蛋鸡H5、H9亚型禽流感和新城疫免疫血清抗体与卵黄抗体检测比较分析

为分析蛋鸡免疫后卵黄抗体与血清抗体的相关性,试验采集经H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫的黔东南小香鸡、乌蒙乌骨鸡、威宁鸡血清样本和卵黄样本,采用血凝抑制试验进行相关免疫抗体检测。结果:3个地方品种鸡的血清样本和卵黄样本中均可检测出H5、H9亚型禽流感和新城疫免疫抗体,且几何平均效价均大于24以上,达到免疫合格标准,不同地方品种鸡群间差异不显著(P>0.05);免疫后30d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,但差异不显著(P>0.05);免疫后60d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,差异显著(P<0.05)。结果表明:卵黄抗体与血清抗体呈正相关性,卵黄抗体几何平均效价均低于血清抗体。在临床上可用卵黄抗体替代血清抗体进行H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫效果的评价,但应选择在免疫后30d以内。     

免疫蛋禽血清和卵黄禽流感抗体的相关性研究策

对免疫蛋禽血清和卵黄中的H5亚型高致病性禽流感抗体进行监测,比较血清和卵黄中HI效价的差异并找出其相关性.试验结果表明,蛋鸡和蛋鸭接种H5亚型高致病性禽流感疫苗后,在抗体的上升期,血清和卵黄HI效价差异显著或极显著(0.01＜P＜0.05,P＜0.01);而在抗体稳定期,血清和卵黄HI效价差异不显著(P＞0.05).在抗体稳定期,血清和卵黄抗体水平之间的相关系数都在0.85以上,(0.66＜r＜1.00),呈强直线相关.试验证明,无论是蛋鸡还是蛋鸭在抗体稳定期内均可以使用卵黄替代血清进行HI抗体监测.     

禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究

应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。     

母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体的检测及其相关性分析

为了解母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体检测结果的相关性,试验采集了新城疫疫苗免疫母鸽的血液和卵黄,通过血凝抑制试验检测了新城疫病毒的抗体,利用GraphPad Prism软件中的Spearman Analysis分析了血清抗体效价和卵黄抗体效价的相关性。结果表明:绝大多数样品提取的卵黄液抗体效价低于血清抗体效价,而绝大多数样品的卵黄原液抗体效价高于血清抗体效价。血清抗体效价、提取的卵黄液抗体效价与卵黄原液抗体效价两两之间呈显著或极显著正相关(P0.05或P0.01),提取的卵黄液抗体效价与血清抗体效价之间的相关系数最高。说明鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体有明显的相关性,提取的卵黄液可代替血清用于母鸽新城疫病毒抗体的检测。     

牛支原体P48蛋白卵黄抗体的制备

为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。     

蛋鸡卵黄与血清中H5N1亚型禽流感病毒Re-4株抗体效价相关性研究

用卵黄样本和血清样本监测H5N1亚型禽流感病毒Re-4株HI 抗体效价,对2种样本监测结果进行相关性研究。对115日龄蛋鸡群免疫重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-4株,禽用）,免疫后20～260 d对固定鸡群采样（血清样本和卵黄样本）,进行免疫抗体监测。结果表明,115日龄鸡群免疫后20～260 d卵黄和血清HI 抗体效价呈强相关,相差在1 log2以内的占绝大多数,均值t检验差异不显著。因此,用卵黄样本监测禽流感 HI 抗体效价是可行的。     

卵黄抗体检测法在禽流感免疫监测中的应用

针对160日龄罗曼产蛋鸡,在免疫接种禽流感病毒油乳剂灭活疫苗(H5N1Re1+Re4)14d、21d、28d、35d后,分别随机抽检、采集相应的鸡蛋和血清各20份,采用血凝抑制(HI)试验分别监测血清及卵黄中H5抗体水平。结果表明,28d后(包括第35天)血清和卵黄中H5抗体产生水平相当。因此,以禽流感卵黄抗体检测代替血清抗体检测完全可以应用于蛋鸡的日常监测,既降低鸡的应激反应,同时又提高鸡群的生产性能,适于基层兽医站推广应用。     

蛋鸡血清抗体与卵黄抗体相关性的分析与研究

蛋鸡注射禽流感、新城疫等疫苗后免疫抗体在血清、卵黄中的上升与衰减以及两者相关性的研究。结果表明:(1)血清抗体和卵黄抗体密切相关;(2)不同疫苗产生的抗体在血清与卵黄中产生的抗体水平的相关性并不相同。     

免疫微生态制剂对产蛋鸡蛋品质和抗体效价的影响

为了解免疫微生态制剂对鸡蛋抗体效价及蛋品质的影响.本试验选取2个规模化蛋鸡场(约10000只左右),通过在饲粮中添加微生态制剂,比较使用前后鸡蛋的新城疫和禽流感卵黄抗体效价及蛋品质,使用后的20天死淘数、产蛋数及蛋重.结果 表明,微生态制剂的使用可减少蛋鸡死淘率,提高新城疫(ND)、禽流感(H5-6、H9)的卵黄抗体滴...     

鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序探讨

在每年春秋两季的重大动物疫病免疫抗体监测中,我们发现,少部分蛋鸡场的商品蛋鸡一个饲养周期只注射过2次禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗,但在商品蛋鸡淘汰时(540日龄左右)采血检测禽流感H5亚型和H9亚型病毒免疫抗体效价,抗体合格率(≥5log2)还在90％以上.目前商品蛋鸡场疫苗防疫种类繁多,如果单用禽流感H5、H9单价灭活疫苗免疫商品蛋鸡,一个饲养周期禽流感疫苗就得注射6～8针.对此,我们用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗分别对两组商品蛋鸡1次性免疫和2次性免疫注射后,定期采血进行HI抗体效价跟踪检测;并对只做2次禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗的一个商品蛋鸡场的三批蛋鸡作了禽流感免疫抗体效价和禽流感病毒抗原快速检测的调查.旨在探索一种简便、安全有效的蛋鸡禽流感的预防免疫程序.     

SPF鸡感染禽白血病病毒A/B亚群后血清抗体与卵黄抗体的变化及其相关性

拟研究以卵黄抗体替代血清抗体检测判定SPF鸡群禽白血病病毒(ALV)感染状态的可行性。在人工接种ALV-A/B后的40只SPF鸡刚开产时,从21只抗体阳性鸡及19只抗体阴性鸡分别采集血清和卵黄并一一对应,比较卵黄不同稀释度与血清中ALV-Ab抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。另外36只同批次不攻毒的SPF鸡单独饲养作为对照,76只鸡在25~34周龄期间,每隔3周分别采集1次血清,每周采集1次种蛋,共采集了304份血清样品及836份卵黄样品。所有血清和卵黄抗体用IDEXX的ALV-Ab抗体ELISA检测试剂盒检测。血清按试剂盒规定的1∶500稀释,卵黄按预试验结果选定稀释度稀释。同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品,严格在同一次ELISA试验中检测。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄做1∶300稀释时,假阳性和假阴性最少,确定1∶300为卵黄最适稀释度。在25~34周龄,836份卵黄抗体的检测判定结果与304份血清抗体检测结果吻合率达94.7%,即这些血清抗体阳性鸡同时期采集的卵黄抗体也全部阳性,血清阴性鸡的卵黄抗体也均为阴性。结果提示疫苗生产企业可通过检测SPF种蛋的卵黄抗体来判断SPF鸡场对ALV的洁净度。     

鸭坦布苏病毒冻干高免卵黄抗体的研制

本研究用鸭坦布苏病毒病灭活苗三次免疫SPF蛋鸡,收取高免鸡蛋,制备成冻干高免卵黄抗体;用鸡胚中和试验和间接ELISA方法进行效价检测。试验结果显示,第3次免疫后2周,卵黄抗体中和效价为1∶103.5,4、5周达到最高值1∶104.5;间接ELISA方法检测冻干前后的抗体效价结果均为阳性;对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,可为鸭坦布苏病毒的防控提供一种有效的冻干高免卵黄抗体制剂。     

抗强毒新城疫、禽流感(H5、H9) 多价二联高免卵黄抗体的研制和应用

以强毒新城疫(VND)、禽流感(AI H5、H9型)高效价抗原多次免疫健康蛋鸡，收集ND、AI卵黄抗体均高于14Log2的鸡蛋，经过特殊工艺处理，加入一定量的丁胺卡那霉素、防腐剂按适当比例用灭菌生理盐水稀释制备新城疫、禽流感(H5、H9)多价二联高免卵黄抗体。应用该高免卵黄抗体对1月龄鸡只进行预防免疫，攻毒治疗试验。试验结果表明，预防ND免疫保护率可达87-100％，治疗保护率达73％以上；预防AI免疫保护率可达100％，治疗保护率达80％。     

禽流感高效价卵黄抗体的制备和应用

试验选用4个免疫增强成分,采用1%添加水平添加到130日龄法国伊莎褐壳蛋鸡的日粮中,并用禽流感H5N1疫苗连续免疫鸡群3次,试验结果显示,4个免疫增强成分的试验组与对照组相比,前两次免疫效果显著,但当血清抗体效价达到15log2左右时,效果不是很明显;用制备的高效价卵黄抗体与疫苗同时接种未免疫过的海兰褐蛋雏鸡发现其能填补单独使用疫苗免疫时的抗体空白期,可提高紧急预防高致病性禽流感的效果。     

间接ELISA法检测鸡新城疫抗体

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫 ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释检测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.941 28 x 0.206 77,r=0.981 63,可用于定量测定.血凝抑制(HI)方法与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法的敏感性是HI方法的3倍以上.应用建立的ELISA方法比较了卵黄、气管及胆汁中局部抗体与血清抗体的差异.     

