重庆市动物源性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解重庆市部分区县动物源性金黄色葡萄球菌的耐药情况,采集重庆市北碚区、合川区、荣昌县部分养殖场466份畜禽粪便样品,将样品划线接种于Mueller-HInton高盐平板,挑取可疑菌落接种LB液体培养基,提取基因组后,通过PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因,对鉴定的金黄色葡萄球菌进行23种临床常用抗菌药物的药物敏感性试验。结果从466份样品中分离出25株金黄色葡萄球菌,包括17株鸡源菌株和8株猪源菌株。25株临床分离株对23种抗菌药物均有不同程度耐药,对氨苄西林、青霉素G、四环素、强力霉素、林可霉素耐药严重,耐药率超过60%,对阿米卡星、呋喃唑酮、万古霉素只有1株细菌耐药。所有分离菌均为多重耐药。表明分离菌的耐药性严重。本试验结果为重庆市养殖场的临床用药提供了参考,为研究重庆市动物源性金黄色葡萄球菌的耐药基因、耐药机制和耐药传播规律奠定了基础。     

动物源金黄色葡萄球菌分离株mecA基因的表达及耐药性分析

为明确动物源金黄色葡萄球菌(SA)的耐药状况,使用微量肉汤稀释法分离45株金葡菌,并进行9种药物的药敏试验,筛选出耐耐甲氧西林金葡菌(MRSA)菌株,使用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因。结果表明,除了万古霉素、莫匹罗星外,金葡菌对其他药物均产生了耐药性,MRSA的检出率为51.1%;mecA基因检出率为51.1%,MRST内mecA基因携带率明显高于甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)。     

湖南省奶牛源金黄色葡萄球菌分离鉴定与耐药性分析

为了掌握湖南省内奶牛源金黄色葡萄球菌的耐药情况,指导临床合理用药,抽取牛乳样品,通过对细菌的分离培养和纯化,采用基质辅助激光电离飞行时间质谱仪和全自动生化鉴定仪进行鉴定,并对分离菌株进行18种抗菌药物耐药性检测,结合耐药表型和mecA基因检测判定MRSA菌株。结果显示,2020-2021年从湖南地区257份牛乳样品中分离出金黄色葡萄球菌39株,89.74%的临床分离菌株表现为不同程度耐药,其中对青霉素耐药最为严重,耐药率达82.05%;对红霉素、克林霉素、替米考星、庆大霉素、头孢西丁耐药率在20%～35%之间;对多西环素及万古霉素绝对敏感,耐药率为0。38.46%分离菌株表现为多重耐药,以7重耐药最多。鉴定出19株MRSA,其中包含15株OS-MRSA和4株OR-MRSA。本研究可为湖南省内奶牛企业制定合理用药措施提供依据。     

动物源性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究

金黄色葡萄球菌简称为金葡菌,是人与动物机体中的一种重要病原菌,可能会诱发口腔黏膜、皮肤与鼻腔等组织感染,在兽医临床上通常会表现为皮肤、软质感染,诱发牛羊乳房炎、猪败血症及犬的鼻炎等多种病症,若不能及时予以治疗,很可能会造成动物病死。此外,金葡菌还可能会诱发尿路感染、关节炎及肠炎等病症,是诱发食物中毒的一种主要致病菌。1材料与方法1.1菌株来源标准菌株选用ATCC25923;临床菌株均是在2017年4-9月期间从上海、甘肃与杭州3个宠物医院的病犬和养猪场的病猪病灶部位。     

鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合感染病原的分离与鉴定

通过对18份病死鸡的肝脏、脾脏、肾脏病料进行细菌分离培养与鉴定,结合流行病学、临床症状和病理剖检变化,确诊为鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合感染.同时采用药物预防治疗,2周后,该病得到了控制.     

禽源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

金黄色葡萄球菌病给我国家禽养殖业带来的危害越来越大.通过对2013年9～12月家禽肿眼和关节脓肿的病例进行临床症状和剖检病理变化的观察及病原菌分离与鉴定,确诊40株为致病性的金黄色葡萄球菌感染,并对其选用10种广谱抗菌素进行药敏试验,选用高敏药物进行治疗.     

