草鱼出血病基因疫苗的免疫效果

为探讨含有草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP6基因的重组基因疫苗对草鱼出血病的免疫效果,将重组基因疫苗分别配制为10、30和60μg三个梯度,同时设30μg pFastBacTMDual空载体组,均以等体积的氢氧化铝佐剂为免疫增强剂,对草鱼进行注射,以未经处理的草鱼作为对照组。定期采血测定抗体效价,最后对各组草鱼进行攻毒试验并计算死亡率和免疫保护力。结果显示：注射疫苗的三组草鱼均产生抗体,10μg组效价为1：6～1：11;30μg组为1：9-1：13;60μg组为1：11-1：17,且各组效价均在第28天测定最高,免疫保护率依次为100％、100％和95％,而空载体组和对照组为70％和0％。研究表明,疫苗能够诱导草鱼产生免疫反应,为草鱼出血病核酸疫苗的生产应用和产业化提供了重要的理论依据。     

影响草鱼出血病疫苗免疫效果因素风险评估

 应用模糊层次分析法, 并结合流行病学调查、荟萃分析和德尔菲法, 构建了由评估指标体系、风险因素权重、评分标准、综合评价函数等组成的草鱼出血病免疫预防风险评估模型, 其中, 评估指标体系包括疫苗品质(B1)、免疫程序(B2)、鱼体(B3)、池塘环境(B4)和饲养管理(B5)共5个准则层风险因素和疫苗品种(C1)、保存温度与有效期(C2)、运输存储条件(C3)、免疫时疫苗的存放(C4)、免疫时鱼体健康状态(C5)、免疫技术(C6)、免疫剂量(C7)、漏免的鱼数(C8)、鱼种来源(C9)、健康状态(C10)、鱼体规格(C11)、水温(C12)、溶氧(C13)、氨氮(C14)、亚硝酸盐(C15)、pH值(C16)、透明度(C17)、水色(C18)、底泥厚度(C19)、载鱼量(C20)、搭配模式(C21)、药物的使用(C22)、饲料(C23)、青草投喂(C24)等24个指标层风险因素; 5个准则层风险因素权重值集合为W={0.267; 0.102; 0.131; 0.263; 0.237}, 24个指标层风险因素绝对权重集合为W={0.138;0.059;0.046; 0.024; 0.035; 0.018; 0.027; 0.022; 0.040; 0.054; 0.037; 0.076; 0.037; 0.032; 0.030; 0.027; 0.018; 0.019; 0.024; 0.104; 0.024; 0.027; 0.062; 0.020}; 分别建立了定性和定量评估指标的评分标准, 并以综合评价函数 表示风险评估结果。应用该模型评估了华南地区36个免疫池塘发病风险, 结果显示, 3个发病池塘风险值分别为0.572、0.638、0.617, 处于高度风险级别, 与未发病塘存在极显著差异(P<0.01), 评估结果较准确, 表明该模型可应用于草鱼出血病免疫预防管理和决策。

     

注射草鱼出血病疫苗免疫效果的观察报告

草鱼出血病不仅严重威胁着当年鱼种，而且会激发细菌性“三病”的发生，这方面已有许多报道。一直以来，草鱼已成为我区池塘养殖的当家品种，但草鱼容易发病，每年因出血病和细菌性“三病”的发生，使草鱼的成活率仅有40%-50%，有的甚至只有10％左右，给我区的渔业生产带来严重     

培养基更换后草鱼出血病灭活疫苗的免疫效果

使用廉价培养基ＣＡＳ在ＣＩＫ细胞系上增殖草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ—８５４株），所制备的灭活疫苗性能稳定，安全性好。用该疫苗免疫草鱼，饲养１０天后，其血清中和抗体水平测定结果表明，注射组为１０７．９±１１．０（３），浸泡组为６８．５±９．９（３），与对照组［２０．２３±４．５（３）］相比，Ｐ值分别为Ｐ＜０．００１和０．００１＜Ｐ＜０．０１，差异极显著。     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果

本文报道经筛选的ＧＣＨＶ－８４１毒株在草鱼吻端成纤维细胞系中进行适应性培养，弱毒驯化，细胞培养弱毒疫苗的制备，安全性观察，不同稀释度和剂量的免疫保护率测定及保存试验，ＧＣＨＶ－８４１毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的。筛选得５３－５９代作毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的，筛选得５３－５９代作毒种制备的细胞制备细胞弱毒疫使用安全，用稀释１０－１０＾４倍的疫苗，０．１－０．３     

草鱼出血病病毒vp6核酸疫苗的免疫效果评估

为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6。按每尾分别注射疫苗载体10、30、60μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14～20 cm,体质量60～120 g),同设pFastBacTMDual载体(30μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无菌水)。于免疫后不同时间通过RT-PCR检测免疫鱼体中vp6基因的表达,并于免疫后第14、21、28、49、70天分别通过间接凝集反应检测血液中的抗体水平,并在免疫第21天感染GCRV评估免疫保护效果。结果显示,核酸疫苗免疫草鱼后,各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第28天达到最高;攻毒后每尾注射疫苗载体10、30、60μg组的死亡率分别为0%、0%、5%,pFastBacTMDual载体对照组和空白对照组分别为30%和100%。表明构建的核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果。     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果的研究

草鱼出血病是一种病毒性疾病，而免疫防治是该病最有效的防治方法之一，因此疫苗研制对该病的防治意义重大。多年来鱼用疫苗制品为组织灭活疫苗，但它要在发病季节从自然界收集材料，因而几乎不可能大批量生产，往往冬末春初放养草鱼种期间因缺乏疫苗而错过了预防免疫时机。采用离体细胞培养法制备疫苗就能克服上述缺点。     

