冷冻精液的保存及使用

<正> 精液冷冻保存通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。其最大优点是可长期保存,使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制,可充分提高公牛的利用率。现将冷冻精液的保存和使用的技术要点介绍如下: 1 稀释液的配方:12％蔗糖液75ml,甘油5ml,卵黄20ml。 2 稀释:将经过检查合格的精液(活力0.6以上,精子密度中等)按1:2～5倍稀     

波尔山羊种公羊高效利用技术研究

对波尔山羊精液进行1：20～30稀释,以每次0．5ml输精剂量给土种山羊输精。精液稀释后于4～8℃条件下保存10h,精子活力由0．76降至0．51。共统计输精母羊386只．442个情期,其中362只母羊怀孕受胎,情期受胎率为81．9％。     

鸭精液液态保存的研究

试验用单人背腹式按摩采精法收集纯净的鸭精液。对不同稀释液(1％NaCl液、Lake液、pH 7.1Lake缓冲液BPSE和BNP—2)(精液:稀释液,v/v)稀释的鸭精液在不同温度(2—5℃、8—10℃和25℃)下的保存效果和以pH 7.1Lake缓冲液按不同稀释比例(1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9和1:10)稀释的鸭精液在2—5℃温度下的保存效果进行了研究。结果表明:鸭精液液态保存的最适温度为2—5℃;以PH 7.1Lake缓冲液的稀释保存效果最佳;按1:2、1:3、1:4和1:5稀释比例稀释鸭精液均可取得良好的保存效果。     

不同稀释液2—5℃保存鸡精液的研究

试验使用不同稀释液在2—5℃稀释保存鸡精液,测定了体外保存的精子活力和pH值变化。随保存时间的延长,不同稀释精液的精子活力和pH值下降幅度有差异。精子活力与pH值密切相关。精液稀释保存24小时的受精率以BPSE液最高(86.37％),与新鲜未稀释精液的受精率无显著差异;不同稀释液的受精蛋孵化率均无显著差异。用BPSE液加氧和减压保存的效果均无改进。Lake液以1:1(精液:稀释液,v/v)的倍数稀释,保存24小时后精子活力和pH值明显低于较高稀释倍数(1:2或1:3);保存24小时的受精率显著低于输精前加入BPSE液调整Lake液后的受精率。     

肉羊同期发情人工授精优化改进试验

利用乌兰察布市现阶段在绵肉羊同期发情人工授精工作中常用的普通稀释液,将精液按1:3和1:5的比例稀释,输精2次和3次,比较配种情期受胎率的差异,结果表明, 1:3稀释精液人工输精配种,受胎率极显著高于1:5稀释组(P0.01);输精2次和3次,受胎率差异不显著(P0.05)。同时,使用"高渗低温大倍稀释保存液",将精液按1:3、1:5、1:10的比例稀释,全部输精2次,受胎率分别为67.50%、48.8%和42.47%,结果表明, 1:3稀释组受胎率显著高于其他两组(P 0.01)。高渗稀释液和普通稀释液,稀释精液输精配种,受胎率差异不显著(P0.05)。     

提高猪人工授精效果的综合措施

提高猪人工授精效果的综合措施主要是 :采精前搞好公猪及假母猪的卫生 ,挤净公猪包皮腔中的包皮液 ,采精时不收集最初射出的精液 ;使用无毒害作用的一次性手套采精 ;采用一次性采精用品 ;将稀释液加温至与精液相同的温度 ;用一次性精液袋分装精液 ,并保存在 1 7℃下 ,每天摇匀 1～ 2次 ;用干纸巾擦拭母猪的外阴 ;输精时要求精液活力 0 .6以上 ,总精子数 30亿 ,体积 70～ 1 0 0ml。     

鹅精液短期保存研究

鹅的新鲜精液进行精子活力检测后,分别用0.9%NaCl和脱脂牛奶2倍量稀释,在2～5℃、15～25℃、38～39℃,48.5℃温度下保存.结果表明:保存温度在48.5℃的精液,0.5小时精子全部死亡;在38～39℃条件下,用0.9%NaCl稀释与牛奶稀释鹅精液,精子活力变化基本无差异(P>0.05);0.9%NaCl稀释的鹅精液,在2～5℃、15～25℃、38～39℃温度条件下,保存效果无显著差异(P>0.05);牛奶稀释的鹅精液,低温保存效果较好,与其他各组比较差异极显著(P<0.01).     

