蛋鸡日粮中添加苜蓿草粉对肠道菌群的影响研究

为研究蛋鸡日粮中添加苜蓿草粉对肠道菌群结构及多样性造成的影响,试验选用17周龄海兰灰商品代蛋鸡90羽,随机分为2组,每组45羽,设空白对照组和苜蓿草粉添加组,对盲肠内容物进行菌群培养计数和PCR-DGGE。结果显示：苜蓿草粉组盲肠大肠杆菌和乳酸杆菌数目均高于对照组,但差异不显著（P〉0.05）。对照组DGGE泳道条带数目高于草粉组,二组共有条带比例为36.4%。对照组各样本之间聚类较近,苜蓿草粉组样本与其聚类距离较远。试验表明,日粮中添加苜蓿草粉后,蛋鸡肠道的菌群结构及多样性均发生了变异。     

饲料添加山姜和蜡样芽孢杆菌对小鼠肠道菌群的影响

滑叶山姜(Alpinia tonkinensis Gagnep)为姜科山姜属植物,分布于我国广西和云南地区。以其果实或根茎入药,含有挥发油、黄酮类化合物等多种     

替米考星对内毒素炎症小鼠存活率和细胞因子的影响

替米考星按20 mg/kg剂量经灌胃给药后,观察其对内毒素(LPS)炎症小鼠的保护率,并通过不同时间段眼球采血,分离血清,应用试剂盒用酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assy,ELISA)法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1β)的水平.结果表明,替米考星明显提高了内毒素炎症小鼠的存活率,死亡率由100%降低为50%(P<0.05).LPS(20 mg/kg)能提高血清中TNF-α、IL-10、IL-6和IL-1β的水平,替米考星能够显著抑制TNF-α、IL-6和IL-1β的释放,而明显提高IL-10的水平.     

二甲酸钾预防沙门菌感染小鼠的效果评价及对肠道菌群的影响

二甲酸钾(potassium diformate, KDF)为酸化剂的代表之一,在2001年被欧盟批准可作为饲料添加剂使用,在2005年被我国批准作为饲料添加剂。目前已有较多的研究表明KDF可以显著提高动物的生长性能,然而关于KDF对传染病预防作用的直接证据的研究还比较少。本研究旨在通过体外抑菌试验及小鼠感染模型,在体外和体内评价KDF对致病菌的预防效果,并检测KDF对小鼠肠道菌群的影响,以探讨KDF的作用机理。在体外检测KDF对养殖场中常见病原菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)后,选取3～4周龄,体重12～15 g的C57/BL6雌鼠,分组饲喂一周后感染鼠伤寒沙门菌,记录KDF饲喂组、KDF饮水组和对照组小鼠感染后的体重变化(n=6),并在感染后第6天将小鼠安乐死检测其盲肠组织载菌量(n=6)、血清炎性细胞因子水平(n=6)和盲肠病理变化(n=3)。另外选取两组3～4周龄,体重12～15 g的C57/BL6雌鼠(n=5),饲喂含有KDF的饲料两周后采集其粪便,利用16S rRNA测序技术分析饲喂KDF对小鼠盲肠菌群的影响。结...     

葡萄糖氧化酶对饲喂含霉变饲料小鼠体重和肠道微生物的影响

本试验旨在研究葡萄糖氧化酶(GOD)缓解霉变饲料对小鼠平均日增重和肠道菌群变化的影响。18~22 g昆明小鼠130只,随机分为13组。分别饲喂添加0、10%、20%、30%霉变玉米面和0、0.1%、0.3%、0.5%GOD的饲料,试验期为60 d。结果表明:1)不同霉变玉米添加量的饲料饲喂小鼠60 d,与试验对照组比较,0.3%GOD能显著或极显著改善小鼠平均日增重(P<0.05或P<0.01)。2)添加10%霉变玉米面,0.3%和0.5%GOD组与试验对照组比较,极显著降低了大肠杆菌的数量(P<0.01),增加了乳酸杆菌数量(P<0.01);添加20%霉变玉米面,饲喂60 d时,3种不同浓度的GOD极显著降低了大肠杆菌数量(P<0.01),提高了乳酸杆菌数量(P<0.01);添加30%霉变玉米面,3种不同浓度的GOD显著或极显著减少了肠道大肠杆菌数量(P<0.05或P<0.01),0.3%GOD效果较好,饲喂60 d时,0.3%和0.5%的GOD添加量极显著提高了肠道乳酸杆菌数量(P<0.01)。结果提示,GOD能够缓解霉变饲料对小鼠生长造成的影响。饲料中黄曲霉毒素B1含量低于67.77μg/kg时,添加0.3%的GOD效果较好。     