动物源性金黄色葡萄球菌耐药性的检测

用K—B法对52株动物源性金黄色葡萄球菌进行了17种抗生素耐药性检测。结果，试验菌对16种抗生素的耐药率达19．2％～84．6％，耐药率最高的为氨苄青霉素，最低的为头孢曲松；其中对12种抗生素的耐药率在50．0％以上；在52株金黄色葡萄球菌中最少的耐2种抗生素，最多的耐15种抗生素，表明临床分离的金黄色葡萄球菌株均表现高水平耐药和多重耐药；受试菌均对万古霉素敏感。     

生驼乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性分析

为了解生驼乳中金黄色葡萄球菌的污染状况,本文从骆驼养殖户中采集了90 份生驼乳,对其进行金黄色葡萄球菌的增菌、培养和分离,并利用全自动微生物生化鉴定仪进行鉴定,同时对分离出的阳性菌株采用纸片扩散法进行耐药性分析。生化鉴定结果表明,90 份生驼乳样本中分离出8 株金黄色葡萄球菌,分离率8.9%。耐药性分析表明,8 株阳性菌株对青霉素耐药率达75%;对氧氟沙星敏感率最高,可达100%;对头孢哌酮钠、环丙沙星敏感性较高,敏感率可达87.5%;对链霉素、卡那霉素、阿莫西林、头孢唑啉和头孢西丁,四环素、氯霉素、头孢噻肟、林可霉素、苯唑西林、庆大霉素较敏感,敏感率在37.5%~75.0%之间。本研究为对生驼乳中的金黄色葡萄球菌的污染防控提供了参考依据。     

猪大肠杆菌和葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

对湘西北地区某猪场患病的仔猪的粪便及病变的脾脏、肝脏、淋巴结、肺脏、肾水肿液进行病原菌分离鉴定,并用Kirby-Bauer法测定分离菌株对15种抗菌药的敏感性。结果表明,患病仔猪分离到大肠杆菌和猪葡萄球菌两种细菌。其中大肠杆菌对庆大霉素、头孢呋肟、丁胺卡那霉素、四环素、先锋必素敏感,对氯霉素、氧哌嗪青霉素、先锋五号、头孢曲松钠、新霉素中介,对羧苄青霉素、强力霉素、青霉素、氨苄青霉素、红霉素有较高的耐药性。葡萄球菌对先锋霉素Ⅴ、丁胺卡那霉素敏感,对头孢曲松钠中介,对其他抗生素耐药。其中大肠杆菌对药物敏感率、中介率、耐药率均为33.33%;葡萄球菌的敏感率为13.33%,中介率为6.67%,耐药率为80.00%。     

1株羊肺源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

采用16S rRNA序列分析及生化分析的方法,从某规模育肥羊场的患呼吸系统疾患的病羊分离到1株金黄色葡萄球菌,命名为JLY-1。药敏试验结果显示,JLY-1是1株多重耐药葡萄球菌,对红霉素、氨苄西林、复方新诺明高度耐药（MIC≥512 μg/mL）;对多西环素、丁胺卡那（MIC≥64 μg/mL）和环丙沙星、恩诺沙星（MIC≥4 μg/mL）耐药;对氟苯尼考和头孢曲松敏感（MIC≤0.25 μg/mL）。     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中blaTEM基因携带率为100%,其中全部为blaTEM-1基因,blaCTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为blaCTX-M-15基因,没有检测到blaSHV、blaOXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac(6’)-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中bla_TEM基因携带率为100%,其中全部为bla_TEM-1基因,bla_CTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为bla_CTX-M-15基因,没有检测到bla_SHV、bla_OXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac（6'）-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