鸡精液稀释保存技术的研究

 本文在研究鸡精液基本生理生化特性的基础上，明确了鸡精子体外存活的适宜渗透压和酸碱度。用国产常用试剂，研制出BJJX稀释液，其渗透压为367毫克分子/公斤，pH7.2。用BJJX稀释液与鸡精液作1∶2稀释，0-5℃保存9或24小时后给母鸡输精，蛋受精率分别为90．0%（233/259）及79.0%（184/233），用BPSE液作为对照，蛋受精率为92.4%（218/236）及78.5%（197/251）。以1∶1稀释，在0-5℃保存24小时后输精，BJJX液和BPSE液的蛋受精率分别为92.2%（249/270）及94.8%（220/232）。BJJX稀释精液目前已在京郊作生产性推广应用67000余枚种蛋，蛋的受精率为74.6-91.1%，获得肯定效果。     

波尔山羊精液高倍稀释受胎效果

在对山羊进行人工授精时 ,选择何种稀释液 ,稀释倍数为多大 ,目前尚无定论。我们针对该问题进行了比较试验 ,结果如下。1　材料与方法1 .1　受试公母羊的选择公羊为滑县道口镇某个体户所饲养的 3头种用波尔山羊 ,年龄 2～ 3岁 ,体重 42～ 63ｋｇ ;射精量 0 .4～ 1 .2ｍｌ,精液密度 1 9.8～ 30 .4亿 /ｍｌ,精液活力 0 .7～ 0 .9级。母羊为当地农民散养的本地羊 ,年龄 8月龄至 5岁 ,胎次 0～ 8胎。1 .2　稀释液试验用稀释液有 3种 :① 0 .85 %生理盐水。②乳糖 6ｇ ,柠檬酸三纳 1 .5 ｇ ,加重蒸馏水 1 0 0ｍｌ;取其上清液 80ｍｌ,加卵黄 2 0ｍ…     

褪黑素在猪精液保存中的抗氧化作用

为探讨褪黑素(MLT)在猪精液保存中的抗精子氧化损伤效应,采用分步筛选的方法,首先在15 ℃保存稀释精液中分别添加1×10-6 mol/L(M1)、1×10-5 mol/L(M2)、1×10-4 mol/L(M3)、1×10-3 mol/L(M4)和1×10-2 mol/L (M5) MLT,以不添加MLT为对照组(M0),检验并选择MLT有效浓度用于15 ℃保存的离心精液,检验并选择MLT最佳浓度用于冷冻精液.结果表明:在保存6 d的稀释精液中,M1、M2和M3组精子活率(TMS)、质膜完整性(PMI)和顶体完整性(NAR)均高于M0,M2最高,M4、M5则显著低于M0(P＜0.05);丙二醛(MDA)浓度均低于M0,并以M2为拐点先降后升;选择M1、M2和M3用于离心精液保存,6 d后TMS和NAR均高于对照组,且M2与对照差异显著(P＜0.05),MDA浓度则逐渐降低且与对照差异显著(P＜0.05);选择M2用于精液冷冻保存,解冻精液TMS、PMI、NAR和线粒体膜电位(Mt-MP)显著提高(P＜0.05),MDA浓度显著降低(P＜0.05).可见,添加适宜浓度MLT能够抑制稀释、离心及冷冻保存猪精液中的精子氧化损伤,显著提高精液保存质量.     

