正义、反义、干涉调控肉桂酰辅酶A脱氢酶基因对烟草的影响

肉桂酰辅酶A还原酶(Cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是在木质素合成途径中起到关键作用的酶,负责催化肉桂酰辅酶A类物质的还原反应生成相应的醛类化合物.分离得到毛白杨CCR基因的cDNA.将CCR基因以正义、反义和干涉的形式,通过农杆菌介导的方法转入烟草中,Southem杂交以确定转基因成功.在获得的转基因植株中,所有下调基因的植株都表现出可溶性酚酸含量下降,木质素含量也有明显的下降趋势,纤维素含量则有上升,可能是对木质素含量下降的一种代偿性增长.植物细胞壁组分的含量变化表明CCR基因可能是一个控制木质素代谢途径的一个很好的调控点.     

母兔维生素A缺乏症的防治

母兔缺乏维生素A，不但自身受害，还殃及子代健康，降低子代素质。笔者曾做了多例实验表明，结果发现：     

维生素A在繁殖和发育中的作用

20世纪初,人类首次认识到生殖过程中对维生素A的需求,并认识到维生素A在胚胎发育过程中的重要性.对维生素A更深入理解首先来自对大鼠胚胎的营养缺乏研究,然后来自对小鼠的遗传研究.现在普遍认为,全反式维A酸(RA)是维生素A的一种形式,RA支持雄性和雌性生殖及胚胎发育.维生素A缺乏症中发现存在很多生殖和发育障碍的现象.维生...     

环颈雉肝脏脂肪酸合成酶活性的研究

对环颈雉肝脏脂肪酸合成酶类进行测试分析。结果表明，环颈雉肝脏的各种脂肪酸代谢酶类的活性表现为：84日龄的ACC、FAS及NADP-MDH的活性值比28日龄的显著增加。G-6-PDH的活性非常低，显示环颈雉的脂肪酸合成途径与鸡相同，脂肪酸的合成所需要的NADPH是由NADP-MDH参与的丙酮酸一苹果酸途径提供的。     

肉牛酒糟育肥注意事项

酒糟是一种很好的肉牛育肥饲料，利用酒糟育肥肉牛上膘快，收益大。但在育肥过程中，常发生酒糟中毒和维生素A缺乏症，所以用酒糟育肥肉牛应注意以下事项：     

母缺VA两代受害

V_A(维生素A)是保障养殖动物优生优育的重要维生素之一,母代缺乏V_A,不但自身受害,还要殃及子代,危害子代健康,降低子代素质,养殖业对此必须给以足够的重视。由于外来品种家畜如杜洛克猪、汉普夏猪等对缺乏V_A特别敏感且症状较重,必须格外关注。     

徐淮山羊SCD1基因的克隆和亚细胞定位研究及转基因小鼠的制备

【目的】克隆徐淮山羊硬脂酰辅酶A脱氢酶1（SCD1）基因的cDNA并分析该基因生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白在亚细胞水平定位该基因表达产物,研究该基因在异种动物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性及外源基因能否稳定遗传。【方法】采用RT-PCR方法从徐淮山羊脂肪组织中克隆SCD1基因cDNA,进行生物信息学分析,并构建含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-SCD1,脂质体（LTX）介导基因转染NHI-3T3细胞,48 h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达。利用睾丸注射法制备转基因小鼠,在F1代和F2代个体DNA水平和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。【结果】成功克隆出徐淮山羊SCD1基因的全序列cDNA,大小为1 074 bp,编码357个氨基酸,GenBank登录号为JX854036,徐淮山羊SCD1序列与人、褐家鼠、小家鼠、绵羊、牛和野猪相应编码区的同源性分别为86%、83%、82%、98%、95%、90%,氨基酸序列同源性分别为84%、79%、79%、96%、92%、95%;成功构建了融合表达载体pEGFP-C1-SCD1;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-SCD1融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中,与在线软件预测一致;通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内暂态表达和持续性表达,且可以稳定遗传。【结论】体外克隆的徐淮山羊SCD1基因cDNA在单细胞水平上表达于细胞质中,在小鼠体内也可以表达。     

