人癌裸小鼠原位移植瘤模型的研究及应用进展

自1969年Rygaard等首次将人类肿瘤成功地移植于探小鼠以来，大多数人类恶性肿瘤均已在棵小鼠体内建立了移植瘤模型，就其移植途径而言，多采取皮下接种方式，虽然这种移植方式简单易行，肿瘤的生长情况也便于观察，且在一定程度上也近似地模拟了原有肿瘤的形态学、生物学及生物化学特性［“j。然而，对于大多数人类恶性肿瘤来说，接种子棵小鼠皮下组织是属于异位移植，脱离J其起源组织器官的微环境，因此在实验中移植瘤的某些行为常不同于原先患者身上恶性肿瘤的生物学行为．如移植瘤常有包膜、呈局限性生长、很少发生局部或远处器官的转移…     

裸杂鼠自发性乳腺癌的裸鼠间移植及高转移表达

将ＮＣ系裸杂鼠（ｕｎ／＋）的自发性乳腺癌移植到同系裸小鼠皮下获成功并连续鼠间传１２代，共移植裸小鼠２７只，成活率 １００％。对该移植瘤的生长及转移特性的研究表明，其移植成功率高、潜伏期较短且相对稳定、生长迅速、间质血管丰富，并有高发的自发性肺转移的特点。该模型的建立对研究肿瘤转移的机制及肿瘤转移与血管生成等关系有一定意义。     

NC系裸小鼠对鸡红细胞的体液免疫应答

1981年黄强等首次将NC系裸小鼠从日本引入我国,并开展了一系列繁殖饲养和应用研究,通过~3H-TdR掺入法的淋转试验结果,已证实了该系杂合子(nu/+)鼠的T和B细胞功能基本正常,而纯合子(nu/nu)鼠T细胞缺乏,B细胞功能正常。但至今国内未见有该系裸小鼠的体液免疫应答研究的报道。本文采用吴铁等用鸡红细胞作免疫原的溶血素测定法,检测了该系纯合子和杂合子鼠对鸡红细胞抗原刺激后血清溶血素产生情况,并与正常ICR小白鼠作对照比较,以了解该系裸小鼠的体液免疫应答状态。     

裸小鼠繁殖群自发性肿瘤发病情况的研究

对本室六年中饲养于SPF条件下的466只NC系裸鼠繁殖群动物的自发性肿瘤发病情况进行了观察研究,其中纯合子鼠(雄nu/nu)164只,杂合子鼠(雌,un/+)302只。每只动物平均观察时间均达7个月以上,淘汰时均经详细解剖学检查,检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定.共检出自发性肿瘤7例,发生于纯合子裸鼠5例,杂合子鼠2例。结果表明,在相同饲养环境下,裸鼠(雄,nu/nu)的自发性肿瘤发病率(3.04％)比其同系有胸腺杂合子鼠(雌,nu/+)(0.66％)明显增高(P<0.05),且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短,其自发瘤以恶性上皮性肿瘤为主。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤的观点。作者还提出了评价裸鼠群体自发性肿瘤发病率的方法.     

裸小鼠和SCID小鼠整体模型在人癌临床实验研究中的应用

为促进棵小鼠和SCID小鼠整体模型用于人癌临床实验的研究，作者将1992年10月至1995年9月三年间，于哈佛大学医学院、麻省总医院放射肿瘤学系、EdwinL．Steele放射生物学研究室，在HermanD．Suit教授的指导下，利用棵小鼠和SCID小鼠所开展的主要研究作一综述。1利用裸小鼠人痛模型进行实验性治疗及其机制探讨人脑多形性胶质母细胞瘤（GBM）是中枢神经系统的一种高度恶性肿瘤，在美国每年约有三平新确诊病例。对GBM患者，目前经手术治疗、手术联合放疗或化疗，能长期存活者也仅为5％，是对放时线极不敏感的肿瘤之一。放深入了解其生物…     

