还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽（GSH）对西门塔尔牛精液低温保存（0℃）的影响。在精液稀释液中分别添加0（对照组）、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛（MDA）水平、三磷酸腺苷（ATP）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组（P<0.05）;在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组（P<0.05）,MDA水平低于其他组（P<0.05）。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。     

稀释液中添加还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响

为了研究还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响,实验通过在稀释液中分别添加不同浓度的还原型谷胱甘肽,研究了它对猪精液液态保存后的精子活力、顶体完整率、质膜完整率、DNA损伤率、体外受精卵裂率及囊胚率等影响。结果表明,向稀释液中添加1 mmol/L,5 mmol/L,10 mmol/L GSH均能显著提高精子保存质量。其中添加1 mmol/L还原型谷胱甘肽效果最好,10 mmol/L效果较差,但大部分指标仍显著高于对照组。证实了稀释液中添加还原型谷胱甘肽有助于提高液态保存猪精液的质量。     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

海藻糖和甘油相互协同提高绒山羊精液冷冻保存品质

本实验旨在研究不同浓度的海藻糖和甘油相互协同对绒山羊精液冷冻保存的影响。将0 mmol/L (T0)、50mmol/L(T50)的海藻糖和0%(G0)、1%(G1)、2%(G2)、3%(G3)的甘油分别组合为T0G0、T0G1、T0G2、T0G3、T50G0、T50G1、T50G2和T50G3。以Tris-柠檬酸-葡萄糖(TCG)为基础稀释液,分析不同组合对绒山羊精液冷冻保存的影响。检测解冻后精子活力、运动参数、DNA完整率、顶体、质膜完整率、抗氧化水平。结果表明:海藻糖和甘油联合添加时精子冷冻保存效果显著高于单独添加海藻糖或甘油组,其中T50G1组作用最显著。在基础稀释液中添加50 mmol/L(T50)的海藻糖时,精子冷冻解冻后的活力、质膜完整率随着甘油浓度的升高而降低,而在基础稀释液中不添加海藻糖时,精子冷冻解冻后的活力、质膜完整率随着甘油浓度的升高而升高。综上表明,海藻糖和甘油通过协同作用提高精子冷冻保存效果,两者发挥作用的最适浓度为50 mmol/L海藻糖和1%甘油,并且海藻糖和甘油协同作用对精子活力以及质膜完整性具有浓度依赖性。     

不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60 mmol/mL)、维生素E(0、0.2、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/mL)、SOD(0、100、200、400、600 IU/mL)、CAT(0、50、100、200、300 IU/mL)、GSH(0、1、5、10 mmol/mL)等抗氧化剂,检测冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子MDA含量,以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明:在冷冻稀释液中联合添加100 IU/mLSOD和200 IU/mL CAT明显提高冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.01)。     

不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响

为了探讨在冷冻稀释液中添加不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响，试验将6头沂蒙黑猪的精液混合后分成6组，分别为对照组(冷冻保存液)和在冷冻保存液中添加100,200,300,400,500 mg/L维生素E的试验组，先用液氮保存，然后将每组精液解冻后检测精子活力及运动参数、顶体完整性、质膜完整性、DNA完整性、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)水平，以此来评估维生素E对精液品质的影响。结果表明：与对照组相比，200 mg/L组和300 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著提高(P<0.05),其中300 mg/L组提高最显著；100 mg/L组和400 mg/L组精子运动参数也提高，而500 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著降低(P<0.05)。与对照组相比，100 mg/L组、200 mg/L组和300 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性及MMP水平均显著提高(P<0.05);而500 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性及MMP水平均显著降低(P&l...     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

EGTA对猪精液液态保存的影响

猪精液液态保存体系中,钙离子浓度升高将降低精子活力,缩短精子体外保存时间。常用的金属螯合剂EDTA的溶解度较低,且容易发生沉淀,因此改进螯合剂对于改进猪精液保存液配方,提高猪精液液态保存质量十分重要。本研究中我们在精液液态保存液中分别添加不同浓度(1.5,3,6,12 mmol/L)的钙离子螯合剂EGTA,检测其对猪精子的活力、质膜完整性、顶体完整率、获能情况以及受精能力的影响。结果表明,精液保存液中添加EGTA能显著提高猪精子保存质量,其中添加3 mmol/L EGTA效果最好(P<0.05)。与对照组相比,添加3 mmol/L EGTA时,体外受精率和囊胚率显著提高(P<0.05)。因此,精液保存液中添加EGTA有助于提高猪精液液态保存的质量。     

