观赏凤梨再生体系的建立及优化*

 以5个品种（系）观赏凤梨的腋芽为外植体,研究了不同基因型、激素配比和苗龄对芽分化的影响。采用L9(34)正交试验分别针对TDZ,6-BA,NAA,IBA,蔗糖、大量元素及椰乳（CW）等因素进行优化,筛选出最佳的增殖培养基和生根培养基。结果表明：芽分化的最佳培养基为MS+TDZ 1.5mg/L +6-BA 0.5mg/L。在此分化培养基上,紫星和红星的芽分化频率较高,达76.8%,70.6%。黄星、火炬和红剑芽分化频率较低,分别为44.2%,27.4%和 24.9%。7d苗龄的腋芽外植体最适于再分化。最佳增殖培养基为MS + TDZ 0.5mg/L + 6-BA 1.0mg/L +NAA 0.2mg/L+蔗糖40g/L,其增殖系数达7.31。最佳的生根培养基为1/2MS + NAA 0.5 mg/L + IBA 1.0mg/L +CW 20mL/L,生根率达60%以上     

Regeneration system in vitro of Bromeliad distant hybrid

[目的]建立一套观赏凤梨远缘杂种离体再生培养体系,为优质新种质的工厂化生产提供参考.[方法]以观赏凤梨V‘ Christiane’×G.dissitisflora远缘杂交种子为材料,研究不同激素组合和基因型对种子愈伤组织的诱导、芽分化和无菌苗生根的影响.[结果]在添加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L的MS培养基上,株系Cd-40的增殖倍数最高,为20.43,其次为Cd-15、Cd-46.与MS培养基相比,在添加不同浓度NAA和6-BA的1/2MS培养基中,Cd-15愈伤组织增殖倍数为6.5～8.5.在含6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的MS培养基上,Cd-8、Cd-15、Cd-40的平均芽分化率和平均芽分化数均最高,分别为98.49％和18.4个/块.在E4培养基中,Cd-15、Cd-40的愈伤组织分化率和分化芽均达最高值.Cd-40无菌苗在含NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+ 6-BA 0.25 mg/L的1/2MS培养基上生根效果最好,生根率高达99.0％,平均根数为2.41条/株.[结论]在添加生长素NAA的培养基中提高6-BA的浓度有利于芽的分化,NAA是观赏凤梨无菌苗生根效果较好的激素.     

长杆观赏甘蓝下胚轴离体再生研究

以长杆观赏甘蓝(Brassica oleracea var.longata)实生幼苗下胚轴作为外植体,在附加细胞分裂素6-BA的MS培养基上,通过愈伤组织发生途径获得了再生植株,在研究中发现不同6-BA浓度(1、2、4、6 mg/L)对长杆观赏甘蓝不定芽形成有显著影响,其中在6-BA 4 mg/L培养基上的再生能力最强,每个外植体可再生出25.3个不定芽.此外,还对长杆观赏甘蓝离体培养的愈伤组织冉分化过程进行了组织学观察.     

观赏凤梨嫩吸芽离体培养中褐化防止的初步研究

把观赏凤梨的嫩吸芽置于防褐剂中浸泡切割成薄片,于消毒剂中消毒８￣１０ｍｉｎ后置于防褐剂中浸泡３０ｍｉｎ,再接种到ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上,置于黑暗条件下培养,试验结果表明：质量分数为０．０２的ＮａＣｌＯ消毒处理有加剧观赏凤梨嫩吸芽变的趋势,质量分数为０．００１的ＨｇＣｌ２消毒处理对褐变的影响不大。观赏凤梨依据褐变的程度从重到轻排列为：粉菠萝、水塔花、红星凤梨、七彩凤     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

非洲菊离体再生体系的建立

以花托为外植体，研究了6－BA与NAA的组配对花托产生不定芽及继代增殖的影响，结果表明，10mg/L6－BA与0．2mg/LNAA的且配有利于不定芽的形成，1mg/L6－BA与0．2mg/LNAA的组配有利于不定芽的增殖，0．25mg/LNAA与0．25mg/LIAA的组配有利于生根。就芽的增殖而言，用琼脂作凝胶林比用植物胶作凝胶好。     

姜花离体再生体系的建立

为建立姜花离体再生体系,对姜花离体培养过程中种子萌发诱导与不定芽增殖培养基的筛选,以及试管苗生根、移栽等关键技术进行了试验。结果表明:诱导外植体萌芽的最适培养基为MS;培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L利于诱导丛芽及增殖,芽的增殖系数可达4.76,培养基1/2 MS+IBA 0.5 mg/L适宜再生苗的生根诱导。     

