球虫分子生物学检测方法研究进展

球虫病是由球虫引起的一种发病率高、致死率低、显著影响动物生长,对畜牧业危害最严重的寄生虫病之一.建立高效的球虫检测方法对防控球虫病具有重要意义.为改善传统诊断方法的局限性,目前基于核酸的新兴诊断技术正在发展.论文综述了国内外球虫分子生物学检测方法的研究进展,分析了各种技术的优点和问题,展望了球虫分子生物学技术的应用前景...     

GAg-ELISA检测丝虫病的方法与应用

ＧＡｇ－ＥＬＩＳＡ检测丝虫病的方法与应用徐礼周，冯子玲，叶萍，钟志萍，周勇志（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所）ＥＬＩＳＡ技术具有灵敏度高、特异性强、设备简单、操作简便、试剂稳定、对人体无害等优点，是当今最先进的免疫诊断方法之一［“。目前国际上Ｅ...     

PCR技术在犬病毒病诊断上的应用

随着分子生物学的发展，PCR基因扩增技术已越来越多的应用于犬的病毒病、细菌病和寄生虫病的诊断和研究之中。聚合酶链反应(Polymerase chain reaction．PCR)技术是在从样品中提取病原DNA或RNA后，体外扩增某一特定病原的DNA或RNA序列的一种分子生物学方法。与常规病原诊断方法相比，PCR技术更特异，更快捷。目前PCR技术已广泛应用于犬病毒病诊断。     

我国首次建立的家畜寄生虫病免疫诊断技术--家畜伊氏锥虫病补体结合试验

我国现已建立的动物寄生虫病特异性诊断技术分别属于三大类,已经广泛使用的为病原诊断和免疫学诊断两类,前者一般在发现寄生虫后随即建立了,后者却是在晚些时期才建立的。至今免疫疹断技术已有沉淀反应、凝集反应、荧光素标记、酶标记、同位素标记、金标记等好几类,每类中又包括许多种技术,每种技术又包含许多种不同的具体方法。而最初行之有效和广泛使用的免疫诊断技术却是诊断马伊氏锥虫病的补体结合试验,该技术于20世纪50年代由军马卫生科学研究所郑策平、刘俊华、霍时德、雷振声等建立的,后来又建立了牛、骆驼等其他家畜伊氏锥虫病…     

第五讲 动物寄生虫病的免疫诊断与分子生物学诊断（二）

1．10建立动物寄生虫病免疫诊断方法的关键要素 衡量各种免疫诊断方法的优劣一般根据三项要素，即敏感性、特异性和实用性。三项皆高(强)者为优。敏感性的高低以能检测到抗体或抗原量的多少为依据，即能检出越少的量越敏感，但在临诊应用时则以阳性检出率高低为依据，越高越好；特异性是以非特异性反应     

LAMP方法及其在病原微生物检测中的应用

环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一门新兴的分子生物学技术,该技术具有操作简单、不需要大型仪器设备、成本低廉、反应时间短、结果判定简单等优点,且具有比常规分子生物学方法更高的灵敏度和特异性.目前该技术在细菌、病毒及支原体等病原微生物的快速检测和早期诊断中已广泛应用.通过对国内外LAMP研究进展及该技术在细菌、病毒、支原体等致病菌中的诊断应用进行综述,以期介绍该技术的优缺点和应用现状,从而为今后的广泛应用提供参考依据.     

新科学技术讲座 第五讲 动物寄生虫病的免疫诊断与分子生物学诊断(二)

1.1 0　建立动物寄生虫病免疫诊断方法的关键要素　衡量各种免疫诊断方法的优劣一般根据三项要素 ,即敏感性、特异性和实用性。三项皆高 (强 )者为优。敏感性的高低以能检测到抗体或抗原量的多少为依据 ,即能检出越少的量越敏感 ,但在临诊应用时则以阳性检出率高低为依据 ,越高越好 ;特异性是以非特异性反应多少为依据 ,少则强 ,在临诊应用时以假阳性反应高低为依据 ,越低越强。决定敏感性和特异性高低的原因不仅取决于不同的方法种类 ,也同样取决于抗原 (抗体 )制备技术 ,阳阴性判定标准 (阈值 )的制定、操作者的技术水平 ,所用试剂质量、…     

