菜豆晕疫病检测技术研究进展

介绍了生理生化检测技术、经典血清学检测技术、现代分子检测技术3种常用的菜豆晕疫病传统检验技术,并讨论了免疫磁性-实时荧光PCR技术、环介导等温扩增技术和红外光谱检测技术3种植物病原细菌最新检测技术应用于菜豆晕疫病的可能性。     

菜豆晕疫病菌的分离与鉴定

菜豆晕疫病菌的分离与鉴定王淑秋葛泉卿（烟台动植物检疫局２６４０００）烟台市某公司从台湾引进一批四季豆种子，我局对种子进行了检疫。我们用离体叶片法〔１〕从该批种子中分离到一种病原细菌，经鉴定证明为菜豆晕疫病菌ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅＰＶ?..     

菜豆普通细菌性疫病病原菌鉴定

【目的】明确中国北方地区菜豆普通细菌性疫病病原菌。【方法】应用菌落特征、油菜黄单胞菌菜豆变种诊断试剂检测、致病性测定、16S rDNA和16S-23S rDNA ITS序列分析、特异PCR检测、脂肪酸分析及生理生化反应特征对病原菌分离物进行鉴定。【结果】从病害样品和菜豆种子样品中均分离到类似黄单胞杆菌的细菌分离物,选取25个代表分离物进行致病性测定,有24个分离物在菜豆品种“英国红”上导致典型菜豆普通细菌性疫病症状。结合16S rDNA及16S-23S rDNA ITS序列比对分析、特异性PCR检测及生理生化反应的结果,24个分离物中7株被鉴定为地毯草黄单胞菌菜豆变种,17株为褐色黄单胞菌褐色亚种。【结论】中国北方地区发生的菜豆普通细菌性疫病由地毯草黄单胞菌菜豆变种或（和）褐色黄单胞菌褐色亚种引起;褐色黄单胞菌褐色亚种在中国属首次报道。     

呼伦贝尔盟大豆疫病病原菌鉴定

对采集到的大豆疫病１８个样本分别进行了分离比纯和形态鉴定，结果表明，该地区大豆疫是由疫霉属大豆疫霉菌引起，经过致病性测定，发病率为１００％。     

菜豆细菌性疫病病原细菌的鉴定

根据1985～1986年对菜豆细菌性疫病病原细菌个体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应和血清学特性等几个方面的试验结果,证明该菌为菜豆疫病菌(Xanthomonas campestris.pv.phaseolus vulgaris(E.F.Smith)Dowson].供试菌株在细菌学性状等方面与Florence Hedges(1924)[8]报道完全一致.     

无土栽培系统长瓜疫病病原菌的鉴定

于1995－2000年在浙江省的无土栽培系统发病的长瓜上，分离到92个疫病菌分离物，取典型的4个分离物作为供试菌株，观察无土栽培系统长瓜疫病的症状，及供试菌株的病原菌孢子囊、有性器官及其菌落形态等特征，测定不同温度下的生长特性和寄生范围。结果表明，孢囊梗为不规则分枝，孢子囊顶生，近球形、椭圆形、长椭圆形、卵形、肾形或不规则形，有明显的乳突，有的孢子囊则不止一个乳突，孢子囊成熟后易脱落，并带有长的孢囊柄，在水中极易释放出游动孢子，游动孢子肾形。异宗配合，藏卵器球形，直径为20．1－31．0μm，壁薄而平滑，柄多为棍棒形；雄器围生，球形或扁球形或圆筒形，卵孢子球形，黄褐色，壁厚而平滑，满器或不满器，直径为15－28μm。该菌最适生长温度为25－30℃，最高生长温度大于35℃。因此，将浙江无土栽培系统长瓜疫病病原菌鉴定为Phytophthora capsici Leonian。     

呼和浩特地区青椒疫病病原菌鉴定

从呼和浩特市郊区各乡分别采集青椒疫病株，经分离培养和鉴定，确定了呼市地区引起青椒疫病的病原菌为辣椒疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉ）．通过接种试验，确认该菌为致病菌。     

蒌叶细菌性疫病的症状和病原菌鉴定

本文描述了海南省某萎叶种植基地发生细菌性疫病的症状,根据对该病原菌的形态、染色反应、培养性状、生理生化特性、寄主范围等测定结果,将该病原菌鉴定为甘蓝黄单胞菌萎叶致病变种[Xanthomonas campestris pv．betlicola（Patel,Kulkarni et Dhande1951）Dye1978．]。     

应用生物技术提高烟草对野火病抗病性的研究进展

 自80年代中后期以来,在应用生物技术提高植物抗病性方面取得了重大进展。对应用生物技术提高烟草对野火病抗病性的研究进展进行了综述。     

番茄细菌性斑点病病原鉴定的初步研究

1997～2001年在辽宁省的露地及大棚番茄上分离得到4个菌株,接种番茄幼苗上,发病症状与自然发病症状完全一致,并从接种病株上重新分离到此病原细菌,经革兰氏染色、菌体形态、培养性状、生理生化反应等鉴定,确认该病原菌为丁香假单胞番茄致病变种（Pseudomonas syringae pv.tomato（Okabe）Young,Dye＆Wilkie）.     

