副猪嗜血杆菌对喹诺酮类药物流行病学临界值的建立

为了解副猪嗜血杆菌对喹诺酮类药物的耐药现状，制定副猪嗜血杆菌对喹诺酮类药物的流行病学临界值，本试验根据CLSI-VET中规定的方法，对ScienceDirect、PubMed、中国知网等数据库中副猪嗜血杆菌对喹诺酮药物的耐药数据进行收集，共收集到605株环丙沙星、74株氧氟沙星、322株左氧氟沙星、211株达氟沙星、276株萘啶酸、143株洛美沙星、638株恩诺沙星及262株马波沙星的最小抑菌浓度数据，进行数据修正后利用统计软件ECOFFinder进行整理拟合，得出MIC拟合直方分布图，确定了副猪嗜血杆菌对8种喹诺酮类药物的流行病学临界值和耐药率。8种药物中可用于兽医临床使用的药物为达氟沙星、恩诺沙星、马波沙星、环丙沙星；萘啶酸作为第1代喹诺酮抗菌药，已基本退出市场；另外3种药物不可用于兽医临床。通过调查研究得出副猪嗜血杆菌对氧氟沙星、萘啶酸、洛美沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、马波沙星、恩诺沙星药物的流行病学临界值分别为8、4、4、0.25、0.25、0.0625、0.0625和0.03125 μg/mL，说明目前野生型副猪嗜血杆菌对环丙沙星、达氟沙星、马波沙星和恩诺沙星这4种兽医临床可用药敏感性较高，临床推荐使用。文章得出的数据在国际交流频繁的时代普遍适用，在国内外缺乏相应药效学折点和临床折点时可作为敏感和耐药的判定标准，并为进一步制定临床折点，指导临床用药、延长喹诺酮药物的临床使用寿命奠定了基础。     

达氟沙星对猪胸膜肺炎放线杆菌的体外药效研究

为了解猪胸膜肺炎放线杆菌对达氟沙星的敏感性和达氟沙星的杀菌效果,收集和分离48株猪胸膜肺炎放线杆菌,采用微量肉汤稀释法和菌落计数法对体外药物敏感性试验和生长曲线、杀菌曲线进行了研究。猪胸膜肺炎放线杆菌对氨苄西林、磺胺异恶唑、头孢噻呋、大观霉素、黏菌素耐药率高,对阿莫西林/克拉维酸、复方新诺明、氟苯尼考、多西环素、庆大霉素、四环素、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星敏感。达氟沙星最小抑菌浓度(MIC)集中在0.0078μg/m L。达氟沙星浓度在MIC及以上时,随浓度升高,杀菌时间缩短,为典型的浓度依赖型抗生素。该试验结果可用于指导猪传染性胸膜肺炎的临床预防和治疗。     

3种动物专用抗菌药在鸡肠道沙门菌的流行病学临界值的建立

为建立3种动物专用抗菌药（氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星）在鸡肠道沙门菌的流行病学临界值（ECOFFs），本研究选取2017年分离自广东省各地兽医站和养殖场的166株鸡肠道沙门菌，采用琼脂稀释法测定3种动物专用抗菌药的最小抑菌浓度（MIC），利用非线性回归分析法及NRI（normalized resistance interpretation）和ECOFFinder程序分析处理MIC数据，并最终确定氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对鸡肠道沙门菌的ECOFFs。结果显示，氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星对沙门菌的MIC范围分别为2~>512、4~>512和0.015~64 μg/mL；MIC₅₀和MIC₉₀分别为256和>512、16和>512、0.5和16 μg/mL。氟苯尼考和安普霉素的MIC值呈明显的单峰或双峰分布，且界限明显，而达氟沙星的MIC值出现了不连续多峰分布。综合3种分析方法，最终确定氟苯尼考、安普霉素和达氟沙星的ECOFFs分别为16、16和0.125 μg/mL。本研究初步得到了3种药物在鸡肠道沙门菌的ECOFFs，为沙门菌耐药判定标准的制定提供了参考。     