芝麻酚对猪精液冷冻保存效果的影响

为了探究芝麻酚对猪精液冷冻保存效果的影响,用手握法采集成年杜洛克公猪精液,预处理后添加不同浓度芝麻酚(0,0.05,0.10,0.15,0.20和0.25g/L)的冷冻稀释液进行稀释,冷冻-解冻后检测猪精子活率、质膜完整性(低渗肿胀试验)、线粒体活性、顶体完整性、DNA完整性以及超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性等。结果显示:当芝麻酚添加浓度为0.20g/L时,解冻后精子活率、线粒体活性、质膜完整率和顶体完整率为最高,相比较于对照组,分别提高了12.67%、19.07%、18.78%和14.09%(P0.05);MDA含量最低为2.04nmol/mL(P0.05);SOD和GSH-Px酶活最高为73.04U/mL和237.59U/I(P0.05)。当芝麻酚添加浓度为0.25g/L时,DNA完整性最高为72.46%(P0.05)。当芝麻酚添加浓度为0.15g/L时,CAT酶活最高为3.44U/mL(P0.05)。结果表明:与对照组相比较,在猪精液冷冻稀释液中添加适当浓度的芝麻酚能显著提高解冻后猪精子活率、功能完整性和抗氧化能力(P0.05),且当芝麻酚的浓度为0.2g/L时对猪精子冷冻保存效果最好。研究结果表明,芝麻酚作为一种天然抗氧化剂,对猪精子冷冻保存具有良好的效果。     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

虾青素和平衡时间对猪精子冷冻保存效果的影响

试验旨在研究虾青素和平衡不同时间对猪精子冷冻保存效果的影响。试验分为6组,空白对照组（冷冻保存I液）和试验组（冷冻保存I液中添加0.5 mmol/L虾青素,降温平衡时间分别为2、4、6、8、12 h）。结果表明：与空白对照组相比,平衡6 h的猪精子在解冻后各项运动参数均显著提高;平衡4、6、8 h组的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、DNA完整率显著提高,活性氧含量显著降低;平衡2、4、6 h组的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶3种抗氧化酶活性显著提高,ATP含量显著提高;平衡6 h组的丙二醛水平降低4.74%(P<0.05)。综上,冷冻保存I液中添加0.5 mmol/L虾青素对猪精子冷冻保存具有一定的改善作用,其中以平衡6 h的效果最佳,能够显著提高猪精子冷冻保存效果。     

谷胱甘肽对犬精液冷冻保存效果的影响

为探讨在冷冻稀释液中添加谷胱甘肽（GSH）对犬精液冷冻保存效果的影响,采用按摩法采集5只杂种土犬的精液,离心去精清后,在冷冻液中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的GSH,制成0.25 mL的冻精进行冷冻保存,以不添加GSH的处理组作为对照组。解冻后在含有5% CO₂的空气、37 ℃、相对饱和湿度条件下孵育10 h,分别在孵育0、2、4、6、8、10 h时检查精子活力。结果显示：冻融后0 h,0.5、1.0 mmol/L GSH处理组的精子活力较高,分别为0.36和0.38,均显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组,且两者之间差异不显著（P>0.05）;1.0 mmol/L处理组的精子顶体完整率最高,为85.10%,显著（P<0.05）高于对照组,同时,其精子畸形率最低,为23.00%,显著（P<0.05）低于对照组。冻融后体外孵育2、4 h时,0.5、1.0 mmol/L处理组的精子活力均较高,其中,0.5 mmol/L处理组在体外孵育4 h时,其精子活力仍可达到0.30;孵育6 h时,1.0 mmol/L处理组精子活力最高,显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组;孵育8 h时,各GSH处理组的精子活力均显著（P<0.05）高于对照组;在孵育至10 h时,各GSH处理组的精子活力较其他孵育时间均有较大幅度的下降,未检测到对照组中有呈直线运动的精子。综上提示,在犬精液冷冻液中添加0.5~1.0 mmol/L的GSH能够显著提高冻融后的精子质量和体外存活时间。     

己酮可可碱对吐鲁番黑羊冷冻精液生理活性的影响

为探究己酮可可碱(PTX)对吐鲁番黑羊冷冻-解冻后精子生理活性的影响，本实验在冷冻-解冻后的精液中分别添加不同浓度(0、1、2、3 mg/mL)的PTX在37℃恒温水浴锅中进行孵育，检测孵育10 min、20 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h后的精子活力、活率、运动速率、畸形率、质膜完整率、顶体完整率以及总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标，评价PTX对吐鲁番黑羊精液解冻后质量的影响。结果表明：与对照组相比，添加1～3 mg/mL PTX可以在5 h内提高精子活率、活力、运动速率、质膜完整率、顶体完整率、T-AOC活性以及GSH-Px活性(P<0.05)，降低精子畸形率(P<0.05)，其中以2 mg/mL PTX组孵育20 min精液品质最佳，即吐鲁番黑羊精子活率、活力、直线速率、曲线速率、平均路径速度、畸形率、质膜完整率、顶体完整率、GSH-Px活性分别为68.99%、61.18%、29.3μm/s、32.2μm/s、22.8μm/s、14.45%、56.99%、57.99%、4235.92U/mL。在本实验条...     

