荧光增白剂和增效蛋白对粘虫核型多角体病毒的增效作用

离体和活体处理粘虫幼虫围食膜后,通过SDS-PAGE分析其围食膜蛋白条带的变化、观察其形态学特征、生物测定等方法研究了荧光增白剂FB28和棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白(En-Ha)对粘虫幼虫围食膜的破坏作用及其对粘虫核型多角体病毒(MsNPV)的增效作用.结果表明,FB28离体处理围食膜能够解离大部分围食膜蛋白,幼虫摄取含有l?28的饲料4 h后,围食膜破裂.呈现出蓝色的荧光,高分子量蛋白条带消失.En-Ha离体处理围食膜,能够降解高分子量蛋白,出现高分子量蛋白条带消失,低分子量蛋白条带出现的现象;幼虫摄取含有9 ug/mL En-Ha饲料7 h后,围食膜极易断裂,高分子量蛋白条带消失.经过一段时间恢复实验后,FB28和En-Ha处理的幼虫围食膜都能够恢复正常,其破坏作用是短暂的.生物测定结果表明,FB28和En-Ha均能够通过破坏围食膜完整性提高MsNPV的感染率,使IC50显著降低.     

河业省地下害虫区系调查研究

1979—1983年在河北省54个县调查了地下害虫的地理分布和危害程度.从采集的大量昆虫标本中,已初步定出了60个虫种,其中包括金龟子50种,金针虫4种,缕蛄2种,拟地甲2种及麦根蝽象等.根据害虫危害程度和生态条件将全省划分为六个自然区,每个区都有自己的优势虫种.目前,地下害虫发生趋势是:蛴螬十分严重,如华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟、铜绿丽金龟;金针虫(细胸金针虫)在某些地区具有发展趋势;蝼蛄危害减轻,例如华北蝼蛄.作者认为,河北省低平原区仍是重要防治区,在麦田主要防治华北大黑鳃金龟、细胸金针虫,在玉米田要防治华北大黑鳃金龟、黄褐鳃金龟等,在花生田防治暗黑鳃金龟、华北大黑鳃金龟、铜绿丽金龟.     

18种杀虫剂对华北大黑鳃金龟和铜绿丽金龟的毒力比较

采用浸渍法,测定了18种杀虫剂对华北大黑鳃金龟和铜绿丽金龟2龄幼虫的室内毒力,并比较了供试杀虫剂对两种试虫的毒力差异。结果表明,氨基甲酸酯类杀虫剂和大多数有机磷杀虫剂对两种金龟子幼虫的毒力差异较小,其它各类杀虫剂对铜绿丽金龟的毒力显著高于对华北大黑鳃金龟的毒力。其中新烟碱类药剂对两种试虫毒力差异最大,如啶虫脒对铜绿丽金龟的毒力高于华北大黑鳃金龟159.61倍,另外,苯基吡唑类杀虫剂氟虫腈对两种试虫毒力也相差了85.73倍。     

苏云金杆菌Cry8Ea2蛋白的分离纯化及生物活性测定

Cry8Ea2蛋白是一种新型苏云金杆菌杀虫晶体蛋白。通过穿梭载体pSXY422b将cry8Ea2导入Bt无晶体突变菌株中,获得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中获得表达。通过分子筛层析,成功获得纯化的130 kDa活性毒素蛋白。用改进的生物活性测定方法进行Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟一龄幼虫的杀虫活性测定,LC50分别为0.267 9μg/mL和0.071 9μg/mL。研究首次发现Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟具有较高毒力,拓展了该蛋白的杀虫谱,为转基因工程提供了新资源。     

