木耳灭活原生质体融合育种研究

以黑木和毛木耳为亲本菌株 ,通过灭活原生质体融合 ,经过初筛和复筛 ,一株新的稳定的木耳高产菌株被选育出来。黑木耳和毛木耳原生质体分别被热灭活 (6 5℃ ,30min)和紫外线灭活 (30W ,30cm ,10min) ,双亲存活率为 3 5× 10 -7～ 3 2× 10 -8。在聚乙二醇诱导下融合继续生存 ,亲本原生质体融合被实现 ,重组频率为4 3× 10 -5。     

双孢蘑菇、野蘑菇和姬松茸的过氧化物酶和酯酶的同工酶分析

本文对蘑菇属的双孢蘑菇、野蘑菇和姬松茸的 8个菌株的菌丝体阶段的过氧化物酶 (POD)和酯酶(EST)同工酶进行分析研究。结果表明 :(1)POD和EST同工酶谱不仅清楚地显示出这 3个种的 8个菌株同属于蘑菇属所具有的共同酶带 ;而且酶谱还清楚地显示出不同种不同菌株间的酶的差异。 (2 )双孢蘑菇 4个菌株 (除野生菌株 96 4 3外 )之间无论是来自中国还是来自西欧 ,无论是白色品系还是棕色品系 ,它们的POD和EST同工酶的遗传相似性是比较高的。 (3)双孢蘑菇与野蘑菇的遗传距离近于它与姬松茸的距离     

利用双孢蘑菇工厂化设施栽培姬松茸初探

利用双孢蘑菇工厂化栽培设施，通过对环境条件的精确控制，进行了姬松茸栽培试验研究，结果认为：姬松茸在利用草炭土作为覆土时易产生菌被，产量较常规栽培高，试验中的2号和3号菌株的表现较好，产量较高。     

姬松茸与双孢蘑菇不同菌株的RAPD扩增研究

以4个姬松茸菌株和2个双孢蘑菇菌株为材料，用20个随机引物对它们进行RAPD扩增，通过对供试菌株遗传相似系数的估算和系统聚类分析，构建姬松茸和双孢蘑菇遗传相关树状聚类图谱，结果表明，进行RAPD扩增的20个随机引物中，有12个能产生三种带型，当遗传相似系数升至0.8713时，这6个菌株被分为3类，第一类为菌株18和26，第二类为菌株13和12，第三类为菌株33和45。     

姬松茸原生质体制备及再生条件优化

以姬松茸JS01为试材,通过单因素试验和正交实验,利用SPSS 22.0软件进行分析,对姬松茸原生质体的制备及再生条件进行优化,以提高姬松茸原生质体产量和再生率。首次通过在再生培养基中添加细胞壁前体物质及营养因子,进一步提高姬松茸原生质体的再生率。结果表明:原生质体最佳制备条件为菌龄7d,以0.6mol·L~(-1) KCl作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间4.0h,pH 6.0,在该条件下原生质体产量高达1.97×10~7个·mL~(-1);菌龄6d,以0.6mol·L~(-1) MgSO_4作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度2.0%,酶解温度30℃,酶解时间3.0h,pH 6.5,再生培养基为GM时,原生质体的再生率最高,为1.12%。再生培养基中添加纤维二糖和维生素B_1后,再生率为1.17%,较优化结果提高了4.46%。该研究为姬松茸在菌种提纯复壮、原生质体诱变、原生质体融合育种、原生质体基因组重排等遗传学研究提供参考依据。     

双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体的RAPD分析

本研究以双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体为材料,用5对随机双引物进行RAPD分析。结果表明,RAPD反应扩增出的特异DNA谱带能够将原生质体同核体与异核体出发菌株以及杂交异核体与同核体亲本明显区别开来。因此,RAPD分析是一种快速有效的手段,能够在双孢蘑菇的遗传研究和菌种改良中发挥重要作用。     