羊附红细胞体小鼠模型的建立

[目的]用人工感染的方法构建羊附红细胞体小鼠模型,并对其进行鉴定。[方法]将注射地塞米松的昆明小鼠以腹腔注射方式人工感染羊附红细胞体,通过镜检、巢式PCR检测、临床症状观察、剖检及病理形态学观察对感染情况进行鉴定。[结果]羊附红细胞体小鼠模型已成功建立。[结论]可以用昆明小鼠建立羊附红细胞体实验动物模型,不仅有助于该病的诊断,而且为羊附红细胞体流行病学、致病力、免疫学以及有效药物筛选等方面的研究提供了一种合适的动物模型。     

人α干扰素转基因小鼠模型的建立

[目的]建立人α干扰素（interferon-α,IFN-α）转基因小鼠,为研究IFN-α在抗病毒中的作用提供模型动物。[方法]将人IFN-α基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过原核显微注射法建立IFN-α转基因小鼠。[结果]通过特异性引物PCR法和South-ern杂交法检测出4只阳性转基因小鼠。分离4个转基因鼠系F1代PCR阳性小鼠血液中的淋巴细胞进行RT-PCR检测,其中3个鼠系为阳性。收集阳性小鼠血清,用ELISA方法和微量板染色测定法检测出3个转基因鼠系均有IFN-α表达。[结论]成功建立了CMV启动子启动的表达人IFN-α基因转基因小鼠,为研究干扰素抗病毒机制及对其他动物进行抗病毒感染基因工程育种研究奠定了基础。     

三种不同给药途径建立小鼠肝硬化模型的比较

按逐步增加食用白酒浓度的方法诱导肝硬化的模型,将80只KM雄性小鼠随机分为4组,A组采用灌胃,B组采用皮下注射,C组采用腹腔注射,D组为对照组,并把20只SD大鼠随机分为皮下注射E组、对照组F组。观察各组的体重变化、死亡率和肝假小叶形成率。采用上述方法诱导7周后A～F组小鼠体重早期缓慢下降,后期缓慢增加。A组死亡5只,死亡率25%,假小叶形成率65.2%;B组死亡1只,死亡率5%,假小叶形成率92.5%;C组死亡2只,死亡率10%,假小叶形成率86.5%;E组大鼠体重早期明显下降,后期缓慢增加,死亡5只,死亡率50%,假小叶形成率66.7%;D组、F组体重明显增加,无死亡,无肝硬化形成。结果表明:小鼠皮下注射给药,逐步增加食用白酒的浓度可以缩短肝硬化形成的时间,提高形成率,降低死亡率。     

盐酸苯胺诱导小鼠皮肤快速衰老模型的建立

为研究皮肤衰老机制和抗皮肤衰老药物的筛选奠定基础。采用腹腔注射盐酸苯胺160 mg·kg-1,每3天一次,注射5次的方法建立皮肤衰老小鼠模型。结果显示:注射盐酸苯胺后,Prdx2基因敲除小鼠与野生型小鼠外周血含海因茨小体红细胞数量均上升(P0.001);小鼠血液活性氧水平升高(P0.01);皮肤组织中Cyclin D1,Cyclin E,p21,p16的表达量和p38,ERK的磷酸化程度均升高(P0.01);小鼠真皮层厚度减少。表明酸苯胺可诱导小鼠皮肤提前衰老,且Prdx2可延缓这一作用。     

大肠癌唾液蛋白指纹图谱分子诊断模型研究

目的 研究建立大肠癌（colorectal cancer,CRC））唾液蛋白质指纹图谱新型分子诊断模型。方法 采集34例肠癌患者、45例健康志愿者（正常组）的唾液标本,用弱阳离子交换型（WCX）纳米磁珠联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）技术进行检测,获得各标本的蛋白指纹图谱。用Biomarker Wizard软件分析所获得的蛋白指纹图谱找出差异蛋白,再用Biomarker Patterns 5.0.2建立鉴别诊断模型。结果 共检测到312个肠癌差异蛋白质峰,两组比值大于3（肠癌/正常对照 > 3,或者正常对照/肠癌 > 3）,其中有37个差异蛋白质峰有统计学意义（P<0.05）;其中有7个差异蛋白质峰肠癌组表达上调,28个差异蛋白质峰肠癌组表达下调,有35个差异蛋白质峰有显著差异（P<0.01）。筛选建立了由m/z为2 501.26、4 779.95、3 140.39的3个差异蛋白峰组成的肠癌与正常组的诊断模型,该模型的灵敏度和特异度分别为88%（30/34）和98%（44/45）;通过交叉验证法进一步验证诊断模型的可靠性,结果该模型的灵敏度和特异度分别为85%（29/34）和88%（37/45）。结论 用WCX结合MALDI-TOF-MS技术建立的唾液蛋白诊断模型为肠癌的诊断提供了新途径。     

