羊布鲁菌杆病的防控措施

羊布鲁菌杆病（Brucellosis）是能够致使人畜共患病的一种烈性传染病,羊布鲁菌杆病也属于现阶段造成全球危害最大的一种人畜共患病。该病的传播不但能给养殖业的经营造成致命的经济亏损,更会给养殖户的生命安全造成直接重大威胁。因此,结合现今的临床病例,对羊布鲁菌杆病发病诱因以及临床特征进行深入分析,并且制定出行之有效的防控检疫措施,是当前预防羊布鲁菌杆病的重要防控工作。     

张家口市规模化奶牛场布鲁菌病血清学检测与分析

为了查清张家口市规模化奶牛场布鲁菌病流行动态,采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验的方法对2 680头奶牛做了布鲁菌病血清学检测。结果表明,布鲁菌病血清阳性率为0.45%,已经出现零星感染。     

布鲁菌PCR检测方法的建立及其应用

本文根据已发表布鲁菌BCSP31基因序列,设计1对引物,以布鲁菌19号苗基因组DNA作为模板,建立诊断牛布鲁菌病的PCR方法,并对方法的特异性、敏感性及适用性进行验证.结果显示,PCR能扩增布鲁菌BCSP31基因特定序列.该方法对布鲁菌的最小检出量为9pg,对葡萄球菌26001株、大肠杆菌O78等7种参照菌株的核酸扩增结果均为阴性.建立的PCR方法具有快速简便、特异性强、敏感性高等特点.     

规模羊场布鲁菌病流行特点及净化措施探究

随着我国社会经济的快速发展,人们生活水平的不断提升,我国养殖向着规模化、集约化及科学化的方向不断发展.规模养羊场中布鲁菌病防控属于重要的工作内容,但一些地区发病率在上升.布鲁菌病属于人畜共患病,一旦发病不仅会影响规模养羊场的良性发展,还会影响社会稳定,探讨有效的防治措施意义重大.     

猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌多重PCR检测方法的建立及应用

为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法。特异性试验结果表明,可以从4种布鲁菌以及4种细菌混合物中扩增出大小分别为276、494、733和976bp的特异性条带,对照组的检测结果为阴性;敏感性试验结果表明,对4种病原菌基因组DNA的检出量为猪种32.2pg、牛种21.3pg、羊种27.5pg、绵羊种43.2pg;人工模拟感染样本检测结果表明,能从混合感染的病料中特异地检测出4种病原菌。应用该方法对200份临床奶山羊乳样进行检测,结果检出4份阳性。建立的多重PCR方法具有特异性强、敏感度高、稳定性好的特点,可以有效地检测4种布鲁菌的感染。     

基于系统多层次灰色关联熵的奶牛布鲁菌病风险评估

[目的]探究影响奶牛布鲁菌病风险评估的主要因素及其影响顺序。[方法]从饲养与调入、繁育、饲养环境、混养情况4个方面,设定了评价指标体系,选取3个有代表性的地区进行了调查,应用系统多层次灰色关联熵分析方法进行奶牛布鲁菌病风险评估。[结果]一级指标对奶牛布鲁菌病风险的影响顺序为:饲养与调入>饲养环境>混养情况>繁育;二级指标对奶牛布鲁菌病风险的影响顺序为:U32>U12>U11>U31>U21>U42>U43>U23>U22>U41;3个有代表性的地区奶牛布鲁菌病的风险水平为:A省份>B省份>C省份。[结论]该研究为合理评估不同地区的奶牛布鲁菌病风险水平提供了理论依据。     

检测牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用研究

根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成3对引物,以牛种布鲁菌A19,羊种M5,猪种S2基因组DNA为模版,建立可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法,并对方法的扩增效果、特异性、敏感性及适用性进行验证.结果显示,牛种布鲁菌可扩增出222bp和615bp两条带,羊种布鲁菌可扩增出222bp和932bp两条带,该方法对牛种布鲁菌A19和羊种布鲁菌M5混合DNA模板的最小检出量为100pg,对葡萄球菌26001株、大肠杆菌O78等7种参照菌的核酸扩增结果均为阴性.应用该方法对19份布鲁菌血清抗体为阳性牛乳样进行检测,结果均为布鲁菌抗原阳性.     