毛白杨4-CL cDNA的克隆、表达及活性分析

从毛白杨(Populus tomentosa)木质化茎中提取总RNA,利用RT-PCR技术进行cDNA扩增,获得1条1 621 bp的片段。测序结果表明:该片段编码536个氨基酸组成的多肽,序列中包含所有已知4-CL蛋白的2个特征序列boxⅠ(SSGTTGLPKGV)和boxⅡ(GEICIRG)。将cDNA克隆到原核表达载体pET-32a( )中,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,4-CL基因在大肠杆菌BL21中获得表达,所表达融合蛋白的分子量约为70 ku。酶活性分析表明:该重组蛋白对底物PA、FA、CA均表现出催化活性,其偏爱性顺序为PA>FA>CA,对SA则没有活性。     

甘薯在生物强化应用中的研究

在为缓解世界隐性饥饿,将提高甘薯中类胡萝卜素含量用于改善维生素A缺乏的营养结构背景下,探讨甘薯利用和生物强化技术对于提高甘薯中胡萝卜素含量、改善人体健康具有深远意义。本文从维生素A缺乏症、甘薯的利用以及甘薯在生物强化中的应用等方面进行综述,旨在利用生物强化技术进一步提高甘薯在营养膳食中的价值。     

干旱胁迫对番茄叶片蜡质积累的影响

【目的】研究干旱胁迫对番茄叶片蜡质积累的影响,及蜡质含量与蜡质合成相关基因β-酮脂酰-辅酶A合成酶(SLCER6)表达的关系,为植物表皮蜡质抗旱研究提供理论依据。【方法】以番茄品种Micro-Tom为材料,在其花蕾期进行干旱胁迫后,当植株表现出明显缺水症状时分别采集第1叶位至第7叶位的叶片,以同期正常浇水番茄植株作为对照,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)和气相色谱-火焰离子化检测仪(GC-FID),对7个叶位叶片的蜡质成分和含量进行检测,并通过扫描电镜观察叶片的表皮超微结构,同时用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析蜡质合成相关基因SLCER6的表达情况,最后对蜡质及其各成分含量与SLCER6基因表达量变化值之间的相关性进行了分析。【结果】(1)干旱胁迫后番茄叶片上、下表面超微结构与对照组基本一致,均没有蜡质晶体覆盖,且较为光滑,呈薄膜状结构,但皱褶明显减少,细胞凸起增多。(2)GC-MS和GC-FID分析表明,从对照组中共鉴定出24种蜡质成分,番茄叶位间蜡质含量存在一定差异,但均以烷烃含量为主,其平均含量为(1.794±0.397)μg/cm~2,占蜡质总含量的93.83%,并含有少量的三萜类、初级醇和豆甾醇成分,但这3种化合物只占到蜡质总含量的4.66%。(3)干旱胁迫并没有造成番茄叶片蜡质组分以及烷烃碳链的改变,但能够极显著增加蜡质的总含量,尤其是烷烃类物质,与对照组相比,干旱胁迫组烷烃含量平均增加了161.15%,是三萜类、初级醇及豆甾醇成分总增加率的1.6倍。(4)SLCER6基因在番茄不同叶位叶片中均有表达,其表达量从第1叶位到第7叶位总体呈下降的趋势;干旱胁迫后,SLCER6基因表达量均显著增加。【结论】干旱胁迫能够极显著增加番茄叶片蜡质总含量,增加的成分主要是烷烃;干旱胁迫也能够诱导SLCER6基因表达量上调;番茄叶片蜡质积累与SLCER6基因表达量之间存在着正相关关系。     

青天葵HMGR 基因片段的鉴定 和生物信息学分析

采用生物信息学对青天葵转录组测序获取的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶编码基因片段Nf HMGR及其编码蛋白进行功能鉴定和表达分析。结果表明,Nf HMGR基因片段序列长度为1 563 bp,与其他植物HMGR基因的同源性最高可达88%;编码含有521个氨基酸、分子量约为55.34 ku的亲水性不稳定蛋白。Nf HMGR蛋白具有3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶Ⅰ类酶功能域,归属于3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶超级家族,包含3处跨膜结构域,不含任何信号肽、转运肽,二级结构表现为混合型结构蛋白质。在青天葵不同组织中,Nf HMGR基因在球茎中的表达量高于在叶片中的表达量。     

