Progress in Study of Cardiac Muscle Tissue Engineering

各种类型的心脏疾病一直是困扰人类的一个难题,目前临床上采用的各种治疗方法虽然能够缓解心脏病的症状,但均无法根治。心肌组织工程的研究有望使这一难题获得解决。心肌组织工程研究主要包括种子细胞获取、支架材料研制以及工程化心肌组织构建等方面内容。在此,从心肌组织工程研究的基本途径、工程化心肌组织的特点、移植存在的问题及可能的解决办法等几方面,对近年来心肌组织工程的研究作一概述。     

心宁片药效学实验研究(Ⅱ)

目的大鼠长期服用心宁片对心肌组织的保护作用。方法采用硫代巴比妥酸法和Pyrogllol-NBT法测定心肌组织丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果大鼠长期服用心宁片能明显减少心肌组织丙二醛(MDA)的生成，保护心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性；明显增加血清中高密度脂蛋白，降低血清中低密度脂蛋白和胆固醇含量。结论心宁片对大鼠心肌组织有明显的保护作用。     

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 各种类型的心脏疾病一直是困扰人类的一个难题，目前临床上采用的各种治疗方法虽然能够缓解心脏病的症状，但均无法根治。心肌组织工程的研究有望使这一难题获得解决。心肌组织工程研究主要包括种子细胞获取、支架材料研制以及工程化心肌组织构建等方面内容。在此，从心肌组织工程研究的基本途径、工程化心肌组织的特点、移植存在的问题及可能的解决办法等几方面，对近年来心肌组织工程的研究作一概述。     

豆类丝核菌次级代谢产物对阿霉素所致小鼠骨髓和心肌毒性的保护作用研究

探讨了豆类丝核菌次级代谢产物对阿霉素(ADR)所致小鼠骨髓抑制及心肌损伤的保护作用。建立小白鼠骨髓抑制和心肌损伤模型。检测血常规,描记心电图,测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。心肌组织石蜡切片,HE染色,光镜观察。结果表明阿霉素4 mg.kg-1可致小白鼠骨髓抑制和心肌损伤。豆类丝核菌次级代谢产物可抑制阿霉素引起的白细胞数、红细胞数、血红蛋白量的减少;使心率加快,心电图Q波振幅减小,QRS波时间缩短和S-T段回升;降低血清CK、LDH活力,增强心肌SOD活力,降低MDA含量,减轻心肌组织损伤。豆类丝核菌次级代谢产物对ADR所致小白鼠骨髓和心肌毒性有一定的保护作用。     

G-CSF对急性心梗大鼠血浆和心肌组织中AngⅡ和ET含量的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性心肌梗死(AMI)大鼠血浆及心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮素(ET)含量的影响.方法通过结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死(AMI)大鼠模型,将大鼠随机分为G-CSF治疗组(GAMI组)、心肌梗死对照组(AMI组)和假手术组(SO组),GAMI组模型制备后3h给予生理盐水稀释的rhG-CSF(浓度为2mg/L)皮下注射10μg/kg/d,共5d.AMI组和SO组3h后给予等量的生理盐水皮下注射,共5d.三组大鼠于急性心肌梗死模型制造成功后24h、1周和2周后检测各组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET的含量.结果 24hAMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比均有提高但只有心肌中ET含量有显著的差异(P<0.05).1周后AMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比两者含量有明显增高(P<0.05).2周后AMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比两者含量增加的更加明显(P<0.01).GAMI组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量与相应的AMI组比较有明显的降低.结论 G-CSF能降低急性心肌梗死模型大鼠血浆和心肌组织中AngⅡ和ET的含量,G-CSF对AMI大鼠损伤心肌有保护作用.     

Myf5在不同生长阶段小鼠心肌中的定位与表达

Myf5是生肌调节因子MRFs家族的重要成员,在肌细胞的增殖和发育过程中发挥着重要的调控作用。通过对心肌组织进行HE染色和免疫组化试验,观察心肌纤维细胞核的大小和数量、肌纤维体积和肌纤维之间的间隙变化,了解心肌组织不同发育阶段的显微结构,对比各组的阳性着色部位和着色程度的变化,从而对Myf5因子在不同发育阶段小鼠心肌组织的表达进行初步定性、定量和定位分析。并通过实时荧光定量PCR技术对小鼠的不同发育阶段中的心肌组织的Myf5基因表达做出准确的定量分析。结果表明,在小鼠心肌组织发育的不同阶段,Myf5均显示阳性,幼年鼠表达量最高;Myf5 m RNA表达量幼年鼠最高,性成熟鼠最低,呈现先降低后缓慢上升的趋势,并且幼年阶段与性成熟、体成熟阶段呈现极显著差异,与老年阶段无明显差异。研究表明,Myf5表达与小鼠心肌组织发育具有相关性,可进一步揭示Myf5在心脏发育的病理状况差异性和调控机制。     

