波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用

采用自己研制开发的波尔山羊胚胎手术回收和移植的关键器械，共进行122只供体的胚胎回收，回收供体卵巢上正常黄体总计2751枚，回收卵总数2504枚，回收率达到92．3％。采用这种自行研制的胚胎移植器械进行胚胎的子官移植，将2127枚波尔山羊胚胎移植给1182只受体，受体妊娠率达到63．0％（745／1182），证明该胚胎移植器械和制定的应用程序是可行的。     

科苑荟萃

云南水牛的同期发情、超数排卵和胚胎移植试验；无角道塞特绵羊超数排卵技术研究；胚胎移植技术在云南半细毛羊上的应用研究；受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响；波尔山羊胚胎徒手分割试验；波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用；OPS法玻璃化冷冻绵羊胚胎的移植效果观察；影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析；安胎散提高羊胚胎移植受胎率及其机理的研究；[编者按]     

我国移植波尔山羊胚胎获成功

我国首例波尔山羊胚胎移植在山东省无棣县良种畜禽繁育场获成功。这次波尔山羊胚胎移植 ,采用国内先进的药物超数排卵技术 ,在一只纯种波尔山羊供体内 ,一次性采集胚胎 37枚 ,其中可用胚胎 2 9枚 ,并顺利移到当地 2 1只山羊腹中。这次胚胎移植创下了我国胚胎移植中一次性采集胚胎数量最多、成功率最高的新记录。(摘自《四川畜牧兽医》2 0 0 0年第 2期 )我国移植波尔山羊胚胎获成功     

波尔山羊批量胚胎移植技术体系在上海建立

上海市转基因研究中心从 1999年摸索波尔山羊批量胚胎移植条件 ,现已建立波尔山羊批量胚胎移植技术体系 ,一批次对 5 5只原种波尔山羊进行超数排卵 ,平均每只采集有效胚胎 2 0 2枚 ,共移植山羊5 5 6只 ,受体怀孕率 6 1.3% ,通过胚胎移植共产羊羔40 9只。波尔山羊批量胚胎移植技术体系在上海建立     

科苑荟萃

波尔山羊胚胎移植受体羊难产的救助,影响德国美利奴母羊两次超排移植效果因素分析,农区组织胚胎移植受体牛羊的问题及对策,非繁殖季节胚胎因素对绵羊胚胎移植影响的研究,用北方本地羊作受体的波尔山羊春季胚胎移植试验[编者按]     

波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究

1999～2000年,在成都波尔山羊种羊场进行了波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究.对12只供体用FSH减量法进行超排处理,回收胚胎257枚,平均21.4±11.1枚,其中可用胚206枚,平均17.2±8.33枚.将170枚可用胚移植给同期发情的78只雅安奶山羊受体,其中2只在妊娠2个月后流产,49只受体羊妊娠到期产下纯种波尔山羊羔88只,移植受体妊娠率65.4%(51/78),产羔受体比率62.8%(49/78),胚胎成羔率51.8%(88/170).平均每只波尔山羊供体通过胚胎移植增加纯种后代7.33只.其中RB52号波尔山羊获16枚胚胎,移植给8只奶山羊(双胚),全部妊娠,产下13只纯种波尔山羊,胚胎成羔率达81.3%.结果表明,波尔山羊胚胎移植奶山羊能获得较高的妊娠率和胚胎成羔率,已可从研究阶段发展到产业化应用.     

四川省波尔山羊胚胎移植操作规程的研究

根据四川省的生产条件,进行了波尔山羊胚胎移植操作规程的研究。从波尔山羊胚胎移植中准备工作及实施方案的制定开始,对供、受体羊选择与饲养管理,供体羊超排技术与胚胎回收、鉴定技术,受体羊同期发情与胚胎手术移植技术,以及供、受体羊术后管理等系列化操作规程进行了研究与确定。     

胚胎移植中受体羊重复使用效果的研究

将140枚波尔山羊胚胎移植给63只奶山羊受体,第2年将49枚波尔山羊胚胎重复移植给其中的31只受体,重复2次使用,第3年再将26枚胚胎第3次重复移植于其中的13只受体,试验结果表明,在使用自制专用移植针,熟练、稳妥地进行手术操作的情况下,受体重复使用3次不显著影响移植效果,各次胚胎移植的受体妊娠率分别为61．9％(39／63)、64．5％(20／31)和61．5％(8／13),胚胎成羔率分别为51．4％(72／140)、53．1％(26／49)和46．2％(12／26)。     