卡瓦胡椒离体再生体系的建立

[目的]建立卡瓦胡椒(Piper methysticum)的离体再生体系。[方法]以卡瓦胡椒的带芽嫩茎和嫩叶作为外植体,通过在培养基中添加不同的激素组合,来筛选最佳再生培养基。[结果]卡瓦胡椒的丛芽诱导培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3+0.65%琼脂+3%蔗糖+0.012 5%PVP,最佳芽伸长根生长培养基为1/2MS+5 nmol/L JA+0.65%琼脂+3%蔗糖。[结论]为卡瓦胡椒的工业化生产提供了理论指导。     

擎天凤梨离体培养快繁试验

用擎天凤梨短缩茎做外植体培养,通过固液培养对照试验,结果表明在外植体诱导时,最佳培养基为MS(固)+6BA 2.0mg*L-1(单位下同)+NAA 0.1;继代增殖培养以MS(液)+6BA 1.0+IBA 0.1为优,培养30d,其增殖倍数可达5.8;MS(固)+6BA 0.1+IBA 3.0为较好的生根培养基.     

辣椒离体再生体系研究

以5个辣椒(Capsicum annuum L．)品种(系)为材料,针对不同基因型、苗龄、外植体种类、激 素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了较为系统的研究,从“农城椒2号”、“农城椒3号”、 “0127”、“0159”、“0171”等5个辣椒品种(系)中筛选出“农城椒2号”、“0127”、“0171”3个再生能力 较强的基因型。确定了辣椒离体再生最适外植体为子叶,最适苗龄为12-14d。筛选出高效不定芽分 化培养基(MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 5．0mg/L BA 0．5-1．0mg/L IAA),其不定芽诱导率可达98％。诱导 出的不定芽转入MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 3．0mg/L BA 1．0mg/L IAA 2．0mg/L GA3 10．0mg/L AgNO3 芽伸长培养基,不定芽伸长率最高可达47．1％。不定芽伸长后在MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 0．2mg/L I- AA 0．1mg/L NAA生根培养基上诱导不定根。待其长成发达根系后移栽大田成苗,建立了辣椒高效 植株再生体系。     

“双亚10号”亚麻离体再生体系的建立

以亚麻的成熟种子为外植体,建立了一种有效的亚麻植株再生体系。研究结果显示,亚麻的发芽培养基为B5;茎尖分化增殖的最佳培养基为MSB＋6-BA1.5 mg.L-1＋IAA0.2 mg.L-1,平均增殖系数达到10.05;生根最适培养基为1/2B5＋NAA0.02 mg.L-1,平均生根数达8条,生根率达到95%。该再生体系的建立为亚麻遗传转化研究奠定了基础。     

棉花远缘杂交种质资源的比较鉴定研究

为了丰富棉花育种基础材料,我们于1999年自中国科学院遗传所引进棉花远缘杂交种质材料150余份,这些材料分别含有海岛棉、瑟伯氏棉、草棉、索马里棉、斯特提棉、异常棉及中棉的种质,均为比较稳定的高代品系.2000～2001年在本中心临清试验站进行了系统的种植观察研究,主要考查其综合农艺性状、纤维品质特性、抗病性、熟性及产量潜力,从而对引进材料进行分类整理,并探讨其在棉花生产和育种上的利用价值.     

提高甘蔗远缘杂交后代花粉育性的研究

甘蔗远缘杂交后代通过 92-142d的光周期诱导处理后,其孕穗期提早至适宜于花粉形成与发育的 9 -10月份,它们的花粉育性,除了云F1 2000-118外,均比对照提高。另外,远缘杂交后代的花粉育性除了受温度影响外,还与种性密切相关,且双亲血缘关系越远,杂交后代的花粉育性越差。     

棉花远缘核质杂种的培育与育种应用

综述了作者所在课题组近 30年的远缘杂交工作。通过染色体加倍、胚珠离体培养等技术 ,克服远缘杂交不亲和性及杂种后代不孕性 ,成功获得了多个种间杂种和异源细胞质的质核杂种。通过进一步回交选育 ,获得了异源细胞质的抗虫种质T458、Q1 0 38及纤维品质优良的陆地棉种质J80 80、H80 8、H82 8等。育成了棉属 9个种 (种系 )细胞质同核系 ,为棉属细胞质的遗传分类及演化研究提供了基础材料 ,研究了同一细胞核背景下异源细胞质的遗传效应。中棉和异常棉胞质能显著提高陆地棉抗性。实现了陆地棉胞质的陆地棉雄性不育“三系”配套。在实现了哈克尼西棉胞质陆地棉雄性不育“三系”配套的基础上 ,进一步与海岛棉 71 - 74杂交 ,改良了恢复系。从陆地棉与异常棉的远缘杂交后代中 ,选育出哈克尼西棉基因组以外的、来自异常棉基因组的新恢复源。展望了棉花远缘质核杂种的应用前景 ,提出种间质核杂种的应用是棉花育种的新途径     

