流式细胞术应用及植物种质资源倍性研究进展

流式细胞术是一种应用流式细胞仪进行分析和分选的方法,该方法操作简捷,高效,且对样品的破坏性小。近年来,科学技术不断进步、农业不断发展,但很多古老的资源却逐渐消失。因此,植物种质资源的保护和合理的开发利用是当前科研的一项重要工作,且植物种质资源是作物遗传育种与创新的重要物质基础,而其倍性的鉴定则是了解其遗传背景和进一步应用的基础。目前,流式细胞术应用于多个领域,如在医学领域、生物学领域等,但在植物种质资源倍性鉴定上的应用较少。本文综述了近几年流式细胞术的发展及在医学、生物学领域和植物种质资源倍性鉴定上的应用。     

流式细胞仪测定百合花粉倍性的研究

[目的]为利用百合未减数花粉进行有性多倍化育种。[方法]利用流式细胞仪测定百合花粉的倍性,以Marlon、Viviana的花粉为材料,以叶片为对照,比较两种不同细胞核提取液的效果差异。[结果]Cy Stain UV Precise T提取液明显优于WPB提取液;Marlon、Vivian叶片测定结果显示其为二倍体,花粉测定的图像显示两个品种都能自发产生2n花粉。[结论]流式细胞仪可以快速地测定百合花粉的倍性。     

流式细胞仪在果树作物倍性鉴定上的应用

综述了流式细胞仪的发展历史、工作原理、使用方法及其在果树作物倍性鉴定上的应用进展,并对存在问题及今后的研究提出了建议。     

流式细胞术检测乌克兰鳞鲤倍性

[目的]筛选测定乌克兰鳞鲤（Cyprinus carpio）倍性的合适的方法。[方法]建立3种流式细胞术样品制备方法：肾组织单细胞悬液法、红细胞甲醛固定法和红细胞乙醇固定法。采用BD FACS tar Puls型流式细胞仪测定倍性。[结果]3种制样方法均能得到结果,但红细胞甲醛固定法最佳。[结论]流式细胞术可精确、快速地检测乌克兰鳞鲤倍性,适应其多倍体产业化的需要。     

基于流式细胞仪鉴定菊芋倍性方法的建立及应用

【目的】利用流式细胞仪检测菊芋种质的染色体倍性,为菊芋的种质鉴定及遗传育种研究提供基础数据。【方法】建立基于流式细胞仪检测菊芋倍性的检测体系,并针对不同电压（（340,365.3和422 V））、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)添加与否、取样部位（老叶、嫩叶、块茎和根）对体系进行优化。利用建立的稳定优化体系对302份菊芋种质资源的倍性进行检测。【结果】针对菊芋材料,选取幼嫩叶片,在样品处理时添加PVP溶液消除多酚及多糖物质的干扰,检测电压选用365.3 V,以流式细胞仪进行倍性检测的效果较好,准确性较高。302份菊芋种质资源倍性检测结果表明,整体变异系数在2.17~9.74,二倍体共3份,仅占资源总数的0.99%;四倍体共25份,占资源总数的8.28%;六倍体共274份,占资源总数的90.73%。【结论】基于流式细胞仪建立的菊芋种质资源倍性鉴定方法检测效果较好,准确性较高。     

流式细胞术(FCM)在贝类倍性检测中的应用

对某种生物来说 ,体内细胞核内所含的DNA量总是一定的。利用流式细胞仪(FCM)可在短时间内准确测出细胞中DNA的含量 ,鉴别有机体的倍性。作者系统地介绍了用流式细胞仪检测鲍鱼、牡蛎、扇贝等经济贝类倍性的方法 ,包括机械法、化学法、抽取血液法及固定贝样的制备法等。另外 ,还报道了实验中新发现的一些现象 ,如牡蛎嵌合体及诱导过程中的非整倍体等。     

流式细胞术(FCM)在贝类倍性检测中的应用

对某种生物来说,体内细胞核内所含的ＤＮＡ量总是一定的。利用流式细胞仪（ＦＣＭ）可在短时间内准确测出细胞中ＤＮＡ的含量,鉴别有机体的倍性。作者系统地介绍了用流式细胞仪检测鲍鱼、牡蛎、扇贝等经济贝类倍性的方法,包括机械法、化学法、抽取血液法及固定贝样的制备法等。另外,还报道了实验中新发现的一些现象,如牡蛎嵌合体及诱导过程中的非整倍体等。     

利用流式细胞仪检测草莓倍性方法的优化

[目的]建立一套利用流式细胞仪快速鉴定草莓倍性的方法,为草莓新品种选育提供技术支持.[方法]以二倍体森林草莓、四倍体东方草莓、六倍体智利草莓和八倍体凤梨草莓为试材,通过改良提取液、增加离心和过滤次数等,应用流式细胞仪对大田生长的草莓植株根尖、茎尖和幼叶进行倍性检定.[结果]不同部位材料检测峰值有所不同,其中匍匐茎茎尖和根尖的细胞检测效果优于幼叶;在提取液中加入巯基乙醇,可使荧光通道值峰形更饱满;增加离心次数和上机前再过滤,可使峰值更清晰.[结论]利用流式细胞仪检测草莓倍性的优化条件为:采用匍匐茎茎尖或根尖的细胞为检测试材,在常规提取液中添加巯基乙醇来制备DNA悬浮液,DNA悬浮液离心漂洗3次后经300目尼龙网过滤再上机检测.     