金龟子绿僵茵对华北大黑鳃金龟幼虫的杀虫活性研究

虫生真茵是害虫的重要天敌之一.从华北大黑鳃金龟幼虫Holotrichia oblita(Fald.)分离出一株真菌,并采用浸渍法初步研究了对华北大黑鳃金龟幼虫的杀虫活性.结果表明,分离出的虫生真菌为金龟子绿僵茵(Metarhizium anisopliae)菌株;随金龟子绿僵茵孢子浓度的升高,华北大黑鳃金龟幼虫的感病死亡率增加,在孢子浓度为2.1x104、1.9×105、2.2×106、2.0×107、1.8×108个/ml时,幼虫的累计死亡率分别为20%、65%、90%、100%和100%.用时间.剂量.死亡率模型(time-dose-mortality model,TDM)对幼虫的致病力数据进行模拟,所建模型均顺利通过Hosmer-Lemeshow拟合异质性检验,表明模型拟合良好,并由模型估计出了该菌株对华北大黑鳃金龟幼虫的致死剂量与致死时间.结果说明该菌株对防治华北大黑鳃金龟幼虫具有较强的应用潜力.     

华北大黑鳃金龟丝氨酸羧肽酶在不同体系中的表达

丝氨酸羧肽酶（Serine carboxypeptidases,SCPs）是一类在酸性pH环境下参与多肽和蛋白质的加工、修饰与降解等多个重要环节的真核生物蛋白水解酶。根据华北大黑鳃金龟丝氨酸羧肽酶（ HoSCP）全长基因序列设计引物,利用PCR方法克隆hoscp基因并分别连接到表达载体pET28b和pPIC9K上,转化大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115,实现了其在原核以及真核体系中的表达。结果显示,HoSCP在原核细胞及酵母细胞中均能稳定表达50 kDa的特异蛋白。 HoSCP的成功表达为其在华北大黑鳃金龟体内的活性和生物学功能研究提供了可能。     

中国农科院植保所成功筛选华北大黑鳃金龟植物源引诱剂

正为研制华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita的植物源引诱剂,中国农科院植保所研究人员选取7种植物挥发物单体,筛选各单体最佳引诱浓度并据此设计35个三元配方,通过华北大黑鳃金龟成虫触角电位反应试验及进一步的趋势行为反应试验筛选出对华北大黑鳃金龟雌、雄成虫引诱作用较强的配方,并通过笼罩引诱试验测试所筛选配方对成虫的引诱效果。     

金龟子绿僵菌对华北大黑鳃金龟幼虫的杀虫活性研究

虫生真菌是害虫的重要天敌之一。本文从华北大黑鳃金龟幼虫Holotrichia oblita (Fald.)分离出一株,并采用浸渍法初步研究了对华北大黑鳃金龟幼虫的杀虫活性。结果表明,分离出的虫生真菌为金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)菌株;随金龟子绿僵菌孢子浓度的升高, 华北大黑鳃金龟幼虫的感病死亡率增加,在浓度为2.1×104、1.9×105、2.2×106、2.0×107、1.8×108个孢子/ml时,幼虫的累计死亡率分别为20 %、65 %、90 %、100 %和100 %。用时间-剂量-死亡率模型(time-dose-mortality model ,TDM) 对幼虫的致病力数据进行模拟,所建模型均顺利通过Hosmer-Lemeshow拟合异质性检验,表明模型拟合良好,并由模型估计出了该菌株对华北大黑鳃金龟幼虫的致死剂量与致死时间。结果说明该菌株对防治华北大黑鳃金龟幼虫具有较强的应用潜力。     

五岳寨苏云金芽孢杆菌资源多样性分析及杀虫基因的鉴定

分离筛选高效广谱野生苏云金芽孢杆菌菌株并对五岳寨地区苏云金芽孢杆菌资源多态性进行分析。采用温度筛选法进行菌株分离筛选,光学显微镜下观测菌株的晶体形态,通过PCR-RFLP和SDS-PAGE法对这些菌株进行基因鉴定和蛋白分析,并进行生物活性测定。从土壤中分离得到72株Bt菌株,共包含13种cry基因,9种基因组合,另有8株未鉴定出基因型,SDS-PAGE蛋白分析发现这些菌株主要表达130、90、50 kDa蛋白;生物活性测定结果显示有20株对小菜蛾和棉铃虫具有高效毒力,另有4株对华北大黑鳃金龟有高效毒力,其中2株的校正死亡率可达80%。五岳寨地区苏云金芽孢杆菌资源丰富并具有良好的多态性。     

