乳茄组培快繁技术

以乳茄嫩枝为外植体,研究了不同消毒方法和不同激素对乳茄诱导、增殖及生根等的影响。结果表明,最适合乳茄外植体的消毒方法为70%的酒精消毒10s,0.1%的升汞消毒6min;最佳芽诱导培养基为MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1);最佳继代增殖培养基为MS+BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+GA_30.1mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),增殖系数为4.35;最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L~(-1)+ABT1 0.3mg·L~(-1),生根率达93.5%以上;组培苗移栽适宜基质为泥炭土∶珍珠岩=5∶1,成活率达96.7%。     

樱桃砧木吉塞拉7号茎尖快繁技术

本试验研究不同浓度激素配比对吉塞拉7号茎尖培养的影响。取春季一年生的新梢做外植体,剥取幼嫩茎尖,接种到不同配方的诱导培养基上,生长30 d左右,转移到增殖培养基上。结果表明,茎尖成活率最高的培养基是MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),成活率达90.0%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1)+GA_3 0.1 mg·L~(-1),增殖系数达3.9;生根率最高的培养基为1/2MS+IBA0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+Ac 0.5 mg·L~(-1),培养30 d左右,生根率达89%,平均每株生根4.3条;最佳移栽基质是蛭石,成活率达95.7%。     

铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖

以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基。结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1),诱导率为66.67%。原球茎最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),苗整齐健壮,叶片大而浓绿。试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),生根率为100%。驯化移栽基质为碎砖瓦15%+松树皮50%+刨花25%+羊屎10%。     

二次回归正交设计在灰楸离体培养中的应用

为建立灰楸离体繁殖体系,应用二次回归正交设计与SPSS软件分析,建立灰楸组培继代培养增殖系数、增殖芽长度、增殖芽数、愈伤组织横向膨大、愈伤组织纵向膨大、叶数,生根培养生根率、根长、发根数、发芽数、芽长等回归方程,通过对各方程进行模拟寻求,确定6-BA、IBA、NAA在继代与生根培养中的用量范围。结果表明:灰楸组培继代培养6-BA用量的最佳范围为1.343~1.356 mg·L~(-1),IBA用量在0.11~0.294 mg·L~(-1);一定质量浓度的6-BA在继代培养中起主要的诱导分化作用;IBA对诱导分化芽数有显著的回归关系,与其它指标无显著关系;分化芽叶数的多少与6-BA与IBA无显著关系。灰楸组培生根培养IBA用量的最佳范围为0.272~0.329 mg·L~(-1),NAA为0.027~0.033 mg·L~(-1);一定质量浓度的IBA主要促使根系与芽长生长,对生根率与发芽数无显著作用,NAA起着主要的诱导根系发生作用,与生根率、发芽数有显著的回归关系;生根苗叶数的多少与6-BA与IBA无显著关系;IBA用量在0.272~0.329 mg·L~(-1)、NAA在0.027~0.033 mg·L~(-1)范围内,灰楸组培生根率可达96%以上,可靠性为95%。灰楸离体培养适宜的继代培养基为DKW+6-BA 1.343~1.356 mg·L~(-1)+IBA 0.11~0.294 mg·L~(-1)+琼脂4.5 g·L~(-1)+蔗糖25 g·L~(-1)(p H=5.8);生根培养基为1/2MS+IBA 0.272~0.329 mg·L~(-1)+NAA 0.027~0.033mg·L~(-1)+琼脂5.0 g·L~(-1)+蔗糖10 g·L~(-1)(p H=5.8)。     

苹果砧木组织培养与快繁技术研究

通过对不同苹果砧木M9、M26、八棱海棠、平邑甜茶的离体培养研究,探讨不同砧木的初代、继代培养、生根以及移栽技术.结果表明,①以4种砧木的离体新梢进行初代培养,最佳培养基均为MS+ 6-BA1.0mg·L1+NAA 0.1mg· L-1.②M9与M26的最佳增殖培养基MS+ 6-BA 1.0 mg· L-1+IBA 0...     

枝干番杏组织培养技术

以枝干番杏的带叶茎段为外植体,比较不同灭菌方法的灭菌效果,及不同激素浓度对丛生芽诱导及生根的影响。结果表明:本研究中枝干番杏组织培养不经过愈伤组织阶段,芽诱导最适宜的培养基为MS+6-BA 8.325 mg·L~(-1)+NAA 16.65 mg·L~(-1)。芽丛生继代最适培养基为MS+6-BA 2.4 mg·L~(-1)+NAA 9.6 mg·L~(-1),根诱导最适培养基为1/2 MS+6-BA 1.2 mg·L~(-1)+NAA 4.8 mg·L~(-1)。枝干番杏的离体快繁体系有望用在番杏科其他植物的组培中。     

