东方百合快繁培养基优化与脱毒技术研究

摘 要：【研究目的】为实现百合种球的国产化,繁育大量的优质种球,笔者以东方百合的西伯利亚和索邦品种为材料,研究东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较不同的组织培养方法的脱毒效果。【方法】设置不同的激素浓度梯度筛选东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较新鲜百合球茎尖培养、冷藏处理百合球的茎尖培养、鳞片培养、鳞片扦插苗茎尖培养和试管苗茎尖培养等5种组织培养方法的脱毒效果。【结果】试验结果表明,百合茎尖诱导的适宜培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA,芽形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,苗形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.08mg/L NAA,生根的适宜培养基为1/2MS + 0.4mg/L NAA + 4%AC (Active Charcoal)。病毒检测表明试管苗茎尖培养的脱毒效果最好,但成活率较低;冷藏处理百合球的茎尖培养的脱毒效果也较好且成活率较高。【结论】筛选的东方百合各阶段的培养基配方能满足东方百合快速扩繁的技术要求,茎尖培养在东方百合依然是较好的脱毒方法。     

榆林市陇薯7号马铃薯茎尖脱毒培养基筛选

应用不同激素配比的培养基对引进马铃薯品种陇薯7号进行茎尖的分化培养,以期获得脱毒试管苗。试验结果表明,诱导陇薯7号茎尖分化成苗的最适培养基配方为MS+0.05 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA,成活率达92%,成苗率达24.56%。     

马铃薯茎尖组织培养方法优化研究

提高马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。以克新1号为材料,研究了不同茎尖大小、不同浓度和配比的激素对马铃薯茎尖诱导的效果。结果表明:茎尖越小,脱毒率越高,但成活率和成苗率越低,以叶原基数为2的茎尖脱毒效果最好。通过对6种培养基的对比,筛选出MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.1 mg/L为茎尖诱导分化成苗的最优培养基。     

滁菊组织培养脱病毒技术研究

采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,建立滁菊组培脱毒快繁技术体系.研究结果表明,滁菊茎段诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;茎尖增殖的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA.接种脱毒结果为,脱毒率＞83%,茎尖成活率＞42%.     

龙牙百合茎尖脱毒快繁及种球培育技术

当龙牙百合鳞茎在58℃下处理10~20 min,再在40℃下处理72 h;茎尖大小为0.2~0.4 mm时的诱导成活率达60%~66.7%。继代增殖培养基为MS 1.0 mg/L BA 0.1 mg/L NAA时,其增殖系数是3.36。培养基中4.5%~5.5%的食用糖和60 d的培养时间利于鳞茎数量和质量的增加。移栽后的小鳞茎培育8个月可达鲜重22 g/个以上的脱毒种球。     

西伯利亚百合不同部位鳞片的快速繁育

为西伯利亚百合种质保存、工厂化育苗及遗传改良提供依据,以西伯利亚百合的外、中、内3层鳞片为外植体进行组织培养研究,建立了西伯利亚百合鳞片的快速繁殖体系.结果表明:中部鳞片的小磷茎诱导率最高,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率达85.7％;试管苗生根培养基以1/2 MS+...     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%~79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。     

水晶布兰卡百合花器官的组织培养

以水晶布兰卡百合的花器官子房、花瓣、花丝为外植体,研究不同培养基配方对水晶布兰卡百合不同花器官对小鳞茎诱导、愈伤组织分化及小鳞茎增殖的影响。试验结果表明,培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较适合于初代培养,此时子房小鳞茎的诱导率达58.3%;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L适合于不同花器官愈伤组织的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L有利于小鳞茎的增殖。     

提高百合茎尖组织培养脱毒效率研究

以带有CMV病毒的东方百合栽培品种Siberia鳞茎为外植体,常规消毒后在MS BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L培养基中培养成苗,热处理后剥取较大的茎尖(0.4～0.6 mm)进行培养,待茎尖长成植株后再次剥取较大茎尖进行二次脱毒,经检测脱毒率可达80%.研究结果表明,茎尖二次脱毒培养方法简单,易于操作,脱毒率高.     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

东方百合OT系列试管鳞茎的诱导与植株再生体系的建立

[目的]通过对东方百合OT系列品种康佳德奥、罗宾娜试管鳞茎的诱导,建立康佳德奥、罗宾娜的植株再生快繁体系,为进一步建立脱毒快繁体系奠定基础.[方法]采用康佳德奥、罗宾娜不同部位的外植体进行试管鳞茎的诱导,比较用不同部位的外植体诱导的难易及快慢程度,筛选适合的诱导激素、增殖激素及生根激素水平.[结果]在百合OT系列选择外植体诱导时,最好用茎尖作外植体进行诱导;由于罗宾娜、康佳德奥所含内源激素水平不同,因而增殖培养基BA最好控制在1.0～0.5 mg/L;生根激素水平罗宾娜为NAA 0.5mg/L,康佳德奥为NAA0.3 mg/L,生根率为100;,试管苗结鳞茎率大于50;;试管苗移栽在条件容允许的情况下,用山土最为适宜,成活率可达到93;以上.[结论]在百合OT系列选择外植体诱导时,最好用茎尖作外植体进行诱导;罗宾娜的增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+ NAA0.5 mg/L、康佳德奥的增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L;生根激素水平罗宾娜为NAA 0.5 mg/L,康佳德奥为NAA 0.3 mg/L,试管苗移栽最好使用山土.     

