拟穴青蟹幼蟹北方室内水泥池中间培育技术

为解决北方地区拟穴青蟹(Scylla paramamosain)有效养殖周期短的难题,本实验通过对拟穴青蟹幼蟹进行中间培育,以促进拟穴青蟹幼蟹的蜕壳生长,从而缩短拟穴青蟹在北方地区的养殖周期。试验分别设计了常温、20、24、28、32℃五个水温组作为拟穴青蟹幼蟹中间培育试验组,经过25 d的培育试验,结果显示：水温28℃试验组的生长指标、增重率及特定生长率均比其他试验组要高,而且存活率也较高。试验表明,水温28℃可以作为拟穴青蟹幼蟹中间培育阶段的温度,有利于促进青蟹的生长蜕壳。     

拟穴青蟹室内水泥池高效人工育苗技术

拟穴青蟹俗称青蟹,属于节肢动物门、软甲纲、十足目、梭子蟹科、青蟹属.青蟹肉质鲜美、营养丰富,为高档海产品.我国是青蟹的重要产区,自江苏沿海向南的东南沿海均是其自然分布区,同时也是人工养殖的主要区域.我国具有120多年的青蟹养殖历史,广东在全国率先开展青蟹人工暂养活动.近年来,我国青蟹人工养殖年产量保持在14万吨以上,养...     

拟穴青蟹北方地区室内越冬技术研究

拟穴青蟹是我国重要的海水蟹养殖品种,在东南沿海广泛养殖,2018年养殖面积23 129公顷、产量157 712吨.青蟹个体大、品质好,深受老百姓喜爱,市场潜力巨大.而在我国北方沿海主要开展三疣梭子蟹养殖,近几年受病害增多、种质退化等因素影响,养殖产量和经济效益呈现下滑趋势,急需优化养殖产业结构.2019年,课题组及附近...     

黄河三角洲地区拟穴青蟹盐碱水池塘养殖技术研究

为解决拟穴青蟹(Scylla paramamosain)供不应求的难题,在黄河三角洲地区开展了盐碱水池塘养殖拟穴青蟹的试验。试验准备了3个2 000 m²的盐碱水池塘,共放养4 500只幼蟹,经122 d养殖,收获青蟹488.25 kg,平均产量2 441 kg/hm²,养成后青蟹的平均体重为311 g,最大体重为396 g。     

拟穴青蟹两种养殖模式的比较

以拟穴青蟹为主养品种,比较半封闭式养殖模式与传统开放式中水体理化生因子、放养品种的存活率和产量,以探索汕头牛田洋的适宜青蟹养殖模式。经过10个月的养殖试验,半封闭式养殖模式水体理化指标、污染物指标、菌体指标等总体优于开放式养殖模式。半封闭式养殖模式青蟹存活率高出开放式养殖模式66.22%,其他养殖品种的存活率和产量也均高于开放式养殖模式。研究结果表明,与传统的开放式养殖模式相比,半封闭养殖模式能有效降低水体污染指标,提高养殖产量,较为适合在汕头牛田洋青蟹养殖区进行推广。     

盐碱水和海水养殖条件下的拟穴青蟹生长和营养成分比较分析

为探究不同水体条件下拟穴青蟹的生长和营养成分差异,本研究测定了黄河三角洲海水（DY）、盐碱水（ZD）及三门海水（SM）的水质离子组成,采用阿廖金分类法进行养殖水体分类;测量形态指标并计算肥满度,利用独立样本t-检验（t-Test）方法比较3种水体中养殖90和140日龄青蟹的生长;测定肝胰腺和肌肉氨基酸及脂肪酸含量,应用主成分分析和聚类分析方法分析各组青蟹氨基酸和脂肪酸的组成。结果显示,ZD组养殖水体碱度显著高于SM组（P<0.05）,与DY组无显著差异（P>0.05）;3个组90日龄青蟹肥满度在0.54~0.89之间,ZD、DY组青蟹肥满度显著高于SM组（P<0.05）,140日龄青蟹肥满度的组间差异不显著（P>0.05）;共测出20种氨基酸和26种脂肪酸,3个组青蟹的肝胰腺和肌肉总氨基酸含量（TAA）分别为3.94~6.87 g/100g和9.73~12.42 g/100g,SM组均为最高;3组青蟹的肝胰腺和肌肉总不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量（TUFA/TFA）比值分别为59.68~68.80%和70.08~73.79%,其中,ZD组青蟹肝胰腺中C20:5n-3（EPA）含量为各组最高;主成分分析和聚类分析分别显示,ZD组的青蟹的氨基酸与脂肪酸含量与其他组区分较为明显,但差异不显著（P>0.05）,各组青蟹的肌肉、肝胰腺氨基酸和脂肪酸含量的聚类结果均相似。研究发现,与正常海水相比,盐碱水养殖青蟹的生长速度、肥满度及氨基酸和脂肪酸含量差异不大,部分指标占优,为保证养殖青蟹的生长速度和产量,可在盐碱水中适量补充Mg2+和K+。研究结果为盐碱水青蟹养殖和新品种培育提供参考。     