纳米颗粒硒对湖羊精液冷冻保存的影响

将新采集且活力达标的湖羊精液添加到含不同质量浓度(0.00,0.25,0.50,1.00,2.00 mg/L,Ⅰ～Ⅴ组)纳米颗粒硒(nanoparticulate selenium, SeNPs)的冷冻基础稀释液中进行稀释,然后将稀释的精液分装入0.25 mL冻精细管,并在液氮中储存。7 d后解冻,对每个处理的精液进行精子质量参数评估,包括精子活力、运动参数、畸形率、顶体完整率、质膜完整性,并测定各组精液的总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶活性(CAT)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量以及相关抗氧化基因(SOD1、GCLC、GCLM和PRDX1)的表达。结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅲ,Ⅳ组对解冻后精子的运动能力、顶体完整率和膜完整性均有积极影响(P<0.05),尤其是Ⅳ组精子冻后活力达48.68%,顶体完整率为80.51%,头部质膜完整率为52.54%,尾部质膜完整率为50.99%,均处于最高水平;SeNPs处理后的冷冻精液T-AOC和CAT活性显著增加(P<0.05),其中Ⅳ组T-AOC最高为(10.94±0.25) U/mL、CAT活性为(11.01±0.92)U...     

不同浓度芦丁和冷冻速率对猪精子冷冻保存效果的研究

【目的】 探讨冷冻稀释液中添加不同浓度芦丁和不同冷冻速率对杜洛克公猪精子冷冻保存效果的影响及其二者的互作关系,以期为指导生产实践和提高优良种猪利用率提供依据。【方法】 试验分为6组,分别为空白对照组（冷冻稀释液Ⅰ液）和试验组（分别在冷冻稀释液Ⅰ液中添加0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol/L芦丁）,在距离液氮面上1 cm （快冷冻）和3 cm （慢冷冻）处分别进行冷冻。在液氮中保存30 d后,检测冷冻-解冻精子的运动参数、质膜完整率（MI）、顶体完整率（AI）、DNA完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）和ATP含量,以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性来评价解冻后的精液品质。【结果】 冷冻速率方面,在相同浓度芦丁冷冻液中,慢冷冻效果均好于快冷冻效果,差异显著（P<0.05）。芦丁浓度方面,快冷冻和慢冷冻组均以添加0.6 mmol/L芦丁的效果最好（P<0.05）,添加0.8 mmol/L芦丁的效果次之。二者互作方面,冷冻速率与芦丁浓度间存在交互作用,其中慢冷冻×0.6 mmol/L芦丁组合的精子的运动参数、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位、ATP含量均显著高于其他组合试验组（P<0.05）,ROS水平显著低于其他组合试验组（P<0.05）,SOD、CAT和GSH-Px的活性较其他组合试验组均显著提高（P<0.05）。【结论】 不同芦丁浓度与不同冷冻速率间存在互作效应,其中在冷冻稀释液中添加0.6 mmol/L芦丁慢冷冻猪精子效果最好。     

牛血清白蛋白对犬精液冷冻保存效果的影响

为了研究牛血清白蛋白(BSA)对犬精液冷冻保存效果的影响,试验配制含有不同浓度(0、3%、5%、7%)BSA的精液冷冻稀释液用于保存犬精液,测定冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及线粒体膜电位(MMP)等指标。结果表明：3%和5%BSA组冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC均显著高于对照组(P<0.05);3%BSA组MDA含量显著低于其他各组(P<0.05),线粒体膜电位值显著高于其他各组(P<0.05);除精子活力外,7%BSA组和对照组之间各项指标均差异不显著(P>0.05)。说明在犬精液冷冻稀释液中添加BSA能有效改善冷冻-解冻后精液品质,对提高精子抗氧化能力及代谢能力都有显著效果,BSA的最适添加浓度为3%。     

绿原酸对猪精液冷冻保存效果的影响

为探究绿原酸对猪精液冷冻保存效果的影响,分别在TCG稀释液中添加不同浓度(15、30、50、80和100 pg/mL)的绿原酸,通过测定冷冻-解冻后精子的活率、顶体完整率、质膜完整率、DNA完整率、超氧化歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性来判定对保存效果的影响.结果表明,当添...     

二甲双胍对犬精液冷冻保存效果的影响

本实验旨在研究二甲双胍对犬冷冻-解冻后精液品质的改善效果,用含有不同浓度(0、25、50、100μmol/L)二甲双胍的Tris-卵黄稀释液冷冻保存犬精液,解冻后测定精子活力、质膜完整率、顶体完整率、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位状态及腺苷三磷酸(ATP)含量等指标.结果显示:二甲双胍添加组的...     

大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究

试验旨在探究在山羊精液冷冻保存过程中单独使用大豆卵磷脂(SL)、卵黄(EY)及其联合使用的效果。以20%EY(V/V)和2%SL(m/V)为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷冻解冻后分别对精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性进行检测,同时利用试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量变化。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后该组的精子活力、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组无显著性差异,较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量和SOD活性无显著性差异,但精子抗氧化能力较另外2个联合添加组显著提高。综上,山羊精液冷冻基础稀释液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。     

添加咖啡因、亚牛磺酸对牛精子功能的影响

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因(0、2.5、5.0、7.5mmol/L)或亚牛磺酸(0、5、10、20、40μmol/L)的获能处理液中,且每个处理组加入约200μL的精液,在CO_2培养箱里经上游处理45min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组(P0.05),且2.5mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组(P0.05),且20μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5mmol/L咖啡因组和对照组(P0.05)。因此,20μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。