布鲁杆菌病性脊柱炎的治疗进展

布鲁杆菌病（brucellosis,简称布病）是由布鲁杆菌引起的一种人畜共患的系统性、变态、反应性传染病。布鲁杆菌病性脊柱炎是布鲁杆菌侵袭脊柱引起的感染性脊柱炎［1］,是布鲁杆菌病性骨关节炎的表现之一,是一种罕见的脊柱炎,在布病中的发生率为2％～53％［2］,由Kulowski和 Vinke在1932年首次描述［3］。近几年中国发病率呈上升趋势［4］,局部地区流行严重,疗程长,不易根治,而且布鲁杆菌病性脊柱炎容易误诊为脊柱结核,两者早期影像上都表现受累椎体破坏,椎间隙变窄或消失,可形成椎旁脓肿,鉴别十分困难［5］。目前对布鲁杆菌病性脊柱炎的治疗效果不明显,但随着对布鲁杆菌病性脊柱炎发病机制认识的提高,对布鲁杆菌病性脊柱炎治疗研究也有了新的进展。目前布鲁杆菌病性脊柱炎缺乏统一的治疗方案,一般急性期、没有神经受损症状、影像学表现椎体破坏不明显和无椎旁软组织肿胀的病例,多采取非手术治疗,非手术治疗包括较长时间卧床制动,加强支持疗法,高压氧治疗,药物治疗等;非手术治疗无效,症状逐渐加重者,应采取手术治疗。现对近年来布鲁杆菌病性脊柱炎的治疗进展综述如下。     

动物布鲁氏菌病疫苗的来历及亚单位疫苗的研究概况

布鲁氏菌病是一种严重危害人和动物健康的人畜共患病,人群感染主要来源于感染的动物及被污染的畜产品,目前疫苗免疫仍是控制动物布鲁氏菌病的主要措施。现有国际参考疫苗主要有牛种疫苗株S19和羊种疫苗株Rev.1,这些疫苗为动物群布鲁氏菌病控制提供重要保障的同时也存在关键的技术瓶颈问题,如安全性差,接种动物出现流产;血清抗体体内持续时间较长,干扰常规诊断等。随着布鲁氏菌基因组测序工作的相继完成及DNA重组技术的发展,新型布鲁氏菌病疫苗的开发成为研究的热点。亚单位疫苗本着其较高的安全性和有效性,在动物群布鲁氏菌病控制过程中具有较大的应用前景。笔者综述了布鲁氏菌病疫苗的发展史,并对布鲁氏菌病亚单位疫苗的研究进展进行概述。     

猪病疫苗研究进展

重点介绍近年来研究较多的新型猪病疫苗,以期为开发安全、稳定、高效、廉价的猪病疫苗提供参考。     

布鲁菌17KD膜蛋白的原核表达与初步鉴定

以马耳他布鲁菌基因组为模板,设计引物,扩增17KD膜蛋白基因全长,获得422bp长的片段。将该片段直接克隆于原核表达载体PGEX-4T-2,成功构建阳性重组表达载体。IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测,在大肠杆菌中成功表达大小为43KD的蛋白,并且该蛋白与布鲁菌病临床阳性动物血清产生特异性结合反应。通过17KD蛋白的成功表达,试图评价该蛋白在布鲁菌病诊断用抗原及基因工程疫苗研制过程中应用的可行性。     

规模羊场布鲁菌病流行特点及净化措施探究

布鲁菌病是规模化羊场养殖中常见的羊传染性疾病。患布鲁菌病的母羊可出现流产、死胎等严重情况,公羊可出现睾丸炎等情况,尤其严重的是该病属于人畜共患病,该病不仅会给规模化养殖场带来经济损失,还严重威胁到养殖场养殖人员的身体健康。近几年,疾病防控机构每年都报告不同数量的病例,以羊场养殖人员、养羊户和肉羊屠宰者居多。因此,探究其流行病学特征,针对性给予预防措施极为重要。本文主要针对羊布鲁菌病的发病流行特点及防控净化措施加以阐述分析,旨在为规模化羊场布鲁菌病的防控提供理论和实践依据。     

