DNA分子标记技术在农作物品种鉴定上的应用

文章概述了利用DNA分子标记技术(RFLP、RAPD、SSR、AFLP、ISSR和STS等)进行品种鉴定的原理、特点和研究概况,从DNA分子水平上进行品种鉴定具有准确可靠、成本低、自动化、不受环境影响等优点,DNA分子标记技术在品种鉴定方面具有广阔的应用前景。     

DNA分子标记技术在花生品种鉴定上的应用研究

利用10个中国花生品种,评估了AFL,SRAP,SSR和STS技术在区分相近来源花生品种上的应用效果。结果表明,AFLP和SRAP标记虽然可以揭示这些花生品种的遗传多样性,但在本研究采用的引物对条件下,单独使用任何一对引物不足以区分全部品种,提示我们需要考虑多对引物的配合,或者需要尝试更多的限制酶或引物对;从103对SSR或STS引物中筛选出9对引物,即Lec_1,Ah4_26,Ah4_4,SsS14,SHPAL_1,PG_71,PG_43,PM_36,PG_22,对所采用的10个花生品种的区分率均为100%。鉴于花生栽培种形态学、细胞学和生化标记贫乏,这9对高辨别力的SSR和STS引物对花生遗传研究和品种鉴定工作具有重要价值。     

SSR和形态标记在叶用莴苣品种鉴定上的应用

利用SSR标记和形态学标记对27个叶用莴苣品种进行DNA指纹图谱分析和遗传多样性分析。从50对引物中筛选出22对引物对叶用莴苣资源进行指纹图谱构建和遗传多样性分析。形态学鉴定主要调查了26个主要的指标,主要包括叶片性状和植株性状。变性聚丙烯酰胺和毛细管电泳相结合的结果显示共扩增出187种多态性基因型,平均每对引物扩增出8.31种。引物多态信息量(PIC)分布范围为0.42～0.92,平均为0.75。用形态标记和分子标记对27个品种进行聚类分析的结果表明,分子标记聚类分析的结果均可将27份材料分为4组,而形态标记可将材料分为2组,本研究结果为叶用莴苣的品种鉴定提供了科学依据。     

DNA分子标记技术在品种鉴定和纯度分析上的应用

本文就ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＳＳＲ、ＡＦＬＰ、等４种ＤＮＡ分子标记技术的原理及其在作物品种鉴定和纯度分析上的应用作了概述,并对它们的应用前景作了探讨。     

花菜类SSR分子标记筛选及其在品种鉴定上的应用

青花菜(B.oleracea var.italica)和花椰菜(B.oleracea var.botrytis)均为以花球为产品的甘蓝变种,亲缘关系较近,生产上常以花菜类来统称。为筛选出一套花菜类品种简单重复序列的鉴定引物,分三批从已公布的SSR引物中挑选出70对引物,以8份品种为材料,根据扩增多态性好、稳定性高、染色体上分布均匀等原则筛选出36对引物,用于花菜类品种鉴定。经173份品种验证,该引物组合可以很好地区分花椰菜与青花菜,能鉴定出绝大部分品种,只有3个品种相似系数达1,无条带差异,无法区分开。形态性状观测发现这3个品种差异极小,验证了本研究建立的SSR标记鉴定品种方法的准确性。36对引物中只需要10对核心引物就可以达到最大区分能力,不同组合理论分辨力不同,最大可达2.92×10¹²,推荐染色体上分布均匀的组合作为花菜类品种鉴定的最优组合,其理论分辨率为1.09×10¹²。本研究表明SSR分子标记可以用于花菜类品种鉴定,可为今后花菜类产业化中种苗纯度和真实性鉴定及种质资源管理提供技术支撑。     

电泳在植物品种鉴定中的应用

电泳作为一种分析工具开始于1937年。它可以揭示酶或其它蛋白质产物的结构变异,从而间接检测基因组。蛋白或酶的电泳分析在作物育种、种子检验、生产、登记、销售和加工过程中有不少应用,但在大规模品种鉴定中至今尚无实际应用。国际新产品保护联盟(UPOV)也注意到这一发展方向,目前正进行对小     