东方百合"索邦"离体培养再生体系的建立

以东方百合"索邦"的鳞片为外植体,进行组织培养技术研究.结果表明,诱导不定芽的最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,每块鳞片平均诱导4.3个不定芽,诱导率达69.23%;不定芽增殖的最适宜培养基为MS+2,4-D 4.0 mg/L,每段叶片平均分化3～4个不定芽,平均增殖率达72.5%;生根适宜培养基为1/2MS+IBA 0.3 mg/L和1/2MS+NAA 0.1 mg/L,每株平均长出8～12条根,根粗壮适宜移栽.不同部位的鳞片对不定芽诱导影响较大,外层分化能力最强,中层次之,内层最差;同一鳞片基部分化能力最强,中部次之,尖部最差;基部叶片增殖能力最强,中部次之,尖部最差.     

三倍体LA百合远缘杂交亲本的筛选

为探究三倍体LA百合是否可作为育种亲本并筛选与亚洲百合远缘杂交育性较高的组合,本研究对26个LA品种与10个亚洲百合品种进行62个组合的远缘杂交,并利用基因组原位杂交技术(GISH)对部分杂种后代进行鉴定分析。结果表明:1)三倍体LA杂种系百合通常雄性不育,但可以作母本与二倍体或四倍体亚洲百合杂交。2)与二倍体亚洲百合(AA)相比,四倍体亚洲百合(AAAA)与LA杂种系百合远缘杂交的育性普遍更高。3)筛选出了7个育性较高的亲本组合,包括 ‘Nashville’בNello’、‘Freya’בVal di Sole’、‘Desiderio’בDetroit’、‘Samur’בNello’、‘Batistero’בRegata’、‘Rousseau’בVal di Sole’和‘Ercolano’בBenlica’;对62个组合杂交结实情况的分析显示,3个LA品种(‘Freya’、‘Nashville’和‘Orange Tycoon’)作为母本较好,6个亚洲百合品种(‘Val di Sole’、‘Nello’、‘Regata’、‘Detroit’、‘Benlica’和‘Black out’)作为父本结实性较高。4)三倍体LA品种可产生非整倍体配子和基因组间的染色体重组,在百合种质渗入育种中有较大潜力。本研究为发挥三倍体LA百合育种潜力及进一步培育有商品价值的百合新品种奠定了基础。      

远缘植物试管苗嫁接及ISSR分析

本研究在已建立的小麦、绿豆、长寿花、玉米、辣木、杨桃、和宝塔菜的无菌快繁技术的基础上,采用微芽嫁接技术进行嫁接,首次获得小麦/宝塔菜、绿豆/宝塔菜、绿豆/长寿花等远缘嫁接植株;ISSR分子标记嫁接苗及其砧木与接穗,结果表明,嫁接苗有来自砧木和接穗的扩增位点,同时还具有不同于两者的特异扩增位点,并对这一结果进行了初步探讨。     

唐菖蒲离体直接再生技术的研究

以唐菖蒲品种Advanced red的籽球、无菌根为外植体,研究了不同植物生长激素种类和浓度、硝酸银、籽球切割方式等因素对唐菖蒲离体直接再生的影响.结果表明:籽球切片直接再生植株的能力最强,无菌根次之.籽球切片直接诱导不定芽再生的最佳培养基为MS 2,4-D 0.6 mg/L 6-BA 1.1 mg/L AgNO3 1.5mg/L,不定芽再生率为85.95%,平均再生芽数为14.10;籽球接种方式以横切为宜,正反面对不定芽再生均无影响,而纵切接种只产生不定根;最佳生根培养基为MS IBA 0.5 mg/L,生根率达到91.81%,单苗根数为18.97.     

两个亚洲百合品种离体再生体系的建立

以亚洲百合‘普瑞头’、‘布耐罗’2个品种的外中层鳞片为外植体,培养基以MS为基础附加不同浓度的6-BA及NAA,成功诱导出了不定芽,得出:‘普瑞头’鳞片再生较适宜的生长调节剂配比为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L（单位下同）,‘布耐罗’为MS＋6-BA 0.5＋NAA 1.0.通过对再生苗叶片不同部位的再分化实验,比较得出小鳞茎叶的叶片基部分化能力非常强,而叶片上部基本不分化,鳞茎叶基部是建立高频快速再生体系的首选材料.该文进一步探讨了适宜鳞茎叶基再生的生长调节剂配比,适宜两个品种鳞茎叶基再生的生长调节剂配比为:MS＋6-BA 2.0＋NAA 0.2、MS＋6-BA 1.0＋NAA 1.0、MS＋6-BA 0.5＋NAA 0.5.最后,研究了母株不同继代次数对叶基不定芽再生率的影响,结果表明:母株继代培养5～6代后,叶基的分化能力略微下降,约为80％