G-CSF对急性心梗大鼠血浆和心肌组织中Ang1I和ET含量的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对急性心肌梗死（AMI）大鼠血浆及心肌组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和内皮素（ET）含量的影响。方法通过结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死（AMI）大鼠模型,将大鼠随机分为G-CSF治疗组（GAMI组）、心肌梗死对照组（AMI组）和假手术组（SO组）,GAMI组模型制备后3h给予生理盐水稀释的rhG-CSF（浓度为2mg/L）皮下注射10μg/kg/d,共5d。AMI组和SO组3h后给予等量的生理盐水皮下注射,共5d。三组大鼠于急性心肌梗死模型制造成功后24h、1周和2周后检测各组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET的含量。结果 24hAMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比均有提高但只有心肌中ET含量有显著的差异（P〈0。05）。1周后AMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比两者含量有明显增高（P〈0。05）。2周后AMI组与SO组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量相比两者含量增加的更加明显（P〈0。01）。GAMI组血浆及心肌组织中AngⅡ和ET含量与相应的AMI组比较有明显的降低。结论 G-CSF能降低急性心肌梗死模型大鼠血浆和心肌组织中AngⅡ和ET的含量,G-CSF对AMI大鼠损伤心肌有保护作用。     

东北红豆杉提取物对急性心梗大鼠心肌细胞Bcl-2、Bax因子表达的影响

通过观察红豆杉提取物对急性心梗动物模型心肌细胞中Bcl-2、Bax凋亡因子的影响,探讨其对梗死心肌的保护作用及机制.采用结扎左冠状动脉分支法复制心肌梗死动物模型,运用免疫组化法定量分析心肌组织中Bcl-2和Bax表达的变化.结果表明:与模型组相比,红豆杉提取物给药组可增加心肌组织中Bcl-2的表达,抑制Bax的表达.红豆杉提取物可通过上调Bcl-2和下调Bax的表达,使Bcl-2/Bax值上升,抑制心肌细胞凋亡,从而对梗死心肌的保护起作用.     

大豆异黄酮对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化的保护作用

目的：观察大豆异黄酮（Soybean isoflavone,SI）对异丙肾上腺素（Isoproterenol,ISO）诱导的心肌纤维化（Myocardial fibrosis,MF）的保护作用.方法异丙肾上腺素皮下注射诱导心肌纤维化模型,经SI低、中、高（30,60,120 mg/kg）3个剂量组和阳性对照卡托普利组（50 mg/kg）治疗后,观察其对心肌细胞直径（MD）、心室重量指数（ HW/BW）、左心室重量指数（ LVI）、羟脯氨酸（ Hyp）含量及心肌组织中钙调神经磷酸酶（ Calcineurin,CaN）活性的影响.结果 SI不同剂量组均能够降低HW/BW和LVI（P〈0.05或P〈0.01）,减少羟脯氨酸含量（P〈0.05或P〈0.01））,减小心肌细胞直径（P〈0.05或P〈0.01）,降低心肌组织中CaN的活性（P〈0.01）,减轻ISO诱导的心肌纤维化.结论 SI对心肌纤维化的保护作用可能与降低心肌组织中钙调神经磷酸酶活性有关.     

加味丹参饮作用内源性H2S合成途径保护心肌缺血/再灌注损伤的实验研究

目的 通过观察益气活血中药组方加味丹参饮（JWDS）对心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）模型大鼠血清硫化氢（H₂S）合成酶/胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyse,CSE）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes,CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,DH）含量、心肌组织超微结构、心肌组织CSE mRNA表达的影响,从内源性H₂S合成途径探讨JWDS治疗MIRI的作用机制。方法 给药组大鼠按剂量6.19 g/（kg·d）要求给药14 d,末次给药2 h后采用结扎冠脉左前降支/再灌流方法复制MIRI模型。HE染色观察心肌组织机构改变情况;ELISA法检测血清CK、LDH、CSE含量;Western-blot检测心肌组织CSE蛋白表达;Real-time PCR检测心肌组织CSE mRNA表达。结果 JWDS可明显改善MIRI模型大鼠心肌组织病理改变,降低血清LDH、CK含量（P<0.01）,升高CSE含量（P<0.01）,上调心肌组织CSE及mRNA表达（P<0.05,P<0.01）。PPG可明显降低JWDS组大鼠血清CSE含量（P<0.01）,下调心肌CSE mRNA表达（P<0.01）。结论 JWDS对实验性心肌缺血/再灌注（MIR）大鼠心肌损伤具有明显保护作用,其机制与促进内源性H₂S生成从而保护心肌细胞结构,抑制CK、LDH漏出,上调心肌组织CSE蛋白及mRNA表达有关。     

