鸡白血病病毒群特异性抗原的抗体固相放射免疫分析及应用

固相放射免疫分析(SPRIA)试验的各成分的适宜条件是:固相载体抗体浓度为40μg/ml;~(125)Ⅰ-兔抗 AMVgs 的 IgG 为200万 cpm/ml;被检样品1:5稀释;对照 gs抗原为0.2μg/ml。可检出的最小抗原量为0.05μg/ml.检查了 SPF 雏鸡、NDV 等抗原以及 gs 抗原和 AMV 血浆毒等样品,证明 SPRIA 是特异的.SPRIA 与琼扩方法检查现地雏鸡的符合率为84.6%.     

鸡成骨髓细胞增多症病毒蛋白的提取及其抗原活性的检测

以差异离心-蔗糖密度梯度离心法浓缩和纯化鸡成骨髓细胞增多症病毒(AMV)。纯化的病毒主要存在于35％蔗糖梯度内,经琼扩反应检测,其抗原效价为1:32。纯化的AMV经酚-SDS处理后,经SDS-PAGE分离,出现四条蛋白带(分子量为12,000～40,000)。应用SR-RSV抗血清,以SDS-PAGE-琼扩协同法检测,其中三条蛋白带(分子量约为12,000,24,000和30,000)具有共同性抗原活性。     

检测禽白血病/肉瘤病毒ELISA双抗体法的研究

用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法提纯了感染雏鸡血浆中禽成髓细胞性白血病病毒(AMV),并用SDS-PAGE法提取了AMV的结构蛋白P_(27)~(838)。以纯化的P_(27)~(838)高免家兔,制备了兔抗P_(27)~(838)的禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗体。选用兔抗P_(27)~(838)IgG作为包被抗体,该抗体与辣根过氧化物酶的结合物作为酶标抗体,以聚苯乙烯微量板为固相载体,建立了监测禽白血病的ELISA双抗体法,经试验证明该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点。     

鸡马立克氏病(MD)的特异性诊断 Ⅰ、使用已知阳性血清作免疫扩散试验诊断MD的研究

使用已知抗马立克氏病病毒(MDV)血清进行免疫扩散试验,共检查了1,933只鸡的羽髓材料,其中未感染MDV的健康鸡104只(全部阴性),实验感染MDV的鸡475只(469只阳性,占98.73％),火鸡疱疹病毒(HVT)免疫的鸡56只(全部阴性),实验感染鸡成髓细胞增生性白血病病毒(AMV)的鸡107只(全部阴性),实验感染鸡新城疫(ND)、传染性支气管炎(IB)和传染性喉气管炎(ILT)病毒的鸡各60只(全部阴性),非MD发病鸡场的鸡545只(19只阳性,占3.48％),MD发病鸡场的鸡466只(252只阳性,占54.08％)。在实验感染鸡中,MDV羽髓抗原的最早检出时间大约在感染后的第13～14天,最适检出时间大约在20～30天。临床耐过鸡的羽髓抗原检出率随时间的延长而降低。另外,把在非MD发病鸡场检出的羽髓抗原阳性鸡的抗凝全血接种于5日龄的鸡胚卵黄囊,接种后14天检查绒毛尿囊膜,在大多数接种胚中可见典型的病毒痘斑,说明羽髓抗原阳性鸡的血流中确实含有MDV;也就是说,用已知MDV阳性血清检查羽髓抗原来诊断MD的免疫扩散试验是特异而可靠的。     

弓形虫全抗原免疫对雏鸡生长与器官发育的影响

为研究弓形虫ΔKu80株全抗原免疫对雏鸡生长和器官发育的影响,试验选用7日龄的罗曼蛋鸡公母各40只,分为8组,每组10只,分别皮下注射不同剂量的弓形虫ΔKu80株全抗原,每日观察各组鸡只的临床症状,记录体重变化,并在免疫后第28天进行剖检,采集各器官进行器官指数分析。结果表明:各组公鸡和母鸡的体重变化趋势一致,除公鸡组肝脏指数有差异外,其他各组各器官指数差异不显著(P0.05)。试验所用的弓形虫ΔKu80株全抗原疫苗对雏鸡的生长和重要器官的发育无不良影响,以1×10~6个/只弓形虫ΔKu80株全抗原疫苗的剂量免疫雏鸡,能够促进公鸡的肝脏发育和母鸡生长。     