EM菌对小鼠肠道病变的修复作用

本研究以小鼠肠道为模型,采用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠肠道病变,并用EM菌修复小鼠肠道,探索EM菌对小鼠肠道病变的修复作用。试验结果表明,在使用DSS建立病变模型后,对照组小鼠停药后病情依然持续加重,很快死亡;而喂食EM菌处理组,小鼠的体重逐步恢复、免疫酶活力几乎恢复正常、肠道内壁结构也与正常小鼠相似,小鼠死亡率大大降低。说明EM菌在肠道病变的修复方面具有显著作用。     

外源MDR鼠伤寒沙门菌对健康小鼠肠道菌群的影响

旨在探究外源多重耐药(multidrug resistant, MDR)鼠伤寒沙门菌进入健康小鼠肠道后对其肠道菌群的影响。将25只小鼠随机分为质控组(C)、灌胃1 d组(G1)、灌胃3 d组(G2)、灌胃5 d组(G3)和灌胃7 d组(G4),每组5只。将携带耐药基因的猪源耐药鼠伤寒沙门菌按10⁶ CFU·mL^-1的浓度对除质控组外的试验组小鼠进行灌胃。分别采集灌胃前第0天和灌胃结束后1～14 d的新鲜粪便样本,采用高通量测序技术分析灌胃后小鼠粪便中肠道菌群多样性变化。结果显示：1)与C组比较,各试验组在灌胃结束后临床上均表现为轻微腹泻,从粪便样本中分离出与灌胃菌同一型的MDR鼠伤寒沙门菌,且分离率差异不大;2)试验组小鼠肠道菌群Alpha多样性中Chao1、Goods＿coverage和Observed＿species指数明显高于C组;3)G2组、G3组和G4组在门及属水平物种丰度上变形菌门(Epsilonbacteraeota)和螺杆菌属(Helicobacteraceae)相对丰度显著低于C组(P<0.05)。在LEfSe分析上变...     

叶下珠醇提物对肠炎沙门菌毒素致小鼠炎症的影响

研究叶下珠醇提物对攻毒肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis)毒素小鼠血清、肝、脾和空肠炎症因子水平的影响。将50只昆明小鼠随机分为空白对照组(CK)、肠炎沙门菌毒素组、叶下珠醇提物高剂量组、中剂量组和低剂量组(40 mg/mL、20 mg/mL和10 mg/mL)。各组灌胃叶下珠醇提物7 d,除对照组外,其余各组均腹腔注射肠炎沙门菌毒素,24 h后采血,扑杀各组小鼠,快速分离肝、脾和空肠组织,ELISA测定小鼠血清中IL-6、TNF-α和IL^-10水平。结果表明,与对照组相比,肠炎沙门菌毒素组小鼠腹泻等临床症状明显,剖检可见肝、脾、肠出血肿胀等病变,叶下珠醇提物各剂量组小鼠临床症状和脏器损伤均明显轻于肠炎沙门菌毒素组。炎症因子检测结果显示,与对照组相比,肠炎沙门菌毒素组血清中IL-6水平显著下降(P<0.05),但TNF-α和IL^-10水平变化不显著(P>0.05),肝、脾和空肠中IL-6、TNF-α水平均极显著升高(P<0.01),IL^-10水平均极显著降低(P<0.01)。...     

PCV2对小鼠肠道SIgA及相关细胞因子含量的影响

用PCV2感染5周龄昆明系小鼠,分别在感染后7,14,21,28,35,42d处死小鼠,取脾脏、腹股沟淋巴结、Peyers结做PCR鉴定PCV2感染情况,提取肠道中蛋白检测SIgA及肠道相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量的变化。结果显示:随着感染时间的延长,试验组小鼠肠道SIgA、IL-2和IFN-γ水平均呈先升高后降低的趋势,IL-4和IL-10呈持续升高的趋势。结果表明:小鼠肠道SIgA及相关细胞因子的含量在PCV2的刺激下发生了不同程度的改变。     

抗菌肽饲料添加剂对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

对试验小鼠饲喂1‰和3‰抗菌肽饲料添加剂,鸡红细胞吞噬试验检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,研究抗菌肽饲料添加剂对小鼠免疫功能的影响.结果表明,抗菌肽饲料添加剂可以显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数,增强小鼠非特异性免疫功能.     