洋水仙Dutch Master愈伤组织的诱导、分化及植株再生

以洋水仙品种Dutch Master的鳞茎、叶、花葶及无菌苗叶片作为外植体,选用MS为基本培养基,分别添加不同质量浓度的NAA(0.5,1.0,1.5mg·L~(-1))、IBA(0,0.5,1.0mg·L~(-1))、2,4-D(0,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mg·L~(-1))、6-BA(0.5,1.0,1.5,2.0,3.0mg·L~(-1))和KT(0.1,0.3,0.5mg·L~(-1)),研究不同外植体和不同外源激素配比对小鳞茎的诱导,愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响。结果表明:在Dutch Master初代培养阶段,6-BA的影响效应最大,随着6-BA质量浓度的升高,诱导率呈上升趋势,最适宜的初代培养基配比为:MS+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+2,4-D 0.2mg·L~(-1);以带鳞茎盘的双鳞片作为外植体诱导小鳞茎效果最好,诱导率达76.7%;鳞片部位以鳞茎外层鳞片的培养效果最好,分化率达97.5%;在Dutch Master愈伤组织诱导阶段,2,4-D的影响效应最大,当2,4-D浓度为1mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率的均值(K2)为峰值,最适宜的愈伤组织诱导培养基配比为:MS+2,4-D 1mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1),Dutch Master无菌苗叶片愈伤组织诱导率可以达到81.3%;在Dutch Master愈伤组织继代培养阶段,最适宜的继代培养基配比为:MS+2,4-D 0.5mg·L~(-1)+6-BA 1mg·L~(-1),可以增殖分化得到没有玻璃化的小植株。     

观果树种轮生冬青离体快繁技术

以轮生冬青幼嫩茎段为外植体,通过筛选启动培养基、比较不同增殖培养基及继代次数对增殖的影响,生根诱导培养基的筛选,建立了轮生冬青的离体快速繁殖技术体系。结果表明:最适腋芽诱导培养基为B5+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.05 mg·L~(-1);适宜增殖培养基为B5+6-BA1.5 mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1),第4次继代时增殖系数最大为6.3,丛生芽长势好;适宜的继代周期为35 d;最佳生根培养基为1/2B5+IBA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.3 mg·L~(-1),生根率可达100%。移栽于V(珍珠岩)∶V(蛭石)∶V(腐殖土)=2∶1∶1的混合基质中,成活率达90%以上。     

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

以成年态葡萄柚的茎段为材料,研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响,以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:(1)WPM+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1)为初代培养的最佳培养基,腋芽诱导率达78.33%;(2)继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1),增殖系数达4.93,芽长达2.62cm;(3)培养基1/2WPM+NAA 0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖40g·L-1+AC 0.1%的生根效果最好,生根率达63.33%,株高3.03cm,根粗壮;(4)生根苗移栽成活率达78%以上。     

优良大樱桃砧木吉塞拉5号组培快繁体系构建

为建立优良大樱桃砧木的组培快繁体系,研究以樱桃砧木吉塞拉5号为试验材料,研究了外植体不同取材时间、消毒方法、激素浓度配比、移栽基质等因素对其组培快繁的影响。结果表明,4~5月份是吉塞拉5号取材的最佳时间,污染率最低为8.83%,诱导率最高为87.6%;采用0.1%Hg Cl2外植体消毒8 min效果最好;吉塞拉5号初代培养适宜的培养基是MS+6-BA0.5 mg·L~(-1)+IBA0.2 mg·L~(-1),诱导率最高为83.1%,增值数最高为5.4,继代培养基为:6-BA0.6 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)效果最好,增值数最高为7.3;在1/2MS+0.2mg·L~(-1)IBA+0.4 mg·L~(-1)IAA生根培养基上,试管苗生根率可达97.2%;试管苗移栽基质配比为蛭石∶基质=1∶2时,成活率最高达97.6%。这些研究结果为进一步建立大樱桃砧木离体快繁体系奠定了基础。     

杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

东方百合Tiger Woods离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Tiger Woods的组培快繁技术,以其花器官为外植体获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片和叶片为次级外植体诱导不定芽形成,通过扩繁、生根获得完整植株,炼苗后移栽。结果表明:花梗与花丝诱导能力较强,其最适诱导培养基分别为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)与MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)。无菌苗鳞片、叶片直接诱导产生不定芽的最适培养基为MS+TDZ 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)与MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1),诱导率为100%和93.33%,诱导系数为4.48和2.88;而上述两种外植体间接诱导愈伤组织的最适培养基为MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)与MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),愈伤诱导率为93.33%和96.67%,分化系数为4.53和3.63。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖75g·L~(-1),生根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1),移栽最佳基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1∶1∶1,成活率达91.11%。     