SNP分子标记及其在作物品种鉴定中的应用

作物品种鉴定是优良品种选育和推广的重要保障,而合适的检测方法是对品种进行准确鉴定的关键。随着分子标记技术的发展,第3代分子标记SNP逐渐应用到品种鉴定领域。本研究概述了SNP分子标记的特点,分析了高分辨率熔解曲线、竞争性等位基因特异性PCR、基因芯片、测序法、靶向测序基因型检测等5种作物研究中常用的高通量检测方法的特点及适用性,梳理总结了SNP标记在品种真实性鉴定、纯度检测和亲缘关系分析与分类等方面的研究与应用情况,以期为后续利用SNP分子标记进行品种鉴定提供技术参考。     

DNA分子标记及其在甘蔗育种上的应用

DNA分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种新的较为理想的遗传标记，在甘蔗育种方面发挥了重要作用。DNA分子标记包括：限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)、简单重复序列(SSR)、染色体或基因组原位杂交(GISH)、荧光原位杂交(FISH)等。本文对植物DNA分子标记的原理、特点及其在甘蔗种属鉴定、遗传多样性分析、分子图谱构建及病害分子诊断等方面的研究进行简要的概述。     

DNA分子标记及其在遗传育种上的应用

本文比较系统地介绍了DNA分子标记的种类（RFLP、“小卫星”DNA、“微卫星”DNA、AP－PCR、RAPD和AFLP等）、含义、技术、原理和特点，重点阐述TDNA分子标记在遗传育种上的应用前景。     

Cultivar identification and genetic fingerprinting of temperate fruit tree species using DNA markers

In recent years we have witnessed critical advances in the applications of molecular markers for genetic fingerprinting in cultivated plants. Their advantages have been widely recognised but they are even more important in woody perennials due to some particularities of these species such as their long generation time, their large individual size and their vegetative propagation. In this review, the information so far published in molecular fingerprinting of temperate fruit tree species using DNA markers is analysed with the goal of obtaining a common ground that will allow an easier and faster genetic identification that, at the same time, has to be reproducible among laboratories. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

分子标记技术在农作物品种鉴定上的研究进展及未来展望

概述了以AFLP、ISSR、SRAP以及SSR 等4 种主要的分子标记技术在农作物品种鉴定上的研究进展,提出了SSR将是未来利用分子标记技术鉴定品种纯度以及品种DUS测试的首选分子标记技术。同时介绍了在快速鉴定品种纯度上的研究进展,并预测未来利用互联网技术将分子标记指纹图谱和农作物品种形态学特征相结合实现品种快速检索、不同品种之间数字指纹比对以及比对信息快速输出以实现品种的快速鉴定,实现在农作物任何生长期均可达到快速鉴定品种纯度和真实性的目的,促进农作物品种权的保护以及中国种业的健康发展。     

DNA分子标记技术在农作物种子质量检验中的应用

种子质量是农业生产中的重要元素,它包括种子真实性和品种纯度2个方面。目前检测种子质量大致主要有3种方法：大田鉴定法,生化标记鉴定法和DNA分子标记鉴定法。大田鉴定法和生化标记鉴定法在实践过程中存在着一些无法解决的问题,使得它们的应用受到一定的局限性。DNA分子标记技术是随着分子生物学的发展而发展起来的一种新型的鉴定方法。它具有简便、快速、准确的特点,弥补上述2种传统鉴定法的缺点。本文对几种生产中常用的DNA分子标记技术根据其特点进行了分类,介绍了每种标记方法的基本概念,基本原理,并对其应用过程中优缺点进行了简要概括;主要就每种标记技术在种子真实性和品种纯度检测应用方面对前人的研究进行了详细综述;列举了理想的作物种子真实性和品种纯度鉴定方法应该满足的基本要求。DNA分子标记技术在农作物种子真实性和品种纯度鉴定方面存在的问题主要是,目前还没有建立专门针对杂交种纯度检测的分子标记,这也制约了分子标记应用的普遍性。DNA分子标记技术与大田鉴定法和生化标记鉴定法相比具有独特之处,故在农作物种子真实性和品种纯度检验中成为首选的方法。但是其更为广阔的应用前景还有赖于DNA分子标记技术的进一步发展。     

应用SSR技术对三个优质水稻品种的指纹鉴定

为了能够更加准确高效及时地对不同的水稻品种进行鉴定区分,应用SSR分子标记技术对3个优质水稻品种(象牙香占、抗白软占、抗倒丝苗)进行了SSR分子标记鉴定。对分布于水稻不同染色体上的73对SSR引物进行筛选,有8对能够在3个试验品种中显示较好的多态性。这些有多态性的8对引物分布在5条不同的染色体上。其中单用引物RM551就可以将3个供试品种完全区分开。其它7对引物之间相互组合使用也可以对3个供试品种进行很好的区分。试验表明将SSR分子标记技术应用到水稻品种的鉴定区分是一种完全可行,且高效简洁的方法,可以应用到实践生产中。     