黔东南有机兔眼蓝莓园金龟子种类及综合防控

为了摸清有机生产模式下,贵州省黔东南州有机蓝莓园金龟子昆虫的种类,于2013-2014年,对黔东南有机蓝莓园金龟子类昆虫进行了调查。结果显示黔东南有机蓝莓园金龟子类害虫有3科13属26种。3科为丽金龟科、鳃金龟科和花金龟科科。13属为弧丽金龟属、彩丽金龟属、异丽金龟属、喙丽金龟属、毛丽金龟属、齿爪鳃金龟属、云鳃金龟属、绢金龟属、等鳃金龟属、青花金龟属、星花金龟属、罗花金龟属和锈花金龟属。其中丽金龟科有中华弧丽金龟、曲带弧丽金龟和琉璃弧丽金龟等14种;鳃金龟科有暗黑鳃金龟、江南大黑鳃金龟和华脊鳃金龟等6种;花金龟科有斑青花金龟、小青花金龟和凸星花金龟等6种。丽金龟科的喙丽金龟、铜绿丽金龟和棉弧丽金龟,鳃金龟科的暗黑鳃金龟和黑绒鳃金龟,花金龟科的小青花金龟和白星花金龟等7种为优势种。结合黔东南有机蓝莓园金龟子种类、危害特点及GB/T19630-2011的规定,建议对黔东南有机蓝莓金龟子危害防治,在坚持"预防为主,综合防治"原则下,采取农业防控、物理防控和生物防控等综合防控措施。     

Synthesis of somatic hybrids (RCBB) by fusing heat-tolerant Raphanus sativus (RR) and Brassica oleracea (CC) with Brassica nigra (BB)

Brassica carinata (BBCC), a potential oilseed crop for dry land agriculture, is sensitive to high temperatures during germination and early stages of growth, which thereby restricts the possibility of using the residual soil moisture available after the rainy season for its cultivation. To overcome this problem, a three‐genome hybrid, RCBB, was synthesized using Raphanus sativus (RR) and Brassica oleracea (CC) as donor sources for the desired heat tolerance. Protoplasts of RC hybrids obtained through sexual crosses between R. sativus (female) and B. oleracea (male) were fused with protoplasts of Brassica nigra (BB) to produce RCBB somatic hybrids. The hybrid colonies regenerated with an average frequency of 7.6%. Twelve out of 36 hybrids grown to maturity were characterized for their nuclear and organelle genomes. While all the hybrids showed the presence of B. nigra chloroplasts, 10 of the hybrids showed B. nigra‐specific mitochondria and two had Raphanus‐spedfic mitochondria. The somatic hybrids could be backcrossed to B. carinata.     

Hybrids of Bread Wheat (Triticum aestivum) with Thinopyrum scirpeum (4x) and Thinopyrum junceum (6x)

Hybrids were obtained by crossing Thinopyrum scirpeum (4x) and T. junceum (6x) onto Triticum aestivum cv, ‘Chinese Spring’. An average meiotic pairing of 24.44^I+ 5.07^II+ 0.14^IIIin the ‘Chinese Spring’×T. scirpeum hybrid (ABDE₁E²) is attributed to two similar genomes from T. scirpeum (E₁E₂E₃E₄). An average meiotic chromosome pairing in the other hybrid (ABDJ₁J₂E₃) was 31.70^I+ 3.80^II+ 0.90^III and is attributed to autosyndetic pairing between the three genomes of T. junceum.     

