鹿角杯形珊瑚溶菌酶PdLYZ重组蛋白的表达及其体外抑菌活性特征

珊瑚疾病的大规模爆发已严重威胁到珊瑚礁生态系统的结构和功能.溶菌酶是无脊椎动物固有免疫应答中的重要效应分子之一.本研究从鹿角杯形珊瑚(Pocillopora damicornis)中克隆得到了1个溶菌酶基因(PdLYZ),随后体外诱导表达并纯化PdLYZ重组蛋白,同时测定PdLYZ重组蛋白对大肠杆菌(Escherich...     

壮实鹿角珊瑚生物碱的体外抗菌活性

为获得低毒廉价新型鱼药,采用牛津杯法和试管二倍稀释法分别测定壮实鹿角珊瑚生物碱对溶珊瑚弧菌、塔氏弧菌、鲨鱼弧菌的敏感性、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并与对照环丙沙星进行比较。结果表明,壮实鹿角珊瑚生物碱对3种弧菌的体外抗菌活性与环丙沙星相近。     

小花棘豆生物碱体内抗菌活性研究

[目的]研究小花棘豆总生物碱的体内抗菌活性.[方法]分别腹腔注射和皮肤感染金黄色葡萄球菌及化脓链球菌建立小鼠感染模型,皮肤感染组以皮肤细胞修复和炎性细胞浸润为评价指标,腹腔注射组以小鼠存活率为评价指标,观察不同剂量小花棘豆生物碱对感染小鼠的治疗作用.并对正常小鼠灌胃小花棘豆生物碱,观察7d内的毒性反应.[结果]小花棘豆生物碱具有较好的抗菌活性.其保护金黄色葡萄球菌和化脓链球菌感染小鼠的ED50分别为10.38和14.51 mg/kg,小花棘豆生物碱对正常小鼠的LD50为1 644.3 mg/kg,对金黄色葡萄球菌和化脓链球菌的化疗指数分别为158.4和113.3;皮肤感染组小花棘豆生物碱的治愈率高于对照组.[结论]小花棘豆生物碱对金黄色葡萄球菌和化脓链球菌具有较强的抗菌作用,具有一定的应用前景.     

风信子鹿角珊瑚的胚胎和幼虫发育研究

采集异株风信子鹿角珊瑚Acropora hyacinthus自然排放的精卵,进行人工授精,并在显微镜下连续观察其胚胎和幼虫的发育过程。结果表明：风信子鹿角珊瑚是雌雄同体,体外受精,在月圆后2~3d同期排卵;其胚胎发育分为6个阶段,即受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠期、浮浪幼虫期、珊瑚幼体;受精卵经过48 h发育为浮浪幼虫,再经7 d着床变形发育为珊瑚幼体;其浮浪幼虫附着在附着基上后逐渐膨大,由圆形变成蝶形完全附着在基底上,口盘朝上,随后幼虫发生附着变形,长出触手,形成珊瑚幼体。本研究为国内对文昌云龙湾风信子鹿角珊瑚的胚胎和幼虫发育过程的首次报道,研究结果可为珊瑚礁的生态修复提供参考依据。     

风信子鹿角珊瑚的胚胎和幼虫发育研究

采集异株风信子鹿角珊瑚Acropora hyacinthus自然排放的精卵,进行人工授精,并在显微镜下连续观察其胚胎和幼虫的发育过程。结果表明:风信子鹿角珊瑚是雌雄同体,体外受精,在月圆后2³ d同期排卵;其胚胎发育分为6个阶段,即受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠期、浮浪幼虫期、珊瑚幼体;受精卵经过48 h发育为浮浪幼虫,再经7 d着床变形发育为珊瑚幼体;其浮浪幼虫附着在附着基上后逐渐膨大,由圆形变成蝶形完全附着在基底上,口盘朝上,随后幼虫发生附着变形,长出触手,形成珊瑚幼体。本研究为国内对文昌云龙湾风信子鹿角珊瑚的胚胎和幼虫发育过程的首次报道,研究结果可为珊瑚礁的生态修复提供参考依据。     