禽源产色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性分析

为了解禽源产色葡萄球菌的耐药性,本研究从发病金陵花鸡中分离到1株产色葡萄球菌GZQX2019,并进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验、16S rDNA序列分析、药敏试验、部分耐药与肠毒素基因检测和动物回归试验。结果显示,分离菌在鲜血琼脂培养基上长出表面凸起、边缘整齐的溶血现象白色菌落;革兰氏染色镜检呈葡萄串状球菌。生化试验结果显示,分离菌蔗糖、精氨酸水解酶、木糖等反应阳性,尿素、木糖醇、麦芽糖等反应阴性。系统进化树显示,分离菌与产色葡萄球菌处于同一分支;药敏试验结果显示,分离菌对红霉素、头孢他啶、多西环素等6种抗菌药耐药,对头孢呋辛、头孢哌酮、新霉素等11种抗菌药敏感。耐药与肠毒素基因检测结果显示,分离菌能检测出热敏感细胞肠毒素基因Alt,耐大环内酯类基因ermB,β-内酰胺类基因VIM、TEM,四环素类基因tetB。动物回归试验结果显示,分离菌对小鼠和雏鸡致病能力不强或者没有致病力。试验成功分离到1株禽源产色葡萄球菌,丰富了禽源产色葡萄球菌的认知。     

耗儿鱼松鼠葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了探讨松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)的病原学特性,本试验从耗儿鱼(Corydoras)分离出菌株YDE0916,并对其进行生理生化鉴定、16S rDNA基因PCR扩增、序列分析及耐药性分析。结果显示,该菌株为革兰氏阳性球菌,呈串形,无芽孢,无荚膜。该菌不运动,β-半乳糖苷酶、VP反应为阴性,蔗糖、麦芽糖为阳性。扩增的16S rDNA基因序列长度为1 476 bp (GenBank登录号:KP031644),与GenBank中的松鼠葡萄球菌16S rDNA基因序列的相似性达99%。系统进化树显示,菌株YDE0916和松鼠葡萄球菌聚为一簇,由此判定菌株YDE0916为松鼠葡萄球菌。药敏试验结果显示,该菌株对诺氟沙星、杆菌肽耐药,对美满霉素、庆大霉素、氨苄西林等22种药物高度敏感。本研究为松鼠葡萄球菌的分离鉴定及预防积累参考依据。     

Isolation,Identification and Drug Resistance Analysis of Staphylococcus sciuri of Corydoras

To explore etiology characteristics of Staphylococcus sciuri, strain YDE0916 was isolated and identified from Corydoras by cultivation, biochemical identification, 16S rDNA gene PCR amplification and sequence analysis, and resistance analysis.The result showed this strain was gram-positive, serial, spore, without capsule.The physicochemical properties showed immobility, β-galactosidase-negative, VP reaction-negative, sugar and maltose-positive.The nucleotide sequence of 16S rDNA was 1 476 bp and its GenBank accession number was KP031644.This 16S rDNA showed 99% homology with Staphylococcus sciuri.Phylogenetic tree showed that strain YDE0916 and several Staphylococcus sciuri strains gathered into one cluster.So the strain was identified as Staphylococcus sciuri.The antibiotic sensitive test showed that strain YDE0916 was resistant to norfloxacin and bacitracin, and was highly sensitive to 22 kinds of drugs, such as minocycline, gentamicin and ampicillin.This study could provide a reference for identification and prevention of Staphylococcus sciuri.     

湖南省部分地区奶牛源金黄色葡萄球菌分离鉴定与耐药性分析

[目的]为了解湖南省部分地区奶牛场金黄色葡萄球菌耐药情况,制定合理的用药方案,对来自湖南省不同地区的牛奶样品进行细菌分离与鉴定。[方法]得到19株金黄色葡萄球菌,分别进行药敏试验和耐药基因检测。[结果]试验结果显示,19株金黄色葡萄球菌均呈现多重耐药,其中对青霉素的耐药率较高,对万古霉素和利福平的耐药率极低,耐药基因的结果与耐药表现基本相同。[结论]试验结果可以为作为治疗湖南省奶牛场金黄色葡萄球菌感染提供依据。     

鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药基因的检测

从山东省滕州市某种鸡场的19只死胚及出壳弱雏中分离出6株大肠杆菌,平均分离率为36.84%。生化鉴定表明,这些致病菌均符合大肠埃希氏菌的生化特性。本实验用平板稀释法对6株鸡源致病性大肠杆菌进行了药敏实验,结果6株菌对五大类抗生素(氨基糖甙类、四环素类、氯霉素类、磺胺类、硝基呋喃类)的10种药物的耐药性以卡那霉素最高,四环素次之,呋喃妥因最低。设计了4对引物,采用PCR技术,对6株鸡源大肠杆菌的耐药基因进行了检测并对所得耐药基因进行了扩增及序列测定。