双抗体夹心阻断ELISA检测血清中牛病毒性腹泻-粘膜病病毒抗体的研究

本研究建立了检测血清中牛病毒性腹泻-粘膜病(BDV-MD)病毒抗体的双抗体夹心阻断ELISA,并用其检测了长春地区293头奶牛和262头黄牛的血清.结果,奶牛的阳性率为54.9％.黄牛的阳住率为43.5％.本方法是一种敏感、特异、快速的检测抗体方法,可在基层推广应用.     

广东种禽场四种疫病抗体检测

１９９５年１０月至１９９６年５月，我站对各市送来的３５个种禽场，６２６７份禽血清运行ＮＤ，ＩＢＤ，ＭＧ，ＳＰ四种疫病抗体检测，结果：ＮＤＨＩ－Ｔ检测５９９８份血清，阳性率为９０．１６％，合格率为７５．８９％，幅度为０～１００％，说明种鸡场ＮＤ免疫水平比较高，但悬殊甚大。ＩＢＤＡＧＤ检测６２６７份血清，阳性率为８７．９４％，证明我省种鸡场生产的鸡苗ＩＢＤ的母源抗体是相当高的，大多数小鸡可以避免ＩＢＤ     

用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法，用该法检测20份人工感染鸡血清样品，抗体阳性率为100％，康复期鸡群血清抗体阳性率为43％，人工接种弱毒疫苗65d和170d鸡群血清抗体的阳性率分别为60％、70％。经反复试验，确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件，即抗原包被浓度10．8μg／孔，待测血清最佳稀释度为1：100。     

Dot─ELISA检测猪生殖和呼吸综合征抗体的研究

用差速离心法提纯ＰＲＲＳ病毒，利用ＮＣ膜作为载体，在国内外首次成功建立了检测ＰＲＲＳ血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为１００μｇ／ｍｌ，被检血清工作浓度为１∶１０，酶标兔抗猪ＩｇＧ工作浓度为１∶６００。对７２份北京地区猪血清分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率为３３．３％，ＩＦ检测阳性率为３０．６％，与ＩＦ符合率较高，对部分待检血清检测结果表明：６１份１９９１年进口美国猪血清阳性率为０％，１８２份１９９５年进口加拿大猪血清阳性率为４．９４％。本法不需特殊仪器，适用于基层兽医部门和猪场对该病的血清学诊断和流行病学普查     

锡盟东苏旗绵羊布病血清抗体调查

通过对临床血清样本布鲁氏菌抗体检测,调查锡林浩特地区绵羊布鲁氏菌病发生与流行情况。应用虎红平板凝集试验对1216份绵羊血清进行了布鲁菌血清抗体检测,结果羔羊、基础母羊和商品羊的抗体阳性率分别为5．57％、769％和2．69％,总的抗体阳性率为4．4％。     

重庆市部分地区牛传染性鼻气管炎和流行性牛白血病的血清学调查

为了解传染性鼻气管炎（IBR）和流行性牛白血病（BL）的流行情况，从重庆市辖区内11个区县（自治县）采集奶牛、黄牛、水牛血清共；369头份，用酶联免疫吸附试验（HLISA）检测IBR和BL抗体。结果从部分区县（自治县）检测出阳性样品，IBE阳性率介于2．70％～20．00％之间，总阳性率为4．61％；奶牛、黄牛、水牛总阳性率分别为5．34％、4．92％、0％。BL阳性率介于2．70％～52．50％之间，总阳性率为12．20％，奶牛、黄牛、水牛总阳性率分别为20．87％、1．64％、0％，提示该病在我市奶牛和黄牛牛群中存在，污染较广，应引起重视。     

应用间接荧光抗体试验检测猪生殖-呼吸道综合征抗体

应用间接荧光抗体试验进行了猪生殖－呼吸道综合征病毒抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪场血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２０份，阳性率为９０．９％；Ｌ猪场血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