苹果砧木M9快繁技术的建立及试管苗生根进程解剖研究

通过对苹果砧木M9离体培养,筛选该砧木的初代、继代培养、生根培养基,并解剖分析生根进程.结果表明:1)以M9的离体新梢进行初代培养,75％酒精30 s+0.1％升汞8 min消毒效果较佳,较适培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1 +NAA0.5 mg·L-1.成活率为18.9％.2)M9的适合增殖培养基MS+6-BA1.0 mg·L-1 +IBA0.1mg·L-1,有效新梢数达到6.4个·株-1.3)较适生根培养基为1/2MS+ IBA0.3 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1.暗培养5d后,光培养35d,生根率达到85.5％.4)M9试管苗不定根的发育过程可分为3个时期:形成层细胞分裂期,不定根原基形成期,不定根的分化形成期.     

垂枝樱花组培技术研究

为了建立更高效的垂枝樱花的组织快繁体系,以垂枝樱花的当年生带腋芽茎段为外植体,进行了外植体的灭菌、启动、增殖和生根培养,探讨了适宜的外植体灭菌方法与程序,不同培养基配方对启动、增殖、生根培养效果的影响。结果表明:适宜的表面灭菌方法为75%乙醇浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡10min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达66.7%;较适宜的启动培养基为1/2 MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化达68.3%;适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+GA310mg·L~(-1),增殖系数为7.0,平均苗高2.9cm;适宜的生根培养基为:1/2 MS+NAA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),生根率达93%。     

小果型西瓜快速繁殖技术研究

为建立小果型西瓜组织培养快速繁殖方法,对小果型西瓜重要种质材料的保存扩繁提供技术支持。以小果型西瓜为材料、MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选小果型西瓜快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果表明:子叶苗茎尖丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)效果较好,试管苗继代增殖最适培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+IBA 0.3mg·L~(-1)。     

中华补血草的组织培养和植株再生体系优化

为进行中华补血草优良品种的保存和培育,为从分子水平进行泌盐植物耐盐机理研究奠定基础,本研究以中华补血草无菌苗叶片为外植体,对中华补血草的组织培养和再生体系进行了优化。结果表明,以MS+6-BA 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基为愈伤组织诱导最佳培养基,愈伤组织诱导率为100%;以MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)为丛生芽诱导最佳培养基,诱导率为99.06%;丛生芽继代培养适宜的培养基为MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+6-BA 0.15 mg·L~(-1);以MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基为最佳生根率培养基,生根率为87%,且根系生长良好。     

杂交兰的组织培养与快繁技术

以杂交兰的茎尖为外植体进行离体培养,探讨杂交兰的原球茎的诱导、增殖、分化、生根培养,以及练苗移栽等一系列技术措施。结果表明,原球茎诱导的适宜培养基为Hyponex No.1(花宝1号)+6-BA2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎增殖的适宜培养基为花宝1号+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎分化的适宜培养基为1/2MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);生根培养基以1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA1.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1)为佳,移栽基质选用泥炭土∶珍珠岩3∶1成活率高。     

黄芩离体再生体系的建立

为了建立黄芩的离体再生体系,以黄芩幼苗的茎段为材料,研究了不同的激素浓度配比对黄芩外植体诱导愈伤组织、再生芽和根的影响。结果表明:黄芩茎段在MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳;在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中黄芩茎段的再生芽的分化效果最好;在1/2MS+NAA 0.4 mg·L~(-1)的培养基中,黄芩茎段再生根的分化效果最好,数量最多。     

亚洲百合试管鳞茎诱导

为进一步优化百合离体培养条件,以亚洲百合鳞片为外植体,研究不同鳞片部位、不同激素配比对亚洲百合试管鳞茎诱导的影响。结果表明:鳞茎内层下部分化率最高,鳞茎中层下部鳞片污染率低,是亚洲百合适宜选取的外植体材料。6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)鳞片分化率最高为75.00%,鳞片分化数最高的激素配比为6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化数为3.05。在6-BA和NAA配合使用的情况下,6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)增殖效果最好,增殖数为13.4个。百合试管鳞茎膨大的理想激素浓度配比为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+PP_(333)4.0mg·L~(-1)。     

观赏水草雪花草的离体培养与快速繁殖

为了促进雪花草的工厂化育苗,以雪花草幼嫩的枝条为外植体,建立了快速无性繁殖体系。结果表明:不定芽诱导增殖培养基最佳配方为改良MS培养基+6-BA2.0mg·L~(-1)+IBA0.1mg·L~(-1)+GA1.5mg·L~(-1);生根培养基配方为改良的MS培养基+NAA 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.1mg·L~(-1)。该离体培养方法能提高雪花的繁殖系数,有效缓解当前种苗不足和缩短上市时间,满足市场需求。