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【目的】分析陕北8个县(区)马铃薯X病毒外壳蛋白(CP)基因序列的一致性和变异性,明确病毒变异程度,为脱毒马铃薯的推广提供参考。【方法】以陕北8个县(区)种植2~3代疑似携带病毒的马铃薯叶片为材料,首先用Trizol法提取8个采样点马铃薯叶片总RNA,以已公布的马铃薯X病毒CP基因序列设计特异引物,通过RT-PCR扩增目的DNA片段,用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物;然后对CP基因进行克隆并测序,使用DNAstar软件分析陕北马铃薯X病毒CP基因序列的一致性,并与国内外其他地区12个马铃薯X病毒进行比较,采用邻接法构建系统进化树。【结果】从陕北8个县(区)马铃薯叶片中均扩增到与预期大小一致的长度为620 bp目的片段,可知这些马铃薯均感染了X病毒。不同CP基因序列之间存在微小变异,8个县(区)样品间CP基因的序列一致性在95.2%~99.4%,与国内外其他地区12个样品CP基因的序列一致性在92.9%~98.5%。系统进化树显示,将X病毒可分为4个类群,而陕北8县(区) 马铃薯X病毒归属于其中的2个类群。【结论】马铃薯X病毒在陕北地区普遍存在,RT-PCR方法可快速、准确地检测到马铃薯X病毒,X病毒CP基因存在一定程度的变异。 相似文献
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转病毒移动蛋白及复制酶基因烟草的协生和重组风险分析 总被引:2,自引:0,他引:2
对转化番茄花叶病毒 (ToMV)、烟草花叶病毒 (TMV)移动蛋白 (MP)基因和黄瓜花叶病毒P1株系(CMV P1)部分复制酶基因的 3种转基因烟草 ,分别接种马铃薯X病毒 (PVX)、马铃薯Y病毒 (PVY)、CMVRB株系 (CMV RB)和TMV。症状观察和ELISA测定发现 ,各病毒在转基因烟草和非转基因烟草上的症状及病毒浓度没有显著差异 ,表明这些病毒在转基因烟草上没有协生作用发生。对转化ToMVMP基因和转化CMV P1部分复制酶基因的转基因烟草 ,分别接种TMV和CMV RB ,定期进行生物学、ELISA和免疫捕获反转录PCR(IC RT PCR)检测 ,在 16个月的连续测定中未发现病毒重组现象。 相似文献
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黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因克隆及在病毒检测中的应用 总被引:4,自引:3,他引:4
根据已经发表的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白基因的序列,人工合成引物,通过反转录和PCR扩增并克隆了黄瓜花叶病毒辣椒分离物P33(CMV-P33)的外壳蛋白基因,构建到质粒PBS的Hinc位点.重组质粒经Sma酶切后,在0.8%低熔点琼脂糖上电泳,回收克隆的CP基因片段(约0.7kb),用切口平移的方法进行α-32PdATP标记.以此为探针,通过点杂交技术检测提纯的病毒CMV-P33和R1株系、CMV-P33的RNA,及受CMV侵染的辣椒叶片汁液,结果表明:提纯的CMV-P33和R1株系的最低检出量分别为1ng和4ng,CMV-P33的RNA为0.1ng.检测受CMV侵染的辣椒叶片汁液时,最大稀释倍数为100倍.其次,用该探针检测健康辣椒和受烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒侵染的烟叶汁液时,检测反应均为阴性. 相似文献
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侵害番茄的病毒种类较多,目前国内外已经报导的近二十种。在我国较常见的有烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、番茄束顶病毒(ToBTV)和番茄卷顶病毒(ToCTV)等七种,其中以烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒两种流行广泛,为害最大。在烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、马铃薯X病毒三种病毒中有两种或者三种同时侵染并发,则症状加重,严重减产,甚至无收。近两年来,尤其1979年国内大部分地区番茄受病毒侵害严重,产量损失很大。 相似文献
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辣椒抗病毒病研究现状概述 总被引:3,自引:0,他引:3
辣椒是当前生产中大面积栽培的主要蔬菜种类之一,在全国各地普遍栽培。20世纪70年代以来,由于品种交流范围扩大、交流速度加快以及耕作制度的限制,使得病毒病的传播进一步加快,病毒病由原来的次要病害逐渐上升成为辣椒的主要病害,危害逐年加重,严重影响了辣椒的产量和品质〔1,2〕。辣椒病毒病的毒源,从1923~1925年Dolitte证实黄瓜花叶病毒(CMV)侵染辣椒以来,世界各国已分离到30余种病原病毒,其中最主要的是烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、烟草蚀纹病毒(TEV)、黄瓜绿斑花叶病毒(CGMM… 相似文献