复硝酚钠在双孢蘑菇栽培中的应用研究

试验旨在阐明复硝酚钠对双孢蘑菇菌丝萌发、出菇时间、产量以及品质的影响。实验设置了不同稀释倍数的1．8％复硝酚钠溶液加入栽培料中，结果表明：在培养料中添加浓度为3×10^-6g／mL的1．8％复硝酚钠溶液与未添加复硝酚钠溶液的处理相比，菌丝生长速度加快17％，出菇时间提前9d，且产量提高22．39％，双孢蘑菇子实体中粗蛋白含量也得到提高。     

双孢蘑菇原生质体的制备

为提高制罐质量,目前双孢蘑菇生产要求采用气生型菌株,但它的产量较低。而匍匐型菌株产量虽高,可是质量差。因此,如能选育出具有上述两者优点的既高产又优质的菌株,将有重要的理论与实践意义。由于双孢蘑菇孢子多为自身可育,自然杂交机率低,用原生质体融合的方法是达到此目的的有效手段,原生质体的制备。则是该方法的第一步。     

姬松茸无公害栽培技术要点

姬松茸又称巴西蘑菇或柏拉氏蘑菇,是一种食药兼用的珍稀食用菌,不但菇体脆嫩滑爽,具杏仁味,鲜美可口,而且含营养物质十分丰富. 近年来,姬松茸社会需求量逐年增长,价格稳中有升.但漳州市食用菌产业受到国内外市场影响,市场行情不好,价格低迷,造成广大菇农亏损,栽培面积逐年减少.笔者利用现有双孢蘑菇菇房改栽姬松茸,两者生活习性、栽培工艺基本相似,同时有利于当地农业结构调整,农民增收.现将姬松茸无公害栽培技术介绍如下.     

松茸与香菇原生质体融合的研究

以获得利于半人工或人工栽培优良松茸菌株为目的，利用松茸与香菇分离纯化的再生原生质体对潮霉素自然抗药性的差异，结合原生质体灭活为融合子筛选的依据。在PEG、Ca^2 系统中以30％PEG4000，30℃处理25min，诱导松茸与香菇良用菌原生质体融合，获融合子5株，融合率0．45％。     

双孢蘑菇POD酶学特性及其与褐变的关系

为了研究POD在双孢蘑菇褐变过程中的作用,对POD酶学特性进行了测定,并对不同贮藏条件下双孢蘑菇中POD活性变化与褐变的关系进行了分析。结果表明：以愈创木酚为底物时,双孢蘑菇中POD的米氏常数（Km）为5.704 mmol ? L-1,最适反应pH为5.0,最适反应温度为45 ℃;低温可以显著抑制POD的活性,20 ℃和10 ℃时其相对酶活性分别为68%和55%,2 ~10 ℃范围内的酶活性差异不显著;20 ℃贮藏1 d和2 d时POD酶活分别是10 ℃贮藏的4.8倍和10.9倍。7种化合物对POD活性的抑制作用由强到弱依次为：DTT > AsA > L-Cys > SDS > 无水亚硫酸钠 > 柠檬酸 > NaCl。贮藏过程中,虽然POD抑制剂处理双孢蘑菇的褐变程度和气调处理没有显著性差异,但其POD活性显著高于气调处理,说明POD活性高不是引起双孢蘑菇组织褐变的主要因素。     

双孢蘑菇遗传育种研究进展

综述了人工选择育种、杂交育种、原生质体融合育种和基因工程育种等双孢蘑菇遗传育种研究的现状及进展,并展望了上述研究领域的发展趋势。     

巴西蘑菇多糖冲剂制备工艺研究

采用正交试验法优化了微波辅助提取巴西蘑菇多糖的条件,研究了多糖冲剂制备工艺,并用苯酚-硫酸法对巴西蘑菇多糖冲剂中多糖含量进行了测定.结果表明,以水为溶剂,巴西蘑菇多糖最佳提取条件为：提取时间30min,微波功率为80%（全功率为800w）,液料比为20：1.巴西蘑菇多糖冲剂配方为：巴西蘑菇粗多糖：可溶性淀粉：甜蜜素=1：4：0.04,冲剂中多糖含量为7.624%.     

