五味子药渣多糖的提取及其免疫活性

提取并纯化得到五味子药渣多糖,对其体外免疫活性进行初步评价。经水提醇沉、乙醇分级、活性碳脱色、Sevage法和链蛋白酶联合脱蛋白,从五味子药渣中获得c SDP、f SDP和SDP 3种多糖。通过体外淋巴细胞转化试验验证3种多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,结果表明:3种五味子药渣多糖在一定质量浓度下对未经活化的小鼠淋巴细胞有增殖作用,对Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖有显著促进作用;多糖的纯化程度越高对小鼠脾淋巴细胞的增殖促进作用越强;五味子药渣粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

白蔹多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

[目的]分离纯化白蔹多糖,研究白蔹均一多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[方法]采用水提醇沉法提取白蔹多糖,通过三氯乙酸法脱除蛋白,用中空纤维超滤膜和DEAE Cellulose DE-52对白蔹多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成,采用MTT法测定均一多糖对Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[结果]PAJM-A均一多糖分子量为1.29×105u,由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xly)组成,其物质的量比为1.36∶1.87∶2.02∶1.58∶1.04,均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞有较显著的增殖作用。[结论]PAJM-A是一种新的白蔹均一多糖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。     

迭鞘石斛所含多糖对小鼠免疫细胞影响的研究

[目的]研究迭鞘石斛（Dendrobinm chryseum Rolfe）所含多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的影响。[方法]分离提取小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,通过添加和不添加迭鞘石斛所含多糖进行体外培养,以MTT法检测这些免疫细胞增殖的变化情况。[结果]石斛多糖在中、高浓度时可极显著提高小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增值（P﹤0.01）,低浓度时没有增强作用。[结论]迭鞘石斛所含石斛多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的增殖有增强作用,说明对小鼠具有免疫增强作用。     

三七总皂苷粗提物S-3溶血性及体外免疫活性的研究

经大孔吸附树脂分离纯化,从三七中得到三七总皂苷(PNS) S-3组分,研究其溶血性及体外免疫活性。采用红细胞溶血率测定溶血性,以体外小鼠T、B淋巴细胞增殖反应及IL-2诱生检测S-3的体外免疫活性。结果表明:S-3浓度在0.25 mg·mL~(-1)以下时无溶血性,在125μg·mL~(-1)以下时未表现出对脾淋巴细胞活力有抑制作用。S-3浓度为10μg·mL~(-1)时对刀豆蛋白A诱导的体外小鼠T淋巴细胞增殖有极显著促进作用,为100μg·mL~(-1)时则极显著抑制T淋巴细胞增殖反应;而PNS浓度在1～100μg·mL~(-1)范围内均呈现出显著促进作用, S-3浓度为10、100μg·mL~(-1)时极显著抑制LPS诱导的小鼠B淋巴细胞增殖作用,在此浓度下PNS显示出对B淋巴细胞增殖有显著或极显著促进作用。S-3浓度为25μg·mL~(-1)时极显著促进小鼠T淋巴细胞IL-2分泌,与相同浓度的PNS相比, S-3无更显著的促进作用。这一研究提示S-3具有较好的安全性,且在体外具有一定的细胞免疫活性和诱生细胞因子的能力,为从PNS中开发出安全、高效的动物免疫增强剂奠定了基础。     

枸杞多糖对小鼠精原干细胞增殖作用的影响

[目的]观察枸杞多糖(LBP)对体外培养的小鼠精原干细胞的增殖作用。[方法]选2～5日龄的ICR小鼠,采用多次贴壁法纯化精原干细胞培养3 d,加入不同浓度的LBP,利用MTT比色分析法和Brdu增殖细胞标记法,检测不同浓度LBP对体外培养精原干细胞增殖的影响。[结果]与对照相比,用LBP处理后的精原干细胞的细胞数量明显增多,高浓度的LBP(200μg/ml)对精原干细胞的增殖有明显的促进作用(P<0.01)。[结论]LBP能够促进精原干细胞的增殖。     

紫锥菊多糖对 IEC-6细胞增殖的影响

[目的]研究紫锥菊多糖对大鼠小肠上皮细胞株 IEC-6细胞增殖的影响。[方法]以IEC-6细胞为研究对象,采用 MTT方法检测细胞增殖率,观察紫锥菊多糖对该细胞增殖的影响。[结果]紫锥菊不同剂量与不同的培养时间对 IEC-6细胞的生长均有促进作用,但是随着处理时间的延长,不同浓度的促增殖效果也不尽相同,表现为在浓度为50、200μg/ml 时增殖率随着处理时间的延长先增加后逐渐减弱,但在培养24 h后表现显著促增殖作用;浓度100μg/ml 在72 h、浓度500μg/ml 在48 h表现明显促增殖作用;经48 h处理的EPS其增殖率随浓度提高而增强。[结论]紫锥菊多糖具有促进 IEC-6细胞增殖的作用,通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。     