珊瑚藻提取物对食用菌病菌及杂菌的抗菌活性

 对珊瑚藻乙醇提取物的抗菌活性进行初步研究,测定了其对圆弧青霉、绿色木霉、黑曲霉菌丝生长的抑制作用。结果表明, 浓度为0.001g/mL的珊瑚藻乙酸乙酯相Rf 000条带48h的抑制率最低,为11.4%;浓度为0.01g/mL的珊瑚藻Rf 0 92条带部分对圆弧青霉96h抑制率最高,达到了86.0%。GC MS分析表明,珊瑚藻乙醇提取物成分以酯类为主。     

鱼腥草注射液体外抗菌活性研究

研究了鱼腥草注射液的体外抗菌活性.以水蒸气蒸馏法制备鱼腥草中药注射液,金黄色葡萄球菌为供试菌种,通过活菌记数法、加氨苄西林钠辅助法对鱼腥草注射液的体外抗菌活性进行研究.结果表明:鱼腥草注射液在体外有一定的抑菌作用,其抗菌效果比生理盐水明显要强.以活菌记数法、加抗生素辅助法测定中草药的体外抗菌活性,方法可行,数据可靠.     

鹿角珊瑚中肿瘤坏死因子TNF-α抑制剂的计算机虚拟筛选

[目的]通过计算机虚拟筛选,从鹿角珊瑚化合物构建的数据库中寻找作为TNF-α抑制剂的先导化合物。[方法]采用Chem Office Ultra 2008的Chem Draw绘制分子化学结构,Chem Finder构建配体数据库,Molecular Operating Environment v2008.10(MOE)寻找TNF-α受体的三维结构活性部位,对配体小分子进行2次3D衍生,然后对接打分,筛选最理想的类药分子。[结果]鹿角珊瑚中分离的成分及其衍生物中含有多个TNF-α受体蛋白对接效果很好的化合物,并且有2个化合物的效果活性接近阳性对照配体。[结论]鹿角珊瑚中分离的成分及其衍生物中2个化合物有助于肿瘤治疗的发展。     

响铃草黄酮提取物体外抗菌活性研究

为探讨响铃草黄酮提取物的体外抗菌活性.采用乙醇索氏抽提、大孔树脂纯化的方法获得响铃草黄酮提取物,通过打孔扩散法和最低抑菌浓度法(MIC)检测其对4种人体常见致病菌生长的影响.结果表明:响铃草黄酮提取物对供试菌具有不同程度的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑制效果最好,对大肠杆菌的抑制作用不明显.响铃草黄酮提取物总黄酮含量为38.51%,该提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌、大肠杆菌的抑菌圈分别为36 mm、11 mm、9 mm和0 mm,对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌最低抑菌浓度分别为6.25 mg/mL、25 mg/mL,50 mg/mL.用乙醇索氏抽提、大孔树脂纯化的方法提纯响铃草总黄酮简便可行.     

金杯藤叶提取物的体外抗菌活性研究

[目的]对金杯藤叶的提取物进行体外抗菌活性测定及化学成分定性分析。[方法]用浓度85％乙醇作溶剂,采用微波辅助提取获得总提物,随后用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取;用纸片扩散法和微孔板二倍稀释法测定总提物及各萃取相对7种常见致病茵的抑茵圈、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。用系统预试法初步测定叶提取物的化学成分。[结果]金杯藤叶总提物对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌有明显抗茵作用,而对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏茵、乙型副伤寒沙门氏茵、大肠埃希氏茵等无抗茵作用;其中石油醚相和水相对3种革兰氏阳性茵有抗菌活性。金杯藤叶可能含有糖类、多糖及苷类、皂苷、有机酸、生物碱、黄酮、甾体及三萜类和强心苷类等成分。[结论]金杯藤叶的总提物含多种生物活性物质,对革兰氏阳性菌有特异性抗菌活性,且有效成分存在于石油醚相和水相。     

