宁夏地区羊源大肠埃希氏菌的分离鉴定及耐药性检测

为了解宁夏地区羊源大肠埃希氏菌的流行情况及对常用抗生素的耐药性,对采集于宁夏地区的108份病料进行大肠埃希氏菌的分离鉴定,采用微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对分离株的最小抑菌浓度(MIC).结果表明,在108份病料中共分离到58株大肠埃希氏菌,分离率达53.7％;分离菌株中耐药株共34株(58.6％),其中15株(4...     

腹泻仔猪肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性研究

为探明仔猪细菌性腹泻肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌流行的血清型、耐药表型及耐药基因型,本试验采集了贵州省5个地（州）市7个规模化养猪场的128份腹泻仔猪肠道样本,并对采集的样本进行了大肠埃希氏菌和沙门氏菌分离与鉴定,通过动物试验鉴定菌株的致病性,利用血清学方法鉴定其血清型,并通过药敏纸片法对主要致病菌进行耐药性研究,采用PCR技术检测各致病菌株耐药相关基因,分析细菌耐药表型和耐药基因型相关性。结果显示,本研究共分离鉴定到78株致病性大肠埃希氏菌与21株沙门氏菌,致病性大肠埃希氏菌血清型以O138、O87为主,沙门氏菌血清型以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌居多;药敏试验结果表明,本试验分离到的78株致病性大肠埃希氏菌对β-内酰胺类药物耐药率达80%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均超过40%,分离鉴定的21株沙门氏菌对氨基糖苷类药物耐药率达50%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均达20%以上;本试验分离鉴定的致病性大肠埃希氏菌共检出12种耐药相关基因,沙门氏菌共检出10种耐药相关基因,两种细菌耐药基因型与耐药表型符合率均达60%以上,且均为多重耐药。本研究为仔猪腹泻的综合防控提供了理论依据。     

鸡源大肠埃希氏菌流行病学调查及耐药性分析

为了解广东韶关地区鸡源大肠埃希氏菌的流行病学及其耐药性特点,本研究通过2022年对采集自广东韶关地区41个规模养鸡场和28个土鸡散养场的鸡喉头、肛门粪便、病死鸡的肝脏、心血、脾、肠道内容物共737份样品进行细菌分离纯化、病原菌的生化鉴定和药敏试验,研究广东韶关地区鸡源大肠埃希氏菌的流行病学及其耐药性特点。结果显示,541份样品分离到大肠埃希氏菌,检出率73.41%,总体泄殖腔大肠埃希氏菌检出率87.78%,咽喉部大肠埃希氏菌检出率58.24%,死鸡病料大肠埃希氏菌检出率78.38%,规模场大肠埃希氏菌检出率为73.72%,散养场大肠埃希氏菌检出率为73.01%。分离菌株普遍对阿奇霉素、头孢噻肟、阿米卡星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星敏感,对青霉素、氨苄西林、链霉素、卡那霉素、四环素、阿莫西林、氟苯尼考、泰乐菌素、林可霉素、克林霉素耐药,多重耐药比高达79.71%。规模场分离菌多重耐药比为97.56%,散养场多重耐药比为53.57%。本研究为广东韶关地区鸡源大肠杆菌病的防控提供了参考。     

青岛地区鸡源大肠埃希氏菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查青岛地区鸡源大肠埃希氏菌的流行性及耐药情况,从青岛部分规模化养殖场随机采集185份鸡泄殖腔拭子,通过选择性培养基和16S rRNA进行大肠埃希氏菌分离纯化和菌属鉴定,采用琼脂稀释法对11种抗菌药物进行药敏试验并应用PCR检测碳青霉烯类、β-内酰胺类、黏菌素类和四环素类耐药基因。结果显示共分离到173株大肠埃希氏菌,分离率为93.50%。药敏试验结果表明,分离菌株对阿莫西林、头孢氨苄、四环素等8种抗菌药物耐药率为61.27%～100.00%,对美罗培南、亚胺培南、替加环素耐药率为0.58%～30.06%。分离菌株均表现为多重耐药(3耐～10耐),以7耐～8耐为主。耐药基因检测显示,bla_CTX-M和tetA检出率为95.95%和90.75%,其他耐药基因的检出率为3.47%～37.90%。结果表明,山东省青岛地区鸡源大肠埃希氏菌耐药率较高,多重耐药情况严重,给食品安全及公共健康造成了潜在威胁。     