苜蓿花叶病毒和白三叶草花叶病毒复合侵染对本氏烟中5种激素含量的影响

为探明苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus, AMV)和白三叶草花叶病毒(white clover mosaic virus, WCMV)复合侵染的协生作用致病机理,以复合接种AMV+WCMV的本氏烟为处理,分别以单独接种AMV、WCMV、磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0, PBS)的本氏烟为对照,采用DAS-ELISA (double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay)方法检测了接种病毒72 h的本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中的病毒含量及72～720 h内水杨酸(salicylic acid, SA)、茉莉酸(jasmonic acid, JA)、独脚金内酯(strigolactones, SLs)、油菜素内酯(brassinolide, BR)、乙烯(ethylene, ETH) 含量的变化。结果表明：AMV和WCMV 接种比例为3∶1的植株720 h时的发病症状比单独接种一种病毒(AMV或WCMV)明显,主要症状表现为轻花叶、斑驳花叶、重花叶、明脉、皱缩。检测接种72 h时叶片病毒浓度发现,接种比例3∶1的植株中AMV的浓度比单独接种AMV以及AMV和WCMV接种比例为1 ? 1和1 ? 3的处理高,而WCMV的浓度略低于其单独接种WCMV处理,高于AMV和WCMV接种比例为1 ? 1和1 ? 3的处理;接种AMV和WCMV混合液后复合侵染的本氏烟叶片中SA、JA、SLs、BR、ETH含量在一定时间内与单独接种AMV、WCMV及对照之间差异显著(P < 0.05),其中,AMV和WCMV接种比例为3∶1的混合液可在一定时间段内提高本氏烟叶片中SA (216～504 h)、SLs (216～432 h)、BR (216～504 h)、ETH (288～720 h)含量,降低JA (216～504 h)含量,其SA、SLs、BR、ETH含量分别比单独接种AMV、WCMV和健康植株(CK)提高了36.27%以上,JA含量降低了59.09%多。     

应用ELISA检测鸡白血病病毒gs抗原的初步探讨——与其他禽病毒抗原交叉试验

以ELISA检测了经SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞增殖的几种禽病病毒、SPF鸡卵卵清、人工接种AMV的SPF雏鸡及SPF雏鸡的肌肉、肝脏、粪便和血清等被检材料.证明本方法是特异性的.     

苜蓿花叶病毒和白三叶草花叶病毒复合侵染对本氏烟中5种激素含量的影响

为探明苜蓿花叶病毒(alfalfa?mosaic?virus,?AMV)和白三叶草花叶病毒(white?clover?mosaic?virus,?WCMV)复合侵染的协生作用致病机理,以复合接种AMV+WCMV的本氏烟为处理,分别以单独接种AMV、WCMV、磷酸盐缓冲溶液(pH?7.0,?PBS)的本氏烟为对照,采用DAS-ELISA?(double-antibody?sandwich?enzyme-linked?immunosorbent?assay)方法检测了接种病毒72?h的本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中的病毒含量及72～720?h内水杨酸(salicylic?acid,?SA)、茉莉酸(jasmonic?acid,?JA)、独脚金内酯(strigolactones,?SLs)、油菜素内酯(brassinolide,?BR)、乙烯(ethylene,?ETH)?含量的变化.结果表明:AMV和WCMV接种比例为3:1的植株720?h时的发病症状比单独接种一种病毒(AMV或WCMV)明显,主要症状表现为轻花叶、斑驳花叶、重花叶、明脉、皱缩.检测接种72?h时叶片病毒浓度发现,接种比例3:1的植株中AMV的浓度比单独接种AMV以及AMV和WCMV接种比例为1???1和1???3的处理高,而WCMV的浓度略低于其单独接种WCMV处理,高于AMV和WCMV接种比例为1???1和1???3的处理;接种AMV和WCMV混合液后复合侵染的本氏烟叶片中SA、JA、SLs、BR、ETH含量在一定时间内与单独接种AMV、WCMV及对照之间差异显著(P?相似文献   

苜蓿花叶病毒和白三叶草花叶病毒复合侵染本氏烟的发病流行因素

为明确苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)在室内条件下复合侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)的发病流行因素，以接种磷酸缓冲盐溶液(PBS)的本氏烟为对照，通过对AMV和WCMV单独接种侵染、复合侵染的不同接种浓度、不同温度和相对湿度(RH)对本氏烟发病的影响及本氏烟中两种病毒含量变化进行了研究。结果表明最适合本氏烟发病的AMV和WCMV单独接种浓度分别为20%(AMV:PBS=1:4)和50%(WCMV:PBS=1:1)，两种病毒复合侵染接种的浓度为75%和25%(AMV:WCMV=3:1)；最适宜发病的温度为25℃、RH为60%，在此条件下，AMV和WCMV复合接种侵染本氏烟的平均病情指数为80.12，比单独接种AMV、WCMV的病情指数分别提高了22.36%、45.28%，其病毒含量是两种病毒单独接种本氏烟中的2.11和1.60倍。综上可见，当温度为25℃、RH为60%以及AMV和WCMV复合侵染接种浓度为75%和25%时，本氏烟发病最严重。     