弓形虫实验室诊断技术研究进展

弓形虫病（toxoplasmosis）是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）感染引起的一种人兽共患寄生虫病,在世界各地都有分布,宿主种类十分广泛,人间和动物的感染率都比较高,对人类健康和公共卫生构成了威胁。目前,弓形虫病没有理想的药物用于治疗,早期诊断是防控该病的重要手段之一。病原学诊断是最早建立的弓形虫诊断方法,操作简单,结果可靠,但耗时较长,无法满足快速、高效、批量检测的需求,因此在实验室诊断方面应用逐步减少。免疫学检测方法以ELISA和IHA方法为主,已有较为成熟的商品化试剂盒或诊断试剂,在大规模的检测和流行病学调查中起到了很大作用。分子生物学方法与传统的病原学检测方法相比,其速度、通量、特异性、敏感性各方面都有提升,相较于免疫学诊断,避免了获得性免疫带来的假阳性结果,是未来弓形虫病实验室诊断的主要发展趋势。本文从病原学、分子生物学和免疫学方面对弓形虫的实验室诊断技术进行论述,以期为弓形虫的实验室诊断和防控措施的制定提供参考。     

核酸技术在禽病诊断中的应用

近年来 ,随着分子生物学发展 ,禽病诊断水平有了很大提高。禽病的实验室诊断技术已从常规的病毒分离鉴定以及抗原、抗体的免疫学检测 ,进入到可对病原微生物的基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平。核酸技术是分子生物学技术的一部分 ,它包括聚合酶链反应 ,核酸探针及限制性内切酶酶切片段分析和核酸序列测定。核酸技术的核心是根据病原体的遗传物质ＲＮＡ或ＤＮＡ进行鉴别定性 ,其目的是检测病原体 ,同时鉴定血清型、亚型或基因型 ,核酸序列分析定性的水平是其他方法不可比拟的。核酸技术具有高灵敏性、高特异性等优点 ,目前该技术…     

应用SPA-ELISA诊断猪痢疾的研究

目前诊断猪痢疾多采用病原分离和粪便检查,其操作比较繁琐,且费时费力,检出率也并不高。为了探索新的诊断方法,进行了本试验,并与琼脂扩散作了对比。结果表明,本法检出率高、特异性强,是较好的快速诊断方法之一。现将结果报告如下。     

我国伊氏锥虫病免疫诊断研究进展（综述）

伊氏锥虫感染马、骆驼、牛、羊等牲畜,严重影响牲畜的生长发育,甚至引起死亡。因此,伊氏锥虫病防治工作愈来愈得到重视.相应地,其诊断技术也得到深入的研究。由于显微镜检查等病原学方法检出率低,因而,敏感、特异的免疫学诊断技术得到迅速的发展.本文就我国家畜伊氏锥虫病的免疫诊断技术的发展作一概述。     

寄生虫病LAMP技术研究进展

人们越来越重视寄生虫对畜牧业和人体健康的危害,临床上对寄生虫病的检测经历了病原学诊断和免疫学诊断后,分子生物学诊断方法也日益发展,但这些检测手段普遍存在缺陷,随着LAMP技术在各领域的发展应用,其快速、灵敏、简便诊断优点带来巨大效益,本文介绍LAMP技术近年来在寄生虫领域的应用,为我国基层推广LAMP技术的应用提供参考。     

PCR技术在布鲁氏菌检测与鉴别中的应用

布鲁氏菌是一种可感染多种哺乳动物的人兽共患病病原,能给公共卫生和畜牧业带来严重危害。常用的布鲁氏菌病原检测方法包括布鲁氏菌分离培养和分子生物学方法。其中的PCR技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便等优点,在布鲁氏菌检测、菌种鉴别、疫苗株与野毒株区分等方面得到了广泛应用。本文综述了PCR技术在通用型布鲁氏菌、不同种型布鲁氏菌及布鲁氏菌疫苗菌株检测与鉴别中的应用研究,以期为检验检疫、流行病学调查、人与动物布鲁氏菌病诊断等提供技术参考。     

浅谈弓形虫病免疫诊断技术

弓形虫病是一种寄生虫病。弓形虫可随着血液流动到各部位,从而引发多种疾病,且感染率高,致死率高,是危害动物和人体健康的重要疾病。因此,本文将简单介绍弓形虫病的几种免疫诊断技术,以期为准确预防和治疗弓形虫病提供理论依据。     