百合组织培养技术研究

以百合西伯利亚和索邦的茎尖、鳞片为试材,研究了培养基类型、激素浓度、活性炭对百合苗生长的影响。结果显示:茎尖分化的适宜培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞片产生不定芽的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,西伯利亚的分化率高于索邦;百合继代增殖的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;添加活性炭可提高生根率。     

甜樱桃茎尖培养脱毒研究

以甜樱桃(PrunusaviumL.)嫩梢芽为外植体进行了茎尖组培脱毒研究,筛选出的增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA30.5mg/L+AgNO35.0～10.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,丛生芽增殖数达到6个以上;确定良好的生根培养基为1/2MS+IBA0.7mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,生根率达75.1%,移栽成活率可达80.5%以上;利用生物学方法对甜樱桃试管苗进行了初步病毒鉴定,结果表明,0.5～0.8mm茎尖培养对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和李矮缩病毒(PDA)的脱毒率达39.4%和48.1%;0.5mm以下茎尖培养对ACLSV和PDA的脱毒率达75.8%和78.6%,证明甜樱桃试管苗0.5mm以下的小茎尖培养能有效脱除ACLSV和PDA病毒。     

甘薯茎尖快速剥离及成苗技术研究

以优质食用型甘薯品种‘烟薯25'为材料,在室内和田间条件下,进行不同茎尖剥离方式对比试验、茎尖成苗对比试验、病毒检测试验、试管苗快繁试验以及产量对比试验,研究甘薯高效脱毒的最佳方式。结果表明:采用"一刀切"的茎尖剥离技术平均茎尖成活率和成苗率比常规的层层剥离技术分别高219.2%和429.7%,茎尖培养的最佳培养基配方为MS+0.08 mg/LIBA+0.06 mg/L6-BA;经病毒检测,采用"一刀切"技术病毒脱除率为50%,而常规技术为25%;通过6种不同快繁培养基配方的试验发现,MS+0.04 mg/LIBA+0.05 mg/LGA为最理想的快繁培养基;经田间产量对比分析,脱毒苗鲜薯产量比不脱毒苗平均增产19.9%、薯干增产19.6%,单株结薯数增加0.6块,大中薯率提高3.8%。     

亚洲百合不定芽的诱导及再生植株的建立

以亚洲百合鳞茎为外植体,采用不同浓度激素组合对其进行不定芽的诱导、增殖以及生根进行研究,以期建立该种亚洲百合组织培养快速繁殖体系。试验结果表明:诱导亚洲百合不定芽的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其出芽率为83.33%,最适宜诱导不定芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,其增殖率为92.75%,诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L,其生根率为92.86%。试验结果可为亚洲百合生产扩繁、脱毒复壮、基因转化等工作提供参考。     

东方百合叶片组织培养研究

对东方百合杂交系(Orientalhybrids)中西西(Sissi)品种的叶片、叶柄进行了离体培养研究。结果表明,诱导西西叶片、叶柄分化出小鳞茎的培养基为S4(MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L),诱导率分别为22.2%,11.1%。S4培养基诱导的小鳞茎粗壮,再分化能力强,诱导率相对较高,宜采用MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基作为继代培养基;生根培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L。     

不同因素对大百合鳞茎诱导出芽的影响

以大百合中层鳞茎作为外植体,研究了培养基、激素配比、蔗糖浓度和光照强度对大百合鳞茎诱导出芽的影响。结果表明:大百合鳞茎诱导的最适培养基为MS作为基本培养基,前4周采用暗培养,以MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖45 g/L为培养基诱导愈伤组织,之后采用光培养,以MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖15 g/L为培养基诱导愈伤组织分化出芽,可使愈伤组织诱导率达到88.89%,出芽率达到93.82%,平均出芽数达到12.3,能够诱导产生大量材料,有利于大百合组培快繁。     

不同因素对大百合鳞茎诱导出芽的影响

以大百合中层鳞茎作为外植体,研究了培养基、激素配比、蔗糖浓度和光照强度对大百合鳞茎诱导出芽的影响。结果表明:大百合鳞茎诱导的最适培养基为MS作为基本培养基,前4周采用暗培养,以MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖45 g/L为培养基诱导愈伤组织,之后采用光培养,以MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖15 g/L为培养基诱导愈伤组织分化出芽,可使愈伤组织诱导率达到88.89%,出芽率达到93.82%,平均出芽数达到12.3,能够诱导产生大量材料,有利于大百合组培快繁。     

紫薯脱毒快繁技术研究

为促进紫薯优良品种脱毒种苗的推广应用,提高紫薯产量和品质,以济薯18和济黑1号的优良种薯芽为外植体建立无菌体系,采用正交试验设计,研究了不同培养基、6苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)及蔗糖浓度对紫薯苗诱导的影响。获得苗诱导的最佳培养基后,再从无菌材料上剥取茎尖进行分生组织脱毒培养。结果表明:这种方法脱毒难度低,脱毒效果好,脱毒率达100%;济薯18茎尖脱毒培养的最佳培养基为:1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L;济黑1号最佳培养基为:MS、1/2MS或1/4MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L。     

东方百合‘Siberia’无病毒原原种直接再生体系建立

为快速获得无病毒东方百合‘Siberia’原原种用经RT-PCR技术检测无CMV、LSV、LMoV病毒的‘Siberia’种球为试材,以中外层鳞片为外植体组培获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片为次级外植体,研究了不同植物生长调节剂对试管内小鳞茎直接再生的影响。结果表明,试管内小鳞茎直接再生的最适培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为92.31%,诱导系数为4.15。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖90 g/L,生根最适培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L,移栽成活率可达100%。