家蚕ga Pdh基因的克隆及分析

从家蚕EST数据中检索到果蝇(Drosophila melanogaster)甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)(AAN09371)氨基酸同源序列,用seqMAN延伸,电子克隆家蚕gapdh的cds,用PCR克隆家蚕gapdh基因序列.家蚕甘油醛-3-磷酸脱氢酶(bmgapdh)基因长1 485 bp(N0:DQ202316),包括5'UTR 221 bp,3'UTR 265 bp和完整的999 bpORF框,编码333个氨基酸残基.用BLASTN进行同源性分析表明与果蝇的同源性为91%,与鹌鹑胚胎纤维细胞序列同源性最差,为71%.bmgapdh基因在家蚕基因组中是单拷贝的,包舍3个外显子.3'UTR序列包含AATAA终止信号和Poly(A).推导的氨基酸序列N端包含与NAD+结合的保守结构域:ASCTTNCL.     

家蚕ga Pdh基因的克隆及分析

从家蚕EST数据中检索到果蝇（Drosophila melanogaster）甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）（AAN09371）氨基酸同源序列,用seqMAN延伸,电子克隆家蚕gapdh的cds,用PCR克隆家蚕gapdh基因序列．家蚕甘油醛-3-磷酸脱氢酶（bmga pdh）基因长1485 bp（NO：DQ202316）,包括5′UTR 221 bp,3′UTR 265 bp和完整的999 bp ORF框,编码333个氨基酸残基．用BLASTN进行同源性分析表明与果蝇的同源性为91％,与鹌鹑胚胎纤维细胞序列同源性最差,为71％．bmgapdh基因在家蚕基因组中是单拷贝的,包含3个外显子．3′UTR序列包含AATAA终止信号和Poly（A）．推导的氨基酸序列N端包含与NAD^＋结合的保守结构域：ASCTTNCL．     

水禽常见维生素缺乏症及其防治

<正>1维生素A缺乏症维生素A是家禽正常生长发育、视觉及黏膜完整所必需的维生素。能保持皮肤和黏膜的完整性,抵抗微生物和寄生虫病侵袭,增强机体的特异性免疫机能;促进机体和骨骼的生长,提高繁殖力,增加视色素。家禽缺乏维生素A,多因其日粮中供应不足或者吸收障碍所致,本病常见于幼龄水禽易发生。1.1临床症状鸭鹅缺乏维生素A时,病禽精神不顿,食欲不振,生长停滞、消瘦。羽毛松乱,趾爪卷缩,步     

防治猪营养元素缺乏症

1．缺乏维生素A 因饲料成分单一，青饲料缺乏而引起的常见病。症状：皮肤粗糙，皮屑增多，生长慢，咳嗽下痢，眼干，行走摇晃，肌肉痉挛等。     

ICL、ICDH、ODH和GDH酶与L-谷氨酸的合成

通过对对数生长期细胞的异柠檬酸裂解酶（ICL）、异柠檬酸脱氢酶（ICDH）、α-酮戊二酸脱氢酶（ODH）和谷氨酸脱氢酶（GDH）的分析以及对细胞L-谷氨酸产生量和发酵残糖的综合分析,发现由于乙醛酸循环关键酶ICL的缺失,L-谷氨酸产生量大幅下降,说明乙醛酸循环是谷氨酸棒杆菌中的主要回补途径,L-谷氨酸合成需要乙醛酸循环。在保证乙醛酸循环回补功能的前提下,提高ICDH活性,减弱ODH活性,有利于L-谷氨酸的合成。     

对家兔维生素A缺乏症治疗技术的探索

文章结合自己多年从事基层一线畜牧兽医工作的经历,详细论述了维生素A缺乏症的发病机制,诱因,症状,诊断要点和防治的基本知识,对其它地区养兔场、户治疗该病具有借鉴意义.