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贵州不同海拔地区马铃薯病毒病初步调查及检测鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]调查贵州省不同海拔地区马铃薯病害发生情况,鉴定出贵州省马铃薯易感病毒种类。[方法]采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)对在黔南州、黔东南州及毕节地区采集的805份马铃薯样品进行病毒检测。[结果]805份马铃薯样品中检出有29份马铃薯X病毒(PVX)为阳性;41份马铃薯Y病毒(PVY)为阳性;285份马铃薯S病毒(PVS)为阳性;23份马铃薯卷叶病毒(PL-RV)为阳性,带病毒率46.95%。[结论]对贵州马铃薯危害较重的病毒种类依次为:马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)。 相似文献
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马铃薯A病毒病及其防治 总被引:1,自引:0,他引:1
马铃薯A病毒病是由马铃薯A病毒(Potato Virus A,PVA)引起的一种系统侵染的病毒病.马铃薯感染上该病后可造成减产40%以上,是马铃薯生产上危害较严重的病毒病之一.由于至少有7种蚜虫以非持久性的方式传播该病病毒,而这些蚜虫在我国又比较常见,因此该病毒流行的可能性很大,具有较大风险.该病毒病病原不定期可与马铃薯Y病毒属的其他病毒如PVY、YVX等复合侵染,对马铃薯、烟草等造成更大的危害. 相似文献
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辣椒花叶病防治研究初报 总被引:1,自引:0,他引:1
辣椒(Capsicum annuum L.)花叶病,是近年影响产量和质量的重要问题。经近年来的研究(1980~1985年),初步鉴定,主要毒原为烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)及很少的烟草蚀纹病毒(TEV)和马铃薯Y病毒(PVY)等。因毒原种群不同症状表现有些差异。由TMV侵染的辣椒多表现黄色斑驳花叶型和普通花叶型;由CMV侵染的辣椒叶片,多表现黄化型和畸形、蕨叶等型。田间蚜虫传播CMV,品种间对病毒的抗性略有不同,若采取一系列栽培措施,有显著减轻本病的作用。兹将防治研究初步结果简报如下。 相似文献
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分别从陕西咸阳、兴平、杨凌、柔谷、眉县、岐山、凤翔等地采集辣椒病毒病标样126份,在室内通过单斑分离及回接验证得到5种分离物,采用鉴别寄主的生物学反应和DA S-EL ISA法鉴定,结果表明,引起陕西辣椒病毒病的毒原有黄瓜花叶病毒(CM V)、烟草花叶病毒(TM V)、烟草蚀纹病毒(TEV)、马铃薯Y病毒(PVY)和蚕豆萎蔫病毒(BBW V),其中CM V和TM V是优势毒原种群,分别占检测样品的60.31%和30.94%。在室内分别以CM V和TM V的枯斑寄主苋色藜和心叶烟为测试寄主,采用半叶法对接种叶片分别于接种前和接种后涂施病毒抑制剂,测试了7种病毒抑制剂的抑制效果。结果表明,接种前后涂施3.85%病毒必克水乳剂500倍液,均对黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒有很好的防治效果,且接种前涂施的防治效果较接种后涂施的防治效果好。 相似文献
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一、普通花叶病 (一)发病规律.烟草普通花叶病是一种植物病毒引起的病害.这种病毒简称THV.除为害烟草外,还为害蕃茄、马铃薯、茄子、辣椒等作物.该病极易接触传播,无病菌烟株只要被病叶磨擦一下,叶片上的茸毛稍有损伤,就能传染病毒. 相似文献
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合适的内参基因是采用实时荧光定量PCR研究基因表达获得可信数据的基础.为了获得合适的内参基因,更好地研究烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)与烟草和番茄2种寄主的互作,本项研究根据已报道的云烟和番茄看家基因设计引物,使用geNormPlus软件分别对其在TMV和PVX侵染下的云烟97和番茄中表达量的稳定性进行了评估.结果表明:2种寄主植物中供试看家基因中各有4对引物满足qPCR的要求,分别是云烟tub,CYP,GAPDH,β-tub,番茄18S,UK,ACT,EFl-α.在2种病毒侵染后的云烟内参基因中表达最稳定的为CYP,番茄中内参基因为ACT.最终确定这2个看家基因分别作为实时荧光定量PCR研究烟草和番茄在TMV和PVX胁迫下寄主体内基因表达变化的内参基因.该结果为进一步探讨2种病毒共同侵染时,它们与烟草和番茄2种寄主互作生物学效应研究奠定了基础. 相似文献