壳寡糖纳米硒的工艺优化研究

[目的]优化壳寡糖纳米硒的合成工艺。[方法]采用单因素探究壳寡糖与亚硒酸钠的比例、乙酸质量浓度和反应时间对纳米粒子粒径、PDI和电位的影响,并以PDI为主要判断依据,电位为次要判断依据,进行正交试验,优化反应的条件。[结果]最优工艺条件为壳寡糖与亚硒酸钠的比例为16∶1,乙酸质量浓度为3%,反应时间为2.5 d,得到壳寡糖纳米硒的PDI为0.238,电位为50.36 mV。通过方差分析可知,反应条件对PDI影响由大到小依次为壳寡糖与亚硒酸钠的比例>反应时间>乙酸质量浓度,反应条件对电位影响由大到小依次为反应时间>壳寡糖与亚硒酸钠的比例>乙酸质量浓度。[结论]该研究优化了壳寡糖纳米硒的合成条件,为壳寡糖纳米硒的进一步开发利用提供了支持。     

壳寡糖-硒纳米植物营养调节剂的研制与应用

以壳寡糖为模板，利用复凝聚法制备了壳寡糖一硒纳米颗粒．用透射电子显微镜和Zeta—sizer电位分析仪对颗粒进行表征，发现所制备的颗粒为球状颗粒，平均粒径为100nm左右，表面带弱正电性．纳米颗粒在4℃条件下保存比较稳定，25℃以上使用有利于硒元素的释放．壳寡糖一硒纳米颗粒作为植物营养调节剂应用于水稻种植，试验表明，在水稻孕穗期和齐穗期使用均能显著提高稻谷中硒含量，分蘖期使用无明显富硒情况．孕穗期使用该营养调节剂，稻谷产量提高了8％～15％，硒含量提高了3～10倍，大米中营养物质总抗氧化能力提高了30％～60％，对硒纳米颗粒的作用机制进行了初步探讨认为，壳寡糖-硒纳米颗粒，在植物体内缓慢释放硒元素，促进了植物对硒元素的吸收，硒元素稳定富集在大米胚乳中．     

壳寡糖的免疫调节作用及机理研究进展

壳寡糖作为饲料添加剂具有多种生物学功能。文章综述了壳寡糖对动物免疫器官发育、免疫细胞、细胞因子和免疫受体的影响及部分作用机理。     

壳寡糖对植物病原真菌的抑制作用

水溶性壳寡糖对棉花炭疽病菌、稻瘟病等多种植物病原菌的生长有明显的抑制作用 ,抑制作用的大小因壳寡糖分子量、浓度、植物病原菌的不同而有差异。     

壳寡糖对平菇菌丝生长的影响

[目的]研究壳寡糖对平菇菌丝生长速度和菌丝生长过程中纤维素酶活力的影响。[方法]以平菇4号菌种为供试菌种,在培养基中加入不同浓度的壳寡糖,测定平菇菌丝生长速度以及生长过程中菌丝纤维素酶活性。[结果]浓度为0.001mg／g的壳寡糖可明显促进平菇菌丝的生长,对平菇菌丝生长过程中纤维素酶的活力具有明显的促进作用;浓度为0．1mg／g的壳寡糖对平菇菌丝的生长具有一定的抑制作用,在一定程度上抑制了平菇纤维素酶的活力。[结论]壳寡糖对平菇菌丝生长以及纤维素酶活力具有明显的影响。     

壳寡糖对杏鲍菇菌丝生长的影响

以菌丝满瓶时间和纤维素酶活力为指标探讨了壳寡糖对杏鲍菇菌丝生长的影响。结果表明:0.0001mg/g壳寡糖能明显提高杏鲍菇纤维素酶的酶活力,同时缩短了杏鲍菇的菌丝满瓶时间;而0.01mg/g壳寡糖对杏鲍菇纤维素酶的酶活力具有明显的抑制作用。     

壳寡糖衍生物对烟草花叶病的田间防效试验

测定了壳寡糖、宁南霉素、水杨醛壳寡糖希夫碱、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱、水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯对烟草花叶病的抑制效果,结果表明:这些药剂对烟草花叶病毒(TMV)均具有一定的诱导抗病效应,其中以5-溴壳寡糖希夫碱膦酸酯药剂的防治效果较好。     