竹叶提取物对小鼠运动能力的影响

旨在研究竹叶提取物对小鼠运动能力的影响。选取8周龄健康雄性小鼠45只随机分为阴性对照组、模型组和试验组,检测骨骼肌和心肌组织中丙二醛(MDA)的质量摩尔浓度,并测定超氧化物岐化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。结果表明,试验组小鼠游泳至力竭的时间显著大于模型组。与阴性对照组相比,运动训练后,模型组小鼠骨骼肌和心肌组织中的MDA质量摩尔浓度上升,试验组下降;模型组小鼠骨骼肌和心肌组织中的CAT活性下降,试验组升高;试验组和模型组的SOD活性升高。说明竹叶提取物具有改善运动能力和抗氧化的功能。     

乳鼠心肌细胞的体外三维培养

【目的】探讨应用PLGA泡沫支架材料,在体外建造组织工程化心肌组织的可行性。【方法】采用顺序消化及差速贴壁法分离纯化乳鼠心肌细胞,将分离所得的心肌细胞接种于PLGA多孔支架材料上,观测复合体内心肌细胞的生长状况、超微结构、细胞代谢率及细胞组分的变化,并将其与正常心肌和二维培养的心肌细胞进行比较。【结果】复合体内的细胞具有心肌细胞的特殊超微结构,免疫组化显示其中的α-横纹肌肌动蛋白染色呈强阳性,与二维培养的细胞相比,细胞代谢更加旺盛。【结论】采用组织工程技术有可能在体外培育出组织工程化心肌组织。     

玉米幼芽提取物对衰老小鼠心肌自由基代谢和超微结构的影响

小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液(125 mg/(kg.d))诱导其衰老,同时分别灌胃10,20和40 mg/(kg.d)玉米幼芽提取物(Extract of maize plumule,EMP),每日1次,连续处理42 d后,测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量,并用透射电镜观察心肌细胞超微结构,研究EMP对D-半乳糖致衰老小鼠心肌自由基代谢和超微结构的影响。结果表明,与对照组相比,D-半乳糖能明显的降低小鼠心肌组织中的SOD、CAT和GSH-Px活性,提高MDA、NO含量;与衰老模型组比较,20 mg/kg EMP处理组小鼠心肌组织的SOD、CAT和GSH-Px活性均极显著升高,MDA和NO含量均极显著降低;与对照组相比,衰老模型组小鼠的心肌Z线变宽、模糊,肌原纤维断裂、溶解、凝集,线粒体肿胀、空泡化、嵴消失;20 mg/kg EMP处理组的以上病变均有明显的改善。这表明20 mg/kg的EMP具有增强衰老小鼠心肌抗氧化酶活性,改善心肌自由基代谢,保护心肌细胞超微结构的作用。     

藏猪心脏脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)组织表达差异性研究

采用半定量RT-PCR法,以GAPDH基因为内参,研究藏猪背最长肌、心肌、肝脏和脂肪组织中H-FABP基因mRNA组织表达差异性。结果显示,H-FABP基因mRNA组织表达差异性显著,脂肪组织表达量高于其他组织(P<0.01);心肌表达量高于背最长肌(P<0.05);背最长肌表达量高于肝脏(P<0.01)。     

丽斑麻晰和山地麻晰组织LDH同工酶谱比较研究

应用灵敏度较高的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，结合尿素抑制实验，对丽斑麻晰和山地麻晰不同组织（如脑，肝，小肠，心肌，肾，睾丸，肌肉和眼球），中ＬＤＨ同工酶的分布特征和性质进行比较研究。实验结果，两种麻晰不同组织ＬＤＨ同工酶酶谱十分相似，并具有组织器官特异性，在心肌和小肠等组织中ＬＤＨ同工酶表现出一定的种间特异性。ＬＤＨ同工酶对尿素抑制的敏感程度依次为ＬＤＨ２＞ＬＤＨ２＞ＬＤＨ１。ＬＤＨ同工酶分布特征与其     