应用间接接荧光抗体试验检测猪繁殖和呼吸综合征抗体

应用间接荧光抗体试验进行了猪繁殖和呼吸综合征血清抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪猪血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性性血清２０份，阳性率为９０．９％；Ｌ猪场猪血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

猪细小病毒病的研究 Ⅱ猪群细小病毒HI抗体的血清学调查

对河南省８个地市１０个猪场不同品种、年龄的２１０头母猪和６０头育肥猪进行了猪细小病毒（ＰＰＶ）血凝抑制（ＨＩ）抗体的检测．结果表明１００％的场ＰＰＶ抗体阳性，其中８０％的场阳性率为１００％，１０％的场阳性率为８４％，另１０％的场阳性率为５５％．４月龄以下的后备母猪和肥育猪抗体阳性率分别为８５％和９０％，其它成年猪的阳性率均为１００％．１０个场的总阳性率为９４．４％．ＨＩ抗体效价最低者为１：１０，最高者为１：５１２０。     

甘肃省猪流感抗体的血清学调查

用酶联免疫吸附试验对甘肃省14个市（州）的42个猪场进行了猪流感血清抗体检测。共检测394份猪血清，在11个市（州）的猪群中检出SIV H1N1抗体，检出阳性139份，平均阳性率为35．28％，阳性率最高为64．8％，最低为3．03％。其中检测健康猪血清160份，阳性43份，阳性率为26．87％；检测患其他病的猪血清174份，阳性95份，阳性率为54．95％，患其他病的猪阳性率高于健康猪。     

青海省部分地区调入仔猪PRRSV抗体ELISA检测

采用ELISA方法对外省调入青海省西宁、湟中、湟源、互助、乐都、循化和民和等七个地区的449份仔猪血清进行PRRSV抗体ELISA检测，结果显示被检血清免疫抗体阳性率为2．5％，感染抗体阳性率为8．9％。其中原产地为甘肃、四川、江苏、重庆的仔猪分别占总体猪的87．3％、5．4％、5．1％、2．2％，其血清的PRRSV免疫抗体阳性率分别为1．3％、0％、0％、60％，感染抗体阳性率分别为9．2％、0％、17．4％、0％，表明外省调入青海省的仔猪RRRS的总体免疫状况不是很好，感染情况较为严重，对此病的检疫防控力度还需进一步加强。     

四川部分种猪场乙型脑炎血清抗体调查

2001年我室从省内已免疫乙脑的8个种猪场采集了597份猪血清进行了乙型脑炎血清抗体检测，结果抗体阳性率仅达32．83％，37．50％的种猪场血清抗体阳性率低于10％，免疫水平低下，不能有效保护种猪免受乙型脑炎感染。应采取积极的预防措施，采用有效的疫苗进行免疫，有效的防止种猪场流行性乙型脑炎的发生。     

Dot—ELISA检测猪生殖和呼吸综合征抗体的研究

用差速离心法提纯ＰＲＲＳ病毒，利用ＮＣ膜作为载体，在国内外首次成功建立了检测ＰＲＲＳ血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为１００μｇ／ｍｌ，被检血清工作浓度为１：１０，酶标兔抗猪ＩｇＧ工作浓度为１：６００。对７２份北京地区猪血清分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率为３３．３％，ＩＦ检测阳履率为３０．６％，与ＩＦ符合率较高，对部分待检血清检测     

间接法Dot—ELISA检测鸡减蛋综合症抗体的建立及应用研究

应用ＳｅｐｈａｄｃｘＧ－２００层析法纯化鸡减蛋综合症病毒，利用ＮＣ膜作为载体，成功建立了检测ＥＤＳ－７６血请抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，被检血清浓度为１：２０，酶标兔抗鸡１ｇＧ浓度为１：２００．底物溶液最适ｐＨ值为７．２。对Ａ－Ｆ６个养禽场随机抽检血清１６０份，分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＨＩ和ＡＧＰ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出阳性率为５１．９％，ＨＩ检出阳性率为４６．９％，ＡＧＰ检出阳性率为３１．９％。对１４０日龄鸡人工感染试验，测定抗体消长规律。本方法不需特殊仪器。适用于基层兽医部门和养鸡场对ＥＤＳ－７６的血清学诊断和流行病学调查。     