应用分子标记技术检测作物杂交种纯度研究进展

随着作物基因组工程的快速发展,丰富的基因组序列为分子标记的开发和应用奠定了基础.分子标记技术可以弥补和克服杂交种纯度形态学及同工酶鉴定中的许多缺陷和难题,为作物杂交种纯度鉴定提供一种准确、可靠、快速、方便的方法.本文综述了几种常用分子标记技术的原理、优缺点及在作物杂交种纯度鉴定中的应用现状.     

适合甜菜品种鉴定的SRAP核心引物的筛选

为筛选适合甜菜品种纯度鉴定的SRAP核心引物,以12个进口国外甜菜品种为材料,对546对SRAP引物组合进行扩增,利用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,选择适合甜菜品种纯度鉴定的SRAP核心引物组合。结果从546对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、重复性好的引物组合23对,这23对引物组合共扩增出177条多态性条带,引物的PIC值均大于0.6。平均每对引物扩增7.7条多态性条带,从理论上讲,这些核心引物完全可以实现对现有甜菜品种的鉴定。     

利用分子标记快速鉴定甜菜育性的研究

试验旨在优化分子标记鉴定甜菜育性的整个鉴定过程,为分子标记鉴定甜菜育性真正应用于实际育种工作打下基础.以随机抽取的10份糖甜菜和5份甜菜多胚种质资源嫩叶为试材,采用两种甜菜DNA提取方法、双重PCR以及两种电泳方式对甜菜育性进行鉴定.结果表明,裂解液法在提取甜菜DNA上更加高效便捷,1h就可以提取100份甜菜DNA,效...     

ISSR分子标记技术在桃品种鉴定中的应用

为了有效地鉴别桃苗木优良品种或类型,为桃种质资源研究和新品种保护提供理论基础,利用ISSR标记对28份桃种质进行了品种鉴定及亲缘关系检测。结果发现：23条ISSR引物共扩增出188条DNA片段,其中96条具有多态性,多态性频率为51.06%;材料间遗传相似系数GS变幅为0.84～0.97,平均为0.92。获得28份供试材料的指纹图谱,鉴定出9条特异出现DNA片段和11条特异缺失DNA片段。通过UPGMA聚类分析发现,供试材料中地理来源及部分农艺性状相近的品种或类型聚为小类,但大的聚类群没有明确的划分标识,可能与桃种质在地区间互换及所选择的ISSR标记有关。     

利用SSR快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的研究

为了建立一套快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的实验体系,对DNA的提取、检测、PCR反应体系、程序、电泳以及显影方法等多个方面进行了优化, 最终确立了一套简单、快速、节约、污染小的甜菜品种纯度和真实性的鉴定体系。该方法使用96孔PCR板,利用碱裂解法提取干种子（或者叶片干粉）DNA;使用无毒的Gelred替代致癌性的EB,利用λ DNA检测提取样品DNA的浓度; PCR反应的体系为5μL,使用多重PCR替代单一PCR;PCR反应程序为94℃变性15s,退火15s,72℃延伸30秒,30个循环,最后72℃延伸5min; PCR产物的分离使用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后使用快速银染法对电泳后的聚丙烯酰胺凝胶进行显影。利用优化后的程序,一个成熟的实验室操作人员只需一天就可以完成192份样品的检测。     

AFLP分子标记鉴别大白菜品种

本试验采用AFLP技术,研究了90份来自7个不同栽培地区的大白菜品种材料。共筛选了20对引物,不同引物组合检测多态性谱带的能力有很大的差异,多态性谱带的数量从9条到32条不等。其中E—ACA／M—CTG是大白菜品种十分高效的引物组合,共产生7l条清晰的扩增带,其中有32条多态性谱带,多态性谱带的百分率为45．7％。通过该引物组合,能将90个品种全部区分开来。同时应用该引物组合检测2个大白菜杂交品种(北京新2号,京夏王)各10株,其中有1株北京新2号的谱带异常,其余同一品种不同单株的带型完全一致。表明AFLP标记用于研究品种指纹图谱,并鉴别品种是完全可行的。