波尔山羊批量胚胎移植莎能奶山羊

采用阴道栓 FSH超数排卵,经产供体波尔山羊22只,在放栓后第9～11天,连续4d递减量肌肉注射FSH。22只供体羊发情与纯种波尔山羊种公羊配种后第7天,手术回收输卵管中早期发育胚胎再经手术移入同期发情的受体奶山羊输卵管内妊娠产仔。结果表明:1获得373枚早期胚胎,其中A级胚胎占31.1%(85/273),B级胚胎占49.5%(135/273),异常胚胎占19.4%(53/273)。2将167枚7日龄可用胚胎(A级和B级)移植147只受体羊输卵管内,移植后35d,妊娠98只,妊娠率为67%(98/147),83只羊足月产羔为89只,产羔率为85%(89/98),20只受体移植了两枚胚胎,只有6只产双羔。3羔羊出生重平均为3.7±0.54kg。每只供体羊平均产羔4.05只。胚胎移植所得羔羊的初生重与自然繁殖波尔羔羊无显著差异(P>0.05)。试验证明,山羊胚胎移植计划可使良种群体繁殖率提高3～5倍,优秀个体繁殖力提高6～8倍,从而加快纯种山羊的繁殖。     

波尔山羊胚胎移植的实用方法与技术

山羊的胚胎移植技术是指利用良种或优秀个体母羊作为供体进行超数排卵处理，使其生产可能多的胚胎，同时以生产性能差的品种或个体母羊作为受体，通过手术方法将供体生产的胚胎移入受体的子宫内，借劣质母羊之腹怀优良个体之胎，从而达到快速扩繁良种羊后代的目的。通过进行波尔山羊胚胎移植技术，可大大加快纯种波尔山羊的繁育速度，获得很好的经济效益和社会效益。     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

牛胎胚移植近况

牛胚胎移植方案主要包括:供体的选择,超排、冲胚、检胚、供受体同期发情、移植、胚胎冷冻、胚胎分割和体外受精。胚胎性别鉴定,同卵双胎的获得、胚胎核移植和嵌合体的获得等是胚胎移植技术应用的发展。 供体牛的选择 技术上考虑,发情周期正常的母牛或育成母牛对超排都应作出预前的估测。实践证明,育成母牛及老龄母牛一般超排效果较差。合适的供体母牛应是4—9岁,生殖机能正常、健康发情规律且孕期正常(H.G.R wagner)。     

KF-1型牛胚胎移植器的研制及移植

我国自1975年开展牛胚胎移植技术的研究以来,虽已先后获得新鲜胚胎及冷冻胚胎移植成功,但移植成功事均偏低。据1985年全国牛胚胎移植试验材料统计,新鲜胚胎移植成功率平均为23.8%(32/160),冷冻胚胎的移植成功率平均仅为9.6%(5/52)。移植成功率低的主要原因之一,是我国还没有定型的配套牛胚胎移植器械,非手术移植胚胎时,很难将胚胎放置在子宫最适部位,并易造成胚胎丢失和子宫环境的感染。因而,移植后可能造成部份胚胎的早期死亡。     

供体母羊及与配公羊个体对波尔山羊胚胎移植效率的影响

对135只波尔山羊供体母羊进行超排处理,回收卵总数2504枚,平均18.55±7.63枚,其中可用胚2182枚,平均16.16±7.46枚.将2127枚鲜胚移植给1182只受体,妊娠率为63.03%(745/1182),移植胚胎成羔率为52.1%(1108/2127).试验结果表明,供体各个体之间所获得的胚胎移植成羔率存在着显著差异(P＜0.05),胚胎成羔率大于80%的供体平均每只获胚胎移植羔羊14.8±4.27只,胚胎成羔率小于20%的供体平均每只获胚胎移植羔羊1.83±1.17只,其中个体获得羔羊最多的为21只(21/26).有9.63%的供体胚胎移植成羔率大于80%,有4.44%的供体胚胎移植成羔率小于20%.14只公羊配种的135只供体获得的胚胎可用率同样存在着显著差异(P＜0.05).     

