稀释液·清洁剂·冷冻程序对猪精液冷冻效果的影响

探讨了稀释液、清洁剂及冷冻程序对猪精液冷冻保存效果的影响。结果显示:①稀释液Ⅳ保存鲜精,精子活率明显低于其他组(P<0.05);但其作为冻精的解冻稀释液时,效果最佳(P<0.05),说明猪精液冷冻保存时可采用第Ⅰ～Ⅲ组稀释液,而解冻时采用第Ⅳ组较佳。②稀释液中于不同阶段添加SDS(Sodiumlaurylsulfate,十二烷基硫酸钠)或OEP(OrvusESPaste,清洁剂)均能显著提高冷冻精子活率(P<0.05),SDS与OEP对冻精活率的影响无显著差异(P>0.05)。③精液冷冻程序采用-70℃、液氮熏蒸与直接液氮熏蒸在对解冻后冻精精子活率上无显著差异(P>0.05)。添加咖啡因能有效提高冻精的解冻后活率。     

猪精液冷冻稀释液配方的筛选

本试验优选出的冷冻稀释液1号和2号配方,冻精活率达0.5,解冻后精子在38～40℃恒温下存活指数分别为1.98±0.64和2.27±0.62。应用日立 H-800型透射电子显微镜对冻精进行超微结构观察,精子顶体完整率分别达59.61%和63.54%。2号配方的冷配情期受胎率达70.57%,其顶体完整率与受胎率呈正相关。     

犬精液冷冻实验研究

以豫西土犬为实验材料,以改进犬冻精的品质为目的,进行了犬精液冷冻研究。实验1,采集6条公犬的浓份精液36次,分别在稀释液Ⅰ和Ⅱ中冷冻成三种剂型(颗粒、0.5mL细管和安瓿),根据解冻后活率比较优劣。研究表明,稀释液Ⅰ中三种剂型的平均解冻后活率(0.35±0.04)显著高于稀释液Ⅱ(0.23±0.05;P<0.01);两种稀释液中颗粒冻精的平均冻后活率(0.34±0.08)显著高于细管(0.26±0.09;P<0.01)和安瓿(0.25±0.08;P<0.01),细管和安瓿冻后活率差异不显著(P>0.05)。实验2,分别将6条公犬每次采集的精液(每条采6次),按同样的方法稀释、平衡、分装,而后将分装的细管分为两组,分别采用程序Ⅰ和程序Ⅱ进行冷冻,其冻后活率分别为0.47±0.10和0.34±0.05(P<0.01);复苏率分别为57.86±8.85和42.27±3.80(P<0.01);顶体完整率分别为34.47±5.20和29.77±4.37(P<0.01)。结果表明:程序Ⅰ的冷冻效果明显优于程序Ⅱ。     

杜泊绵羊细管冻精与湖羊人工授精研究

在4种不同冷冻稀释液制备的杜泊绵羊细管冻精稀释液中,以葡萄糖1.6 g、蔗糖2.0 g、柠檬酸1.38g、Trs 2.42 g、重馏水100 ml、卵黄20 ml、青霉素钾10 IU配方解冻后精子活率最高,与其他3组相比差异极显著(P<0.01)。将此稀释液细管冻精用于人工授精,妊娠率达到62%。     

驴精液冷冻保存的研究

试验以解冻后精子的活力、顶体完整率、顶体膨胀率、顶体破损率、尾部畸形率等几个重要评定指标为依据,筛选了几种驴冻精的冷冻稀释液配方,将其中较好的稀释液作为对照组,再分别进行细管冻精、颗粒冻精和添加不同剂量安钠咖的对比试验.结果表明:5号稀释液的冻后精子活力要显著高于其他4种稀释液(P0.05),精子活力达到0.31,顶体完整率达62.8%;细管冻精的活力要显著高于颗粒冻精(P0.05);在冷冻液中添加安钠咖2mg·mL-1能显著提高解冻后精子的活力(P0.05),使顶体的膨胀率降低9%.     

猪精液颗粒冷冻技术的研究

为提高猪冻精质量,加速猪冻精在生产上的应用,本试验以解冻后的精子活率、顶体完整率和体外受精(IVF)结果作为判定指标,探讨了冷源和Equex.STM对猪精液颗粒冷冻效果的影响。手握法采集成年、健康种公猪精液,分别采用含有Equex.STM的稀释液和普通稀释液进行两步法稀释,然后以干冰或液氮为冷源进行精液冷冻。结果表明,以干冰为冷源滴冻精液冻后活率为0.487833±0.046761,顶体完整率为0.782±0.039704,而以液氮为冷源的方法冻后活率为0.3334±0.055734、顶体完整率为0.5578±0.068482,前者在这两项指标上均显著优于后者(P<0.05)。另外,在稀释液中添加Equex.STM,以干冰为冷源进行滴冻,可使冻精顶体完整率极显著提高(P<0.01)。以含有Equex.STM的稀释液采用干冰滴冻的冻精进行IVF,胚胎卵裂率、囊胚率分别为0.5316±0.125582和0.216±0.053198。结果表明,采用Equex.STM作为冷冻保护剂并以干冰作为冷源可以获得高质量的猪冷冻精子。     

