三角帆蚌外套膜细胞培养的改进与大型有核珍珠的培育研究

为得到大颗粒优质的淡水有核珍珠,进行了游离细胞植入法在三角帆蚌(〖WTBX〗Hyriopsis cumingii〖WTBZ〗)内脏团插核育珠的研究。实验采用两种培养基(培养基1、2)进行外套膜外膜细胞的培养,对不同培养时间(2、4、6、12 h)的细胞活力进行检测,同时将处理过的珠核分别置于两组细胞悬液中共培养,6 h后采用内脏团插核手术,对500只三角帆蚌进行插核,并进行为期5个月的淡水有核珍珠生产实验。实验结果表明：细胞活力随培养时间逐渐增大,培养到6、12 h时,两种培养基中的细胞活力较2、4 h时均有显著提高(〖WTBX〗P〖WTBZ〗<0.05),6 h与12 h相比差异不显著(〖WTBX〗P〖WTBZ〗>0.05);细胞在两种培养基中分别培养,在培养2 h时两组间细胞活力没有显著差异(〖WTBX〗P〖WTBZ〗>0.05),而在培养4、6、12 h时培养基2组的细胞活力显著高于培养基1组(〖WTBX〗P〖WTBZ〗<0.05);培养基2组培养的细胞孵育珠核6 h后,贴附的细胞数量明显增多且分布均匀,插核5个月后,形成了包裹完整、具有光泽、沉积0.8 mm珍珠质的大型珍珠,而采用培养基1组培养的外套膜细胞进行珠核孵育而后插核,得到的素珠较多,且没有形成完整珍珠质包被的珍珠。实验表明改进后的培养基有利于三角帆蚌外套膜细胞培养,从而有利于内脏团有核珍珠的培育,这为进一步开展淡水贝类细胞培养的研究提供了实践基础,为大型有核珍珠的培育提供了依据。     

三角帆蚌外套膜细胞培养的改进与大型有核珍珠的培育研究

为得到大颗粒优质的淡水有核珍珠,进行了游离细胞植入法在三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)内脏团插核育珠的研究。实验采用两种培养基(培养基1、2)进行外套膜外膜细胞的培养,对不同培养时间(2、4、6、12 h)的细胞活力进行检测,同时将处理过的珠核分别置于两组细胞悬液中共培养,6 h后采用内脏团插核手术,对500只三角帆蚌进行插核,并进行为期5个月的淡水有核珍珠生产实验。实验结果表明:细胞活力随培养时间逐渐增大,培养到6、12 h时,两种培养基中的细胞活力较2、4 h时均有显著提高(P<0.05),6 h与12 h相比差异不显著(P>0.05);细胞在两种培养基中分别培养,在培养2 h时两组间细胞活力没有显著差异(P>0.05),而在培养4、6、12 h时培养基2组的细胞活力显著高于培养基1组(P<0.05);培养基2组培养的细胞孵育珠核6 h后,贴附的细胞数量明显增多且分布均匀,插核5个月后,形成了包裹完整、具有光泽、沉积0.8 mm珍珠质的大型珍珠,而采用培养基1组培养的外套膜细胞进行珠核孵育而后插核,得到的素珠较多,且没有形成完整珍珠质包被的珍珠。实验表明改进后的培养基有利于三角帆蚌外套膜细...     