壳寡糖衍生物对烟草花叶病的田间防效试验

测定了壳寡糖、宁南霉素、水杨醛壳寡糖希夫碱、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱、水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯对烟草花叶病的抑制效果,结果表明:这些药剂对烟草花叶病毒(TMV)均具有一定的诱导抗病效应,其中以5-溴壳寡糖希夫碱膦酸酯药剂的防治效果较好。     

壳寡糖对杏鲍菇液体菌种活性的影响

[目的]研究不同浓度的壳寡糖对杏鲍菇液体茵种活性的影响。[方法]以杏鲍菇母种“农杏”为供试菌种,将不同浓度寡聚糖添加到培养基中,观察杏鲍菇液体茵种萌发时间,测定茵丝生长速度。[结果]浓度为0．001mg/ml的壳寡糖能明显缩短杏鲍菇液体菌种的萌发时间并促进其茵丝生长。[结论]壳寡糖作为天然生物物质的降解产物,对食用茵具有生长调节作用。     

磷酸化壳寡糖制备工艺研究

[目的]对壳寡糖磷酸化的工艺条件进行优化。[方法]通过单因素试验,考察磷酸化试剂、温度、时间、pH值对磷酸化壳寡糖磷酸根含量的影响,并通过正交试验确定最佳磷酸化工艺条件。[结果]最佳磷酸化工艺条件为：以浓度5％的多聚磷酸钠（STPP）和浓度1％的六偏磷酸钠（SHMP）的混合液作为磷酸化试剂,温度80℃,时间4h,pH值7．0。在此最佳条件下所得磷酸化壳寡糖的磷酸根含量为1．873％。[结论]该研究可为磷酸化壳寡糖在农业领域的应用提供试验基础。     

淫羊藿苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响

【研究目的】本文研究了淫羊藿苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响。【方法】将不同浓度的淫羊藿苷加入第二代成骨细胞中,分别于培养24、48、72h时,使用MTT法和PNPP法检测成骨细胞的增殖率和碱性磷酸酶(ALP)活性。【结果】淫羊藿苷促进鸡胚成骨细胞增殖和分化,但增殖作用不显著。其中当淫羊藿苷浓度为20ng/ml时,对成骨细胞增殖分化作用最强。【结论】淫羊藿苷能够显著促进鸡胚成骨细胞分化,对成骨细胞增殖有一定作用。     

德庆何首乌提取物对成骨细胞增殖的影响

[目的]观察何首乌提取物对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖及量效关系。[方法]在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的提取物,分别于加药后24、48和72 h用MTT法检测细胞的增殖。[结果]何首乌乙酸乙酯提取物能促进大鼠颅骨成骨细胞的增殖,试验中最佳作用浓度为0.1 mg/ml。[结论]何首乌乙酸乙酯提取物可促进成骨细胞的增值。     

三氧化二砷对大鼠成骨细胞增殖及BMP-2的影响

[目的]观察不同剂量三氧化二砷(As2O3)对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、骨形成蛋白-2(BMP-2)基因表达的影响。[方法]不同浓度(10、1、0.1μmol/L)的三氧化二砷作用于体外培养的成骨细胞48和72 h后,观察成骨细胞的形态,采用MTT法检测成骨细胞的增殖,并通过RT-PCR检测成骨细胞BMP-2基因的表达情况。[结果]10μmol/L As2O3组可见部分成骨细胞变圆变小,细胞核固缩、碎裂,细胞膜皱褶、凹陷;1μmol/L As2O3组成骨细胞数目众多和分裂相明显;0.1μmol/L As2O3组成骨细胞间连接紧密。10μmol/LAs2O3组大鼠成骨细胞OD值明显低于对照组,而72 h OD值低于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);1μmol/L组As2O3OD值明显高于对照组,而72 h OD值高于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);0.1μmol/L As2O2组72 h OD值与48 h OD值无显著差异(P0.05),且OD值与对照组无显著差异(P0.05)。RT-PCR结果表明,10μmol/L组72 h BMP-2基因表达明显低于48 h,且BMP-2的表达明显低于对照组,有显著性差异(P0.01);1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达与48 h无显著差异(P0.05),且BMP-2基因表达与对照组(P0.05);0.1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达明显高于48 h,且BMP-2的表达明显高于对照组,有显著性差异(P0.01)。[结论]As2O3对体外培养大鼠成骨细胞增殖和BMP-2 mRNA表达具有双向调节作用,并且呈剂量-时间依赖性。     