板芩桔甘合剂对传染性支气管炎病毒人工感染雏鸡的临床疗效分析

旨在探讨板芩桔甘合剂(BQJGHJ)对传染性支气管炎病毒(IBV)人工感染雏鸡的临床疗效。选取120只雏鸡随机分为空白组、模型组(感染病毒)、阳性药物组(感染病毒+甘胆口服液)和BQJGHJ高、中、低剂量组(感染病毒+BQJGHJ),每组20只。除空白组外,其他组感染IBV造模,4 d后,各组分别饮水给药,连用5 d。每天观察各组雏鸡临床症状,记录临床症状记分,统计有效率、治愈率;在造模后,给药第3、5天,及停药后第2天分别自翅下静脉采集血液,分离血清,ELISA法检测感染雏鸡血清中IFN-γ、IL-6、IL-10含量变化。结果显示:BQJGHJ高、中、低剂量组的治愈率分别为75.0%、80.0%、65.0%,有效率分别为90.0%、95.0%、80.0%。模型组雏鸡血清中IL-10含量降低,IL-6含量升高,与空白组比较,差异显著(P0.05或P0.01);在给药第3、5天时,BQJGHJ高、中、低剂量组、阳性药物组雏鸡血清中IFN-γ(第5天时,高剂量组差异极显著,P0.01,其他时间、其他组差异均不显著)、IL-10含量(第5天时差异极显著,P0.01)升高,雏鸡血清中IL-6含量降低,与模型组比较,均差异显著(P0.05)。在停药后2 d,BQJGHJ高、中、低剂量组、阳性药物组雏鸡血清中IFN-γ、IL-10含量升高,雏鸡血清中IL-6含量降低,与模型组比较,均差异显著(P0.05或P0.01);BQJGHJ高、中、低剂量组雏鸡血清中IFN-γ、IL-6、IL-10含量,与阳性药物组相比,无显著性差异(P0.05)。BQJGHJ可提高传染性支气管炎雏鸡血清中IFN-r、IL-10的含量,降低传染性支气管炎雏鸡血清中IL-6的含量,发挥治疗鸡传染性支气管炎的作用。     

雏鸡白痢病的发生与其抗体消长规律的相关性研究

采用ＬＰＳ抗原对雏鸡白痢的母源抗体及感染雏鸡的抗体消长规律进行了ＥＬＩＳＡ检测，结果表明，母源抗体绝大多数在７～１０日龄消失，人工感染雏鸡在感染后１６天开始出现ＥＬＩＳＡ阳性反应，１９～２２天抗体水平明显提高。感染后死亡的９只雏鸡几乎都发生在１～１９日龄之间，即发生在ＥＬＩＳＡ检测结果为阴性的阶段。     

雏鸡白痢病的发生与其抗体消长规律的相关性研究

采用ＬＰＳ抗原对雏鸡白痢的母源抗体及感染雏鸡的抗体消长规律进行了ＥＬＩＳＡ检测，结果表明，母源抗体绝大多数在７－１０日龄消失，人工感染雏鸡在感染后１６天开始出现ＥＬＩＳＡ阳性反应，１９－２２天抗体水平明显提高，感染后死亡９只雏鸡几乎都发生在１－１９日龄之间，即发生在ＥＬＩＳ检测结果为阴性的阶段。     

由病禽中分离的大肠艾希氏菌的性状

禽大肠杆菌病所引起出生第一天的雏鸡死亡以及死胚,是繁殖禽群的重大障碍。能带来重大的经济损失。在患本病的农场中,从1508份死亡鸡雏、鸡胚和种卵中分离了337株(25％)肠杆菌。并研究了这些菌的形态学、染色、培养及抗原的特性。     

IBDV感染雏鸡外周血液淋巴细胞chMDA5信号通路因子表达的动态变化

为研究鸡MDA5(chMDA5)及其信号通路因子在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染雏鸡体内的表达情况,将40只14日龄SPF雏鸡随机分为感染组和对照组,感染组雏鸡经点眼、滴鼻方式给予IBDV液,对照组雏鸡于相同日龄、相同途径给予相同剂量PBS,于感染后第1、4、7及21天采取雏鸡外周血液并分离淋巴细胞,采用实时荧光定量PCR方法检测雏鸡外周血液淋巴细胞chMDA5信号通路因子mRNA转录及IBDV载量的动态变化。结果表明,IBDV感染雏鸡后第4天病毒载量较感染后第1天明显升高,之后逐渐下降;雏鸡淋巴细胞chMDA5及其信号通路因子表达量在感染后第4天均有明显的上升(P0.01或P0.05),感染后第7—21天又出现下调。IBDV能够激活雏鸡体内chMDA5信号通路,并且IBDV复制与chMDA5信号通路因子的表达有着密切关系。     

