鲤IL-10锦鲤疱疹病毒核酸疫苗联合免疫效果的研究

本研究选用鲤IL-10,构建p EGFP-N1-IL-10真核表达质粒,分别进行体外细胞转染试验和免疫鱼的试验,证明了重组质粒在细胞中能成功表达,体内免疫试验ELISA结果显示,抗体水平会随着免疫次数、剂量的增加逐渐升高,三免后第1周的抗体水平最高,随后抗体水平逐渐下降。相比单一核酸疫苗p IRES-ORF81,p EGFP-N1-IL-10与核酸疫苗p IRES-ORF81联合免疫所产生抗体水平明显升高,但差异不显著(P>0.05)。     

核酸疫苗研究的新进展

核酸疫苗是当前研究的前沿领域。本文就核酸免疫的作用机理、 影响因素和核酸疫苗在医学上的研究进展及前景做一综述。     

核酸疫苗最新研究进展

核酸疫苗是利用DNA重组技术、基因免疫技术等分子手段制成的新一代疫苗,其与传统疫苗相比,能更加安全、高效、迅速地使机体产生免疫应答。核酸疫苗在人类各种疾病的防控以及动物免疫接种等方面,特别是在畜牧防治领域做出了杰出贡献。本研究主要从核酸疫苗的免疫机制、构建、接种、优缺点和影响核酸免疫效果的因素等方面,针对核酸疫苗领域的最新研究进行整理分析,旨在为核酸疫苗的进一步研究与应用提供参考。     

一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定

本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHV ORF25基因的849bp基因片段,连接至pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj.基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近.将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%.表明本研究在国内首次分离到KHV.     

核酸疫苗的免疫效果与安全性

核酸疫苗是通过基因重组手段将编码某种抗原蛋白质的基因与载体重组后直接导入动物体内,在宿主体内表达抗原从而引起机体免疫应答的新型疫苗,是一种与传统疫苗截然不同的新型疫苗,被誉为第三代疫苗。核酸疫苗可诱导细胞免疫并可抵抗母源抗体干扰,它的诞生给基因治疗和免疫学领域带来了不可估量的前景。核酸疫苗目的基因、质粒载体的选择,接种剂量以及应用的佐剂等因素直接影响到核酸疫苗的免疫效果。DNA疫苗自诞生以来,其安全性一直是人们关心的问题,也是DNA疫苗得以日后应用于临床的关键。     

影响核酸疫苗免疫效果的因素及提高核酸疫苗免疫效果的方法

核酸疫苗(nucleic acid vaccines)是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接导入动物体细胞内,并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的.     

核酸疫苗的研究和应用

90年代中期 ,研制了一种新的免疫防治制剂 -核酸疫苗。所谓核酸疫苗是指将含有编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体作为疫苗 ,直接导入动物细胞内 ,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白 ,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答 ,从而使被接种动物获得相应的免疫保护。免疫应答包括了细胞激活、细胞毒淋巴细胞 ( CTL)产生、细胞因子分泌以及特异性抗体形成等。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸 DNA疫苗。这种免疫称为核酸免疫、基因免疫 ,DNA介导的免疫以及遗传免疫等。核酸疫苗与传统疫苗相比有许多潜在的优势 ,从而被誉为疫苗领域的第三次革命…     

猪2型圆环病毒核酸疫苗的研制及其对小白鼠的免疫效果

为研制猪2型圆环病毒（PCV2）新型核酸疫苗，以pcDNA3为载体，与PCV2的ORF2及其高变区V1、V2、V3、V1-V2连接，分别成功构建了真核表达质粒pcDNA3-ORF2、pcDNA3-V1、pcDNA3-V2、pcDNA3-V3和pcDNA3-V1-V2。对阳性真核表达质粒大量生产并纯化后，以每只小白鼠0．2mg免疫5周龄左右的雌性小白鼠，然后用ELISA检测免疫小白鼠血清中抗体的产生情况。结果显示，这5种真核表达质粒均能刺激小白鼠产生特异性抗体，但相比之下，真核表达质粒pcDNA3-V1-V2诱导小白鼠产生的抗体水平更高，维持的时间更久。表明质粒pcDNA3-V1-V2的免疫效果较好，有望成为防制猪2型圆环病毒的候选疫苗。     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗是当今研究的前沿领域,与传统疫苗相比具有很多优点,被誉为第3代疫苗革命.本文就核酸疫苗的作用机理、方法、医学上的研究进展及前景做一综述.     