地锦草不同组方对大肠杆菌的体外抑菌试验

为研制以地锦草为主药,组方治疗临床大肠杆菌病,提供理论依据,自拟中药处方6个,经水煮处理制成浓度为1g/mL的受试溶液,采用试管倍比稀释法和平板打孔法,对猪源致病性大肠杆菌O20、O48和O161进行体外抑菌试验。试验结果:组方Ⅲ抑菌作用最强,对O48和O161的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均为62.5mg/mL,对O20的最低抑菌浓度(MIC)为62.5mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为125mg/mL。     

托氟沙星纳米乳的体内外抗菌作用研究

为考察托氟沙星纳米乳的体外抑菌活性及体内药效作用,用CLSI推荐的微量肉汤稀释法测定托氟沙星纳米乳的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并与盐酸左氧氟沙星进行比较;以鼠伤寒沙门菌人工感染的雏鸡为研究对象,测定不同浓度托氟沙星纳米乳的体内药效作用。体外抑菌试验表明,托氟沙星纳米乳对无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、多杀巴氏杆菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌、鼠伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌的MIC为0.25μg/mL~2.00μg/mL,其抑菌活性是托氟沙星原药的2倍~4倍,盐酸左氧氟沙星的2倍~8倍;MBC为0.25μg/mL~4.00μg/mL,其抗菌活性是托氟沙星原药的2倍~8倍,盐酸左氧氟沙星的2倍~8倍。体内药效试验结果表明,低剂量(40mg/L)和中剂量(60mg/L)的托氟沙星纳米乳可显著降低鼠伤寒沙门菌感染雏鸡的死亡率和体重损失。托氟沙星纳米乳以纳米乳作为药物载体,增强了托氟沙星对临床常见细菌的体内外抵抗作用,提高了托氟沙星的临床应用价值。     

鸽源性大肠杆菌的分离鉴定及茶多酚对其体外抑菌效果的研究

【目的】确定广州市某规模化鸽场腹泻病例的病原菌及探讨茶多酚对该病原菌的体外抑菌效果。【方法】采集广州市某规模化鸽场腹泻病鸽的粪便,通过分离纯化、染色镜检、16S rRNA基因测序和构建系统进化树等方法对病原菌进行鉴定;采用药敏纸片法分析病原菌的耐药性;采用PCR技术检测病原菌携带的毒力基因;同时通过体外抑菌试验测定茶多酚对该病原菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)以及不同浓度(0(空白对照)、125、250、500和1 000μg/mL)茶多酚对该病原菌的生长、运动和毒力基因表达的影响,综合评定茶多酚对该病原菌的体外抑菌效果。【结果】从病料中分离出1株致病菌株,其生物学特性与大肠杆菌基本一致,命名为GG20210604;经16S rRNA基因测序和系统进化树进一步证实,该菌株为大肠杆菌;经检测,GG20210604对环丙沙星和氨苄西林耐药,并携带4种毒力基因：fliC、fimH、iroN和hlyF;体外抑菌试验结果显示,茶多酚对GG20210604的MIC和MBC均为4 000μg/mL;与空白对照组相比,当茶多酚浓度为250、500和1 000μg/mL时,GG2021...     

白头翁汤方及其单味药水提取液对猪、鸡大肠杆菌体外抑菌活性的测定

为了探讨白头翁汤方及其单味药水提取液对鸡、猪大肠杆菌的体外作用,试验采用微量二倍稀释法和平板法测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:黄连对大肠杆菌的抑杀作用最强,所有菌株对黄连都中度敏感(33.25 g/L≤MIC≤250.00 g/L),黄连对所有菌株也表现出明显杀菌效果(67.50 g/L≤MBC≤500.00 g/L);其次是白头翁,除了鸡大肠杆菌O78和猪大肠杆菌C83644表现不敏感外(MIC=500.00 g/L),其他菌株都中度敏感(67.50 g/L≤MIC≤125.00 g/L),白头翁对大肠杆菌也有杀菌作用(125.00 g/L≤MBC≤500.00 g/L);黄柏对大肠杆菌未表现出明显的抑菌、杀菌活性(250.00 g/L≤MIC≤500.00 g/L,MBC≥250.00 g/L);所有菌株对秦皮都不敏感(MIC≥250.00 g/L,MBC≥500.00 g/L);所有菌株对白头翁汤提取液都不敏感,白头翁汤中含有抗菌成分,但对细菌的抑杀作用并不是其发挥抗细菌性腹泻作用的唯一途径。     