超高效液相色谱串联飞行时间质谱法检测黑水虻产品中黄曲霉毒素B1

本研究建立了黑水虻产品中黄曲霉毒素B1(AFB1)的超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱测定方法,对黑水虻幼虫粉中AFB1的提取、超高效液相色谱串联质谱检测条件进行了优化。使用甲醇-水溶液(8:2,体积比),添加7%氯化钠对黑水虻幼虫粉中AFB1进行提取,免疫亲和柱净化,甲醇-乙酸铵(10 mmol/L)水溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)正离子模式检测,7.0 min出峰。结果表明:AFB1在1~20μg/kg浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,幼虫粉回收率为83.1%~118.3%,相对标准偏差(RSD)为6%~10%;虫粪回收率为76.6%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为0~3%;检出限(LOD,S/N≥3)为0.01μg/kg,定量限(LOQ,S/N≥10)为0.05μg/kg。该方法操作简单、结果准确,可以用于黑水虻幼虫粉和虫粪产品中AFB1的检测。     

Dietary black soldier fly oil enhances growth performance,flesh quality,and health status of largemouth bass(Micropterus salmoides)

The study aimed to assess the effects of dietary black soldier fly oil(BSFO)on the growth performance,flesh quality,and health status of largemouth bass(Micropterus salmoides).Six iso-nitrogenous and isolipid diets were formulated by substituting fish oil and soybean oil(1/2,wt/wt)with BSFO in per-centages of 0％,20％,40％,60％,80％,and 100％,respectively.The diets were fed to 960 fish(initial body weight=16.5 g)in four replicates for 8 weeks.Indicators related to growth performance,body composition,hematology,flesh quality,expression of genes related to inflammatory cytokines and apoptosis,and the response of fish to Aeromonas veronii challenge were analyzed.The results showed that the weight gain rate was numerically improved in all BSFO substitution groups,ranging from 9.3％to 44.0％compared to the control group.The highest survival rate and the lowest hepatosomatic index and condition factor were observed in the BFSO20 group.In terms of flesh quality,the water-holding capacity of the dorsal muscle was elevated with higher levels of dietary BSFO.However,significant changes in texture properties(cohesiveness,gluing,and chewiness)were observed in the BSFO20 group(P＜0.05).Six hematological parameters related to glycolipid and liver function were optimized in most of the BFSO substitution groups.Furthermore,the expressions of six inflammation-and apoptosis-related genes(IL-1β,Bcl-xl,BAX,caspase8,TNF-α,and IL-10)were significantly affected by dietary BSFO(P＜0.05).Following bacterial challenge,the seven-day cumulative survival rates of fish were considerably increased from 10.0％in the control group to 60.0％and 66.7％in the BSFO80 and BSFO100 groups,respectively.One-variable linear regression analysis revealed that various parameters related to fish growth,flesh quality,and health status were significantly influenced by dietary BSFO substitution levels in a dose-dependent manner(P＜0.05).In conclusion,substituting around 20％of dietary fish oil and soybean oil with BSFO is promising in improving the growth performance and flesh quality of M.salmoides.However,to enhance immunity and disease resistance,it is recommended to further in-crease the inclusion of BSFO in the diet.     

Effect of soybean peptides on growth performance,intestinal structure and mucosal immunity of broilers

Five‐hundred 1‐day‐old broilers were randomly assigned to five groups, 100 chickens for each group. From group 1 to 3, 80, 120 and 200 mg/kg soybean peptides was added to the diets respectively; in the fourth group, 3.2 mg/kg genramycin was added; and the fifth group was the control without soybean peptides and antibiotics. At the age of 28 and 49 days, the number of goblet cells (GC), intestine intraepithelial lymphocyte, immunoglobulin A‐forming cells, the ratio of villous height and crypt depth (V/C) of broiler’s duodenum, jejunum and cecum were observed by the application of haematoxylin and eosin or histochemistry staining. The results indicated that soybean peptides added with 80–120 mg/kg could increase daily weight gain, the number of GC and V/C. Soybean peptides could modulate intestinal mucosal immunity of broilers.     

抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究

人工合成抗菌肽Thanatin基因的3条片段,利用重叠延伸PCR扩增技术得到完整的Thanatin基因,通过分子克隆方法构建出pIRES2-EGFP-Thanatin重组表达载体。然后与脂质体混合,采用睾丸打点注射将新构建的抗菌肽基因注入小鼠睾丸内,共注射公鼠5只。6周后与雌鼠交配,对新生仔鼠进行断尾,提取尾尖基因组DNA,利用PCR和Southern印迹方法对其进行检测。结果显示,得到的52只新生仔鼠中PCR检测阳性率为38.46%,Southern印迹检测阳性率为30.77%;在活体荧光成像系统下转基因小鼠呈现绿色荧光表达。通过睾丸注射法使Thanatin基因在小鼠的基因组中得到整合,为进一步研究抗菌肽的作用机理、培育抗病动物品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

超微粉碎对黄连解毒散和白头翁散体外抑菌效果的影响

目的：观察黄连解毒散和白头翁散超微粉的体外抑菌效果。方法：采用超微粉碎和普通粉碎方法将黄连解毒散、白头翁散粉碎成超微粉（300目）和细粉（65目）,用其水提取液和醇提取液采用管碟法进行体外抑菌试验。结果：黄连解毒散、白头翁散超微粉比细粉的抑菌圈直径均显著增大（P〈0.05）。说明超微粉碎可明显提高黄连解毒散和白头翁散的体外抑菌效果。     

一株牦牛源屎肠球菌对小鼠肠道微生物、形态和免疫功能的影响

为研究牦牛肠黏膜源屎肠球菌G2对健康小鼠肠道微生物、形态和免疫功能的影响,试验设置对照组(CON)、热灭活菌组(EHK)、活菌组(ENT)3个处理组,每组8只C57BL/6小鼠,共计24只。CON组、EHK组、ENT组于正式试验期第1、2、4、6天按0.1 mL/只分别灌胃M17培养基、热灭活菌液和活菌菌液,灌胃前无菌收集小鼠粪便进行乳酸菌总菌计数,第8天处死小鼠取样。结果表明:ENT组乳酸菌总菌数量在第3、5天显著大于CON组与EHK组(P <0.05);各组小鼠结肠病理学评分无显著差异,但ENT组隐窝深度显著高于CON组与EHK组(P <0.05);各组间肠黏膜免疫因子Reg3β、Reg3γ和MUC2基因mRNA表达量差异不显著,TNF-α表达量ENT组显著低于CON组(P <0.05)。综上可知,牦牛源屎肠球菌G2可能为一种肠道过路菌,能在短时间内提高肠道乳酸菌的总数,一定程度上具有改善肠道形态和促进肠道健康的作用。     

中药复方总多糖对小白鼠免疫功能的影响

试验小鼠口服中药复方总多糖,对照组口服复方水煎剂、黄芪多糖、生理盐水,通过淋巴细胞转化试验、腹腔巨噬细胞吞噬试验、EA花环形成试验,探讨复方总多糖对正常小鼠免疫功能的影响.试验结果显示,该复方总多糖能显著提高小鼠淋巴细胞转化率、腹腔巨噬细胞吞噬百分率以及EA花环形成率,与水煎剂和黄芪多糖组相比差异显著(P<0.05),与生理盐水组相比差异极显著(P<0.01),表明该中药复方总多糖可明显提高机体的免疫功能.     