6种植物提取物的抑菌活性研究

[目的]研究大蒜、石榴、苍耳等6种植物提取物对几种常见蔬菜病害病原菌的抑制作用。[方法]采用生长速率法测定6种植物丙酮抽提物对病原菌菌丝生长的抑制效果,并进一步开展大蒜粉、苍耳提取物防治番茄早疫病的田间试验。[结果]大蒜、石榴提取物对多种植物病原菌的菌丝都有明显的抑制作用;苍耳次之;辣椒提取物主要抑制黄瓜炭疽病菌和番茄早疫病菌;蒲公英提取物主要对黄瓜炭疽病有抑制作用;侧柏叶对黄瓜白粉病菌的抑制率较高。1.5%大蒜粉防治番茄早疫病效果较好,防效均在95%以上;其中,以2 000倍效果最佳,对成株期番茄早疫病的防治效果达99.40%。[结论]6种植物提取物中,大蒜提取物的抑菌活性最强,1.5%大蒜素粉剂对番茄早疫病的防治效果最佳。     

中草药提取物体外抑菌活性研究

[目的]为探索中草药的作用机制,开发新型中草药水产动物饲料添加剂提供科学参考。[方法]选用黄芩、杜仲、金银花3种常见中草药进行试验研究,以微波辅助提取法提取药物中的主要活性成分,并测定其含量;将各组药物提取液分别对嗜水气单孢菌、温和气单孢菌、鳗弧菌等常见的水产动物致病菌进行体外抑菌试验。[结果]结果表明,各药物的提取液对水产致病菌均有一定的抑菌效果,杜仲提取液对嗜水气单胞菌和鳗弧菌的抑菌效果较好,黄芩对温和气单胞菌的抑菌效果较好,复方药物的体外抑菌效果主要取决于药物配比及其主要活性成分的浓度。[结论]为进一步研究开发出具有特异抗菌作用的新型中草药饲料添加剂提供了研究基础。     

重组人溶菌酶体外抑菌活性研究

以购买商品化的溶菌酶标准品作为对照,通过平板扩散法检测重组人溶菌酶(rhLYZ)在体外对几株致病菌及益生菌的抑菌作用,同时用梯度稀释法检测重组人溶菌酶的MIC和MBC。分别将重组酶和商品酶做梯度稀释后,滴加到涂布有一定量菌液的MH平板,通过平板扩散法测量各组抑菌环直径大小,从而判定其抑菌活性。结果表明,重组人溶菌酶抑菌活性显著高于标准溶菌酶,低质量浓度的重组酶即可对致病菌的生长产生抑制和杀灭作用。rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌较为敏感,抑菌环直径达到15mm～18mm;对多杀性巴氏杆菌抑菌环直径则达到27.5mm。提示rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌及多杀性巴氏杆菌等病原菌均具有较强抑菌活性。     

辣椒乙醇提取液的抑菌活性研究

采用琼脂扩散法研究了辣椒乙醇提取液对细菌、霉菌和酵母菌的抑菌活性。结果表明,提取液对3种菌均具有明显的抑菌作用,且其抑菌效果随提取液浓度的增大而增强。辣椒乙醇提取液对6种供试菌株的抑菌活性依次为：酿酒酵母〉黑曲霉〉青霉〉沙门氏菌〉金黄色葡萄球菌〉枯草芽孢杆菌。     

欧李对碳酸盐胁迫的光合响应

[目的]研究欧李对碳酸盐胁迫的光合响应。[方法]以浓度为100、200、300mmol／L的NaHCO3溶液浇灌3年生欧李苗,在盆栽条件下,于第7、11、15、21、30、36天测定苗木光合作角各项指标。[结果]随胁迫时间的延长,处理植株的气孔导度（岱）、蒸腾速率（开）、净光合速率（n）均呈现先升高后降低的趋势,前期高于对照,后期低于对照。胞间CO2浓度（a）前期升高,中期下降,后期变化不大。叶绿素a含量在前期变化不大,中期呈上升趋势,后期有所下降;叶绿素a／叶绿素b在整个处理时期变化平稳。[结论]整个处理期间,欧李显示出较强的耐盐性。     

