为KF688111。     

库尔勒香梨果萼黑斑病病原鉴定及其ITS、GPD和EF-1α序列分析

采用常规组织分离法对库尔勒香梨果萼黑斑病病样进行病原菌分离,依据科赫氏法则进行病原菌田间致病性测定,并利用分子生物学手段结合形态学鉴定确定病原菌及其分类学地位。田间致病性测定结果表明链格孢属菌株为致病菌株,利用真菌通用引物进行致病菌株保守基因(ITS、GPD和EF-1α)PCR扩增及测序,获得序列Gen Bank数据库登录号为KU145269、KU145271、KU145273。根据田间致病性、形态学观察以及保守基因遗传进化分析结果确定库尔勒香梨果萼黑斑病病原为链格孢属链格孢(Alternaria alternata)。     

菜花贮藏期交链孢霉菌的侵染规律研究

对贮藏期菜花黑斑病菌的侵染规律及最适侵染条件进行了初步研究,为菜花贮藏期该病害的防治提供理论依据。结果表明:温度为贮藏期黑斑交链孢霉菌的主要环境因子,其最低生长温度为4℃,在0℃环境下几乎无法存活。此外其最适侵染的pH为8;交链孢霉菌侵染过程中以分泌细胞壁降解酶破坏组织细胞完整性为主,病原菌在接种的第2天几丁质酶活性明显升高,在接种7d以内,果胶酶活性先下降后持续升高,这种活性升高与菜花贮存6～7d时的病斑扩展规律相符。     

月季响应黑斑病的早期差异表达基因分析

为了获得月季抗黑斑病的相关基因,探究月季抗病分子机制,以月季高抗黑斑病品种‘粉和平’叶片为材料,采用单孢子离体接种法对其接种黑斑病菌,以接种24、48和72 h的cDNA等量混合样为检测子,以相应对照的cDNA混合样为驱动子,构建抑制差减杂交文库。挑选200个阳性克隆进行测序、BLASTx比对分析,获得37条非冗余EST序列,其中32条序列在蛋白数据库中具有同源序列。将获得的EST序列导入相应样本的转录组测序数据库,以其在两个样本中的RPKM比值作为基因相对表达量。结果表明,接种病原菌后,上调表达基因涉及信号识别、离子转运、活性氧清除、光呼吸途径及苯丙烷代谢等方面,其中以活性氧清除、光呼吸途径和苯丙烷代谢途径的基因数最多。这一结果说明月季抗病是通过多基因的协同作用实现的,活性氧清除、光呼吸途径和苯丙烷代谢途径在月季抵抗黑斑病菌过程中发挥重要作用。