乳酸恩诺沙星对温和气单胞菌的体外抗菌后效应

为研究乳酸恩诺沙星对温和气单胞菌(A.sobria)的体外药效学,采用二倍稀释法测定了乳酸恩诺沙星对温和气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),在此基础上探究在温和气单胞菌的不同生长时期加入乳酸恩诺沙星后对其生长的影响,研究乳酸恩诺沙星不同药物浓度(2×MIC、4×MIC、8×MIC)作用对温和气单胞菌的杀菌动力学和抗菌后效应(PAE)。结果显示,乳酸恩诺沙星对温和气单胞菌的MIC和MBC分别为0.39μg/mL和1.56μg/mL,乳酸恩诺沙星对温和气单胞菌有较强的杀菌作用,其PAE与药物浓度呈正相关。     

鸡源普通变形杆菌的分离鉴定及药物敏感性研究

明确鸡源普通变形杆菌的分离鉴定及其药物敏感性状况。采集临床发病鸡的肝脏样品,进行病原分离纯化、革兰染色镜检、生化鉴定,16S rRNA的PCR扩增、测序及同源性比对,对分离菌株进行药敏试验以及最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定。结果显示,分离的细菌为革兰阴性杆菌,16S rRNA同源性分析显示分离菌株与普通变形杆菌的同源性为98.72%;药敏试验结果表明,分离菌株对头孢噻肟、洛美沙星、复方新诺明敏感度高,对红霉素耐药;综合药敏试验及MIC结果,分离菌株对舒巴坦、庆大霉素等5种药物敏感,其中抑菌效果最强的是舒巴坦(MIC 0.125μg/mL),对青霉素、头孢拉定等产生耐药性,其中对青霉素(MIC128μg/mL)和林可霉素(MIC128μg/mL)耐药率较高。说明所分离的菌株是鸡源普通变形杆菌,养殖业中可以选用舒巴坦和庆大霉素等药物进行防控。     

三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果观察

为开发三黄连散于水产养殖防治细菌性疾病的应用,通过常规检查和PCR技术对试验菌株进行罗非鱼无乳链球菌鉴定后,检测三黄连散对该菌的体外抑菌效果。结果试验菌株为罗非鱼无乳链球菌,血清型为Ia型、II型、dIts型。三黄连散对该菌的最小抑菌浓度(MIC)为15.625mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为31.25mg/mL;1/2×MIC和1×MIC能抑制对数生长期的菌体分裂,2×MIC能抑制细菌进入对数生长期。本研究表明:三黄连散对罗非鱼无乳链球菌有良好的体外抑菌效果,可为其临床应用提供依据。     

咳喘停注射液对猪气喘病的疗效试验

采用试管二倍稀释法测定咳喘停注射液对猪肺炎支原体的最小菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并进行了咳停注射液的临床疗效试验,结果表明:该制剂对猪肺炎支原体的最小抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0 04μg/mL和0 08μg/mL;该制剂高、中、低剂量对猪气喘病的总有效率分别为100%、100%、95%,与硫酸卡那霉素相比较差异极显著(P<0 01),与青霉素加链霉素相比较差异亦显著(P<0 05)。     