外界因素对胚胎移植受体妊娠率的影响

胚胎移植成功率取决于诸多因素。它不仅与供体的胚胎质量、数量、不同发育阶段、供受体发情同步差异、受体品种、体况及繁殖力等内在因素有关,还受季节、气候、环境条件、饲养管理、疾病等外界因素影响。本文就外界因素对波尔山羊移植受体妊娠率的影响进行探讨。     

波尔山羊胚胎移植产业化关键技术研究

为使波尔山羊胚胎移植形成产业,对供、受体羊的选择、同期发情、超数排卵、采胚、检胚与移植等关键技术进行了研究.在非繁殖季节(北京地区 4月至 8月),供体波尔山羊 15只,受体羊(马头山羊) 76只,受胎率为 71.0%,移植产羔率为 42.1%;在繁殖季节(北京地区 9月至翌年 3月),供体波尔山羊 34只,受体羊(马头山羊) 98只,受胎率为 68.4%,移植产羔率为 48.0%.这表明波尔山羊胚胎移植可以从研究阶段发展到产业化应用阶段.     

影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析

在生产条件下，对3个优良品种的127只绵羊（道塞特47只、萨福克49只、杜泊31只）和111只波尔山羊供体使用不同国别生产的促卵泡素（FSH）实施超数排卵处理，然后对1231只小尾寒羊和奶山羊受体实施不同方法的胚胎移植，旨在筛选出切合于生产实际成本低、效率高的超数排卵和胚胎移植方案。实验结果表明，使用新西兰产FSH对波尔山羊超数排卵后平均获得可用胚胎14枚／只，显著高于澳大利亚产FSH效果（平均7．59枚／只）（P〈0．05）．而中国科学院产FSH的超排效果（平均10．38枚／只）与新西兰产无显著性差异（P〉0．05）；进一步采用中国科学院产和新西兰产FSH分别对道塞特、萨福克和杜泊3个品种绵羊实施超数排卵结果，获得平均可用胚胎数均无显著性差异（P〉0．05）；使用腹腔内窥镜法和常规手术法胚胎移植结果表明，移植妊娠率分别为57．44％和60．20％．2种方法间无显著性差异（P〉0．05）。由于中国科学院产FSH价格便宜，而腹腔内窥镜法胚胎移植可大大缩短操作时间，两者结合可降低成本、提高效率，适宜羊胚胎移植产业化应用。     

应用胚胎生物技术繁育高产奶牛

本项目由山东省梁山畜牧发展有限公司完成，项目技术创造性强，先后进行了受体鲁西黄牛选育、孕前及孕期的饲养管理，供体牛夏冬季超数排卵，克隆胚胎移植，胚胎规模化移植等方面的技术研究；组装成了以鲁西黄牛为受体，应用胚胎移植技术繁育高产奶牛的配套技术；开创了以鲁西黄牛为受体，应用胚胎移植技术大规模繁育高产奶牛的先例。3年来，生产高产奶牛胚胎516枚，移植受体牛500头次，鲜胚移植成功率达到54％，冻胚移植成功率达到42．8％，体细胞克隆胚胎移植成功率达到20．5％，出生犊牛163头。     

FSH剂量、受体品种及移植胚胎数对崇明白山羊胚胎移植效率的影响

为提高崇明白山羊的繁殖效率,用促卵泡素（Follicle-Stimulating Hormone,FSH）对崇明白山羊进行超数排卵,回收2～4细胞期胚胎移植至同期发情受体的输卵管,跟踪受体妊娠和产羔结果,比较不同FSH剂量时的超排结果,比较受体品种和移植胚胎数对妊娠率和产羔率的影响。试验结果为：（1）对于体重在20～30 kg的崇明白山羊,FSH的最佳超排剂量为240 U,每头次超排平均可获得可用胚胎10.06枚。（2）每只受体均移植2枚胚胎时,徐淮山羊的早期妊娠率为56.44%（57/101）,高于崇波杂交羊组（崇明羊与波尔羊的杂交后代）47.62%（10/21）和徐波杂交羊组（徐淮羊与波尔羊的杂交后代）46.93%（23/49）,但各组间早期妊娠率差异均不显著。（3）移植4枚胚胎时,妊娠率为60.00%（12/20）、产羔率为1.75,均高于移植2枚胚胎组的52.82%（75/142）和1.30。而移植4枚时胚胎的得羔率为26.25%（21/80）,低于移植2枚胚胎组的33.25%（141/424）。这表明,移植4枚胚胎可以提高受体妊娠率和产羔率,但降低了胚胎利用率。     

羊胚胎生产和胚胎移植

综述了绵羊和山羊胚胎生产和胚胎移植各项技术的研究进展，包括超数排卵、体内受精与发育；成熟卵泡卵母细胞与腔前卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精与发育；利用极体生产胚胎以及利用胚胎生产胚胎的胚胎分割与细胞核移植克隆技术；胚胎的回收、检胚与胚胎分级，以及供体与受体的同期发情处理和胚胎移植技术。