兽用核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗是近年来发展起来的一种新型疫苗,它应用现代生物工程和分子生物学技术,克服传统疫苗存在的问题,具有传统疫苗不可比拟的优点,呈现出良好的发展势头和应用前景。在兽用领域中,新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性法氏囊炎等疾病的核酸疫苗得到了较为深入的研究,为兽用核酸疫苗乃至其他领域核酸疫苗的进一步研究提供了有益的参考。     

核酸疫苗研究现状

核酸疫苗是当前研究的前沿领域,它能诱发机体产生体液免疫和细胞免疫,作者就核酸疫苗的概念、载体、作用机理、影响因素、安全性和在畜禽传染病领域中的应用作一综述,希望为动物疫病防治提供参考.     

疫苗的第三次革命—核酸疫苗

在预防疾病的各种手段中,免疫预防是一种比较方便、有效和经济的措施.继第一、二代疫苗实践应用后,核酸疫苗以其特有的可诱导机体产生全面的免疫应答,对不同亚型的病原体具有交叉防御作用以及安全、可靠、生产方便等优点被称之为"疫苗的第三次革命".     

锦鲤疱疹病毒双基因检测方法的研究

为建立锦鲤疱疹病毒(KHV)双基因检测方法,本研究根据KHV聚合酶基因(Sph)和胸苷激酶基因(TK)的保守序列设计2对引物,建立两基因同时检测的PCR方法.结果表明,利用双基因同时检测KHV,可以同时特异扩增出570 bp和155 bp片段,而与鲤春病毒血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤鱼疱疹病毒无扩增反应.而且所建立的双基因检测方法对临床样品的检测结果与单一PCR方法比较符合率为100％.为进一步研究KHV以及诊断方法奠定了基础.     

聚γ谷氨酸生物合成与DegR关系及其免疫佐剂效果研究

为探讨调节因子DegR对聚γ谷氨酸(γ-PGA)生物合成产量的影响,比较聚γ谷氨酸佐剂和传统铝佐剂的辅助免疫效果,利用P43启动子构建了穿梭表达载体pHY-degR,通过电转化地衣芽胞杆菌WX-02获得重组菌株WX-02/pHYdegR。同时以福尔马林灭活的金黄色葡萄球菌蛋白疫苗作为免疫原,分别以不同分子质量聚γ谷氨酸佐剂和铝佐剂制备相关疫苗并免疫小鼠,7d后注射金黄色葡萄球菌,根据小鼠死亡数,计算其相对免疫保护率。结果显示,过表达degR后,聚γ谷氨酸生物合成产量提高至28.5g/L,相比对照菌株WX-02/pHY300提高22.6%。分子质量2×10~3 ku聚γ谷氨酸作为佐剂的相对免疫保护率效果最好(78.9%),优于铝佐剂免疫保护率(52.6%)和未添加佐剂免疫保护率(42.1%)。结果表明,过表达degR基因能提高聚γ谷氨酸生物合成量,且聚γ谷氨酸作为疫苗佐剂能增强疫苗免疫效果,可作为理想的疫苗佐剂。     

第三代新型疫苗--核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗(nucle ic acid vaccine)也称基因疫苗(genetic vaccine)或DNA疫苗(DNAbased immunization),是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因与质粒重组后直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。     