广东水禽源大肠埃希菌耐药性及氨基糖苷类耐药基因研究

为了调查广东地区水禽源大肠埃希菌对氨基糖苷类药物耐药现状和耐药基因的流行情况,探索大肠埃希菌的氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型之间的关系,本研究采用琼脂梯度稀释法测定251株广东地区水禽源大肠埃希菌对氨基糖苷类药物的耐药性和采用PCR方法检测耐药基因。药敏试验结果显示,大肠埃希菌对链霉素耐药较严重,鸭源和鹅源的耐药率分别为81.58%和75.43%,对庆大霉素和卡那霉素较敏感,耐药率分别为25%和54.86%,对阿米卡星最为敏感,其中鸭源的菌株耐药率仅为1.32%。PCR方法检测显示,aadA1和aph(3′)-1检出率较高,为84.6%和91.9%,表明携带aadA1和aph(3′)-1耐药基因的水禽源大肠埃希菌在广东地区呈流行趋势。耐药基因型与耐药表型相关性分析结果显示,耐药基因rmtB的携带与4种药物(庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素和壮观霉素)耐药株的产生具有显著相关性,表明耐药基因rmtB对大肠埃希菌耐药株的产生起重要的作用。本试验结果可为指导广东地区水禽大肠埃希菌病的临床用药提供理论基础和研究大肠埃希菌的耐药基因提供相关的数据。     

流浪犬源大肠埃希菌对氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药性检测

为选择有效治疗流浪犬大肠杆菌病药物,从成都市双流爱之家动物救助中心采集流浪犬粪便进行细菌分离与鉴定,测定其对6种临床常用氟喹诺酮类(二氟沙星、诺氟沙星、沙拉沙星)和氨基糖苷类(阿米卡星、安普霉素和卡那霉素)抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,分离的267株大肠埃希菌对二氟沙星、诺氟沙星和沙拉沙星耐药率分别为56.2%、46.7%和22.1%;对阿米卡星、安普霉素和卡那霉素的耐药率分别为6.0%、6.7%和30.7%;分离菌株对沙拉沙星和阿米卡星最敏感,可优先选择沙拉沙和阿米卡星进行流浪犬大肠杆菌病防治。     

宁夏地区牛源产与非产ESBLs大肠埃希氏菌耐药性差异比较

旨在明确宁夏地区牛腹泻源与健康源大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株及非产ESBLs菌株的耐药性差异.采集牛肛拭子样本277份,采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选,进行生化鉴定和PCR鉴定,采用K-B纸片法进行药物敏感性试验,用ESBLs表型检测方法进行产ESBLs菌株的筛选.结果显示,分离得到14...     

鸡源大肠埃希氏菌多药耐药性的监测与分析

鸡源大肠埃希氏菌病的临床上多采用抗菌药物进行防治,一方面增加养殖成本;另一方面由于抗菌药的不合理应用或滥用,助长了耐药菌株的产生、耐药性增强和耐药谱的扩大。特别是多重耐药现象的出现,不但给临床防治带来了困难,而且对食品安全和人医临床也构成潜在的危害。本试验对临床分离的鸡源大肠杆菌进行耐药性监测,旨在了解和掌握鸡群中大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度,为临床用药和控制该病的流行提供科学依据。     

奶牛乳房炎源大肠埃希氏菌的耐药性分析和毒力基因检测

为了解奶牛乳房炎大肠埃希氏菌耐药性、毒力基因携带及分布情况,从2019年9月至2020年6月在新疆乌鲁木齐、伊犁、昌吉地区的7个奶牛场共采集了142份乳房炎奶牛牛乳样本,采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选,利用生化试验和16S rDNA PCR方法鉴定出大肠埃希氏菌,用K-B纸片扩散法对分离株进行耐药性检测,PC...     