链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性研究

[目的]为枯草杆菌诱导后的家蝇幼虫提取物在饲料中的应用提供依据。[方法]采用抑菌圈测量法测定链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性,分析其对温度、酸碱和离子强度稳定性的影响。[结果]链球菌诱导的家蝇幼虫提取物对细菌的抑菌圈直径为6.55~11.01 mm。诱导组中家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其对革兰氏阳性菌的抑制作用较强。而未诱导组提取物对细菌的抑菌圈直径为6.01~8.01 mm,诱导组的抗菌活性高于未诱导组。抗菌肽样品具有较好的温度稳定性。当pH值为4~10时,抗菌肽样品的抗菌活性均较高,以pH值为8时最高。抗菌肽样品的抗菌活性随离子强度的升高而下降。[结论]抗菌肽的抑菌活性受环境离子强度的影响,与其作用机理有关。     

欧李浑浊果汁加工工艺的研究

以欧李为原料,采用单因素试验确定欧李果浆加水量、适合稳定剂,采用正交试验筛选酶解最佳条件和最佳配方。随着加水量的增加,欧李果浆粘稠度降低,欧李原有香味变淡;适当酶解条件下欧李原果汁的出汁率显著提高;糖浓度为10%、原果汁浓度65%、柠檬酸浓度0.12%～0.16%的果汁口味、颜色较佳;黄原胶单独使用时的浑浊果汁稳定性良好;制得成品营养丰富。制备欧李果浆的加水量(质量比):欧李∶水=1∶2;最佳酶解条件:果胶酶浓度0.05%,酶解温度30℃,酶解时间1.5 h;最佳配方(质量分数):原汁浓度65%,糖浓度10%,柠檬酸浓度0.12%;稳定剂选择黄原胶,浓度0.1%。本研究为欧李浑浊果汁加工与存放中的稳定性提供技术保障,拓宽了欧李果实的加工利用途径。     

4种红树植物提取物的体外抗菌活性研究

[目的]探讨4种红树植物无瓣海桑、海桑、黄槿和银叶树提取物对6种常见致病菌的体外抗菌活性。[方法]微波提取法制备植物茎和叶的水提物和醇提物,用纸片扩散法和微孔板2倍稀释法测定了各提取液对各受试菌的抑菌圈、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。[结果]4种红树植物的提取物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑制作用无特异性;水提物和醇提物对受试菌株的抑菌谱不一致。4种植物茎和叶的水提物对金黄色葡萄球菌均有抑菌和杀菌作用,MIC和MBC在2.0～15.6 mg/ml之间。银叶树的叶水提物对金黄色葡萄球菌和表皮金黄色葡萄球菌有明显的抑菌和杀菌活性,但对副伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌和枯草芽胞杆菌有抑菌而无杀菌作用。[结论]银叶树可作为抗菌药物的原植物进行开发利用。     

钙果不定芽生根诱导研究

[目的]研究间苯三酚(PG)、NAA和IBA对钙果不定芽生根的影响,为钙果组培苗的批量生产提供技术参考。[方法]以1/2 MS为基本培养基,利用PG、NAA和IBA不同浓度的组合对钙果不定芽进行生根诱导,研究不同组合培养基的诱导生根效果。[结果]培养基中单独添加IBA、NAA或PG均不能诱导钙果生根;不同浓度的IBA和NAA组合诱导生根率低于5.0%;PG配合IBA和NAA使用可明显促进钙果生根,其中以培养基1/2 MS+PG 5.0 mg/L+IBA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L生根效果最好,培养20 d,钙果生根率达85.0%,且根系正常。[结论]适宜浓度的PG配合IBA和NAA使用,使钙果的生根率明显增加,以1/2 MS+PG 5.0 mg/L+IBA 1.5mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基生根效果最好。