不同稀释剂对猪冷冻精液的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液,在37℃下离心,弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,用7种不同的稀释液进行稀释,应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明,在7种稀释液中,7号稀释液优于其他6种稀释液(p<0.05);与其他的冷冻保护剂相比,甘油的冷冻保护性能较好(p<0.01),其适宜浓度为2~4ml/l;干解冻(40~45℃)效果优于湿解冻,解冻后精子活率达0.46~0.49(p<0.05);稀释液中添加安钠咖可有效地延长精子的冻后存活时间(p<0.01)。     

谷胱甘肽(GSH)对绵羊细管冻精质量的影响

研究了在绵羊冻精稀释液中添加不同浓度(0、1、2、2.5、3 mmol/L)的谷胱甘肽(GSH)对细管冻精质量及体外受精的影响。结果显示:在绵羊精子的冷冻稀释液中添加1 mmol/L GSH具有最好的效果,可以显著地增加冷冻解冻精子的活力以及精子质膜、顶体膜和DNA的完整性,还可以在一定程度上提高体外受精的卵裂率及囊胚率。     

谷胱甘肽(GSH)对绵羊细管冻精质量的影响

研究了在绵羊冻精稀释液中添加不同浓度(0、1、2、2.5、3 mmol/L)的谷胱甘肽(GSH)对细管冻精质量及体外受精的影响。结果显示:在绵羊精子的冷冻稀释液中添加1 mmol/L GSH具有最好的效果,可以显著地增加冷冻解冻精子的活力以及精子质膜、顶体膜和DNA的完整性,还可以在一定程度上提高体外受精的卵裂率及囊胚率。     

添加V_(B_(12))、V_E、V_C对无角道塞特绵羊精液冷冻效果的影响

探讨在无角道塞特绵羊冷冻精液稀释液中添加VB12、VE、VC对精子冷冻品质的影响。在无角道塞特绵羊冷冻精液稀释液中添加不同质量浓度的VB12、VE、VC制作细管冻精,解冻后观察精子的成活率和顶体完整率等指标。结果显示,VB12添加0.003 g/L时能够显著提高解冻后的精子活率(P0.05)和精子顶体完整率(P0.05);VE添加2.5 g/L时,能够极显著提高解冻后的精子活率(P0.01)和顶体完整率(P0.01);VC的添加4.4 g/L时能够显著提高解冻后的精子活率(P0.05),但对冷冻后精子的顶体完整率无影响。在稀释液中添加VB12、VE和VC能使解冻后精子品质得到提高。VE添加后能够极显著提高冷冻精子的顶体完整率,应该优先考虑添加。     

Study on Semen Freezing Preservation of German Shepherd Dogs

In order to prolong semen preservation and improve pregnancy rate, semen freezing was studied with German shepherd dogs for experimental animals. The semen of four dogs was collected 40 times in four d...     

德国牧羊犬精液冷冻保存的研究

以德国牧羊犬为实验动物,用两种不同的冷冻方法和剂型对犬的精液进行冷冻,以冻精解冻后的活率作为评定指标,提高犬精液利用效率和扩大犬精液的使用范围。采集4条公犬的精液40次,分别在四种稀释液中稀释,冷冻成两种剂型,根据冻后活率比较优劣。结果表明,稀释液2颗粒冻精的冻后活率显著高于稀释液1、稀释液3和稀释液4(P0.05);对犬的精液进行炸熏法和程序冷冻法冷冻,炸熏法冷冻的精液冻后活率均显著高于程序冷冻法冷冻的精液(P0.05)。     

维生素C对藏西北绒山羊精液冷藏效果及 其全基因组DNA甲基化的影响

[目的]研究维生素C对4℃保存藏西北绒山羊精液效果及其全基因组DNA甲基化的影响,为高效利用藏西北绒山羊种公羊精液及推广其人工授精技术打下基础.[方法]假阴道人工采集藏西北绒山羊种公羊新鲜精液,用维生素B12进行4倍稀释后添加不同浓度的维生素C(0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0 mg/mL),4℃保存24 h,观察统计其精子活力、精子顶体完整率和质膜完整率,并通过实时荧光定量PCR检测精子全基因组DNA甲基化的情况.[结果]藏西北绒山羊精液4℃保存24 h后,以添加8.0 mg/mL维生素C的效果最佳,对应的精子活力、精子顶体完整率和质膜完整率分别为(73.41±0.47)%、(58.89±0.88)%和(68.76±0.81)%,3个指标均极显著高于未添加维生素C的空白对照组(P<0.01).添加8.0 mg/mL维生素C的藏西北绒山羊精子全基因组DNA甲基化水平与新鲜精液的接近,均显著低于未添加维生素C的冷藏精液(P<0.05).[结论]原精液中添加2.0 mg/mL维生素C可降低4℃保存藏西北绒山羊精液的全基因组DNA甲基化异常水平,提高藏西北绒山羊精液冷藏效果.     