丽斑麻蜥和山地麻蜥组织LDH同工酶谱比较研究

应用灵敏度较高的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，结合尿素抑制实验．对丽斑麻蜥和山地麻蜥不同组织（如脑、肝、小肠、心肌、肾、睾丸、肌肉和眼球）中ＬＤＨ同工酶的分布特征和性质进行比较研究。实验结果，两种麻蜥不同组织ＬＤＨ同工酶酶谱十分相似，并具有组织器官特异性、在心肌和小肠等组织中ＬＤＨ同工酶表现出一定的种间特异性。ＬＤＨ同Ｌ酶对尿素抑制的敏感程度依次为ＬＤＨ３＞ＬＤＨ２＞ＬＤＨ１。ＬＤＨ同工酶分布特征与其生理功能和生活环境有一定关系。     

骨髓间充质干细胞移植大鼠缺血心肌后GATA-4 mRNA的表达

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植于大鼠缺血心肌后,心脏早发育基因DATA-4 mRNA的表 达、方法设模型组、假手术组和空白对照组,其中模型组采用“冠脉结扎法”建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型、收 集从SD雄性大鼠胫骨和股骨骨髓中分离、培养、鉴定后的MSCs,密度调至3x10`/100 },L悬液,移植于缺血心肌边 缘组织的3个位点直接注入共100 },L的MSCs细胞悬液,假手术组和空白对照组均在与模型组相同注射部位的3 个位点直接注入共100 },L的MSCs细胞悬液,28 d后处死大鼠进行相关实验样木处理〔采用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)技术检测心肌组织中DATA-4 mRNA的表达、结果MSCs移植模型组和假手术组的大鼠心肌中存在 DATA-4 mRNA的表达;而空白组的心肌中未检出DATA-4 mRNA的表达,对其IOD值半定量分析,模型组高于假 手术组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)、结论MSCs在进入缺血心肌环境后,细胞内的心肌特异转录 过程被再次激活.确立了MSCs向心肌细胞分化的方向、     

分布稻田的三种不同体色泥鳅组织LDH同工酶的研究

本文报道了应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析研究分布于稻田的三种不同体色泥鳅在心肌,骨骼肌,肝脏,眼,血清七种组织器官中ＬＤＨ同工酶的表达特征。电泳图谱表明,这些组织分布和活力均具有明显的组织特异性;在脑组织ＬＤＨ２活性最强,其它组织如血清,眼,卵巢,肝脏,心肌等组织中ＬＤＨ３活力最强,此外,在肝脏中存在由Ｌｄｈ－Ｃ编码的Ｃ带。     

贝那普利对心阳虚模型大鼠心功能相关指标的影响

[目的]旨在研究贝那普利对心阳虚模型大鼠心电图ST段、心率、心肌酶以及心肌组织病理学的作用,为其在临床上对心阳虚证的治疗提供参考.[方法]以阿霉素联合冰水浴冷刺激法制作心阳虚大鼠模型,采用多道生理信号采集处理系统监测心电图、心率变化,并以生化分析仪检测心肌酶活性,常规方法制作心脏切片并观察其组织病理学变化.[结果]模型组大鼠出现虚寒症状,心电图ST段在第35、42天明显抬高(P＜0.01),心率从14天开始明显降低(P＜0.05/P ＜0.01),心肌酶LDH、CK、ALT、AST活性显著升高(P＜0.05/P＜0.01),心肌细胞出现空泡变性、心肌变性和轻度单个核细胞浸润.贝那普利组大鼠虚寒症状好转,心电图ST段在第7、14、35、42天明显回落(P＜0.05/P＜0.01),心率在第14、35天显著增加(P＜0.01),心肌酶LDH、CK、ALT、AST活性显著降低(P＜0.05/P＜0.01),心脏仅见极轻度单个核细胞浸润.[结论]贝那普利通过降低心电图ST段异常升高、增加心率、降低心肌酶活性、改善心肌损伤程度减轻心阳虚模型大鼠虚寒症状,对其具有良好的预防和保护作用.     

心肌袖的研究现状

心肌袖(m yocard ia l sleeves)是指缠绕于与心房相连的静脉主干根部的心肌组织,是作为异位兴奋灶引发局灶性心房颤动(foca l atria l fibrillation)的关键解剖部位。目前的研究大多局限在寻求射频消融(rad iofrequency catheter ab lation),或电隔离“袖-房”传导以治疗房颤方法的可行性、安全性、效果和理论依据等方面。对于心肌袖引发局灶性心房颤动的形态学基础及其机制,尚处于不断的研究中。本文拟就这些方面,对心肌袖研究现状作一综述。1异位兴奋灶主要分布在心肌袖内异位兴奋灶一般分布于左、右心耳、界嵴、窦房结附近、冠状静脉窦口…