紫锥菊多糖对IEC-6细胞增殖的影响（英文）

[目的]研究紫锥菊多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响。[方法]以IEC-6细胞为研究对象,采用MTT方法检测细胞增殖率,观察紫锥菊多糖对该细胞增殖的影响。[结果]紫锥菊不同剂量与不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用,但是随着处理时间的延长,不同浓度的促增殖效果也不尽相同,表现为在浓度为50、200μg/ml时增殖率随着处理时间的延长先增加后逐渐减弱,但在培养24 h后表现显著促增殖作用;浓度100μg/ml在72 h、浓度500μg/ml在48 h表现明显促增殖作用;经48 h处理的EPS其增殖率随浓度提高而增强。[结论]紫锥菊多糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。     

药用菌发酵液多糖对脾淋巴细胞的增殖作用

对3种药用真菌发酵液多糖进行小鼠脾淋巴细胞增殖试验,结果表明:3种药用真菌发酵液多糖对小鼠脾细胞具有增殖作用,但与剂量存在依赖关系。最适剂量赤芝发酵液多糖100μg/mL、蝉花菌发酵液多糖400μg/mL、硫磺菌发酵液多糖50μg/mL。     

海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究

[目的]研究海带硫酸多糖的纯化方法、理化性质和生物学活性。[方法]海带粗多糖经离子交换纤维素分离纯化;采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法分别研究多糖含量、硫酸根含量和分子量等理化性质;采用促小鼠脾淋巴细胞增殖试验研究其提高免疫功能的作用。[结果]得到3种纯化的海带硫酸多糖,LPS-1、LPS-2、LPS-3,对其中LPS-3的理化性质检测表明,其糖含量为36.90%,硫酸基含量为11.91%,分子量2.69×10^6D。LPS-3能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有有丝分裂原样作用,对地塞米松引起的小鼠脾淋巴细胞增殖抑制具有显著的拮抗作用,但LPS-3不具有协同有丝分裂原ConA的作用。[结论]该分离方法可得到3种纯化的海带硫酸多糖,其中LPS-3具有显著提高免疫活性的作用。     

超声波辅助提取芦根多糖的影响因素分析

[目的]优化超声波辅助提取芦根多糖的工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上,通过响应面分析考察超声功率、提取时间和料液比对芦根多糖提取率的影响,并对其工艺参数进行优化。[结果]芦根多糖提取的最佳条件为料液比1∶22.5（g/ml）,超声功率250W,提取时间26 min,提取2次;在此最优工艺条件下,芦根多糖提取率达1.724%。[结论]与传统的热水提取法相比,超声波法的提取时间缩短了5/6,多糖提取率增加1.412倍;超声波辅助提取芦根多糖具有快速、高效等优点,可用于芦根多糖的提取。     

刺五加多糖提取纯化工艺的优化

[目的]优化刺五加多糖的提取纯化工艺。[方法]以药用植物刺五加为材料,采用单因素试验和正交试验法对多糖提取、纯化的工艺进行优化。[结果]结果表明,热水浸提的最佳温度为90℃,浸提时间为150min,水料比为18：1,提取次数2次;醇沉温度为-20℃,时间36h,乙醇与浸提液比例为4：1,pH值为7时多糖产率最高。采用树脂动态吸附法筛选不同树脂去除多糖色素和蛋白的效果,结果显示,D941树脂最好。经树脂处理的多糖采用DEAE-Sepharose阴离子交换柱和Sepharose-G200层析柱进一步纯化,得到了纯度较高的As-1和As-2 2个多糖组分。[结论]该研究结果为进一步确定刺五加多糖的生化特性、生理功能奠定基础。     

银杏叶多糖抑制人白血病细胞增殖的试验研究

[目的]明确银杏叶多糖(PGBL)对白血病的治疗价值。[方法]以干燥银杏叶为材料,提取PGBL;向100μl对数增长期的人急性早幼粒白血病HL-60细胞悬液中分别加入100μl含PGBL50、100、200μg/ml的RPMI-1640培养液,以加入100μlRPMI-1640纯培养液为对照,研究不同浓度(50、100、200μg/ml)PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率。[结果]50、100、200μg/ml PGBL对人急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖均有不同程度的抑制作用,且随着药物浓度和作用时间的增加,抑制作用增强,即PGBL对HL-60细胞增殖的抑制作用存在剂量-时间依赖性;方差分析结果表明,PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率显著高于对照(P<0.01)。[结论]PGBL对HL-60细胞增殖具有较好的抑制作用,且该抑制作用具有浓度-时间依赖性。     

柑橘皮多糖抗氧化性研究

[目的]研究柑橘皮多糖的抗氧化活性。[方法]利用水提醇沉法,提取柑橘皮多糖并进行初步纯化,采用苯酚-硫酸法测定柑橘皮多糖的提取率并采用水杨酸法研究柑橘皮多糖清除.OH的效果。[结果]柑橘皮中多糖的含量为6.32%;不同浓度的柑橘皮多糖对H2O2/Fe2+体系通过Fenton法反应产生的.OH都具有清除作用,且随浓度的增加,清除率逐渐升高,即清除率与多糖的用量存在一定的量效关系。[结论]柑橘皮多糖具有明显地抗氧化性,对.OH具有清除作用。     