水貂成骨细胞的原代培养及其鉴定

为探讨原代成年水貂成骨细胞的培养方法,建立细胞库。无菌条件下取7月龄成年水貂肋骨,剪碎,用胰酶、胶原酶消化后接种于培养皿内培养,获得原代细胞。通过细胞形态学观察及碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化、钙结节染色进行鉴定。结果,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色、钙结节染色均呈阳性。证明培养出的细胞是成骨细胞。     

肝素对体外培养肿瘤细胞的影响

[目的]研究肝素对体外肿瘤细胞的抗癌活性,为其应用于肿瘤的治疗奠定基础。[方法]以肺癌细胞A549为材料,添加不同浓度肝素钠进行培养,观察细胞的形态变化;采用MTT比色法检测肝素对体外肿瘤细胞增殖的影响。[结果]试验组的细胞形态无改变和病理损伤,各试验组的A值与对照组差异均不显著。[结论]肝素对体外肿瘤细胞A549无抗癌活性。     

木蹄层孔菌化学成分及不同提取物体外抗肿瘤活性研究

采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇对木蹄层孔菌95乙醇提取物进行分离,运用MTT比色法对各提取物进行体外抗肿瘤活性的测定.结果表明氯仿提取物对Hela细胞表现出较强的抑制作用,在测定浓度范围内呈现出良好的剂量依赖性抑制作用,而乙酸乙酯和正丁醇提取物在同一测定浓度范围内抑制作用不如氯仿提取物,其中石油醚提取物抑制作用最弱.化学预试表明,木蹄层孔菌中存在酚性成分,有机酸,糖、多糖和苷类,内酯、香豆素及其苷类,植物甾醇、萜类化合物,蒽醌及其苷类.     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

青龙衣乙醇提取液对乳腺癌细胞抑制作用的研究

目的研究青龙衣（核桃楸青果外皮）乙醇提取物对乳腺癌细胞的抑制作用。方法将青龙衣乙醇提取液与乳腺癌细胞采用共同体外细胞培养和MTT法。结果青龙衣乙醇提取物对乳腺癌悬浮细胞具有一定的抑制作用。     

4种真菌粗多糖体外抗肿瘤作用研究

[目的]筛选具有抗肿瘤活性的真菌发酵液多糖。[方法]水提醇沉法提取真菌粗多糖,蒽酮-硫酸法测定糖浓度,MTT法测定多糖对体外肿瘤细胞增殖的抑制作用。[结果]在测试浓度范围内,树舌发酵液多糖对人大肠癌细胞SWWC116、人宫颈癌细胞Hela、人肺腺癌细胞NCI-446的最高抑制率分别为80.3%、74.1%、78.5%;榆耳发酵液多糖对NCI-446、SWWC-116、Hela细胞,小刺猴头发酵液多糖对NCI-446细胞的最高抑制率达50%;其余多糖抗肿瘤活性不明显。[结论]树舌发酵液多糖具有抗肿瘤活性。     

球孢白僵菌对亚洲玉米螟血细胞毒力和形态的影响

【目的】测定球孢白僵菌Beauveria bassiana对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis血细胞系SYSU-Of He-C的影响,为促进球孢白僵菌在防治亚洲玉米螟中的应用提供理论依据。【方法】采用MTT和CCK-8法测定球孢白僵菌对亚洲玉米螟血细胞系SYSU-Of He-C的毒力,通过光学显微镜与扫描电镜观察球孢白僵菌生长及其对SYSU-Of He-C细胞的影响。【结果】球孢白僵菌分生孢子处理SYSU-Of He-C细胞24 h后,MTT法的IC_(50)值为2.8×10~5mL~(-1),CCK-8法的IC_(50)值为1.4×10~5mL~(-1)。光学显微镜实时监测发现,在SYSU-Of He-C细胞对数期接种球孢白僵菌浓度为3.5×10~4mL~(-1)时,球孢白僵菌具有明显竞争力,未发现囊胞化与吞噬等细胞免疫现象;处理10 h后,球孢白僵菌分生孢子开始萌发长出菌丝,而SYSU-Of He-C细胞减少且开始变形;处理24 h,球孢白僵菌几乎长满整个视野;SYSU-OfHe-C细胞从近似圆形变长或者变为不规则形状,出现聚集、破碎、胞内空泡、瘤状突起,以及被白僵菌菌丝穿透等现象。【结论】球孢白僵菌可改变亚洲玉米螟血细胞系SYSU-Of He-C的细胞形态,但不能使其发生细胞免疫现象。