壳聚糖对肉仔鸡肠道菌群的影响

试验选择1日龄、体重42.8±2.6g的AA雄性肉仔鸡294只,随机分成7个日粮处理组,每个处理6个重复,每个重复7只鸡,试验期为42d。7种日粮是在基础日粮中分别添加0.00%(对照组)、0.02%、0.05%、0.10%、0.30%、0.50%壳聚糖和50mg/kg金霉素配制而成。结果表明:日粮各处理组对肉仔鸡盲肠内容物中总需氧菌无显著影响;大肠杆菌在14和42日龄时也未显示出显著的组间差异,而在28日龄时组间差异趋于显著(P=0.121),添加壳聚糖的各处理组均不同程度地低于对照组,其中以0.05%壳聚糖组最低;乳酸菌在14日龄时无显著的组间差异,在28日龄时,添加壳聚糖的各处理组相对于对照组均有不同程度的升高趋势,尤以0.05%壳聚糖组最高,而金霉素组则极显著低于0.05%～0.50%壳聚糖组(P=0.008),在42日龄时,乳酸菌的组间无显著差异(P=0.201),但变化趋势与28日龄时类似。可见,添加适宜剂量的壳聚糖可在一定程度上改善肉仔鸡的肠道微生态环境。     

饲粮中添加辣木梗粉对蛋雏鸭生长、免疫及抗氧化功能的影响

本试验通过在饲粮中添加不同水平的辣木梗粉,研究其对1～28日龄蛋雏鸭生长、免疫及抗氧化功能的影响,以探讨辣木梗粉的适宜添加量。试验选取健康、体重相近的1日龄三穗蛋雏鸭135只,随机分为3组(Ⅰ～Ⅲ组),每组3个重复,每个重复15只试鸭。采用基础饲粮加辣木梗粉进行饲喂,Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ组在基础饲粮中添加20 g/kg和40 g/kg辣木梗粉,试验期4周。结果表明:20 g/kg辣木梗粉添加组的平均日采食量(ADFI)分别比空白对照组和40 g/kg辣木梗粉添加组显著提高8.6%和9.8%(P <0.05);20 g/kg和40 g/kg g辣木梗粉添加组的平均日增重(ADG)分别比空白对照组显著提高11.8%和18.3%(P <0.05);40 g/kg辣木梗粉添加组的料重比(F/G)分别比空白对照组和20 g/kg辣木梗粉添加组显著降低16.2%和14.1%(P <0.05);20 g/kg和40 g/kg辣木梗粉添加组血清白蛋白(ALB)含量比对照组分别显著提高39.1%和49.5%(P <0.05);20 g/kg辣木梗粉添加组的免疫蛋白M(IgM)含量比空白对照组显著提高了1.6%(P <0.05);20 g/kg辣木梗粉添加组的血清丙二醛(MDA)含量比空白对照组显著减少33.16%(P <0.05)。综上,在基础饲粮中添加适量的辣木梗粉可提高1～28日龄蛋雏鸭的免疫及抗氧化功能,对辣木梗粉在蛋雏鸭的应用上提供了参考依据。     

甘露寡糖对肉鹑肠长度及肠道菌群的影响

选取240只1日龄肉鹑随机分成4组,每组设4个重复,每个重复15只肉鹑。其中第1组为对照组,饲喂基础日粮,第2~4组为试验组,在基础日粮中分别添加0.5%、1.0%2、.0%的甘露寡糖(MOS)。进行为期50日龄的饲养,分别于35日龄和50日龄采样。试验结果表明,1.0%和2.0%MOS可显著增加35日龄肉鹑小肠长度和十二指肠长度(P<0.05)。1.0%和2.0%MOS组35日龄肉鹑空肠长度和回肠长度显著长于对照组和0.5%MOS组(P<0.05)。各处理组35 d肉鹑空回比均高于对照组,但未达到统计学差异水平(P>0.05)。日粮中添加MOS对50日龄肉鹑肠长度的影响无明显规律,各处理组之间无显著差异(P>0.05)。日粮添加0.5%、1.0%2、.0%MOS可显著降低35日龄和50日龄肉鹑回肠内大肠杆菌的数量(P<0.05),随着日粮MOS添加量的增加,回肠内大肠杆菌数量逐渐下降,且1.0%和2.0%MOS添加组回肠内大肠杆菌数量显著低于0.5%MOS添加组(P<0.05)。日粮添加0.5%、1.0%、2.0%MOS可显著提高35日龄和50日龄肉鹑回肠内乳酸杆菌的数量(P<0.05),随着日粮MOS添加量的增加,回肠内乳酸杆菌数量逐渐升高,且2.0%MOS添加组35日龄肉鹑回肠内乳酸杆菌数量显著高于0.5%MOS添加组(P<0.05)。