拟穴青蟹ISSR-PCR条件的优化

分析DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶及甲酰胺、二甲基亚砜等对拟穴青蟹ISSR-PCR反应的影响.研究结果确定了获得清晰条带的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶的浓度范围分别为:模板DNA 8～50 ng/μl ,Taq DNA聚合酶0.75～1.0 U, Mg2+1.0～2.0 mmol/L(与引物密切相关),dNTP 0.15～0.20 mmol/L,引物浓度0.6～0.8 μmol/L.甲酰胺的添加并不能优化拟穴青蟹ISSR-PCR反应结果,而低浓度的二甲基亚砜可提高扩增产物的清晰度,但与引物相关.     

青蟹呼肠孤病毒对拟穴青蟹的致病性研究

2008-2012年广西海洋研究所海水增养殖基地暂养的拟穴青蟹膏蟹出现“嗜睡”等典型的青蟹呼肠孤病毒病症状.采用套式PCR检测濒死膏蟹感染青蟹呼肠孤病毒阳性率为100％,经Blastn比对扩增序列与青蟹呼肠孤病毒基因(HQ414137.1)相似度达98％,属于青蟹呼肠孤病毒(JX213634).病毒粗提液人工回感后发现,攻毒1h,青蟹血淋巴中即可检测到青蟹呼肠孤病毒;攻毒后第4～6 d,出现死亡高峰,第10 d,累积死亡率达到100％.血清酶指标中碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力明显高于对照组,而与免疫相关的过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力低于对照组;肝胰腺、鳃和肌肉组织切片均呈现显著病理坏死损伤.青蟹呼肠孤病毒是此次拟穴青蟹膏蟹死亡的主要原因.     

青蟹呼肠孤病毒对拟穴青蟹的致病性研究

采用静水法研究不同浓度番石榴水提取物(guava leaf water-extract,GLWE)对带毒拟穴青蟹(Scylla paramamosain)的成活率及在GLWE质量浓度分别为0 (C0,对照组)、10 mg·L^–1(C10组)、20 mg·L^–1(C20组)、40 mg·L^–1(C40组)、80 mg·L^–1(C80组),用药时间分别为0 h、12 h、24 h、48 h、72 h的条件下对其血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酚氧化酶(PO)和一氧化氮合成酶(TNOS、iNOS)活力的影响,并初步探究GLWE的适宜用药浓度范围。结果表明,实验15 d,各处理组青蟹的成活率随着GLWE浓度的增高呈先升后降的现象且与C0组差异显著(P<0.05),其中C40组的成活率最高(55.56%),C0组的成活率最低(22.22%)。用药12 h,C80组的AKP、CAT、PO、iNOS活力均显著高于C0组(P<0.05);用药24 h,C20和C40组的SOD、LZM及C40组的ACP、CAT和PO活力均显著高于C0组(P<0.05);用药48 h,C10、C20组的CAT活力及C40、C80组的TNOS和iNOS活力均显著高于C0组(P<0.05);用药72 h,各处理组的AKP活力均显著高于C0组(P<0.05),但C40、C80组的ACP和CAT活力显著低于C0组(P<0.05)。该条件下,10~40 mg·L^–1的GLWE可在48 h内显著促进拟穴青蟹血清AKP、ACP、SOD、CAT、PO、NOS、LZM活力的升高,其中以20~40 mg·L^–1GLWE的效果最优。     

拟穴青蟹vasa基因cDNA的特征分析与性腺特异表达

vasa蛋白属于DEAD家族蛋白,是一种RNA解旋酶,在生殖细胞的分化中具有重要作用。本研究从拟穴青蟹卵巢中克隆得到vasa基因cDNA全长(将其命名为Sp-vasa),Sp-vasa序列长度为2 944 bp,其中开放阅读框(ORF)长度为1 899 bp,编码632个氨基酸,具有DEAD-box家族蛋白的7个高度保守的结构域。半定量RT-PCR结果显示,Sp-vasa只在卵巢和精巢中特异表达,在其它组织则未检测到表达。由此可见,vasa属于拟穴青蟹性腺特异表达基因。因此,Sp-vasa基因可有望作为有效的分子指标研究拟穴青蟹原始生殖细胞的起源、迁移以及生殖腺的发生。     

冬季不同海区拟穴青蟹可溶蛋白和糖含量比较

采用生物化学方法测定了福建厦门海区和浙江宁海海区冬季拟穴青蟹鳃、肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖的含量.结果显示,厦门海区拟穴青蟹冬季可溶性蛋白含量在鳃(4.02 mg/ml)、肝胰腺(3.12 mg/ml)和肌肉(4.35 mg/ml)中显著高于宁海海区拟穴青蟹鳃(2.49 mg/ml)、肝胰腺(2.22 mg/m...     