检测减蛋综合征抗体间接ELISA法的建立及应用

用蔗糖不连续梯度纯化的减蛋综合征＊（ＥＤＳ－７６）病毒包被ＥＬＩＳＡ板，建立了检测ＥＤＳ－７６抗体的间接ＥＬＩＳＡ法。经测定，抗原最适包被浓度为１μｇ／ｍＬ，待检血清最佳稀释度为１：２００，以ＯＤ４９０〉０．３，Ｐ／Ｎ〉２．１判为阳性结果。对４个鸡场的１２０份鸡血清进行检测，阳性率分别为０，４３．３３％，８０．００％和９３．３３％。     

用ELISA检测接种猪瘟疫苗猪的血清抗体

用ＥＬＩＳＡ检测了接种猪瘟疫苗猪的血清抗体。共计４８６份猪血样,检测到血清抗体阳性者４４１份,阳性率为９０．７４％。同时对其中的１１１份血清进行了自然强毒血清抗体的检测,检测到强毒抗体阳性４份,阳性率为３．６０％。结果表明青海省猪瘟疫苗注射密度较高,但也反映出在青海省猪群中可能存在猪瘟自然强毒感染。     

Dot—ELISA检测牛副结核病抗体的研究

本文利用提纯的副结核分枝杆菌胞浆特异性抗原，建立了检测牛副结核抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法，用该方法对粪便培养阳性性的３２头份牛副结核病血清检测，检出２７头，阳性检出率为８４．４％，其敏感性与ＥＬＩＳＡ相似，与１０头ＯＴ变态反应阳性牛血清检测，无交叉反应。Ｍ－ｐｈｌｅｉＭ．ｆｏｒｔｕｉｔｕｍ．Ｍ．ｋａｎｓａｓｉｉ人工高兔血清经两次用Ｍ．ｐｈｌｅｉ悬液吸收，用建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法也无交叉反应     

2003年我省部分规模化猪场主要猪病免疫监测及其评价

2003年1～12月对全省各地200多个规模化猪场，合计3894份血清，分别进行了猪瘟、口蹄疫、伪狂犬病以及猪兰耳病等几种猪主要传染病的抗体检测。其中，在我们检测的1429份血清中，猪瘟抗体阳性有831份，阳性率为58．2％。检测的332份血清中，口蹄疫抗体阳性159份，阳性率47．9％，检测血清1232份，猪伪狂犬病全毒抗体阳性827份，阳性率67．1％：检测血清901份，其中已免生猪血清594份，兰耳病抗体阳性348份，阳性率58．6％，未免生猪血清307份，抗体阳性133份，阳性率43．3％。     

广西山羊莱姆病血清抗体的调查

1999年－2000年，对广西12个县的石山区和土丘陵区两类生态环境下活动的山羊随机采取血清1265份，用ELISA检测莱姆病血清抗体效价，其中石山区山羊血清639份，检出阳性血清5份，阳性率为0．78％，土丘陵灌丛林区山羊血清626份，检出阳性血清17份，阳性率为2．71％，总阳性率为1．73％（22／1265）。     

猪瘟疫苗免疫猪群中抗体水平的检测

应用ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ技术对猪瘟疫苗免疫猪群中的血清抗体水平进行了检测。共检测４个县的猪血样４８６份，检出血清抗体阳性４４９份，阳性率为９２．３９％，群体免疫保护率在８４．２４％～９４．２５％之间，群体均分值在８９．５～９８之间。