直肠癌患者淋巴结转移相关临床病理因素分析

目的：探讨直肠癌淋巴结转移的相关影响因素,为临床治疗提供参考。方法：回顾性分析施行根治性手术治疗直肠癌患者386例的临床资料,采用卡方检验及Logistic多因素回归分析相关临床病理因素与淋巴结转移的关系。结果：直肠癌患者性别及肿瘤位置与淋巴结转移无关（P〉0．05）,而患者年龄（P〈0．05）、肿瘤大小、分化程度、组织类型、肿瘤浸润深度、术前CEA（P〈0．01）与淋巴结转移明显相关;Logistic多因素回归分析得出的与淋巴结转移的相关因素按密切程度依次递减为肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度。结论：影响直肠癌淋巴结转移的相关因素有年龄、肿瘤大小、分化程度、组织类型、肿瘤浸润深度、术前CEA,其中肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度为淋巴结转移的主要相关因素。     

健脾解毒方联合化疗治疗大肠癌术后患者的临床观察

目的 观察健脾解毒方联合化疗治疗II-III期大肠癌术后患者的临床疗效及其对免疫功能的影响。方法 将40例大肠癌患者按随机数字表法分为治疗组、对照组各20例。两组患者化疗均采用FOLFOX4化疗方案,治疗组加服健脾解毒方汤剂（每日1剂,连服8周）,化疗每2周重复1次,1次为1个周期,连用4个周期后观察两组临床疗效及其免疫功能的变化。结果 治疗结束后治疗组中医证候改善的总有效率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者的中医证候总积分均较治疗前有所改善,两组间比较差异有统计学意义（P<0.01）;治疗后治疗组在KPS评分疗效及体质量增加方面优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;在免疫学指标CD³⁺、CD⁴⁺、CD⁴⁺/CD⁸⁺值改善方面优于对照组,差异具有显著统计学意义（P<0.01）。结论 健脾解毒方能提高大肠癌化疗患者的临床疗效,改善生活质量,并增强机体免疫力。     

结肠癌患者血清中IL-8和VEGF的检测及临床意义

目的探讨白介素-8（IL-8）和血管内皮生长因子（VEGF）血清水平与结肠癌的关系．方法选择结肠癌住院患者64例,所有病例均经病理检查确诊．用ELISA法测定结肠癌患者术前、术后与健康者血清中IL-8和VEGF含量,采用方差分析进行组间两两比较．结果结肠癌患者血清IL-8和VEGF含量明显高于正常对照组（P〈0．05）,DukesC,D期结肠癌患者血清IL-8和VEGF含量明显高于A,B期（P〈0．05）;肿瘤根治术后血清IL-8和VEGF含量较术前明显降低（P〈0．05）,但仍高于正常对照组（P〈0．05）．结论检测血清IL-8和VEGF含量对于结肠癌病情估计和预后判断有重要意义．     