奶山羊精液高倍稀释人工授精技术

奶山羊精液高倍稀释人工授精技术威海市已应用多年。文中介绍了这项技术,采用鲜奶稀释液、5~7倍稀释、0.2ml输精量、子宫颈1~2cm输精、每情期输精2~3次,可获得理想的受胎效果。对于提高良种公羊的利用率,发挥优良公羊的作用,具有重要意义。     

新疆驴精液浓缩冷冻的研究

试验以假阴道采集新疆驴精液,并用5种不同稀释保护液稀释冷冻后,选取其中较为理想的稀释液作为对照组,再通过2种不同的离心方法进行离心浓缩试验,并对解冻后精液的品质进行检测。结果表明:(1)5号稀释液冷冻-解冻精液后,精液活力、顶体完整率要显著高于其他4种稀释液(P<0.05);(2)先添加生理盐水再离心浓缩(离心2组)冻后精液的活力要显著高于对照组和离心1组(P<0.05),在顶体完整率方面,对照组要显著高于离心组(P<0.05),而对照组的尾部畸形率要显著低于离心组(P<0.05)。     

一株鸭源H9亚型禽流感病毒在鸡胚上传代及繁殖规律的研究

对一株从发病鸭体内分离到的H9亚型禽流感病毒株[A/Duck/NanJing/1/1999(H9N2),简称NJ01]进行了传代及繁殖规律的研究。将其在10日龄SPF鸡胚上传至15代,测定血凝价及平均死亡时间。取第3 (E3)、5(E5)、10(E10)、15(E15)代次的毒种稀释至不同浓度,接种10日龄、11日龄SPF鸡胚及非免疫鸡胚,对收获毒液量及血凝价(HA)、病毒含量(ELD_(50))进行比较。同时对接种10~(-4)稀释的第3代毒种死亡鸡胚各组织所含病毒的HA进行测定。结果显示,NJ01株经传代其平均死亡时间为53～64 h,HA为9～11 log_2;E3、E5、E10、E15毒种的ELD_(50)分别为10~(8．83)/0．1 ml、10~(9.0)/0．1 ml、10~(8.33)/0．1 ml、10~(8.32)/0．1 ml;将E3毒种稀释至10~3、10~4、10~5倍接种鸡胚,对病毒繁殖收获量有一定的影响,平均死亡时间延长,经10~(-4)稀释后接种11日龄SPF鸡胚的病毒繁殖效果最好;死亡鸡胚以尿囊液和尿囊膜所含病毒的HA最高,达9～10 log_2,肝、肺及其他组织HA较低,为1～5 log_2。     

不同因素对种公猪精液品质的影响

研究了饲料配方、温度、采精频率、稀释比及保存时间对种公猪精液品质的影响。结果表明 ,要获得良好的精液品质 ,种公猪饲料应含丰富的蛋白质 ,精液适宜保存温度应为 18～ 2 2℃ ,采精适宜频率为 3d 1次 ,稀释比适宜范围为 1∶( 6～ 8) ,保存时间应在 2 4h之内。     

绵羊附睾尾部精液低温保存效果的研究

由成年绵羊离体睾丸上获得附睾尾部精液,进行3种浓度稀释液(葡萄糖、柠檬酸三钠、卵黄含量分别为:Ⅰ组1 5g,0 7g,10ml;Ⅱ组0 4g,1 4g,10ml;Ⅲ组1 5g,0 7g,4ml)低温保存(4℃)效果的观察,并对低温保存前精液的处理方法进行了比较。结果表明:Ⅲ组绵羊精液低温保存总存活时间和存活指数均好于Ⅰ、Ⅱ两组(P<0 01;P<0 05);Ⅲ组保存前经上游处理的精液在总存活时间、存活指数和体外受精效果均明显高于未经上游处理的精液。     