三角帆蚌生长性状和内壳光泽度与所育有核珍珠光泽度相关性分析

光泽度为衡量珍珠价值上限的指标,为了研究三角帆蚌供片蚌和育珠蚌对有核珍珠光泽度的相对贡献,以白蚌（内壳主体色为白色的三角帆蚌）为材料,以壳长和外壳青色为选择性状,设置不同选择策略,建立8 组三角帆蚌群体,在每组群体随机选出供片组和育珠组,开展组合插核手术。经18个月培育,发现不同育珠组合中,供片蚌和育珠蚌同时来自 Ⅰ 组选择群体的YAA育珠组合所育珍珠光泽度值最大,比YGG、YHH产珍珠光泽度分别提高15.46%、21.51%;不同组供片蚌培育珍珠的光泽度差异显著,供片蚌内壳光泽度与珍珠光泽度呈极显著正相关（ r = 0.717 ~ 0.939 ）,建立供片组内壳光泽度和珍珠光泽度回归方程为：y=16.81+0.93x(R^2=0.777),供片蚌生长性状与珍珠光泽度相关性不显著;不同组育珠蚌培育珍珠的光泽度差异显著,但育珠蚌生长性状和内壳光泽度与珍珠光泽度不存在显著相关性。以上结果说明幼蚌期选育外壳颜色青色的三角帆蚌,达到了提升珍珠光泽度的目标,可作为选育产高光泽度珍珠三角帆蚌的间接性状,供片蚌内壳光泽度与珍珠光泽度显著相关,以其作为目标性状更优。     

基于蛋白质组学的三角帆蚌珍珠囊形成相关免疫因子研究

采用iTRAQ及生物信息分析技术研究三角帆蚌珍珠囊及外套膜外膜组织蛋白组差异,筛选其与珍珠形成和生长进程中的免疫调节因子,并通过数字基因表达谱,分析了外套膜插核进程中免疫相关因子的mRNA表达水平。研究结果表明,1871个蛋白被鉴定到,其中显著性差异表达蛋白119个(P<0.05),包括上调蛋白74个,下调蛋白45个;分析发现差异表达蛋白主要具有结合、催化、结构分子、运载体、调节酶等活性,主要富集于次生代谢、变形虫病、糖酵解与糖异生、近端小管碳酸氢盐回收、心肌病、甲烷代谢、脂肪细胞因子pathway。进一步筛选获得免疫相关蛋白37个(19个上调蛋白和18个下调蛋白),其主要富集于Notch、Hippo、NF-κB、TGF-β等信号通路,参与免疫球蛋白、凋亡、损伤愈合以及炎症反应。对上调蛋白中的MRC1、LBP、EPX、FcGBP以及下调蛋白中的CD109、CNN3、NOTCH3、LAMB2等在外套膜以及插核后5、20 thd的插核组织和50、90 thd的珍珠囊组织中mRNA表达量进行分析验证,表达与蛋白水平表达趋势相同,对后续将进一步关注不同免疫相关蛋白间的相互作用及其潜在关联,为阐述贝类免疫系统调节网络研究提供基础资料。     

三角帆蚌亲蚌的选择与培育技术

三角帆蚌系软件动物，隶属于瓣鳃纲，真瓣鳃目，蚌科，帆蚌属，别名：三角蚌、水壳、劈蚌、江贝、翼蚌、溪蚌、铲蚌、小壳等。是中国独有的优秀淡水育珠蚌，分布于河北、山东、安徽、江苏、浙江、江西、湖北和湖南等省大、中、小型湖泊及其周围河流内。在洞庭湖、鄱阳湖、太湖、洪泽湖、巢湖、邵伯湖及高宝湖等湖泊及其周围河流内，产量较高。国内以三角帆蚌所产的珍珠质量最佳，珠质细腻、光滑、色泽鲜艳、形状较圆，但珍珠生产比较缓慢，同时繁殖用亲本多为野生种或长期近亲繁殖，经累代养殖，出现生活力下降，个体变小、产珠性能和抗逆性差等问题，千万产量低，经济效益下降，困扰着淡水珠贝养殖业的发展。[第一段]     

三角帆蚌外套膜细胞培养与组织培养的比较

通过对三角帆蚌外套膜外表皮进行组织培养和细胞培养的比较研究，表明组织培养比细胞培养更易获得大量游离细胞。并且通过原子吸收光谱分析，证明体外培养的三角帆蚌组织和细胞皆能正常分泌珍珠质，且两者的分泌能力大体相同。     

三角帆蚌外套膜细胞培养与组织培养的比较

通过对三角帆蚌外套膜外表皮进行组织培养和细胞培养的比较研究，表明组织培养比细胞培养更易获得大量游离细胞。并且通过原子吸收光谱分析，证明体外培养的三角帆蚌组织和细胞皆能正常分泌珍珠质，且两者的分泌能力大体相同。     