白头翁散对大肠杆菌的体外抑菌效果观察

为了评价白头翁散对大肠杆菌的体外抑菌效果,采用试管二倍稀释法测定白头翁散组方中白头翁、秦皮、黄柏、黄连4味中药水提物及其组成的药对对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并筛选出抗菌作用较强的药对精简组方。单药中黄连抑菌效果(MIC为50 mg/mL)和杀菌效果(MBC为50 mg/mL)最强,黄连与秦皮联合组成药对对大肠杆菌的抑菌效果(MIC为12.5 mg/mL)最强,将4味药物联合组成的方剂抑菌效果最佳(MIC为6.25 mg/mL、MBC为100 mg/mL)。由此表明,白头翁散组方中两种药物联合比单药的抑菌效果好,4种药物组成的方剂比2种药物组成的药对抑菌效果好。     

裸花紫珠颗粒对罗非鱼源无乳链球菌体外抑菌活性研究

无乳链球菌是导致罗非鱼链球菌病的主要病原菌。为探讨裸花紫珠颗粒对无乳链球菌体外抑菌活性，采用肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠颗粒对无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),同时进行标准无乳链球菌和临床分离无乳链球菌对常用抗菌药的敏感性试验。结果表明，裸花紫珠颗粒对罗非鱼源无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)为10.000 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为20.000 mg/mL;药敏试验结果显示临床分离株无乳链球菌对四环素、环丙沙星、氟苯尼考的敏感性降低。该结果为下一步开展裸花紫珠对罗非鱼临床保护试验研究奠定了基础。     

3种抗生素对3种常见鱼类病原菌的抑菌活性研究

为研究盐酸恩诺沙星、乳酸恩诺沙星和乳酸诺氟沙星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和哈维氏弧菌(Vibrioharveyi)的体外抑菌活性,本实验通过测定抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和杀菌曲线,研究3种常用喹诺酮类抗生素药物对3种水产病原菌的体外药效学特性.结果表明:乳酸诺氟沙星对嗜水气单胞菌和哈维氏弧菌抑菌效果最好,MIC分别为0.244μg/mL和1.954μg/mL:盐酸恩诺沙星对鳗弧菌抑菌效果最好,MIC为0.122μg/mL;8 MIC的乳酸诺氟沙星药液在12 h内完全杀灭嗜水气单胞菌,在24 h内也能全部杀灭哈维氏弧菌,8 MIC的盐酸恩诺沙星药液在24 h内全部杀灭鳗弧菌.本研究为3种抗生素在水产养殖中的应用提供实验依据.     

纳米银对猪链球菌体外抗菌活性及其生物膜形成的影响

【目的】研究纳米银(silver nanoparticles, AgNPs)对多重耐药猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)的体外抗菌活性及其生物膜形成的影响,为解决猪链球菌的耐药问题提供参考。【方法】以5株临床分离的多重耐药猪链球菌(S1018、S894、S786、S815和S844)为研究对象,采用微量肉汤稀释法测定AgNPs对5株猪链球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC),通过测定AgNPs作用下细菌的生长速率以及不同浓度AgNPs对猪链球菌的抑制率来评价AgNPs的抗菌活性;通过结晶紫染色法测定各菌株生物膜的形成能力和6.25、12.5、25、50μg/mL AgNPs对5株多重耐药猪链球菌菌株生物膜形成的影响。【结果】AgNPs对S1018株的MIC和MBC均为12.5μg/mL,对其余4株多重耐药猪链球菌的MIC和MBC均为25.0μg/mL;AgNPs对多重耐药猪链球菌的抗菌活性好,25～100μ...     

6种中草药对禽源沙门菌的体外抑菌试验

为了研究中草药对3种不同血清型禽源沙门菌的体外抑菌效果,采用水煎法制备黄连、黄柏、白头翁、金银花、女贞子、乌梅6种单味中草药水提液,然后进行药物敏感性试验,并进一步测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,鼠伤寒沙门菌LLCL-8株对黄连、金银花和白头翁较为敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(83.33±29.46) mg/mL、(125.00±0) mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL、250.00 mg/mL、大于500.00 mg/mL;鸡白痢沙门菌LLC-51株对黄连敏感,MIC为(31.25±0) mg/mL,MBC为125.00 mg/mL;肠炎沙门菌S株对黄连、白头翁敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(104.16±29.46) mg/mL,MBC均为250.00 mg/mL。说明黄连对3种血清型禽源沙门菌具有广谱抑菌作用,且抑菌效果相对明显;白头翁、金银花对某些血清型菌株具有较好的抑菌效果。     