膨化配合饲料和天然饵料对拟穴青蟹育肥的影响

拟穴青蟹(Scylla paramamosain)隶属节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、短尾亚目(Brachyura)、梭子蟹科(Portunidae)、青蟹属(Scylla),是我国传统珍贵海产品(林琪等,2007)。拟穴青蟹作为一种我国南方沿海主要的海水捕捞和养殖的对象,具有食谱广泛、生长繁殖快、适应性和抗病能力强等特点。全国养殖面积3余万hm2,年产量15.19×104 t (中国渔业统计年鉴,2018)。     

广东省阳江地区野生拟穴青蟹2种病毒感染情况调查

青蟹双顺反子病毒-1（mudcrabdicistrovirus-1,MCDV-1）和青蟹呼肠孤病毒（mudcrabreovirus,MCRV）是对养殖拟穴青蟹有较强致病性的2种病原,可导致高死亡率。文章采用双重巢式PCR检测法对2012年阳江地区5月-10月捕捞的野生拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）病毒感染情况进行调查。结果显示,阳江地区2012年5月～10月的野生青蟹群体一直保持较高的病毒携带率（44．83％-100％）,其中MCDV-1检出率最高的月份为6月、8月和9月,MCRV检出率最高的月份为5月-6月和8月～9月;以单独感染类型为主的月份为5月、7月和10月（〉44．83％）,以双阳性感染类型为主的月份为6月、8月和9月（〉82．76％）。由此可见,2种病毒的流行月份为5月～6月和8月～9月;在流行月份期间2种病毒常常协同感染野生拟穴青蟹。     

两种弧菌对拟穴青蟹溞状幼体致病性研究

于5L试验容器内,以副溶血弧菌和溶藻弧菌通过菌浴和口服法感染拟穴青蟹溞状幼体,比较2种弧菌对拟穴青蟹溞状幼体感染的致病力。海水水温25～26℃,盐度30.1,紫外线消毒。试验结果表明,副溶血弧菌菌浴感染拟穴青蟹幼体,24h对Z1至Z5幼体半致死密度分别为4.03×105、7.67×105、8.56×105、1.98×106、8.99×106cfu/mL;溶藻弧菌菌浴拟穴青蟹幼体,24h对Z1至Z5幼体半致死密度为5.76×106、7.64×106、7.92×106、1.02×107、6.02×107 cfu/mL;口服感染试验的幼体死亡率随投喂次数和时间增加而提高。在5×106cfu/mL密度下2种弧菌的混合感染组(密度比1∶1)24h幼体死亡率低于对照副溶血弧菌感染组,高于对照溶藻弧菌组。     

温度对拟穴青蟹循环水养殖系统微生物群落结构的影响

为探究温度对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)循环养殖水体中微生物群落的影响,深入理解环境因子与养殖水体微生物群落之间的相关性。在水温分别为18℃、22℃、26℃、30℃和32℃的循环养殖系统中进行拟穴青蟹养殖,采用16S rRNA高通量测序技术对不同温度下的养殖水体微生物群落组成进行分析。结果表明:(1) Alpha多样性指数显示5组水样中细菌群落多样性指数大小为t26t22t30t32t18,物种丰度大小为t22t26t32t30t18。温度可以导致养殖水体中微生物群落多样性发生变化,但并未发现二者之间直接的相关性。(2) 5种温度下的养殖系统中细菌群落共有31门、43纲、94目、185科和351属,变形菌门(Proteobacteria)为循环养殖水体中绝对优势菌门。在养殖系统水温为26℃时,养殖水体中氮磷污染物含量相对较高,其水中脱氮除磷菌属的相对丰度也显著高于其他4组。(3)由花瓣图和UPGMA聚类分析图进行相似性分析可知,水体微生物群落对温度的变化有着良好的响应, 5组水样的细菌群落结构总体相似性较低,其中最高温度32℃和最低温度18℃的水体中细菌群落结构最为相似。(4)水体中微生物群落结构和与环境因子的相关性分析显示,氮磷营养盐中的总磷(TP)和硝酸盐(NO3–-N)对水中微生物群落特征具有显著性影响,而温度是导致养殖水体中氮磷营养盐差异化的主要原因。上述研究结果初步解释了温度对拟穴青蟹循环养殖水微生物群落的作用机制,为下一步深入研究拟穴青蟹循环水养殖系统中环境变化与微生物的相互关系提供参考。     

