鸡传染性法氏囊病胚胎免疫研究

用ＩＢＤＢＪ８３６免疫接种１８ｄ龄鸡胚，雏鸡在１，３，６周龄用ＩＢＤ强毒攻毒，获得显著保护，其保护率分别为６６．７％，８７．５％和１００％，且早期免疫保护率高于雏鸡免疫。ＩＢＤ胚胎免疫安全，不影响孵化率和健雏率，对新城疫苗的免疫应答没有抑制作用。     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

传染性囊病抗原-抗体复合苗免疫雏鸡的效果

用ＩＢＤＶ抗体与某ＩＢＤ商品疫苗民ＩＢＤＶ－Ａｂ复合苗,用ＩＢＤＶ－Ａｂ复活 合苗与ＩＢＤ商品疫苗在有母源抗体的雏鸡中进行免疫对比试验,试验鸡随机分为４组,饲养在隔离器中,第１组为空白对照组,第２组为攻毒对照组,第３组在１０ｄ龄用复合苗进行免疫第４组在１０ｄ龄用商品苗进行免疫、各组从１１ｄ龄起每隔１０ｄ采血,用酶联免疫吸附试验检测血清中ＩＢＤ抗体水平,３５ｄ龄时进行攻毒试验,试验结果显示,２１ｄ龄     

传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白基因及其表达产物免疫学试验

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２、ＶＰ３重组质粒ＤＮＡ及其大肠杆菌表达产物全菌裂解液油乳剂苗肌肉注射１４日龄仔鸡,免疫后１４和２１ｄ测定血清ＥＬＩＳＡ抗体效价,并于免疫后２１ｄ用ＩＢＤＶ南京野毒株攻击。结果显示：（１）ＶＰ２基因重组质粒ＤＮＡ除可诱导产生较高的ＥＬＩＳＡ抗体外,还可明显降低仔鸡ＩＢＤＶ攻击所引起的急性发病率和死亡率;（２）ＶＰ３－ＧＳＴ融合蛋白表达产物全菌裂解液可较早地诱导产     

简化免疫程序对肉仔鸡生产性能及免疫效果的影响

对肉仔鸡利用痢化免疫程序免疫后的生产性能及免疫效果进行了观察。结果表明：对肉仔鸡采用ＮＤ－ＩＢＤ活，死苗一次性免疫接种，具有ＮＤ及ＩＢＤ抗体产生早，高而主的特点足以保护肉仔鸡整个饲养周期。减少了因免疫接种引起的应激反应，从而使其生产性能得到显著提高。     

抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的临床应用研究

采用纯化的抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）多抗作为第一抗体，抗ＩＢＶ单克隆抗体作为第二抗体，应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法诊断鸡ＩＢＶ病。以多抗包被浓度为１：８０稀释，单抗１：４稀释，显色反应时间３０ｍｉｎ为最佳工作条件。该方法快速、简便、准确、特异性强。ＩＢＶ发病鸡服用１：１０稀释的单抗１ｍｌ／羽一次后有良好治疗效果。健康鸡服用单抗后无任何变态反应。初步建立了抗ＩＢＶ单克隆抗体制剂及安全的治疗方法与诊断系统。     

抗鸡传染性支气炎病毒单克隆抗体的临床应用研究

采用纯化的抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）多抗作第一抗体，抗ＩＢＶ单克隆抗体的第二的抗体，应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法诊断鸡ＩＢＶ，以多抗包被浓度为１：８０稀释，单抗１：４稀释，显色反应时间３０ｍｉｎ为最佳工作条件。该方法快速，简便，准确，特异性强，ＩＢＶ发病鸡服用１：１０稀释的单抗１ｍｌ／羽一次后有良好治疗效果，健康鸡服用单抗后无任何变态反应。初步建立了抗ＩＢＶ单克隆抗体制剂及安全的治疗方法与诊断     

双抗体ELISA检测鸡传染性法氏囊病病原

用单克隆抗体双抗体ＥＬＩＳＡ法检测自然发病鸡和人工感染鸡的法氏囊及其它脏器和ＩＢＤＶ细胞毒，病鸡的法氏囊ＩＢＤＶ检出率约１００％，其它脏器较低，ＩＢＤＶ细胞毒毒价明显低于组织毒。     

