华东地区清洁级大、小鼠中ECTV、MHV和SV的检测

为了研究华东地区清洁级实验鼠中鼠痘病毒(ECTV)、小鼠肝炎病毒(MHV)和仙台病毒(SV)感染症的流行情况,从华东地区4个主要实验动物供应基地分别购入ICR和(或)C57BL/6小鼠各30只,SD或Wistar大鼠各15只。采用摘眼球法采集血样和分离血清后,用进口商品化ELISA试剂盒分别检测小鼠的ECTV、MHV和SV的血清抗体。大鼠因为一般不易感染MHV和SV,因此只检测ECTV血清抗体。调查结果显示,在华东地区4个主要实验动物供应基地中,有3个基地的清洁级实验大、小鼠的检测结果均为阴性,但在另1个基地的清洁级ICR小鼠中,MHV和SV的血清抗体阳性率分别为56.7%和100%,C57BL/6小鼠的MHV血清抗体阳性率为100%。研究结果表明,华东地区实验动物供应基地大部分商品化的实验大、小鼠中,上述3种疫病的检测质量合格,但在个别基地中MHV和SV依然存在,且感染情况比较严重,应该积极采取措施加强管理,净化鼠群,同时认真开展鼠病的监测工作,保证实验用鼠的质量,以免对实验用鼠的繁育和使用带来不利影响。     

干扰生物医学实验研究的动物疾病

在利用动物(实验动物,实验用动物)作实验研究时,动物疾病可能成为研究实验的干扰因素。当然任何一种与自然感染有关的病原微生物都可能成为干扰因素,但一些隐性感染病原微生物,条件致病性微生物及某些正常菌群,感染动物后不显任何临床症状,因此应更加重视。这种隐性感染可导致动物各种生物学参数发生改变,干扰试验过程,影响试验结果的准确性,规律性和重复性。而且在实验处理的刺激下,隐性感染可能显性化,使动物发生疾病死亡,实验被迫中断。例如用乳酸脱氢酶病毒(LDHV)感染小鼠后,可干扰其免疫功能,导致血清中乳酸氢酶(LDHase)水平高达700…     

用ELISA法测定开放饲养鼠群四种病毒抗体的初步报告

为检测开放饲养鼠群有无感染鼠肝炎(MHV)鼠痘(Ect.)仙台病毒(Sendai)和淋巴球脉络丛脑膜炎(LCM)等四种病毒性疾病,在我国我们首先应用了ELISA法测定这四种病毒性抗体。检测鼠群来自北京市三个单位送检的开放饲养小鼠,每个单位20～180只不等,采用SPF小鼠的四种病毒抗体的正常OD值是:Sendai为0.125,Ect为0.135,MHV为0.112,LCM为0.130,乘以2.1倍,作为判定血清学阳性的对照,以阻断试验作验证,用免疫粘附血凝试验(IAHA),单扩血溶(SRH)和血凝抑制试验(HI)作比较,在被检的鼠群中检出的阳性率MHV为25.5％,Sendai为20.24％,Ect为2.7％,LCM为3.4％。     

小鼠肝炎病毒金标快速检测方法的建立

本试验旨在探讨一种能够快速、简便及特异检测MHV病毒的金标检测方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗小鼠肝炎病毒(MHV)抗体,选择优化层析条件,建立双抗体夹心模式的免疫层析法试纸条对MHV进行检测。20 nm左右的胶体金颗粒、5.05 μg为最低稳定抗体量(稳定0.5 mL胶体金)、M135层析材料、3%BSA是最佳封闭液。640 μg/mL抗体蛋白为最适检测线包被浓度,而800 μg/mL抗体蛋白为质控线最适包被浓度。此试纸条能10 min快速特异地检测出MHV抗原,阳性时检测线和质控线均显示红色,阴性时则只有质控线显示红色。结果表明,胶体金免疫层析方法能快速、特异、稳定地检测MHV抗原。     

国内外实验小鼠8种病毒检出情况分析

良好的实验动物质量是保证实验结果准确性的前提保障。感染疫病的实验动物,会对实验结果造成干扰,严重的可导致动物大量死亡,影响实验进度。有的疫病甚至可以感染实验人员。本研究对从美国、德国、日本进口的170批次不同品系的实验小鼠共计340只,来自于国内各科研单位119批次不同品系的实验小鼠共计232只,进行淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、汉坦病毒、鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠肝炎病毒、小鼠细小病毒、小鼠微小病毒和小鼠脑脊髓炎病毒检测。结果表明,进口小鼠8项疫病均无检出,而国内小鼠肝炎病毒、小鼠脑脊髓炎病毒和仙台病毒检出率较高,小鼠微小病毒和小鼠细小病毒也有检出,检出率分别为54.6%、26.9%、9.2%、0.8%和0.8%。     