鸡传染性鼻炎诊断方法研究现状

鸡传染性鼻炎(IC)是由副鸡嗜血杆菌(HPG)引起的鸡的一种急性或亚急性呼吸道传染病。主要特征是鼻粘膜发炎,眼睑水肿,多发生于育成鸡和产蛋鸡群。虽然病死率不高,但由于发病造成的淘汰鸡数量增加和产蛋率显著减少,造成较严重的经济损失。IC的诊断以往多用病原分离鉴定的方法,近几年来,随着免疫学技术以及分子生物学技术的飞速发展,应用于IC的诊断方法也发生了新的变化,而且比以往的诊断方法更加快速灵敏。现将本病诊断方法的研究现状综述如下。一、传统病原分离鉴定方法这是最早应用于诊断该病的方法。常规操作主要由眶下窦采集…     

分子生物学诊断技术的应用(一)

随着分子生物学技术的飞速发展,尤其是分子遗传学的进步,大大提高了动物病原的诊断水平。动物病原的实验室诊断技术已从常规的病原分离鉴定以及抗原和抗体的免疫学检测,进入到可对病原基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平,同时也促进了疫病快速诊断技术发展。近几年随着国家对市县级动物疫病防控设备投资逐年加大,疫病防控诊断平台建设不断加强,兽医技术人员希望普及动物分子生物学诊断技术。本刊特邀湖北省农业科学院畜牧兽医研究所杨峻研究员对分子生物学诊断技术在兽医学科领域的应用进行概述,为大家在实际应用时提供参考。主要内容包括核酸探针技术、单克隆抗体技术、核酸扩增、核酸电泳、免疫印迹技术、图谱分析、核酸序列分析、DNA芯片技术等。     

亲和素—生物素酶联免疫吸附试验在寄生虫病免疫诊断上的应用

亲和素—生物素系统酶联免疫吸附试验是八十年代初建立起来的一种新型生物反应放大系统,是将具有高亲和力、高稳定性的亲和素—生物素系统(Avidin-Biotin System,ABS)引入ELIsA反应的免疫诊断技术.ABC—BLISA即亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex)则是预先按一定比例将生物素化酶与亲和素共温形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体的反应.近年来,ABC—ELISA以其明显的优越性而日益受到了国内外学者的关注,在寄生虫病的免疫诊断方面得到广泛应用,并取得了可喜进展.本文就ABC—ELISA在寄生虫病的免疫诊断方面的应用概述如下.     

仔猪李氏杆菌与附红细胞体混合感染的防治报告

<正>仔猪李氏杆菌病是由李氏杆菌引起的以中枢神经症状为特征的传染病,主要表现为脑膜炎、败血症,其特点是带菌率高,发病率低,仔猪病死率高,气候变化、应激等因素可诱发该病。猪附红细胞体病又称附红体、血虫病或红皮病,是由血液寄生虫引起的一种以贫血、黄疸主要症状的寄生虫病。常年发病,但不同季节发生率有明显差异。病程约10～30 d,死亡率高。这两种病原一旦混合感染,将给诊断和治疗带     

转录组测序——RNA-Seq技术在动物疾病检测中的应用研究进展

从第二代测序技术发展起来的转录组测序技术(RNA-Seq),具有不受物种限制、更高分辨率、背景噪音低、重复性高、成本低廉等优点;被广泛应用于遗传育种、癌症筛查、病原检测等各个领域。目前在野生动物疾病预防诊断工作中还没有该技术应用的报道。本文从RNA-seq技术在动物病毒病、细菌病、寄生虫病三个方面的应用进展进行了阐述,以期能尽早将该技术应用到野生动物疾病防治工作中,为野生动物预防与抵抗病原体感染提供解决策略。     

环介导等温扩增(LAMP)技术及其在鸭病病原检测中的应用研究进展

环介导等温扩增(LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性强、灵敏度高、快速、准确、操作简便和成本低等特点,越来越受到兽医相关工作者的关注。目前,该方法已被广泛应用于各种动物病原的检测。本文综述了LAMP技术在鸭传染病病原检测中的应用研究进展情况,以期为今后鸭病的诊断和防控工作提供参考。