新流二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫产蛋鸡、肉鸡后的抗体水平监测

为探讨鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫商品蛋鸡与商品肉鸡后的抗体消长规律,试验选用商品蛋鸡与商品肉鸡各40只,商品蛋鸡随机分为A、B、C、D组,商品肉鸡随机分为E、F、G、H组,每组10只,A、E组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只;B、F组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,同时肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;C、G组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,于免疫后第7天肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;D、H组鸡不免疫,作为阴性对照组。各组鸡均于免疫前及免疫后的第2,6,10,14,21,28,35天采血检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:商品蛋鸡B、C组在免疫疫苗过程中配合注射禽流感抗体,禽流感的抗体效价呈先上升然后下降再上升的变化趋势,而A组未注射禽流感抗体的鸡,禽流感抗体效价则呈先下降然后上升的变化趋势;商品肉鸡各免疫组禽流感抗体效价均呈先下降然后上升的变化趋势,疫苗免疫后的前期注射禽流感抗体组的禽流感抗体效价相对高些。说明商品蛋鸡免疫新流二联灭活疫苗时配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体短期提升效果较明显,可提高禽流感疫苗的免疫效果;而在商品肉鸡上配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体提升效果不明显。     

家禽卵黄抗体效价检测结果影响因素分析

为进一步规范卵黄HI抗体效价检测方法,试验从所用红细胞的种源性、稀释液种类以及抗原厂家3方面对HI抗体效价检测方法进行对比分析。研究发现,当卵黄样品抗体效价较高时使用异种家禽的红细胞对试验结果影响差异不显著(P0.05),样品抗体效价较低时使用异种家禽红细胞对试验结果有一定影响,但差异同样不显著(P0.05);选择1×PBS或者0.9%的生理盐水作为稀释液对试验结果影响不大(P0.05);使用不同厂家的抗原检测抗体效价禽流感H5亚型(Re-7株)、禽流感H7亚型(H7N9),差异极显著(P0.01)。卵黄抗体效价的检测,对稀释液的要求不高,但应尽量选择同种家禽的红细胞,抗体效价检测结果的对比分析应当选择正规厂家相同批次的抗原进行比较。     

间接血凝抑制试验检测血清和卵黄中鸡毒支原体抗体的研究

将13只正处于产蛋期的试验鸡在接种疫苗前后分别采血、分离血清；收集鸡蛋，分离蛋黄，并分别用16％NaCl、8％柠檬酸纳和氯仿处理后，检测鸡毒支原体(MG)间接血凝抑制(HI)抗体。结果表明：接种疫苗前的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为4.7，4．4，4．1和4.2 log2；第一次接种疫苗后的血清和16％NaCl、8％柠檬酸纳和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7．4、6．7、7．1、6．9log2；第二次接种疫苗后第1次采集的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为10．4、9．6、10．1、9．710g2，第2次采集的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7．9、7.1、7．6和7．4log2。8％柠檬酸钠处理后的卵黄抗体效价最高，与血清抗体效价最接近。血清HI抗体效价与卵黄HI抗体效价具有良好的一致性和相关性，用卵黄可以代替血清进行HI试验。     

鸡抗大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体变化规律研究

用猪源大肠杆菌四价(K88、K99、987P、F41)灭活疫苗免疫蛋鸡,微量凝集法定期检测蛋鸡血清抗体和卵黄抗体的效价。结果表明,血清抗体比卵黄抗体出现早,免疫蛋鸡血清中和卵黄中4种抗体的消长规律基本相似,但不同抗体水平之间存在明显的差异,整个试验期间血清抗体水平均比卵黄抗体水平高。     

SPF鸡感染J亚群禽白血病病毒血清抗体与卵黄抗体的变化动态及其相关性

为研究以卵黄抗体替代血清抗体判定SPF鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染状态的可行性,人工接种ALV-J的SPF鸡23周龄时,分别从25只抗体阳性鸡及22只抗体阴性鸡采集血清和卵黄,比较不同稀释度的卵黄与血清中ALV-J抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄1∶400稀释,假阳性和假阴性最少,确定1∶400为卵黄最适稀释度。对40只攻毒SPF鸡和36只同批次单独饲养的空白SPF鸡在25~34周龄,每隔3周采集一次血清,每周采集一次种蛋,共采集304份血清样品和760份卵黄样品。血清按1∶500稀释,卵黄按1∶400稀释,所有血清和卵黄抗体用美国IDEXX公司ALV-J抗体ELISA检测试剂盒检测,同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品严格在同一次ELISA中检测。结果显示,在25~34周龄,卵黄抗体检测判定结果与血清整体吻合率为82.5%~95%。上述结果表明用卵黄抗体替代血清样品检测来监控SPF鸡群对ALV-J的感染状态是可行的,疫苗生产企业可通过抽检SPF鸡场提供SPF种蛋的卵黄抗体水平来判断SPF鸡场的洁净度。