鸡源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

为探明泰州地区鸡源大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药情况,对13株分离自泰州地区的鸡源大肠杆菌进行ESBLs检测,并采用微量肉汤稀释法测定不同药物对产ESBLs菌和非产ESBLs菌的最小抑菌浓度(MIC).结果显示,13株分离菌中有5株被确定为产ESBLs菌株,阳性率为38.5%.产ESBLs菌对β-内酰胺类抗菌药的耐药性极其严重,耐药率明显高于非产ESBLs菌,二者对氨苄西林的耐药率分别为100%和62.5%,对头孢噻呋的耐药率分别为100%和12.5%,对头孢曲松的耐药率分别为80%和20%,产ESBLs菌对其他抗菌药物的耐药率也明显高于非产ESBLs菌.氨苄西林与舒巴坦(2:1)联用与单用氨苄西林相比,对产ESBLs菌的MIC值降低至单用氨苄西林时的1/16~1/8,但对非产ESBLs菌的MIC值没有明显变化.氨苄西林与阿米卡星(1:1)联用与单用两者中的任何一种相比,对产ESBLs菌和非产ESBLs菌的MIC值均降低至单药时的1/16~1/2.结果表明,临床可选择β-内酰胺酶类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂来治疗产ESBLs鸡大肠杆菌的感染,也可尝试将不同种类、不同作用机理药物联合应用来治疗鸡大肠杆菌感染,尤其是耐药性鸡大肠杆菌感染.     

鸭大肠杆菌ESBLs的检测及耐药性分析

本文对临床分离的12株鸭大肠杆菌进行了ESBLs检测,并用K-B纸片法测定了其对常见几种抗菌药物的敏感性,以期为抗菌药的临床合理应用提供依据.结果表明:临床分离的12株大肠杆菌中有4株产ESBLs,检出率为33%.产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率都高达100%,而不产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率均为87.5%;4株产酶菌中对氨苄西林、氨曲南耐药率分别为75%、50%,而8株不产酶菌对其耐药率分别为62.5%、0.0%,可见产酶菌的耐药率明显大于不产酶菌.同样,对于氨基糖苷类、喹诺酮类等其他抗菌药物也出现此种情况,说明产酶菌对这些药物存在多重耐药性.所以,临床中应注意通过药敏试验合理选用药物.才能取得好的治疗效果.     

鸭大肠杆菌ESBLs的检测及耐药性分析

本文对临床分离的12株鸭大肠杆菌进行了ESBLs检测,并用K-B纸片法测定了其对常见几种抗菌药物的敏感性,以期为抗菌药的临床合理应用提供依据。结果表明：临床分离的12株大肠杆菌中有4株产ESBLs,检出率为33％。产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率都高达100％,而不产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率均为87．5％;4株产酶菌中对氨苄西林、氨曲南耐药率分别为75％、50％,而8株不产酶菌对其耐药率分别为62．5％、0．0％,可见产酶菌的耐药率明显大于不产酶菌。同样,对于氨基糖苷类、喹诺酮类等其他抗菌药物也出现此种情况,说明产酶菌对这些药物存在多重耐药性。所以,临床中应注意通过药敏试验合理选用药物,才能取得好的治疗效果。     

猪源分离大肠埃希菌产ESBLs的基因型及耐药性分析

为了解上海地区规模化猪场分离的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分离率、耐药性和基因型,收集2010年9月-2011年3月从上海地区10个规模化养猪场分离的296株大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验以及PCR技术分别检测TEM、CTX-M、OXA和SHV基因。在296株大肠埃希菌中,52株大肠埃希菌产ESBLs,产酶率为17．6％。在52株ESBLs菌株中,46株为TEM型,占88．5％;15株为CTX—M型,占28．8％;11株为同时携带TEM型和CTX—M型,占21．2％。大肠埃希菌产ESBLs株对10种常用抗菌药物的耐药性较为严重,而且存在多重耐药;上海地区猪源大肠埃希菌产ESBLs株流行的主要基因型为TEM型和CTX—M型。     

猪场环境大肠杆菌qnrA和aac(6') - Ib基因检测

为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)- Ib - cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)- Ib基因,测序分析aac(6’)- Ib - cr基因变异体,并用药敏纸片琼脂扩散法测其对...     

羔羊源产ESBLs与非产ESBLs大肠埃希氏菌耐药性差异比较及基因型分析

为了明确宁夏地区羔羊源大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与非产ESBLs大肠埃希氏菌的耐药性差异和相关基因携带情况差异,对实验室分离保存的87株羔羊源大肠埃希氏菌,采用ESBLs表型检测方法筛选产ESBLs的菌株和K-B纸片法进行药物敏感性试验,采用PCR法对分离株进行相关基因的检测。结果显示,87株大肠埃希氏菌中5株为产ESBLs菌株,检出率为5.75%。产ESBLs株对多数试验药物呈耐药性;而非产ESBLs菌株对多数试验药物敏感,仅对恩诺沙星、复方新诺明和红霉素耐药率超过50%。20种药物中,产ESBLs株大肠埃希氏菌对18种药物的耐药率极显著高于非产ESBLs菌株(P<0.01)。产ESBLs菌株携带blaCTX的阳性率极显著高于非产ESBLs菌株(P<0.01),产ESBLs菌株中的blaTEM和blaOXA基因的阳性率均高于非产ESBLs菌株,但差异不显著(P>0.05)。结果表明宁夏地区羔羊源大肠埃希氏菌产ESBLs菌株流行率低,产ESBLs菌株耐药性严重,且宁夏地区羔羊源ESBLs菌株优势基因型为blaCTX和blaTEM。     