鸡传染性法氏囊病毒的分离、纯化与抗血清的制备

采用鸡胚尿囊液培养传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）。将培养病毒的鸡胚尿囊液经高速离心，聚乙二醇（ＰＥＧ）沉淀、蔗糖垫底超速离心、ＮａＢｒ密度梯度离心，可获得纯化的鸡传染性法氏囊病毒带。通过透射电子显微镜观察，表明ＩＢＤＶ颗粒呈六角形，直径约６０ｎｍ，无囊膜，其浮力密度为１．３０～１．３６ｇ／ｍｌ。实验所分离的病毒粒子的平均含量为１．７２ｍｇ／ｍｌ。用这种病毒免疫健康家兔制备抗ＩＢＤＶ的血清，获得了效价在１∶３２以上的抗血清，抗血清有较高的纯度和专一性     

不同母源抗体水平雏鸡IBD免疫程序的探讨

采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了１ｄ龄石岐杂雏鸡的ＩＢＤ母源抗体，根据不同母源抗体水平的高低，将１ｄ龄石岐杂雏鸡的ＩＢＤ母源抗体分为高、中、低３种水平．针对每个ＩＢＤ母源抗体水平的雏鸡设计了３种不同的ＩＢＤ双价苗的免疫程序．用ＥＬＩＳＡ检测免疫前后ＩＢＤ抗体的动态变化，并于２３ｄ龄时用ＩＢＤ强毒对雏鸡进行攻毒．结果说明，不同母源抗体的雏鸡，其ＩＢＤ的最佳免疫时机是不同的．作者建议使用ＩＢＤ双价苗免疫石岐杂雏鸡时，可根据１ｄ龄鸡群ＩＢＤ母源抗体的平均ＥＬＩＳＡ滴度，用公式“最佳接种日龄＝（抗体滴度－３４．６４）／２．８２＋１”预测最佳首免日龄．作者最后提出了一个控制石岐杂肉鸡ＩＢＤ流行的方法．     

鸡传染性支气管炎（IB）诊断方法的研究

本试验用鸡胚大量繁殖鸡传染性支气管炎病毒,收集尿囊液,用１％胰蛋白酶处理制备ＩＵＢＶ血凝抗原,建立了血凝－血凝抑制检测ＩＢＶ抗体的方法,其特异性强,操作简便。另外,本试验建立Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法用于检测ＨＢＶ,病料经处理后,点样于硝酸纤维素膜,加兔抗ＩＢＶ抗体,经ＰＰＡ－ＤＡＢ－Ｈ２Ｏ２显色,其检测结果与双抗体夹心ＥＬＩＳＡ的检测结果一致。     

抗IBD高免卵黄抗体的研制

应用ＩＢＤ二价弱毒细胞苗和二价油乳剂灭活苗对鸡进行加强免疫，待高免鸡血清ＩＢＤＡＧＰ抗体效价达１：２５６以上时，收集高免蛋，用于制备抗ＩＢＤ高免卵黄抗体，制出的高免卵黄抗体ＩＢＤＡＧＰ效价为１：６４～１：１２８，用这种高免卵黄抗体对万余只ＩＢＤ病鸡进行治疗，剂量为每只鸡肌注１ｍｌ，总有效率在９０％以上。由此可见，ＩＢＤ高免卵黄抗体具有特异性好、治愈率高、取材方便、制造简便和使用方便等优点，适用于基层推广使用。     

不同免疫程序对MDV抗独特型抗体苗效果的影响

探讨不同免疫程序对MDV（Marek＇s DiseaseVirus,MDV）抗独特型抗体苗抗感染保护的影响.将MDV抗独特型抗体苗用胚内.皮下与单纯皮下相结合的方法免疫SPF鸡,以第二次免疫接种5 d攻毒后, 进行抗感染保护测定,比较各实验组淋巴细胞增生病变,病毒分离及大肠杆菌感染指标等的差异,确定MDV抗独特型抗体苗的免疫程序.结果表明,二种免疫效果相同,抗MD感染保护力达90%.     

鸡马立克氏病二价苗对超强毒攻击的保护试验

将鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）血清Ⅱ型Ｚ_４毒株５００个空斑形成单位（ＰＦＵ）与ＭＤＶ血清Ⅲ型ＦＣ_（１２６）毒株１０００ＰＦＵ组成鸡马立克氏病（ＭＤ）二价疫苗，免疫对ＭＤ高度易感的Ｐ系ＳＰＦ白来航鸡，设３０１Ｂ／１＋ＦＣ＿（１２６）二价疫苗，Ｚ＿４，３０１Ｂ／１和ＦＣ_（１２６）３种单价疫苗免疫组做对照，以ＭＤＶ超强毒Ｍｄ＿５毒株（ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ_５）攻击。结果表明：Ｚ_４＋ＦＣ_（１２６）和３０１Ｂ／１＋ＦＣ_（１２６）２种二价疫苗均能给免疫鸡提供较强的免疫效力，而３种单价疫苗则不能给免疫鸡提供对ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ＿５毒株攻击的有效保护力。     