异色瓢虫对菜缢管蚜、禾谷缢管蚜和白杨毛蚜捕食的作用

异色瓢虫是一种重要的捕食性天敌,可捕食多种蚜虫,在生物防治中具有很大应用前景。研究了异色瓢虫对3种蚜虫(即菜缢管蚜、禾谷缢管蚜和白杨毛蚜)的捕食功能反应。结果表明：异色瓢虫对3种蚜虫的日捕食量中,其中四龄幼虫最大,成虫和三龄幼虫次之,1、2龄幼虫最小。捕食者对猎物的功能反应均属于Holling-Ⅱ型方程。     

N-(1-萘乙酰基)-N'-(4-氨替吡啉基)硫脲(NAT)对小麦生理活性影响的初步研究

以新合成的NAT配制成不同浓度(0.1、1.0、10.50mg·L~(-1))的水溶液,对小麦进行漫种、水培幼苗和大田灌浆期叶面喷洒处理,以与NAT相同浓度的NAA作对比,研究了喷后一定时期小麦叶片生理活性和收割时籽粒千粒重。结果表明,NAT使小麦在不同生长发育时期叶片中的叶绿素含量均增加;幼苗叶片呼吸速率下降;幼苗期低浓度处理NR活性增高,高浓度显著抑制,灌浆期则随处理浓度的升高而显著增加;籽粒千粒重明显高于对照。不论对叶片生理活性还是对籽粒千粒重的影响,NAT的总体效果均明显优于NAA,其中以1 mg·L~(-1)左右浓度的NAT处理效果最佳。     

米象和玉米象蜡层与护蜡层成分的气质联用鉴定

采用正己烷整体浸泡米象和玉米象成虫试虫的方法,在常温及超声波浴的条件下,对两种害虫体壁上表皮的蜡层和护蜡层成分进行提取,借助气质联用分析提取物成分.结果表明:米象蜡层和护蜡层提取物质含有7个组分,玉米象的提取物质中含有3个组分,主要是烃、含有羟基的酚类、带有羟基的酮类物质和酯类.两种害虫的提取物的总离子流色谱图具有明显差异,可以用于区别米象和玉米象.两种害虫蜡层和护蜡层共有成分分别是:1,2-苯二甲酸-1,2-(2-甲基-1)-丁醇二酯、正二十烷和1,2,4-苯三甲酸-(4-正十二醇酯)-1,2-甲二酯,它们可能具有象虫属的特征.米象蜡层和护蜡层的特征成分可能是1,1-二苯基-2-甲基-3-(2-环戊烯基)-1-丙烯、3,5-二(1,1-二甲基乙基)-4-羟基-2,4-环二烯酮、3,5-二(1,1-甲基乙基)-1,2-苯二酚和1,2,4-苯三甲酸-1,2-甲二酯,具有米象种类的特征鉴别意义.因此,利用气相色谱与质谱联用技术,分析研究玉米象及米象的体壁表皮蜡层和护蜡层成分,进行米象和玉米象近缘种的鉴别和昆虫分类具有良好的实际应用前景.     

Bt Research(BT)

正Bt Research(ISSN 1925-1939)is an open access,peer reviewed journal published online by BioPublisher.The Journal is publishing high quality original research on all aspects of Bacillus thuringiensis and their toxins affecting the living organisms,as well as environmental risk and public policy relevant to Bt modified organisms.Topics include(but are not limited to)Bt strain identification,novel Bt toxin discovery     

Bt Research(BT)

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Bioscience Methods(BM)

正Bioscience Methods(ISSN 1925-1920)is an open access,peer reviewed journal published online by Bio Publisher.The journal publishes all the latest and outstanding research articles,letters and reviews in all areas of bioscience,the range of topics including(but are not limited to)technology review,technique know-how,lab tool,statistical software and known     

Bioscience Methods(BM)

正Bioscience Methods(ISSN 1925-1920)is an open access,peer reviewed journal published online by Bio Publisher.The journal publishes all the latest and outstanding research articles,letters and reviews in all areas of bioscience,the range of topics including(but are not limited to)technology review,technique know-how,lab tool,statistical software and known technology modification.Case studies on technologies for gene discovery and function