流式细胞术检测草莓倍性的方法优化

以草莓品种章姬、自育品种C1、二倍体野生种的叶片和根尖为试验材料,比较了2种提取液制备的细胞核悬浮液经流式细胞术检测的结果。结果表明:WPB提取液的效果较好,背景细胞碎片少,G0/G1峰清晰;叶片取材容易,杂质少,更适合作为试验材料。     

一种快速的木本植物倍性检测方法

利用流式细胞仪对泡桐、悬铃木、刺槐三种木本植物进行了DNA含量测定和倍性分析,通过对3种木本植物的样本检测和分析结果．研究认为流式细胞仪在检测木本植物DNA含量和倍性分析上结果比较稳定一致,通过对大量样本的保存,处理方法及上样量对其检测结果影响的研究。得出流式细胞仪在木本植物DNA含量和倍性综合高效快速检测方法,从而为木本植物的遗传育种．倍性快速鉴定等方面提供理论依据。     

流式细胞仪

随着科技水平的不断深入,科研设备的不断更新,国家对科研投入的不断增多,植物检测技术也得到了进一步的发展。流式细胞仪植物检测技术是近几年在我国刚刚兴起的一项新技术,对许多植物科技工作者来说还比较陌生。本文用比较通俗的语言介绍了进行流式细胞仪分析所必须的基本概念、发展历史、工作原理、知名品牌、常见型号及其在植物上的应用。     

基于流式细胞仪对不同品种泡桐倍性 及白花泡桐基因组大小的测定

采用流式细胞仪技术,以白花泡桐、台湾泡桐、楸叶泡桐及鄂川泡桐的幼嫩叶片为材料,用LB01解离液获得细胞核悬浮液,并用碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)荧光染料进行细胞核染色,建立了一套适于不同品种泡桐倍性及白花泡桐基因组大小测定的方法。利用该方法,以不同品种泡桐的已知二倍体为对照,测得不同品种泡桐四倍体植株的相对荧光强度是二倍体的倍数范围均在2±0. 13,符合四倍体细胞核DNA含量的特征;以已知基因组大小的芝麻(Sesamum indicum)和番茄(Solanum lycopersicum)为内标,测得白花泡桐二倍体(B2)的基因组大小为528. 24 Mb,白花泡桐四倍体(B4)的基因组大小为1 019. 94 Mb。     

利用流式细胞术检测甜菜染色体倍性和DNAC-值

[目的]研究流式细胞技术快速、准确、方便测定甜菜体内染色体倍性和DNAC-值,为甜菜染色体倍性、分子生物学领域的相关研究提供参考依据.[方法]以二倍体M39-8-4嫩叶为材料,以已知基因组的新疆野杏洛浦洪待克为外标,建立适合于甜菜染色体倍性和基因组的流式细胞术测定方法.[结果]经7种常用细胞解离液筛选,Marie's为...     

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相关近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的     

植物细胞染色体倍性鉴定方法

综述了植物细胞染色体倍性鉴定的染色体计数法、流式细胞分析法、检测气孔大小及气孔保卫细胞叶绿体数目法等各种检测方法 ,并对其优缺点进行了评述     

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的可靠性。     

11种杨属植物的倍性鉴定及山杨天然三倍体的发现

在西藏芒康的山杨居群中发现有叶型明显偏大的山杨植株,通过与该地其他居群正常山杨的叶型比较推测其为三倍体山杨,后经流式细胞述验证了上述推测,确定为中国首次发现的山杨天然三倍体植株,同时以白杨组物种山杨和圆叶杨,青杨组物种冬瓜杨、梧桐杨、康定杨、滇杨、川杨、青杨、辽杨、德钦杨及大叶杨组大叶杨为研究对象,采用流式细胞仪对每个种代表样本的染色体倍性进行检测。结果表明:这11个物种全部为二倍体,青杨、辽杨、大叶杨的倍性与前人报道结果一致,其余8个种为首次报道。试验结果显示杨属物种的倍性相对稳定,没有发现四倍体。倍性研究结合叶片研究表明,在青杨组中叶形大小仅为不同种之间存在的形态上的差异,而在白杨组山杨中可能就是倍性的差异。