鸡传染性法氏囊病模拟抗原苗免疫作用的探讨

用鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）免疫雏鸡，纯化其IgG(Ab1)免疫兔制备Ab2,Ab2经正常鸡IgG(NC-IgG）和IBD抗原（Ag）吸收后，加佐剂免疫雏鸡，免疫保护指数：Ab2组分别为：100％、100％、90％；对照组：0％。重复实验：50只雏鸡接种3次Ab2免疫，能抵抗IBD强毒攻击，该试验证实：IBD模拟抗原苗在IBD免疫中的应用价值。     

MDV对雏鸡血浆MDA含量与SOD活性的影响

为探讨丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在雏鸡马立克病(MD)发病过程中的作用,研究了雏鸡在人工攻毒后血浆MDA含量与SOD活性的动态变化.结果表明,攻毒组接种马立克病病毒(MDV)后第14天,血浆中MDA的含量显著高于对照组(P＜0.05),第7天和第28天高于对照组,第56天时基本接近;血浆中SOD活性在第7天时对照组显著高于攻毒组(P＜0.05),第14天和第28天高于攻毒组,但差异不显著.表明雏鸡在感染MDV后血浆中MDA含量显著升高,SOD活性明显降低,对雏鸡MD的发病诊断有重要的指导作用.     

1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ的体外诱生

为研究超抗原(SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV(马立克氏病病毒)感染的免疫学规律,采用NO-释放法,设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生的动态变化.结果发现,超抗原SEB(SAG-SEB)可提高脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生水平,其中,高剂量(1 ng/只)引起短时加强后下降,而低剂量(0.01 ng)则出现缓升缓降现象;而MDV接种则抑制脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生; SAg-SEB能增强雏鸡细胞免疫,主要表现于接种初期(1-10 d PI),而MDV却在接种后1-25 d间降低细胞免疫;说明超抗原SEB和MDV虽然均可引起鸡T细胞增殖,但对鸡免疫细胞IFN-γ的体外诱生作用不同.     

一种防治雏鸡(鸭)缺硒病的新药——硒弹丸

甘肃省畜牧兽医研究所畜禽缺硒病研究课题组,近年来研制出一种防治雏鸡(鸭)缺硒病的新药——硒弹丸。该药通过肌胃投服,72小时后,血硒开始升高,有效浓度在体内维持75天以上。经临床对4万多只雏鸡(蛋用、肉用)、雏鸭试验观察,证明该制剂具有吸收快,体内维持时间长,药效稳定、使用简便、价格便宜等特点。适用于4～75日龄雏鸡(鸭)。硒弹丸系采用亚硒酸钠或硒酸     

不同症状类型苜蓿病毒病AMV病原检测及其寄主范围测定

为明确采自田间不同症状类型苜蓿病毒病病样中苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)的带毒情况、症状表现与叶绿素含量的相关性及AMV的寄主范围，本试验通过田间调查采样、症状归类、丙酮乙醇混合液法和双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA)法对不同病样的叶绿素和AMV含量进行测定和检测，并对提纯至不同症状类型病样中AMV对9科32种植物的致病性进行测定。结果表明田间苜蓿病毒病病样有轻花叶、重花叶、叶片边缘褪绿黄化型和叶片畸形皱缩花叶矮化型4种症状类型，均带有AMV，且叶绿素含量、AMV含量与症状表现之间具有正相关性，症状表现最严重的叶片畸形皱缩花叶矮化型病样的叶绿素a、b、总叶绿素含量均比对照低58.00%以上，类胡萝卜素含量比对照高134.06%,AMV含量最高，为252.96 pg·mL^-1；寄主范围测定表明AMV可侵染7科27种植物，对西葫芦致病性最强，症状表现为局部枯斑，30 d时AMV浓度为316.19 pg·mL^-1。     

适时出雏是提高雏鸡质量的重要一环

胚蛋自转入出雏机以后,一般在20天又6小时开始大批啄壳出雏,在20天又12小时可达高峰期,20天又18小时应基本结束。雏鸡出壳以后,当少部分的雏鸡(大约5％)颈部嫩毛未干时,便可将较早出的雏鸡从出雏机内检出。有人主张待雏鸡出壳完毕以后,进行一次性出雏。这种主张是不对的。因为,如果让较早出壳的雏鸡继续停留在出雏