金银花等6种中草药对痢疾杆菌体外抑菌效果研究

[目的]研究金银花等6种中草药对痢疾杆菌的体外抑菌效果。[方法]选用金银花、黄连、五倍子、连翘、穿心莲和蒲公英6种中草药,采用煎煮法提取其有效成分,并对这6种中药提取物在体外对痢疾杆菌的抑菌效果进行了测定。[结果]金银花、黄连、五倍子、连翘、穿心莲、蒲公英这6种中草药的提取液对痢疾杆菌表现了不同的抑菌效果,其中连翘和黄连的抑菌效果较好,测得其最小抑菌浓度(MIC)分别为15.6和31.3 mg/ml;最小杀菌浓度(MBC)分别为31.3和31.3 mg/ml。[结论]不同中草药的抑菌效果不同。     

川芎对蟾蜍离体心脏的影响及其作用机制的研究

[目的]观察不同浓度川芎溶液对蟾蜍心肌收缩力和心率的影响。[方法]采用斯氏离体蛙心灌流方法,分别用0.01、0.02和0.05 g/ml川芎溶液对离体蟾蜍心脏进行灌流;先灌注阿托品,再灌注0.04 g/ml川芎溶液,考察川芎溶液对蟾蜍离体心脏心肌收缩力和心率的影响。[结果]灌注不同浓度的川芎溶液,蟾蜍心脏收缩力下降程度不同,其中0.01 g/ml川芎溶液灌注下的心脏收缩力与正常任氏液灌注下的心脏收缩力在统计学意义上差异不显著,0.02和0.05 g/ml川芎溶液灌注下的蟾蜍心脏收缩力与正常任氏液灌注下的心脏收缩力在差异显著（P〈0.01）;而当先注入阿托品再注入0.04 g/ml川芎溶液,蟾蜍心脏收缩力不再下降。[结论]川芎溶液能降低离体蟾蜍心脏的收缩力,其作用机制可能与细胞表面的M型受体有关。     

猪苓多糖分级纯化及对羟自由基清除作用的研究

[目的]比较不同浓度乙醇醇析的猪苓多糖对羟自由基（.OH）的清除能力,以进一步提高猪苓的药用价值、经济价值和实用价值。[方法]用热水浸提法提取猪苓菌核水溶性多糖,经不同浓度乙醇醇析、纯化获不同等级的猪苓多糖;采用苯酚-硫酸法测定猪苓多糖含量,以多糖含量为评价指标,分析多糖醇析程度;采用邻二氮菲-Fe2＋-H2O2体系检测浓度40%、80%和90%乙醇醇析获取的猪苓多糖对.OH的清除作用。[结果]猪苓多糖在不同浓度乙醇中醇析效果不同,乙醇浓度为80%时,醇析效果相对较好。不同浓度乙醇醇析获取4种等级猪苓多糖,其中3种对.OH具有清除作用。浓度40%、80%乙醇醇析获取的猪苓多糖在一定浓度范围内与清除.OH的能力呈良好的正相关。[结论]研究结果为进一步研究猪苓多糖的结构和功能提供了参考。     

32种中草药抑菌活性的比较研究

[目的]研究连翘（FRUCTUS FORSYTHIAE）、黄连（RHIZOMA COPTIDIS）和刺五加（RADIX ET RHIZOMA SEU CAULIS ACAN-THOPANACTS SENTICOSI）等32味中草药提取物的抑菌作用。[方法]利用95%乙醇提取药物的有效成分,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,采用牛津杯法测定中草药提取物的抑菌作用。[结果]32种中草药中,虎杖等26种中草药提取物对金黄色葡萄球菌具有抑制作用;连翘等23种中草药提取物对大肠杆菌具有抑制作用,且抑菌效果在一定浓度范围内随药液浓度的增大而增强。其中,连翘和黄连对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别是4和10 mg/ml,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别是6和8 mg/ml。[结论]虎杖和连翘分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较好的抑制效果。     

响应面法优化茅苍术多糖的提取工艺

[目的]利用响应面分析法优化茅苍术多糖的提取工艺。[方法]根据中心组合设计原理,以提取温度、提取时间、料液比三个因素为自变量,多糖的提取得率为响应值,设计了3因素3水平响应面分析试验,来确定茅苍术多糖提取的最佳工艺条件。[结果]茅苍术多糖提取的最佳工艺条件为：提取温度87℃,料液比1∶22,提取时间3.1 h。在此最佳条件下,茅苍术多糖的提取率为2.12%。[结论]该研究对大规模提取茅苍术多糖有一定理论指导价值。