疫苗免疫佐剂的研究与应用

近年来,随着免疫学研究的不断深入及基因工程技术的迅速发展,活载体疫苗、DNA疫苗和合成肽疫苗等新型疫苗的研究也取得了可喜的进步。这些新型疫苗纯度高、特异性强,但免疫原性弱,诱导机体产生的免疫应答不够强,因此,应用佐剂来增强其免疫原性或增强宿主对抗原的保护性应答就显得尤为重要。文章就近年来免疫佐剂研究概况作一综述。1铝盐佐剂铝盐佐剂是一类含Al3 的无机盐,其中最常用的效果较好的是Al(OH)3和磷酸铝佐剂。Al(OH)3成本低、使用方便,是兽医生物制品生产中应用最广的一种佐剂,也是至今唯一被美国食品和药物管理局(FDA)批准…     

新型动物疫苗佐剂的研究进展

疫苗佐剂是使疫苗免疫原性充分发挥的工具,目前动物疫苗佐剂主要以铝盐佐剂和油乳佐剂为主。近年来基因重组疫苗和亚单位疫苗发展迅猛,而这些新型疫苗与传统疫苗相比免疫原性较弱,这就对佐剂提出了更高的要求。当前针对佐剂的研究层出不穷,部分佐剂如MF59、AS01、AS03等已经在人用疫苗中成功应用,但应用于动物疫苗还有技术难题需要攻破。蜂胶佐剂目前在动物疫苗中应用较广,且已经占有了一定的市场份额。为充分比较现有新型疫苗佐剂的优缺点,为后续疫苗佐剂的研究提供参考,就目前广泛研究的新型动物疫苗佐剂进行综述。     

氢氧化铝佐剂研究进展

氢氧化铝佐剂作为疫苗佐剂己有近80年的历史。其由于高吸附能力及对某些抗原具有较好的吸附性而优于其它佐剂,它也是唯一被美国FDA认证的人用疫苗佐剂,虽然氢氧化铝佐剂应用历史悠久,但其具体作用机制不明,目前认为主要是“储存库效应”和“免疫刺激效应”两种机制。纳米技术可能会给佐剂领域带来新的发展。纳米颗粒的单晶或多晶微粒具有小尺寸效应、良好的表面或界面效应、靶向作用及缓释作用等,其作为疫苗佐剂的作用己引起了人们的关注。     

纳米氢氧化铝吸附禽流感病毒灭活疫苗的研制及其对肉鸡抗体效价的影响

自制纳米氢氧化铝佐剂,通过吸附H5N1灭活抗原,制备了纳米铝佐剂疫苗,按照中华人民共和国农业行业高致病性禽流感免疫技术规范标准,免疫肉鸡。经检测发现纳米铝佐剂疫苗组肉鸡产生有效保护抗体时间较油佐剂疫苗和常规铝佐剂疫苗提前3d和7d,抗体峰值达到时间较油佐剂疫苗和常规铝佐剂疫苗提前14d。结果表明,纳米氢氧化铝作为高致病性禽流感H5N1的免疫佐剂,可以更早的刺激动物产生有效保护抗体,纳米铝佐剂禽流感疫苗具有广泛的应用价值。     

氢氧化铝佐剂研究进展

氢氧化铝佐剂作为疫苗佐剂己有近80年的历史。其由于高吸附能力及对某些抗原具有较好的吸附性而优于其它佐剂,它也是唯一被美国FDA认证的人用疫苗佐剂,虽然氢氧化铝佐剂应用历史悠久,但其具体作用机制不明,目前认为主要是"储存库效应"和"免疫刺激效应"两种机制。纳米技术可能会给佐剂领域带来新的发展。纳米颗粒的单晶或多晶微粒具有小尺寸效应、良好的表面或界面效应、靶向作用及缓释作用等,其作为疫苗佐剂的作用己引起了人们的关注。     

铝佐剂的作用机制研究进展

随着亚单位疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗的出现,免疫佐剂的研究也逐渐得到人们关注,铝佐剂作为唯一被应用于人用疫苗的佐剂,其作用机制尚未完全明确。随着研究的深入,早期的部分理论也面临诸多质疑。本文结合近年来对铝佐剂自身性质、作用机制等研究数据进行论述,以求促进对铝佐剂作用机制的深入了解和应用。     