宁夏地区犊牛腹泻型产ESBLs大肠埃希氏菌的筛选及相关基因型分析

旨在明确宁夏地区犊牛腹泻型产ESBLs大肠埃希氏菌的阳性率及相关基因型的携带情况。采集犊牛腹泻样本180份,采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选,疑似大肠埃希氏菌的菌株进行PCR鉴定,用ESBLs表型检测方法进行产ESBLs菌株的筛选,用PCR进行相关基因的检测。结果显示,共鉴定出大肠埃希氏菌74份,51株为产ESBLs菌株,检出率为68.92%(51/74),其中bla-TEM、bla-CTX、bla-CTX-M-9基因阳性率均为100%,bla-OXA基因阳性率为50.98%,bla-SHV基因阳性率为23.53%。分离株携带CTX+CTX-M-1+CTX-M-9+TEM基因的菌株占比最高,为21.57%。结果表明,优势基因型为bla-TEM、bla-CTX和bla-CTX-M-9。     

宁夏地区腹泻犊牛产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌的药敏试验及脉冲场凝胶电泳分型

为了解宁夏地区规模化牛场犊牛腹泻源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌耐药和遗传变异情况,对分离得到的17株产ESBLs大肠埃希氏菌,采用K-B纸片法进行药物敏感性试验,采用脉冲场凝胶电泳进行分型研究。结果显示,17株分离株对试验药物多数呈耐药状态,对头孢拉定、四环素、阿莫西林3种药物完全耐药,其他药物的耐药性为70.24%～94.12%,只对阿米卡星、诺氟沙星敏感性较高。分离菌株可分为17个PFGE型,菌株间的相似度为67.5%～85.7%,无优势带型。宁夏地区犊牛腹泻源产ESBLs大肠埃希氏菌耐药性严重,遗传差异较大,但不同菌株存在着不同程度的亲缘关系。     

重组减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13(pcDNA3-HN)在雏鸡体内主要组织器官定植情况检测

为检测重组减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）在雏鸡体内主要组织器官定植情况,本研究将120只1日龄雏鸡随机分成3组,分别用减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13、重组减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）和PBS免疫,在免疫后4、24、48、72、96、120、144及168 h,分别检测减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13和重组减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）在雏鸡心脏、肝脏、脾脏、盲肠和血液的定植情况。结果显示,在免疫后24 h减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13在血液中数量达到了一个峰值,24～48 h血液细菌数量下降,48～96 h血液中细菌数上升并在96 h达到另一个峰值,96～168 h血液中细菌数量下降,在心脏、肝脏、脾脏、盲肠这几个脏器中,细菌的数量分别在4～72 h呈上升趋势并在72 h达到峰值,72～96 h脏器细菌数量下降,96～120 h菌数上升并在120 h达到峰值,随后细菌数量下降;免疫重组减毒沙门氏菌ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）组在雏鸡各脏器细菌总数变化及定植情况与ΔcrpC79-13相似。结果表明,重组菌株ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）与亲本菌株ΔcrpC79-13均可在雏鸡心脏、肝脏、脾脏、盲肠等器官定植,且在各脏器中菌株定植变化趋势一致但数量下降。     

4单抗和3单抗夹心EKlSA的建立和对腹泻仔猪粪样中大肠埃希氏菌k_(88)、k_(99)、987P和F_(41)粘附素抗原的快速检测和鉴定

运用抗产肠毒素性大肠埃希氏菌粘附素(k_(88)、k_(99)、987P、F_(41))单克隆抗体建立了检测临床粪样中这些粘附素抗原的4单抗和3单抗夹心ELISA,经过对人工致病和1038例自然发生腹泻仔猪粪样的检测证明,我们建立的这种ELISA具有灵敏、准确、快速.快速经济的特点.