绵羊冷冻精液平衡方法研究

不同体积水浴平衡法和8层纱布包被平衡法对绵羊冷冻精液品质影响比较研究的结果表明:250 mL和200 mL 38 ℃ 体积水浴平衡的冷冻精子的活率、生存指数、顶体完整率分别为0.43和0.45、3.57和3.55,47.60 %和47.98 %,显著高于150 mL、100 mL、50 mL 38 ℃体积水浴和8层纱布包被平衡冷冻精子的活率、生存指数、顶体完整率(P<0.05);250 mL和200 mL38 ℃ 体积水浴平衡的冷冻精子GOT释放量分别为303.33和303.86(UL-1)(P<0.05)。200 mL38 ℃ 体积水浴平衡到达4℃的时间比250 mL38 ℃ 水浴平衡缩短0.5 h,因此,推荐生产实践中应用200 mL 38 ℃ 体积水浴2.5 h降温到4℃的平衡方法。     

四种冷冻保护剂对鸡精液冷冻效果的比较

采用浓度为12%的甘油、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、二甲基甲酰胺(DMF)作为冷冻保护剂,分别添加到A液(乙酸钠、柠檬酸钠、谷氨酸钠、磷酸氢二钾、果糖、TES);B液(氯化镁、乙酸钠、柠檬酸钠、谷氨酸钠、果糖、EDTA-Na2)2种基础液中,进行常温保存和冷冻试验.常温保存结果发现:甘油对精子毒害作用最大,在A、B 2种基础液中精子生存指数分别为(8.40±0.114),(8.30±0.055)(P<0.01);其次是DMF,而DM-SO及DMA对精子的毒害作用最小.冷冻保存结果发现,以DMSO和DMA作为冷冻保护剂,精子解冻后活率优于DMF和甘油(P<0.01).     

季节变化对夏洛来种公牛精液品质的影响

从洛阳市白马寺种公牛站挑选年龄、健康状况相近且性欲旺盛的夏洛来种公牛5头,对其生产性能指标按春(3—5月)、夏(6—8月)、秋(9—11月)、冬(12—2月)4个季节连续五年的记录进行统计分析。结果表明:(1)采精量随季节变化不明显(P>0.05)。(2)原精活力:夏季(0.46±0.04)与春(0.70±0.01)、秋(0.65±1.01)、冬季(0.69±0.01)差异极显著(P<0.01)。(3)冻后活力:春、秋、冬季均极显著高于夏季(P<0.01),说明季节对夏洛来种公牛精液冻后活力具有明显影响。(4)精液密度:夏季与春、冬季差异极显著(P<0.01),夏季与秋季差异显著(P<0.05)。(5)精液冻后畸形率:夏季的夏洛来种公牛精子冻后畸形率极显著地高于其它季节(P<0.01)。(6)精液冻后的顶体完整率:夏季的夏洛来种公牛冻精顶体完整率极显著地低于冬、春季节(P<0.01),显著地低于秋季(P<0.05)。     

除精浆提高冷冻精液品质的实验研究

采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现:1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0．05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0．05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0．05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液．两者之间无显著差异(P>0．05)。     

加丽素红混合物对血鹦鹉鱼体色和生理指标的影响

试验研究了在基础饲料中添加加丽素红、维生素E、磷脂的混合物对血鹦鹉鱼(Cichlasoma synspilum×Cichlasoma citrinellum)体色和生理指标的影响。试验设3个处理,分别为对照组(处理A),0.7%加丽素红与0.3%维生素E组(处理B),0.7%加丽素红与0.3%磷脂组(处理C),养殖30 d,测定血鹦鹉鱼体内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、类胡萝卜素、谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)等指标。结果表明,处理B血鹦鹉鱼亮度和红度显著高于其他组(P0.05);处理B终体重、增重率、特定生长率显著高于其他组(P0.05)。3个处理间血鹦鹉鱼肝胰脏、肌肉和皮肤中类胡萝卜素含量差异不显著。血鹦鹉鱼肝胰脏中,处理B SOD、CAT活性显著高于其他组(P0.05),处理B MDA活性显著低于其他组(P0.05)。3个处理血清中GOT和GPT含量差异不显著(P0.05)。在基础饲料中添加0.7%加丽素红与0.3%维生素E对鹦鹉鱼的体色、生长和抗氧化系统效果较好。