RE对三角帆蚌珍珠抽促泌作用适宜剂量的研究

采用Ｌ９（３＾４）正交表设计，进行了轻稀土，重稀土和混合稀土三因素三珍珠质分泌影响的试验研究。结果表明，轻稀土和全元素混合稀土对三角帆蚌珍珠质的促泌作用显著，其促泌作用大小顺序是：混合稀土〉轻稀土〉重稀土。在本试验条件下，各类稀土对珍珠促泌的最适浓度分别是：轻稀土为１００￣３００ｐｐｍ，重稀土为１００ｐｐｍ，混合稀土为１００ｐｐｍ。     

三角帆蚌免疫系统及其珍珠层研究进展

为蚌病害的防治及培育出更优质的珍珠,根据近年来淡水育珠蚌三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)及部分其他贝类的研究资料,综述了三角帆蚌血细胞免疫、体液免疫,及其珍珠层结构与形成方面的研究进展,同时分析指出了现有研究的不足及以后的研究重点。     

无公害蒜黄沙培流水栽培新技术

蒜黄沙培流水栽培试验结果表明 ,水温以 15～ 17℃较为适宜 ,品种以苏联大蒜、嘉祥大蒜的产量最高。 10月下旬至翌年 3月份均可生产 ,每 2 3～ 2 5天 1茬。栽培关键技术为避光保温 ,合理灌水 ,以 1昼夜灌 6h ,每隔 3h灌水 1h ,灌水量 10m3 /h为宜     

小麦叶锈菌离体培养研究

用 45 %特克多胶悬剂、15 %TBZ乳油、6 -BA作保鲜剂 ,分别以脱脂棉、滤纸、水琼脂培养基为载体进行小麦叶锈菌离体培养 ,表明在 3种保绿剂中 ,6 -BA的保绿效果最好 ,且小麦叶锈病病程和症状均与温室苗期试验相当 ,45 %特克多胶悬剂次之 ,15 %TBZ乳油效果较差。一定范围内保绿剂的浓度低 ,发病快、褪绿早 ;反之 ,发病慢、褪绿晚 ,但浓度太高不仅影响保绿效果 ,而且影响叶锈病的发生。 3种保绿剂的最适使用剂量分别为 :45 %特克多胶悬剂 5 0 μL·L-1、15 %TBZ乳油 2 5 μL·L-1、6 -BA 2 5～ 75mg·kg-1。叶龄影响离体叶片的保绿效果 ,以叶龄小的初展叶效果最佳。衬垫物灭菌与否对保绿及病害发生无显著影响。三种衬垫物中 ,以脱脂棉效果最好 ,滤纸次之 ,水琼脂效果最差。试验证明以 6 -BA 2 5～ 75mg·kg-1为保绿剂 ,以脱脂棉为衬垫物 ,取叶龄小的初展叶作离体叶片 ,在 18～ 2 0℃的生化培养箱中培养 ,利于叶片的保绿及小麦叶锈菌的生长。该方法比清水法提高保绿效果 1倍以上 ,是行之有效的专性寄生菌离体培养方法之一。     

不同地区三角帆蚌养殖水体的水质

2006年9-10月期间调查了分布江苏(苏州市)、浙江(杭州市、绍兴市)、湖北(荆州市)、湖南(岳阳市)和江西(九江市)16个三角帆蚌养殖水体的水温、透明度(SD)、溶氧(DO)、pH、盐度、电导率、SO42-、CI-、CO32-、HCO3-、Ca2 、Mg2 、K Na 、总碱度、总硬度、总氮(TN)、总磷(11P)、高锰酸钾指数(CODMn)和叶绿素a(Chl-a).结果表明:所调查的养殖水体的DO和pH均适合三角帆蚌的生长.吴江市(苏州市)、杭州市和绍兴县(绍兴市)养殖水体的透明度相对较高,苏州市养殖水体的盐度和电导率最高.所调查的养殖水体中阴离子均以HCO3-最高,阳离子分别以K Na 或Ca2 最高.所调查的养殖水体总碱度为24～219 mgCaCO3/L,总硬度为40.93～218 mgCaCO3/L,Ca2 为7～50 mg/L,其中苏州市和九江市养殖水体总碱度、总硬度和Ca2 较高,杭州和绍兴市养殖水体的总碱度和总硬度较低,绍兴市绍兴县养殖水体和诸暨市的部分养殖水体Ca2 较低.所调查的养殖水体氮磷变动范围为:TN为0.52-1.91 mg/L,TP为0.06～0.3 mg/L,TN/TP为4～17,其中杭州市养殖水体TN和TP最高,绍兴诸暨市的水体TN较高.相城区(苏州市)、荆州市、岳阳市养殖水体和苏州市部分养殖水体TN较低.杭州市、绍兴市和荆州市养殖水体的CODMn相对较高,岳阳市养殖水体的Chl-a含量低.在调查的水体中,TN与TP、CODMn正相关;总硬度与总碱度、Ca2 、Mg2 显著正相关.     