皂苷作为疫苗免疫佐剂的研究进展

皂苷是一类普遍存在于多种植物中的三萜糖苷类化合物,在中医药中具有重要地位。皂苷具有广泛的生物活性,尤其具有免疫调节和免疫刺激作用,可显著增强机体的免疫应答。皂苷作为佐剂不仅能延长疫苗的免疫周期,减少接种次数,也能调控免疫相关基因的表达,使干扰素调节因子、肿瘤坏死因子等的基因表达水平显著上调。皂苷佐剂虽然具有低毒性、高活性等显著优势,但同时也存在细胞毒性、肝肾毒性等缺点。未来可以通过结构修饰,使皂苷达到减毒增效的目的,也可开发新的剂型,解决其溶血性和细胞毒性等问题,使其在疫苗应用中更加广泛。本文对皂苷佐剂活性的机理、优缺点,以及在疫苗产品上的应用研究进展进行综述,旨在为开发新型疫苗佐剂提供参考。     

寄生虫核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗是一种将某种保护性抗原的编码基因克隆到真核细胞表达调控序列的质粒中 ,制成 DNA的重组质粒 ,直接给动物注射后质粒 DNA在组织内扩散 ,被宿主细胞摄取 ,随后通过宿主细胞的转录翻译系统 ,表达保护性抗原蛋白 ,在抗原蛋白释放分泌的同时 ,诱导机体发生免疫应答 ,产生对该抗原的保护性免疫 ,以达到治疗和预防疾病的目的。因此核酸疫苗又称基因疫苗 [1]。其包括 DNA疫苗和 RNA疫苗 ,目前研究最多的是 DNA疫苗 ,由于其不需要任何化学载体 ,又称 DNA疫苗。本文就寄生虫核酸疫苗的研究作一综述。1　核酸疫苗的研究概况1 994年 5…     

鸡γ-干扰素联合新城疫活疫苗对肉鸡免疫效果的研究

选用350只1日龄罗氏308商品肉鸡,比较不同剂量的鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)在新城疫活疫苗免疫前、后使用以及与疫苗同时使用对淋巴细胞刺激指数、巨噬细胞吞噬指数以及鸡新城疫HI抗体滴度的影响。结果显示:各试验组淋巴细胞刺激指数(SI)均高于空白对照组,表现差异显著(p<0.05);与疫苗对照组相比,疫苗免疫后给药组SI优于免疫前给药组和同时给药组,其中两次免疫后给药组好于一次免疫后给药组,500IU/羽的使用剂量优于100IU/羽;ChIFN-γ在免疫的不同时期使用均能有效提高巨噬细胞吞噬指数;两次免疫后给药组较疫苗对照组能明显提高28日龄以后新城疫抗体滴度,表现差异显著(P<0.05);一次免疫后给药组和免疫前给药各组的新城疫抗体滴度及变化趋势与疫苗对照组接近;但同时给药组各日龄段的新城疫抗体滴度都明显低于疫苗对照组。本试验结果显示ChIFN-γ联合新城疫活疫苗使用有助于提高疫苗免疫效果,其使用最佳时机为新城疫活疫苗免疫后使用,使用剂量为500IU/羽。     

锦鲤疱疹病毒双重PCR检测方法的研究

为了快速确诊锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV),本试验建立了KHV双重PCR检测方法。根据锦鲤疱疹病毒的SphⅠ-5基因和胸腺嘧啶脱氧核苷激酶(thymidine kinase,TK)基因设计特异性引物,优化反应条件,建立了KHV双重PCR检测方法。结果表明,建立的方法简单、灵敏、准确,一个反应体系可同时扩增292 bp和410 bp两个基因片段,可有效用于KHV的检测。     

DNA疫苗免疫佐剂的研究及应用

DNA疫苗是近年来出现的一种新型疫苗,能够诱导机体免疫系统产生体液免疫和细胞免疫,在预防和治疗人和动物的疾病中发挥重要的作用。随着DNA疫苗研究的深入和扩展,用于提高DNA疫苗免疫效果的免疫佐剂也逐渐开展起来。本文就新型细胞因子佐剂、趋化因子和协同刺激分子佐剂、补体分子佐剂和CpGDNA佐剂的研究作一综述。