萨福克羊精液低温液态保存效果的研究

[目的]为了提高萨福克羊精液低温液态保存的效果。[方法]用葡萄糖、柠檬酸钠、乳糖、卵黄为主要成分配制了5种萨福克羊精液稀释液,分别4、81、21、6倍稀释精液并5℃保存,通过观测精子存活时间、有效存活时间、生存指数等指标,筛选出精液保存时适宜的稀释液、渗透压、pH值及稀释倍数。[结果]4倍稀释不利于精液保存,8、121、6倍稀释精液保存效果好(P<0.01),结合母羊受胎率稀释保存倍数以8倍为宜;以葡萄糖3.0 g、柠檬酸钠2.0 g、卵黄10 ml为主要成分的稀释液保存效果优于其他4种稀释液(P<0.05)。稀释液pH值和渗透压与精液越接近保存效果越好。[结论]调整稀释液成分、稀释倍数、pH值、渗透压,可以提高萨福克羊精液低温液态保存效果。     

猪0.5 mL细管冷冻精液的人工授精试验

【目的】制备猪0.5mL细管冷冻精液,并对其输精效果进行检测。【方法】制备猪0.5mL细管冷冻精液,解冻后对其品质(活力、快速直线游动精子比例、质膜完整率、顶体完整率)进行检测。将36头母猪随机分为8组:A-1、A-2组(各5头)均输新鲜精液精子4×109个,稀释至80mL,其中A-1组采用常规输精,A-2组采用子宫内人工输精;B-1、B-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液,精子数量分别为1×109和2×109个,均稀释至20mL;C-1、C-2组(各5头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子2×109个,C-1组稀释至60mL,C-2组稀释至80mL;D-1、D-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子4×109个,D-1组稀释至60mL,D-2组稀释至80mL。人工授精后记录妊娠率、受胎率及产仔数量。【结果】制作的猪0.5mL细管冷冻精液解冻后,活力最高的达到(42.4±0.9)%,质膜完整率为(47.2±0.3)%,顶体完整率为(46.8±0.4)%。新鲜精液平均妊娠率为100%,产仔数为9.00±0.63;冷冻精液平均妊娠率为72%,产仔数为6.64±0.82,新鲜精液妊娠率和产仔数均显著优于冷冻精液。【结论】新鲜精液人工输精效果优于冷冻精液;冷冻精液采用60和80mL稀释液体积对产仔率、产仔数没有明显影响;冷冻精液通过子宫内人工输精,效果最佳的精子数为2×109个,稀释液体积为60mL。     

山羊的人工授精技术

一、羊的冷冻精液 : 用假阴道把羊的精液采出后 , 对精液颜色、活力、密度、畸形率立即进行检查 , 将符合生产冻精标准的精液进行稀释 , 放入 3～ 4℃冰箱平衡 2～ 4小时 , 再在距液氮面 1厘米的氟板上以每粒 0.1毫升滴冻 , 并熏蒸 3～ 5分钟 . 冻制的颗粒精液经解冻检查 , 活力在 0.3以上、有效精子 1500万个 , 方可贮存并向用户出售 .……     

山羊精液高倍稀释的输精效果

推广应用人工授精技术,目的就是要提高种公畜的利用效率。在自然交配情况下,一头种公羊的负担量为1:50;人工授精时,用原精或1:1稀释时,种公羊的负担量可扩大到1:500～1000,提高10～20倍。文献资料介绍,绵羊或山羊的精液稀释倍数,常用的为1:1,稀释倍数较高时,为1:3～5。但是山羊的精子密度很高,每毫升精液的精子数,一般均在20亿以上,具有高倍稀释应用的可能性。为了发挥人工授精技术的优越性,进一步提高种公羊的利用率,探讨生产上适宜应用的稀释倍数,1987年进行了山羊精液高倍稀释试验,取得了比较理想的效果,现将结果报告如下。     

浅谈波尔山羊采精的操作规程

波尔山羊人工授精技术可分两类3种方法:第1类为鲜精人工授精技术,又可分为2种方法,①鲜精或1:2～4低倍稀释精液人工授精技术,1只公羊1年可配母羊500～1 000只以上,比用公羊本交提高10～20倍以上.用这种方法,将采出的精液不稀释或低倍稀释,立即给母羊输精,适用于母羊季节性发情较明显而且数量较多的地区.