不同地区三角帆蚌养殖水体的水质

2006年9-10月期间调查了分布江苏(苏州市)、浙江(杭州市、绍兴市)、湖北(荆州市)、湖南(岳阳市)和江西(九江市)16个三角帆蚌养殖水体的水温、透明度(SD)、溶氧(DO)、pH、盐度、电导率、SO42-、CI-、CO32-、HCO3-、Ca2 、Mg2 、K Na 、总碱度、总硬度、总氮(TN)、总磷(11P)、高锰酸钾指数(CODMn)和叶绿素a(Chl-a).结果表明:所调查的养殖水体的DO和pH均适合三角帆蚌的生长.吴江市(苏州市)、杭州市和绍兴县(绍兴市)养殖水体的透明度相对较高,苏州市养殖水体的盐度和电导率最高.所调查的养殖水体中阴离子均以HCO3-最高,阳离子分别以K Na 或Ca2 最高.所调查的养殖水体总碱度为24～219 mgCaCO3/L,总硬度为40.93～218 mgCaCO3/L,Ca2 为7～50 mg/L,其中苏州市和九江市养殖水体总碱度、总硬度和Ca2 较高,杭州和绍兴市养殖水体的总碱度和总硬度较低,绍兴市绍兴县养殖水体和诸暨市的部分养殖水体Ca2 较低.所调查的养殖水体氮磷变动范围为:TN为0.52-1.91 mg/L,TP为0.06～0.3 mg/L,TN/TP为4～17,其中杭州市养殖水体TN和TP最高,绍兴诸暨市的水体TN较高.相城区(苏州市)、荆州市、岳阳市养殖水体和苏州市部分养殖水体TN较低.杭州市、绍兴市和荆州市养殖水体的CODMn相对较高,岳阳市养殖水体的Chl-a含量低.在调查的水体中,TN与TP、CODMn正相关;总硬度与总碱度、Ca2 、Mg2 显著正相关.     

Study on culturing Trichodema mutants

Trichodema mutants strains T5, T0803, T1010, T1003were cultured in different conditions and media, also in the presence of fungicides at 40 mg/kg (CK or procymidone chlorothalonil, or maneb or phosethyl-Al) . The pH values of media were 5, 6, 7 and 8 and hyphae were grown at temperatures of 15, 20, 25 and 30 ℃. After being cultured for 3, 4, 5, or 6 days, the strains were transferred at a lower temperature to sporulate (20 ℃) . Obtained data were analyzed statistically, with the ortho…     

一种实验用长形刨花的制备方法

基于生产长形刨花的设备价格昂贵，提出一种实验用长形刨花的简易制备方法。以杉木Cuninghamia lanceolata生材为原料，采用平刨法和压刨法制备长形刨花，并对刨花尺寸和形态进行分析。结果表明：平刨法刨切的70mm长圆木段的刨花长度为60～80mm的占70％左右，压刨法刨切的90mm长的方材的刨花长度为80～100mm的约占55％；长度为70mm的刨花的形态系数约半数为100～150，90mm长的刨花形态系数约半数为200～300。因此2种方法所制得的刨花尺寸、形态系数等都符合实验要求，取适当长度的木块及调节合适的刀片伸出量即可生产各种规格的刨花。