拟穴青蟹对饵料中稳定同位素富集效应的初步研究

稳定同位素分析技术已成为生态学中营养来源研究的重要手段,但前提需获得动物对不同饵料中稳定同位素的富集效应数据.该实验以从红树林和邻近滩涂收集的犬牙珠(鰕)虎鱼(Acentrogobius caninus)、李氏?(Cal-lionymus richardsoni)、须赤虾(Metapenaeopsis barbata)...     

虾池养殖拟穴青蟹技术

拟穴青蟹（Scylla paramamosain）俗称青蟹,属暖水、广盐性种类,具有个体大、生长快、适应性强等特点,是我国东南沿海各省传统养殖蟹类品种。国内外学者在拟穴青蟹的分类学、繁殖生物学、遗传学、养殖和病害等方面做过较多研究。目前其养殖模式主要有池塘式、围栏式、瓦瓮式、网箱式等。     

中国沿海拟穴青蟹群体遗传多样性的微卫星分析

利用17对微卫星引物对我国沿海7个拟穴青蟹野生群体(杭州湾、三门湾、闽江口、东山湾、珠江口、北部湾、清澜港)进行了遗传多样性分析。结果表明,17个位点在所有青蟹群体中均为高度多态(PIC>0.5),共检测到253个等位基因;7群体的平均等位基因数(A)为9.41～10.94,平均有效等位基因数(N_e)为5.42～6.87,平均杂合度(H)为0.511～0.563,群体遗传多样性水平较高。分子方差分析(AMOVA)结果显示,94.13%的遗传变异存在于群体内,5.87%的遗传变异存在于群体间,两两群体间F_ST值为0.035 5～0.081 7(P<0.01),表明群体间遗传分化水平中等偏低。Hardy-Weinberg平衡检测表明,7群体普遍存在杂合子缺失现象。青蟹群体间遗传距离为0.253 0～0.571 9,UPGMA聚类分析表明,杭州湾与三门湾群体首先聚在一起,再与闽江口群体、东山湾群体聚为一支;珠江口群体与清澜港群体聚为另一支;两分支最后与北部湾群体聚类在一起。     

利用cDNA-AFLP技术研究副溶血弧菌感染下拟穴青蟹的基因差异表达

研究以实验室分离自汕头牛田洋青蟹养殖区的副溶血弧菌感染的健康拟穴青蟹,利用cDNA-AFLP技术分析感染前后拟穴青蟹肝脏组织基因的转录表达差异,最终获得了23个差异片段,其中20个片段成功测序。BLAST分析表明,序列与已知功能基因具有同源性的有6个,其中5个经real-time PCR重新验证为上调表达,主要涉及参与能量代谢的精氨酸激酶(arginine kinase)和甘油醛3磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase),以及参与转运过程的精氨酰tRNA合成酶(arginyl-tRNA synthetase),同时,还有直接参与免疫防御反应的凝乳状蛋白酶(chymotrypsin-like proteinase)。另外,8个差异片段与已知基因或序列无同源性。     

拟穴青蟹miR-34靶基因预测及其生物信息学分析

MiR-34是一类在进化过程中高度保守的miRNA家族,参与机体的许多重要生命活动。本研究首先比较本实验室构建的拟穴青蟹miRNA数据库中的miR-34(spa-miR-34)和通过miRBase获得的多个物种的miR-34的序列特征,然后应用RNAhybrid和Segal Lab两种在线工具预测spa-miR-34的靶基因,用blast2go软件对这些靶基因进行功能注释和信号通路富集分析。结果表明,spa-miR-34可能的靶基因有66个,这些基因的功能主要包括氧化还原、磷酸化、钙离子跨膜运输、转录等生物学过程;信号通路主要富集于精氨酸和脯氨酸代谢、抗生素生物合成、苯丙素生物合成、糖酵解和糖异生等合成代谢通路中。spa-miR-34预测的靶基因所涉及的基因家族和通路亦包括CHH家族、ERK通路、细胞周期和UPP通路、SUMO通路。此外,spa-miR-34预测的靶基因还有蜕皮激素受体,推测spa-miR-34在生殖、蜕皮及氨基酸等物质代谢方面具有重要作用。本研究为进一步了解spa-miR-34在拟穴青蟹中的作用提供了重要参考资料。