布鲁菌gntR4基因无痕缺失株构建及其生物学特性分析

布鲁菌是兼性胞内寄生菌,其入侵宿主细胞后的胞内存活能力决定着布鲁菌的毒力,布鲁菌毒力因子功能的研究对阐明其致病机制具有重要意义。在前期研究中利用转座子随机突变技术发现转录调控子GntR4与布鲁菌毒力相关,故进一步通过定向缺失方法构建布鲁菌gntR4基因无痕缺失株,并通过耐受性试验、免疫印迹试验、胞内存活试验、小鼠致病性试验等对gntR4缺失株的基本生物学特性进行评估。结果表明：gntR4缺失显著减弱布鲁菌抵抗阳性杀菌肽的能力,说明GntR4可能调控部分基因帮助布鲁菌抵抗宿主非特异性免疫杀伤。但GntR4与T4SS的表达无关,与布鲁菌在胞内的存活能力及对小鼠的致病力无关。综上,这一研究构建的基因无痕缺失方法为布鲁菌基因功能研究奠定基础,针对GntR4调控子的研究完善了GntR调控子家族的功能研究,为阐明布鲁菌抵抗宿主免疫杀伤与建立慢性感染机制间的关系提供依据。     

羊只布鲁氏杆菌病的主要防治措施

布鲁氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人畜共患的一种慢性传染病,主要危害养羊只及人类健康,主要以流产为特征,应引起各级主管部门及防控部门的高度重视。     

牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用

根据GenBank中已发表的流产布鲁菌种特异的omp25基因序列及牛分枝杆菌特异保守的16S rRNA加工蛋白rimM基因序列设计了2对特异性引物,通过对PCR条件的优化,建立了快速鉴别检测牛布鲁菌Brucella abortus和牛分枝杆菌Mycobacterium bovis的双重PCR方法.对建立的方法进行特异性和敏感性试验,结果显示,在牛布鲁菌和牛分枝杆菌中分别扩增出448、269 bp的特异性目的条带,作为对照的大肠杆菌Escherichia coli、沙门菌Salmo-nella typhimurium、八叠球菌Sarcina lutea、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、巴氏杆菌Pasteurella multocida、军团菌Legionella pneumophila、枯草杆菌Bacillus subtilis及溶血性链球菌Streptococcus pneumonia均未扩增出任何条带.牛布鲁菌和牛分枝杆菌的DNA最低检出量均为10 pg;牛奶样品中人工污染的牛布鲁菌和牛分枝杆菌的检测敏感性分别为7.9×103CFU/mL、3 ng/mL.     

云南省猪布鲁氏杆菌病血清学调查

采用虎红平板凝集试验与试管凝集试验相结合的方法,对云南省部分养殖场和屠宰厂采集的猪血清样本进行布病血清学检测,检测血清样本302份。经虎红平板凝集试验筛选,共检出阳性血清样本30例,检出率为9.934%。阳性者通过试管凝集试验证实,最终检出阳性血清样本14例,检出率为4.636%。其中屠宰厂检出率为6.091%,养殖场检出率为1.905%,屠宰场的检出率高于养殖场。     

多孔菌分类演变及中国多孔菌分类进展

回顾了多孔菌目(Polyporales)的建立以及该类群分类演变的历史,综述了中国多孔菌分类研究的进展.     

奶牛布鲁氏杆菌的分离与鉴定

[目的]为布鲁氏杆菌的分离与鉴定提供依据。[方法]时某奶牛场进行布病调查,采集血清、血液、牛奶等样品通过硫化氢产,生试验、染料抑菌试验和热凝集试验进行布鲁氏抒菌的分离与鏊定。[结果]21份牛奶样品在浓度10％CO2培养葙中培养至第4天时,有5份培养基上生长出30～50个0．05～2．00mm大小无色、闪光圆形、湿润、隆起的可疑小菌落。硫化氢产生试验结果表明,5个菌株均可产生硫化氢;染料抑菌试验结果表明,5个菌株确为布鲁氏杆菌;热凝集试验结果表明,该5菌株未发生变异;PCR检测结果表明,相对应的牛奶检测呈阳性。[结论]初步鉴定从布病可疑阳性牛分离出的5个菌株为牛布鲁氏杆菌。