四味穿心莲散及其组分对沙门菌的体外抑菌效果观察

检测四味穿心莲散及其组分(穿心莲、辣蓼、大青叶和葫芦茶)对沙门菌的体外抑菌效果。试验选用穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶等10种中药,采用试管二倍稀释法测定各中药水提物、两药联合及市售四味穿心莲散和自制四味穿心莲散对沙门菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,四味穿心莲散的4种组分中,大青叶对沙门菌的抑菌活性最强,MIC为12.5 mg/mL;4种组分杀菌活性一致,MBC均为400 mg/mL;在两药联合中,4种联合呈现相加作用或协同作用;市售四味穿心莲散MIC和MBC均为200 mg/mL,自制四味穿心莲散MIC为50 mg/mL,MBC为200 mg/mL。分析结果表明,大青叶抑菌效果最好,杀菌效果与其他3种组分一致;自制四味穿心莲散的抑菌效果更具优势,杀菌效果与市售方剂一致。     

中草药与抗生素联用对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果观察

为了评价常用抗菌药物和中草药以及联合作用后对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果,试验采用醇提法提取中药有效成分,用试管二倍稀释法分别测定6种抗生素和7种中草药对猪源沙门氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC),用棋盘法测定各药物联合作用的抑菌效果。结果表明:阿米卡星对沙门氏杆菌的抑菌效果最强(MIC为4μg/mL),其次为诺氟沙星与链霉素(MIC为128μg/mL)。在中草药中,乌梅的抑菌效果最强(MIC为31.25 mg/mL),其次为连翘(MIC为62.5 mg/mL)。联合药敏试验结果表明,头孢噻肟分别与阿米卡星、诺氟沙星联合,阿米卡星与氟苯尼考联合,乌梅与艾叶联合均表现为协同作用;阿米卡星分别与诺氟沙星、乌梅、连翘联合,乌梅分别与诺氟沙星、氟苯尼考联合均表现为相加作用;其他药物组合均表现为无关或颉颃作用。说明可通过联合用药减少用药剂量达到治疗疾病的目的。     

中草药对狐狸源腐生葡萄球菌的体外抑菌试验

为了探讨中草药对狐狸源腐生葡萄球菌的体外抑菌效果,筛选出针对腐生葡萄球菌具有较好抑菌作用的药物,试验以临床分离的狐狸源腐生葡萄球菌为试验菌株,采用水煎法提取中草药有效成分,琼脂平板打孔法测定中草药抑菌圈直径,试管二倍稀释法测定中草药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:苏木和诃子对腐生葡萄球菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径分别为28 mm、23 mm;苏木和诃子对腐生葡萄球菌的MIC均为3. 91 mg/mL,MBC分别为3. 91 mg/mL、7. 81 mg/mL,相对其他中草药来说这二种药物的MIC和MBC均较小。说明日常常用的中草药具有一定的抑菌作用,而苏木和诃子的抑菌、杀菌效果相对较好。     

猪肺炎支原体石河子垦区分离株的体外药敏试验

为了筛选石河子垦区猪场猪肺炎支原体分离株的敏感药物,选取氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星等10种猪场常用药物,采用微量肉汤稀释法对3株猪肺炎支原体石河子垦区分离株进行体外药敏试验。结果表明:石河子垦区3株分离株均对泰乐菌素、替米考星和泰妙菌素敏感,最小抑菌浓度(MIC)范围为0.004~0.008μg/mL;对泰妙菌素+土霉素、氟苯尼考、林可霉素中度敏感,MIC范围为0.016~0.064μg/mL;对恩诺沙星、盐酸环丙沙星、土霉素、喘呼宁不敏感,MIC≥0.128μg/mL。说明石河子垦区可采用泰妙菌素、替米考星和泰妙菌素防治猪支原体肺炎。