云南烟草野火病病原细菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)鉴定

 对云南省各大烟区烟草叶片上引起褪绿晕圈的病原细菌从形态学、培养性状、生理生化反应、抗菌素反应、抗血清反应、遗传性状等方面进行了鉴定。结果表明:该菌为烟草野火病菌［Pseudomonas syringae pv. tabaci Wolf &; Foser (1917) Young, Dye &; Wilkie (1978)］。     

引起梨花枯和芽枯的Pseudomonas syringae pv.syringae 病原细菌鉴定

 【目的】明确在中国发生的梨花枯和芽枯的确切病原菌。【方法】用普通细菌学方法、电镜观察、Koch氏病原假说测定、Biolog、脂肪酸分析、PCR及与标准对照菌株的比较。【结果】从16个病样中分离获得12菌株,6株代表菌株显示出与Pseudomonas syringae pv. syringae 3株标准对照菌株相似的致病反应,它们的Biolog和脂肪酸分析的相似度分别为0.57～0.86 和0.58～0.81,PCR和序列测定结合上述结果证实了P. syringae pv. syringae为该病的病原菌。【结论】首次证实了中国梨树上的花枯和芽枯可由P. syringae pv. syringae引起。     

三七细菌性叶斑病病原菌鉴定

[目的]对引起三七细菌性叶宽病的病原菌进行系统鉴定。[方法]以2011及2012年在云南文山及石林县的三七苗圃采集的三七细菌性叶斑病病株为材料,采用柯赫氏法则,检测分离菌株致病性并重新分离得到病原菌。通过病菌形态观察、致病性测定、16SrD—NA序列分析及生理生化特性分析（Biolog系统）对其进行鉴定。[结果]确定三七细菌性叶斑病病原菌为丁香假单胞菌丁香致病变种（Pseudomonas syringae pv．syringae）。[结论]该研究为三七细菌性叶瘫病菌详细鉴定的国内首报。     

鉴别丁香假单胞菌丁香致病变种和豌豆致病变种的 DNA 探针的制备

把引起豌豆枯萎病的丁香假单胞菌丁香致病变种 Pseudomonas syringae pv.syringae 菌株3319和丁香假单胞菌豌豆致病变种 P.syringae pv.pisi 的模式菌株2452的染色体 DNA 分别用限制性核酸内切酶 HindⅢ完全消化,再用 T_4DNA 连接酶把消化好的 DNA 片段连接到用HindⅢ内切酶消化的质粒载体 pUC19上,然后把重组的质粒载体转化到大肠杆菌(E.coli RR1)中去克隆.把菌株3319和2452的 DNA 用 p~(32)标记做成探针,分别与克隆菌落杂交,筛选出只对菌株3319的 DNA 有特异性的1个重组 DNA 的克隆和对菌株2452的 DNA 有特异性的2个重组 DNA 克隆.再把这3个重组质粒 DNA 分别用 P~(32)标记做成探针,与菌株3319和2452的 DNA 杂交,也显示只对各自 DNA 来源的菌株具有特异性.这3个重组质粒中,有2个携带有菌株2452的 DNA 片段,1个为0.82 kb。另1个略小于0.58 kb,还有1个质粒携带有菌株3319的 DNA 片段,为0.85 kb.     

不同烟草品种对云南烟草野火病菌的抗性鉴定*

 采用采自云南省不同地点、不同生理小种的24株烟草野火病菌对24个不同烟草品种及两个野生种黄花烟和长花烟进行抗病性鉴定分析。结果表明,不同抗性品种对不同生理小种的抗性反应差异显著,根据接种后不同烟草品种的形成的病斑直径,将其划分为4个等级：高抗、中抗、中感、高感。辽烟15,G28对于烟草野火病菌0,1号生理小种均表现为高感,而云南省大面积栽培的K326、红花大金元、云烟87等对于两个生理小种均表现为中感,而两个野生种黄花烟和长花烟均表现为高抗,可以作为烟草野火病抗性育种优先利用的种质资源。     

不同烟草品种对云南烟草野火病菌的抗性鉴定

采用采自云南省不同地点、不同生理小种的24株烟草野火病菌对24个不同烟草品种及两个野生种黄花烟和长花烟进行抗病性鉴定分析。结果表明，不同抗性品种对不同生理小种的抗性反应差异显著，根据接种后不同烟草品种的形成的病斑直径，将其划分为4个等级：高抗、中抗、中感、高感。辽烟15，G28对于烟草野火病菌0，1号生理小种均表现为高感，而云南省大面积栽培的K326、红花大金元、云烟87等对于两个生理小种均表现为中感，而两个野生种黄花烟和长花烟均表现为高抗，可以作为烟草野火病抗性育种优先利用的种质资源。     

大豆细菌斑点病抗性鉴定的研究概况

阐述了大豆种质资源抗大豆细菌性斑点病鉴定的现状,归纳出一批抗大豆细菌性斑点病性能好的资源和品种。分析抗性鉴定方法不统一等问题并提出制定统一规范鉴定方法、采取多种措施筛选和创造抗源、开展抗大豆细菌性斑点病性状的分子标记研究。