池养草鱼注射疫苗免疫效果分析

在我市池塘养殖总产量中,草鱼产量占总产量的50%以上,但是,由于草鱼抗病能力较低,在饲养的各个阶段皆易感染各种疾病,尤以病毒性出血病、细菌性烂鳃病、肠炎病、赤皮病发病率较高,影响较大。根据农业部和我省水产部门统一部署,为落实"112"草鱼免疫防疫计划,2006年我们在乐平市进行了草鱼注射疫苗免疫的对比试验。     

草鱼出血病流行情况及注射免疫的试验效果

近两年,我们对我省的草鱼出血病流行情况进行了调查,并开展了出血病组织浆灭活疫苗(下简称为组织浆苗)注射免疫的试验观察。现将结果初步整理如下:     

草鱼出血病的免疫试验

我所与邵阳市城东公社五里牌大队渔场刘益善同志协作，共同开展草鱼出血病的免疫试验，初步获得成功。按中国科学院水生所提供的办法是：取典型病鱼的肾、肝、脾和肌肉组织，捣碎匀浆，加生理盐水(含Nac10．65％)，使成20倍浓度，3000转／分离心半小时，取上层清液再按800单位／毫升加入青、链霉素，加入甲醛液使最终浓度成为0．1％。     

草鱼出血病的研究进展及免疫防治

1 草鱼出血病的流行病学1.1 草鱼出血病的发现1980年发现病毒颗粒并确认为草鱼出血病病原,1991年国际病毒分类委员会将其命名为草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV).GCRV是中国分离鉴定的第一株鱼类病毒,是水生呼肠孤病毒属中致病力最强的毒株,不仅能感染草鱼,而且还能感染青鱼、麦穗...     

草鱼出血病浸泡免疫技术推广快效果好

湖南省水科所1978年开始草鱼出血病浸泡免疫技术的研究,1987年初通过评定,1988年评为“农业科学技术进步二等奖”。该项防病技术目前已在湖南省及江、浙、鄂、     

草鱼出血病的免疫防治试验

正草鱼出血病是一种严重危害草鱼的病毒性传染病,主要流行于我国长江中下游以南广大地区,夏季北方部分地区也有流行,主要危害全长2.5cm~15cm的草鱼鱼种。草鱼出血病目前无有效的药物用于治疗,最有效的控制措施是免疫防治,通过注射灭活疫苗,可达到有效防控。草鱼是惠州主养品种之一,全市草鱼养殖面积20962公顷,年产量16697吨,每年3~6月份草鱼出血病的     

“草鱼出血病疫苗工厂化生产工艺和免疫技术”通过鉴定

草鱼出血病是草鱼病中危害严重的一种病害。为了攻克这一难关,“七五”期间国家组织浙江省淡水水产研究所、长江水产研究所、珠江水产研究所等单位联合攻关。经五年的研究,已取得了重大进展。     

草鱼出血病防治技术(下)

正五、防控措施草鱼出血病尚无有效的治疗药物,目前主要从提高鱼体免疫力、减少诱发因素两方面着手,做到预防疫病发生和控制死亡量,以减少草鱼出血病带来的经济损失。1.预防措施(1)清除池底过多淤泥,用生石灰或漂白粉进行彻底清塘消毒,条件允许,可干塘曝晒半个月。(2)切断病原传播,禁止将带有病毒的鱼苗、鱼种输出及运入。(3)鱼种在放养时要用10毫克/升的聚维酮碘溶液浸泡6～8分钟,放养密度应控制在800尾/亩以下为宜。(4)免疫预防。注射或浸泡草鱼出血病组织浆灭活疫苗或细胞弱毒     

草鱼出血病防治技术(上)

<正>草鱼是我国的四大家鱼之一,养殖量约占我国淡水鱼养殖量的20%。随着草鱼大面积的养殖,草鱼的病害日趋严重,尤其是草鱼出血病。草鱼出血病是一种高度传染性和致死性的病毒性传染病。自1972年发现以来,该病不断危害养殖草鱼,并带来严重的经济损失,严重影响了我国草鱼养殖业的健康发展。本文对草鱼出血病的流行情况、诊断及防控等方面做初步介绍,并以华中地区草鱼出血病的发病规律及防控措施为例进一步探讨,为实际养殖防控提供参考。     

华中地区草鱼出血病的发病规律及防控措施

<正>华中地区是我国草鱼的主要养殖地区,草鱼养殖历史长、面积大,草鱼的病害也十分严重,特别是病毒性的草鱼出血病给草鱼池塘养殖造成严重的经济损失。通过近几年对该地区草鱼疾病的流行病学调查,结合实验室分子生物学检测和现场防治实践,本文把该地区草鱼出血病的主要流行特点和防控建议做如下总结。华中地区草鱼出血病全年可以分为明显不同的两个流行阶段,一是5、6月份(油菜开花前后,或称麦子黄季节)以二龄春     

草鱼出血病发病与水温的关系

<正> 草鱼出血病是危害当年草鱼最严重的疾病之一,近几年研究认为病原是病毒(水生生物研究所第三室病毒组,1978)。有的提出25～30℃是通常发病的水温(水生所第三室病毒组,1978),有的提出30℃以上呈暴发性流行(江西景德镇水产养殖场,1976)。究竟这种病发病、流行情况与水温的关系怎样?为了了解其规律,作者认为有必要将几     

大面积推广青、草鱼出血病免疫技术的效果

青、草鱼是苏州市郊传统养殖的优良品种，居民特别喜食。但二龄青、草鱼病多，成活率低，在生产上群众称之为“二龄关”。细菌性烂鳃、赤皮、肠炎病与病毒性出血病俗称青、草鱼四病，对其生产威胁比较严重。尤以青、草鱼出血病发病率高(约占70％），又无特效药防治，给养殖生产带来了很大损失。