仔猪重症腹泻的临床诊治

仔猪腹泻病,是危害养猪业生产最常见、造成损失较大的疾病之一。病因主要是幼小畜体受环境因素影响而感染细菌及某些病毒引起,轻度病例一般通过调整饲养环境,对症治疗即可治愈,而重症病例表现为精神沉郁、水样腹泻、体温     

浅析鸡瘟病毒的分类及新型疫苗防控研究

鸡瘟病毒属于甲型流感病毒,根据禽流感病毒对鸡和火鸡的致病性的不同,分为高、中、低/非致病性三级。由于禽流感病毒的血凝素结构等特点,一般感染禽类,当病毒在复制过程中发生基因重配,致使结构发生改变,获得感染人的能力,才可能造成人感染禽流感疾病的发生。由基于该病在经济上的重要性,特别是考虑到这种病毒的极易传染性,所有本文对该病毒的研究是十分有必要的。     

仔猪跳跳病的治疗

仔猪跳跳病的治疗仔猪跳跳病（仔猪肌阵挛）是仔猪出生不久后以全身或局部肌肉发生阵发性痉挛为临床特征的一种疾病。此病一般被认为仔猪先天性感染了某些病毒或因怀孕母猪接种了猪瘟疫苗而致。此病若不及时治疗，仔猪因叼不住奶头，吃不到母乳而饿死。治疗时首先应加强护...     

小鼠肝炎病毒抗体ELISA和IFA检测试剂盒真实性评价

为评价小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA和IFA检测试剂盒的真实性,选择两种进口MHV抗体ELISA和IFA试剂盒检测26份小鼠血清,并对检测结果进行对比评价。检测结果显示,26份血清中,13份两种试剂盒检测的结果全为阳性,11份全为阴性,剩余2份分别为ELISA阳性、IFA阴性。评价结果显示,参比IFA,ELISA试剂盒灵敏度为100%,特异度为84.61%,误诊率为15.38%,漏诊率为0,准确度为92.30%,正确指数为0.846,阳性似然比为650%,阴性似然比为0。结果初步证实,ELISA试剂盒配合IFA试剂盒适用于MHV抗体的日常监测。     

在控制疾病和转移基因中使用胚胎的前景

目前,为多种哺乳动物的胚胎提供移植和低温贮藏的技术,对于控制疾病和从感染动物中保存基因是有效的。胚胎在流行病中的作用决定于在受精时或受精后致病性微生物是否能达到卵母细胞和在子宫中早期的胚胎是否会受微生物的侵袭。几乎没有证据能说明重要的家畜疾病是通过配子传递的。胚胎透明带是一道抵抗病原微生物的有效屏障,胚胎从透明带孵出后就很敏感,因此在使用胚胎控制疾病中保证病毒不与透明带表面接触是很重要的,因为从那儿病毒就有可能感染受体或孵育后的胚胎。已经发明用冲洗操作技术结合用酶和抗血清从胚胎表面除去病毒,但某些病毒的去除可能是有问题的。已经证明非洲猪瘟能抵抗酶的外理。因此必须作各种重要病毒的测试,以测定能否通过冲洗除去这些病毒,不过已有大量使用胚胎移植消灭特殊的疾病或从感染动物中保存有价值的基因材料而不传染疾病的例子。     

单纯疱疹病毒脑炎模型的研究

对单纯疱疹病毒(HSV)感染小鼠致病特点进行了观察,小鼠感染HSV第3天后开始发病,感染后第2天脑内可检测出病毒核酸,第3天脑内可分离出病毒,第4天病毒滴度达到高峰,发病2天内死亡。电镜观察感染鼠脑内组织出现超微结构改变,并可找到病毒颗粒。结果说明所建立的HSV脑炎模型可用于评价抗HSV药物。     

用数学预测模型改进传统实验研究方法—对旋毛虫成虫寄生寿命的研究

通常对旋毛虫成虫在小鼠体内存活期的测试是通过对人工感染小鼠的定期解剖而取得。本文介绍了灰色ＧＭ（１,２）模型的数学方法。对部分实验数据（２２天）建立ＧＭ（１,２）模型,预测结果与国内外经典著作报道相符。数学预测方法可以减少１２天工作量和节约３０只近交系小鼠。其作用是改进了传统的实验研究方法和提高了科研效率     

“爱乐新”在防治猪蓝耳病上的应用

猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸障碍综合征,是由猪蓝耳病病毒引起的高度传染性疾病,以厌食、发热、妊娠后期的母猪流产、死胎和弱胎增加,仔猪呼吸异常、死亡率增高等为特征。其危害不仅表现在疾病本身对猪造成的损伤而引起的经济损失,同时猪蓝耳病病毒可逃避免疫系统的监测,持续感染,形成长时间的病毒血症,继发其他病原的感染,导致很高的死亡率和持续的经济损失。猪蓝耳病病毒具有广     

2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响

Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测细胞凋亡的方法.结果表明实验组Caspase3的表达在各时间段里与对照组相比均呈上升趋势,提示了PCV2感染可以上调Caspase3水平,从而增加被病毒感染组织的细胞凋亡,而小鼠心、脑、脾等组织Bak基因表达明显上调,Bcl-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高.这些结果揭示了PCV2感染BALB/c小鼠后,相关细胞凋亡基因在体内的作用与机制,同时为今后细胞凋亡的检测提供了新的方法.     