新型疫苗佐剂研究进展

佐剂是增强和调节疫苗抗原免疫反应的免疫刺激物,与抗原一起使用能产生更强的免疫反应。佐剂能激活机体的天然免疫系统,当佐剂和抗原同时或预先注射到机体内,可改变抗原的形态并延长抗原在体内的滞留时间,促进单核吞噬细胞对抗原的递呈能力及刺激淋巴细胞增殖分化,从而增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂的发展史长达一百多年,目前使用最广泛的疫苗佐剂是铝佐剂,传统的灭活疫苗在很大程度上依靠以铝盐为主的复合物作为主要佐剂。但近年来,随着基因工程技术和生物技术的飞速发展,重组疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等新型疫苗逐步被开发出来,这些新型疫苗与传统疫苗相比往往存在免疫应答能力差等问题,早期的抗原不纯导致传统的铝盐佐剂已无法满足需要。为解决新型疫苗免疫原性差的问题,科研人员致力于开发广谱且高效的新型疫苗佐剂用来增强新型疫苗的作用。新型疫苗佐剂种类繁多,功能各不相同且机制较为复杂,可分为新型油乳佐剂、脂质体佐剂、CpG寡核苷酸佐剂、细胞因子佐剂、纳米佐剂、多糖佐剂及复合系统类佐剂等。笔者对疫苗佐剂的发展史、作用机制及新型疫苗佐剂的分类进行分析和评述,以期为新型疫苗佐剂的研制及开发提供参考。     

不同佐剂对鸡新城疫疫苗免疫调节作用的影响

试验以300只AA雏鸡为试验动物,将其随机分为4组,A、B、C组分别接种相同剂量的甲壳素、蜂胶、铝胶佐剂苗,D组为对照组。结果表明,三种佐剂的疫苗在对肉鸡组免疫的第3、4、5、6、7、9、11、13、15、20、25天后,甲壳素疫苗组H I抗体效价显著高于其它组,蜂胶疫苗组H I抗体效价其次,铝胶疫苗组抗体H I效价最低;用三种不同佐剂的疫苗对肉鸡免疫后第26天称其重量,甲壳素佐剂疫苗组免疫后的肉鸡增重效果最好,蜂胶疫苗组居中,铝胶疫苗组最差。     

中药有效成分对动物疫苗的免疫佐剂效果及相关机理研究进展

佐剂作为疫苗的重要组成部分,其自身的安全性及对疫苗的免疫增强效果受到广泛重视。动物疫苗佐剂种类较多,包括铝佐剂、油乳佐剂和脂质体佐剂等。但由于可应用的佐剂有限,疫苗的需求量增大,因此寻求更加安全有效的疫苗佐剂成为新的研究热潮。中药具有易获取、毒性低和免疫活性强等特点,有潜力成为新型疫苗佐剂。笔者对中药有效成分的佐剂活性、联合疫苗后的免疫调节效果及作用机制进行综述,阐明中药有效成分作为动物疫苗佐剂的可能性及研究进展,为新型佐剂的研制提供理论依据。     

不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响

为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,笔者通过试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明：白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为与弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。     

不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响

为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,本试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明:白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。     

家禽主要疫病免疫技术(三)

大肠杆菌病目前只有大肠杆菌灭活疫苗。最好应用标准株加现地株的“现地自家多价灭活疫苗”,并且注意随时跟踪现地致病菌株的动态变化以便适时针锋相对,保证疫苗的“动态对型”预防。疫苗种类依佐剂的不同大体分为四类:铝胶佐剂灭活疫苗、蜂胶佐剂灭活疫苗、蜂胶中草药佐剂灭活疫苗、油佐剂灭活疫苗,以后二者效果最好。一般七日龄以上鸡均可应用,皮下或肌肉注射。禽霍乱分为灭活疫苗与弱毒活菌苗两大类,还有联苗和亚单位疫苗。1.灭活疫苗:共有“铝胶、油乳剂、蜂胶”3种佐剂类型,以蜂胶佐剂灭活苗保护率最高(80%以上)、免疫期最长(半年);铝…     

新型兽用疫苗佐剂研究进展

正相比于传统的灭活或活体疫苗,由基因工程重组抗原或化学合成多肽组成的现代疫苗往往存在免疫原性弱等问题,需要免疫佐剂来增强其作用。疫苗佐剂能够提高机体对抗原的适应性免疫应答,在疫苗的研发中具有重要的作用。随着药物研发的不断进步,近年来国内外出现了许多新型佐剂。尽管传统的铝盐佐剂是目前唯一全球公认的人用佐剂,但存在激发细胞免疫应答能力差等不足,因此,需要研发更为安全有效的兽用新型佐剂,尤其是安全无毒、能够刺激较强细胞免疫应答的佐     

免疫佐剂研究进展

佐剂的主要作用是提高抗原(免疫原)的免疫原性和免疫反应的可持续性,它能引导机体的免疫系统对抗原产生体液免疫或细胞免疫反应.对佐剂的选择取决于免疫的目的,从用途上分,佐剂可分为试验用佐剂和疫苗用佐剂.前者主要用于特异性抗体的制备,而后者则作为疫苗的必要成分.文章主要介绍目前常用的几种佐剂包括铝盐佐剂、弗氏佐剂、免疫刺激复合物(ISCOM)、脂质体和CpG及其在科研和疫苗中的应用.     

纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。     

免疫佐剂研究进展

佐剂的主要作用是提高抗原（免疫原）的免疫原性和免疫反应的可持续性，它能引导机体的免疫系统对抗原产生体液免疫或细胞免疫反应。对佐剂的选择取决于免疫的目的，从用途上分，佐剂可分为试验用佐剂和疫苗用佐剂。前者主要用于特异性抗体的制备，而后者则作为疫苗的必要成分。文章主要介绍目前常用的几种佐剂包括铝盐佐剂、弗氏佐剂、免疫刺激复合物（ISCOM）、脂质体和CpG及其在科研和疫苗中的应用。     

聚γ谷氨酸生物合成与DegR关系及其免疫佐剂效果研究

为探讨调节因子DegR对聚γ谷氨酸(γ-PGA)生物合成产量的影响,比较聚γ谷氨酸佐剂和传统铝佐剂的辅助免疫效果,利用P43启动子构建了穿梭表达载体pHY-degR,通过电转化地衣芽胞杆菌WX-02获得重组菌株WX-02/pHYdegR。同时以福尔马林灭活的金黄色葡萄球菌蛋白疫苗作为免疫原,分别以不同分子质量聚γ谷氨酸佐剂和铝佐剂制备相关疫苗并免疫小鼠,7d后注射金黄色葡萄球菌,根据小鼠死亡数,计算其相对免疫保护率。结果显示,过表达degR后,聚γ谷氨酸生物合成产量提高至28.5g/L,相比对照菌株WX-02/pHY300提高22.6%。分子质量2×10~3 ku聚γ谷氨酸作为佐剂的相对免疫保护率效果最好(78.9%),优于铝佐剂免疫保护率(52.6%)和未添加佐剂免疫保护率(42.1%)。结果表明,过表达degR基因能提高聚γ谷氨酸生物合成量,且聚γ谷氨酸作为疫苗佐剂能增强疫苗免疫效果,可作为理想的疫苗佐剂。     

不同佐剂GnRH疫苗主动免疫对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响

为探讨铝胶佐剂与白油Span佐剂的GnRH疫苗对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响,12头初生公猪随机分为GnRH疫苗铝胶佐剂免疫组和GnRH疫苗白油Span佐剂免疫组(下简称铝胶组和白油组).9周龄初免,17周龄加强免疫,25周龄屠宰.游标卡尺测量猪阴囊直径和睾丸大小,石蜡切片观察睾丸组织发育,ELISA法和放射免疫分析(RIA)法分别检测GnRH抗体水平和血清睾酮水平.结果表明,铝胶组与白油组GnRH抗体效价差异不显著(P0.05).铝胶组血清睾酮水平于17,21周龄(P＜0.05)和25周龄(P＜0.01)显著地低于白油组,阴囊直径,睾丸直径、横径、周长及睾丸血量均显著地低于白油组(P＜0.05).铝胶组与白油组猪睾丸曲精小管均出现不同程度的空泡化,白油组零星分布少量精子,铝胶组无精子产生.这表明在公猪免疫去势的效果上,辅以铝胶佐剂的GnRH疫苗比辅以白油Span佐剂的GnRH疫苗好.     

三种佐剂对奶山羊乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响

为筛选奶山羊乳房炎灭活疫苗的有效佐剂,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后第10天采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计隐性乳房炎检出率。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P0.05);3个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

旨在筛选适宜于猪丹毒丝菌灭活疫苗的佐剂。以分离鉴定出的猪丹毒丝菌1a型HG-1株灭活菌体为抗原分别配制矿物油佐剂疫苗（简称矿物油疫苗）、氢氧化铝胶佐剂疫苗（简称铝胶疫苗）、ISA201双相油乳佐剂疫苗（简称ISA201疫苗）、GEL02水溶性聚合物佐剂疫苗（简称GEL疫苗）、IMS1313水溶性纳米佐剂疫苗（简称IMS1313疫苗）共5种佐剂的灭活疫苗。小鼠免疫保护试验结果表明,二免14 d后使用约为4 LD₅₀的HG-1株对小鼠进行腹腔攻毒,矿物油疫苗和GEL疫苗的保护率分别为100%（7/7）和71%（5/7）,其他三种佐剂疫苗的保护率均为14%（1/7）。本研究进一步选择铝胶疫苗和GEL疫苗进行猪体对比试验;仔猪安全性试验结果表明,两种佐剂疫苗的副反应均较小;免疫保护试验结果表明,两次免疫后使用约为16 LD₁₀₀的HG-1株对免疫仔猪进行耳缘静脉攻毒,两种佐剂疫苗的保护率分别为60%（3/5）和100%（5/5）。本研究最终选择GEL佐剂作为开发猪丹毒灭活疫苗的最适佐剂。