四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究

通过对染毒途径、剂量和时间的研究,建立四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型。采取腹腔注射和灌胃两种途径给予小鼠1%CCl4,染毒后24 h检测血清转氨酶含量,并观察肝脏病变。结果显示,灌胃组比腹腔注射组小鼠血清转氨酶变化个体差异小,肝脏病变明显,病灶分布均匀,且与实际中毒途径一致,故采用灌胃方法进行确定染毒剂量及时间试验。分别以0.125%、0.25%、0.35%、0.5%的CCl4给小鼠灌胃,染毒24 h后检测血清转氨酶含量,确定最佳染毒剂量。以该浓度给小鼠灌胃,分别于染毒后2、6、12、16、20、24、28、32、48 h检测小鼠血清转氨酶含量。结果表明,灌胃0.35%CCl4,小鼠血清转氨酶升高与对照组相比差异极显著(P<0.01),此浓度灌胃后,20 h血清转氨酶含量显著升高(P<0.01),24 h达到最高值,与对照组相比差异极显著(P<0.01)。因此,以0.35%四氯化碳,按0.1 mL.10 g-1体重灌胃,染毒24 h,可建立较理想的小鼠急性肝损伤模型。     

ICR小鼠肥胖模型的建立以及肥胖指标和脂肪组织形态学比较

[目的]建立ICR小鼠肥胖模型,并比较肥胖型小鼠与对照组小鼠脂肪组织形态学的差异。[方法]以ICR小鼠为研究对象,饲喂高脂日粮构建肥胖模型,测定其体重、脂肪组织湿重和脂肪系数,并进行比较。[结果]雌性和雄性小鼠肥胖造模的成功率分别为16.67%和66.67%。用高脂日粮饲喂60 d后肥胖小鼠脂肪细胞体积明显增大,肥胖型小鼠体重、脂肪组织湿重和脂肪系数与对照组相比均存在极显著差异﹙P0.01﹚。[结论]该研究为ICR小鼠肥胖模型的建立以及脂肪组织的形态学研究提供依据。     

猪带绦虫仓鼠动物模型的建立

 【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用压片技术和组织切片技术对检出的绦虫的形态结构进行研究。【结果】免疫抑制剂在5 mg/只,感染一次就能使囊尾蚴发育到性成熟;在实验仓鼠体内,感染后40 d的仓鼠体内就能检出具有体节的可见虫体,感染80 d后的仓鼠体内能检出孕卵节片;检出的虫体多数吸附在小肠前1/3段,也有寄生在胆囊和胆管中的虫体,甚至偶见虫体钻出胆囊外堆积在肝脏附近;虫体头节上可见4个吸盘及两圈小钩;与人猪带绦虫相比,成熟节片较少。【结论】成功建立了猪带绦虫仓鼠动物模型,这使得成功解决猪带绦虫实验材料的来源问题成为可能,也为猪带绦虫的深入研究奠定了基础。     

三氧化二砷影响人乳腺癌裸鼠移植瘤侵袭性和黏附性Syk机制

目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,AS2O3)影响人乳腺癌裸鼠移植瘤侵袭性和黏附性Syk作用机制。方法成功建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为实验组(AS2O3)和对照组(生理盐水)。7d后观察肿瘤体积的变化,流式细胞术检测肿瘤组织细胞凋亡情况及两组荷瘤裸鼠肿瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达情况。结果实验组荷瘤裸鼠肿瘤体积明显低于对照组,差异有统计学意义;实验组荷瘤裸鼠肿瘤组织细胞凋亡率明显高于对照组(P0.01);实验组ICAM-1表达明显高于对照组(P0.05);实验组MMP-9表达低于对照组(P0.05)。结论 AS2O3对人乳腺癌裸鼠移植瘤具有明显的抑瘤作用,可降低肿瘤组织侵袭性增加其黏附性,其作用机制可能与蛋白酪氨酸激酶Syk的表达有关。     

硫酸庆大霉素致小鼠肾病理模型的构建

试验选用硫酸庆大霉素构建小鼠肾病理模型。48只健康小鼠随机分为3组,即健康对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。其中健康对照组不做任何处理,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组依次每天腹腔注射硫酸庆大霉素0.075和0.150 m L/只,连续注射7 d,测定小鼠血清中尿素氮、肌酐、蛋白质的含量及肾指数。结果表明,试验Ⅰ组与健康对照组相比,各项指标均差异不显著(P0.05);而试验Ⅱ组与健康对照组相比,各项指标均差异显著(P0.05)。结果提示,连续7 d给小鼠腹腔注射0.150 m L/只的硫酸庆大霉素可以成功构建肾病理模型。