猪病毒性腹泻病的特点与紧急防控措施

正1特点猪病毒性腹泻疾病主要是指猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒病等。猪病毒性腹泻疾病主要发生在冬、春季节,主要有暴发性流行和地方性流行2种。一般首次感染多呈暴发性流行,某些猪传染性胃肠炎病毒污染比较严重的猪场,常呈地方     

应用qRT-PCR方法检测鼠痘病毒在小鼠不同组织中的差异分布

鼠痘(mouse pox)是由鼠痘病毒(Ectromelia virus,ECTV)感染实验小鼠引起的一种毁灭性、烈性传染病,为SPF小鼠必须排除的病原之一。本研究基于ECTV主要核蛋白P4b基因片段建立了实时定量PCR方法(real-time quantitative PCR,qRTPCR),用于检测C57BL/6小鼠感染ECTV后心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤中的病毒载量,并用病理组织学观察验证了qRT-PCR方法的特异性和可靠性。结果表明,所建立的qRT-PCR方法能够准确检测小鼠感染后d5和d7不同组织的病毒载量,d5不同组织中病毒载量低于d7,与病理组织学检测结果一致。本研究建立的qRT-PCR检测方法且具有较高的灵敏性、特异性和可靠性,可用于ECTV感染细胞和组织器官中病毒载量、分布和消长动态的定性定量检测。     

猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型的致病性及感染小鼠后的组织分布研究

为了解猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型(APP-S5)对小鼠的致病性及感染小鼠后的组织分布情况,本研究通过测定APP-S5的生长曲线、筛选APP-S5感染小鼠的最佳接种途径以及观察不同剂量的APP-S5对小鼠存活的影响之后,选取1.0×10~7 cfu/只的APP-S5经腹腔注射感染小鼠,以阐明APP-S5感染小鼠后的组织分布规律。结果显示,与肌肉注射和滴鼻相比,腹腔注射接种后小鼠出现的临床症状最早,1.5×10~7 cfu/只接种小鼠后可于5 h内全部死亡;腹腔感染小鼠后,仅在4 h时肺脏中APP-S5菌体含量最多,而在感染6 h时及8 h时肺脏中菌体含量降低。本研究表明,APP-S5感染小鼠后,具有组织嗜性,且不同接种途径对小鼠的致死性存在差异,本研究结果为深入研究APP-S5的致病性提供了实验依据。     

PCR技术使猪病检测速度更快

根据国际养猪协会推出的研究结果,一种以酶为基础的实验过程,即聚合酶能反应(或简称为PCR技术)对猪的保健有很大的作用。此技术为疾病研究者提供了一种快速而准确的病原检测,可以广泛用于畜群感染的监测。 美国家畜疾病中心的学者引用的一个有关用PCR技术检测公猪精子样本中伪狂犬疾病病毒的例子,他说,这种技术比采用细胞培养分离感染病毒的常规方法敏感100～400倍。细胞培养需要好几天才能出结果,而新的方法仅需8小时就可完成。     

2例母猪流产病例的诊治

<正>母猪妊娠期会因受各种因素的影响而导致母猪胚胎死亡,这给实际生产带来一定的经济损失。引起怀孕母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、畸形仔、弱仔的原因比较复杂,总体上可分为疾病、营养、环境、遗传等几方面因素〔1〕。母猪自身某些疾病可导致胚胎死亡,怀孕母猪感染某些病毒和细菌时,会导致体温升高,食欲减退等症状,从而引起胚胎死亡。例如:猪瘟病毒     

猪血凝性脑脊髓炎病毒感染降低ZO-1表达致小鼠血脑屏障通透性升高

为明确猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)感染后对机体血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的影响,本试验以PHEV易感的BALB/c小鼠为实验动物模型,将PHEV接种小鼠后静脉注射伊文氏蓝(Evans blue,EB),运用形态学和化学定量方法检测EB通过BBB进入脑组织的状况。结果显示,接种病毒后3d的小鼠脑组织即出现肉眼可见的蓝色,定量检测结果证实其含量随着感染时间的延长而增加。同时利用荧光定量PCR和Western blot方法分别对病毒感染后不同时间点紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5进行核酸定量检测,证明感染组小鼠脑组织中ZO-1的基因转录水平随感染时间延长下调明显,而Occludin和Claudin-5的变化不明显。进而对脑组织中ZO-1蛋白表达水平进行检测,证实ZO-1的蛋白表达水平也发生下调,表明内皮细胞紧密连接完整性在病毒感染后期遭到了破坏。上述试验结果证实PHEV感染机体后可使BBB的通透性升高,而且这一变化与ZO-1的降低相关,为后期深入开展PHEV所致神经系统炎性损伤的机制奠定基础。