黑翅土白蚁对姬松茸及其培养料的取食性研究

通过观察黑翅土白蚁工蚁的觅食行为,进行了黑翅土白蚁对5种材料（姬松茸、木屑、菌草草粉、菌草姬松茸培养料、木屑姬松茸培养料）的取食选择性研究。结果表明,木屑和菌草草粉的被食率极显著高于其他3种材料,而姬松茸被食率为0;木屑与菌草草粉的泥被面积和泥被覆盖率极显著高于其他3种材料。这都表明姬松茸菌丝及其子实体散发出来的挥发性物质可以抑制黑翅土白蚁取食,黑翅土白蚁为害姬松茸主要是对其栽培料的破坏。     

姬松茸加工过程中防褐变的研究

根据姬松茸酶促褐变的机理,研究了姬松茸加工过程中防褐变的有效方法。以处理后菇片中多酚氧化酶的残存活性及视觉观察菇片放置8h不褐变为指标,确定每种方法的最适参数。结果表明,防止姬松茸褐变有四种方法:沸水热烫10min,0.7％亚硫酸钠溶液浸泡,直接添加0.7％VC或添加0.5％亚硫酸钠与0.3％VC。     

双孢蘑菇保鲜剂及贮运保鲜技术研究

以双孢蘑菇为材料,研究其适宜的贮运温度、包装材料和保鲜剂种类。结果表明,0℃是双孢蘑菇贮藏的适宜温度,泡沫箱为双孢蘑菇适宜的贮运包装材料,3种强氧化性保鲜剂,对双孢蘑菇具有很好的保鲜效果,分别为二氧化氯(50 mg·L-1～200 mg·L-)1、次氯酸钠(20 mL·L-1～50 mL·L-)1和过氧化氢(3%～5%)。贮藏20 d,经二氧化氯、次氯酸钠和过氧化氢处理的双孢蘑菇,其褐变指数分别为0.269、0.4和0.469,分别较对照CK低73.1%、60%和53.1%,其开伞率分别为20%、35%和35%,分别较对照CK低80%、65%和65%。     

巴西蘑菇液体摇瓶培养基和培养条件的优化

通过巴西蘑菇菌丝在液体摇瓶培养基内培养,结果表明,液体培养基最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是酵母膏;以菌丝体生物量为测量指标,采用正交试验方法筛选出巴西蘑菇液体摇瓶最佳培养基为葡萄糖2%、玉米粉2%、酵母膏0.75%、豆饼粉2%、KH2PO4 0.2%、MgSO4 0.1%;最佳培养条件为装液量每500 mL装150 mL,接种量15%,转速160 r.min-1,培养温度28℃,8 d。     

双孢蘑菇菌糠配制辣椒育苗基质的研究

以双孢蘑菇菌糠为试材,探索应用蘑菇菌糠制备辣椒育苗基质的效果。育苗基质配方处理按粉碎消毒的双孢蘑菇菌糠、细红土、细干猪粪、珍珠岩所占的体积分数4因素3水平正交试验设计（L9（34）。结果表明,双孢蘑菇菌糠40％、红土30％、干猪粪20％、珍珠岩20％,为辣椒幼苗成苗率、株高、地上部和地下部鲜重最佳育苗基质配方。     

双孢蘑菇同核原生质体育种技术研究：Ⅱ.同核原生质体的杂交

为建立双孢蘑菇同核原生质体杂交育种体系,本文对同核原生质体亲合性反应及杂交异核体F_1代的农艺性状和F_2代的分离与变异规律进行了研究。结果表明:双孢蘑菇同核原生质体的杂交是一个较复杂的性亲合与核迁移过程,其杂交率较低。在按气生型×气生型、气生型×匍匐型、匍匐型×匍匐型组合的520个杂交配对中,共获得113个杂交异核体,平均杂交率为22%。本研究同时建立了以菌落形态、菌丝生长速度、羧甲基纤维素酶相对活性以及酯酶同功酶电泳为手段的杂交异核体鉴定体系。