感染IBDV的雏鸡在接种传染性支气管炎疫苗后免疫器官的免疫细胞变化

１２０只无ＩＢＤＶ母源抗体的雏鸡随机分成４个实验组和４个对照组,分别于第１、２、３、４周龄时感染ＩＢＤＶ,或用灭菌生理盐水作对照感染,以后分２次用传染性支气管炎疫苗进行免疫。结果发现,首次免疫后第１４ｄ,法氏囊、胸腺和脾脏中的浆细胞、ＴＡＮＡＥ＋及淋巴细胞数均明显低于对照组;二次免疫后第１４ｄ各指标虽有所升高,但仍低于二次免疫对照组。表明感染ＩＢＤＶ的雏鸡对传染性支气管炎疫苗的首次免疫呈严重的抑制状态,而对二次免疫仅有轻微抑制作用;同时证明,ＩＢＤＶ在引起体液免疫抑制的同时还能引起细胞免疫抑制,而且感染日龄越小,免疫抑制就越严重。     

奶牛血清及乳汁中抗鸡IBD抗体的研制

采取不同免疫方法，对不同采样时期的血清及乳汁进行鸡 Ｉ Ｂ Ｄ抗体效价检测，筛选出以 Ｉ Ｂ Ｄ弱毒苗加油乳苗同时接种，２ 次免疫的方法制得的血清及乳汁中抗体效价较高，血清效价最高可达１∶６４，乳汁中抗体效价最高可达１∶３２。此结果为研制乳汁抗 Ｉ Ｂ Ｄ抗体奠定了基础。     

鸡马立克氏病二价苗对超强毒攻击的保护试验

将鸡马立克氏病毒血清Ⅱ型Ｚ４毒株５００个空斑形成单位与ＭＤＶ血清Ⅲ型ＦＣ１２６毒株１０００ＰＦＵ组成鸡马立克氏病二价疫苗，免疫对ＭＤ高度易感的Ｐ系ＳＰＦ白来航鸡，设３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６二价疫苗，Ｚ４，３０１Ｂ／１和ＦＣ１２６３种单价疫苗免疫组做对照，以ＭＤＶ超强毒ＭＤ５毒株攻击，结果表明：Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６２种二价疫苗均能给免疫鸡提供较强的免疫效力，而３种单价疫苗则不能     

鸡法氏囊病细胞毒油乳剂灭活苗对种母鸡的免疫效果

鸡法氏囊病（ＩＢＤ）血清琼扩抗体阴性的５月龄非免母鸡，接种抗原量１．６６７×１０７．６ＴＣＩＤ５０的地方ＩＢＤ细胞毒油乳剂灭活苗后４个月，鸡血清ＩＢＤ琼扩抗体检查１００％阳性，血清平均抗体水平大于１：７．８；鸡群所产的蛋中，至少有９１．３％的鸡蛋卵黄ＩＢＤ琼扩抗体检查为阳性，６５．２％以上的鸡蛋卵黄抗体效价达１：４，平均卵黄抗体水平大于１：５．２，可抵御一般强毒的侵袭。母鸡免后６个月时，只有５７．６％的鸡蛋卵黄ＩＢＤ琼扩抗体检查为阳性，鸡蛋的平均卵黄抗体水平降到１：４以下。     

鸡传染性支气管炎二价灭活苗的研制

从上海、江苏、大连等地的患病鸡群中分离到８株病毒，经鉴定确认为鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。从中挑选出２株具代表性毒株（Ｃ９００１、ＤＬＺ９１１１）研制出二价油佐剂灭活苗。结果表明，１∶１００稀释的二价油佐剂灭活苗最小免疫剂量０．５ｍｌ／只，一次免疫对支气管炎型ＩＢ的保护率可达６６．６７％，对肾型ＩＢ的保护率可达８３．３３％。０．２ｍｌ的二价苗免疫１５日龄的雏鸡，１５ｄ后攻毒，对肾型ＩＢ的保护率达１００％，而肾型和支气管炎型单价苗的免疫保护率分别为９０％和８０％。通过实验室的免疫试验和临床应用，证明安全高效。     

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制

用蚕豆萎蔫病毒提纯病毒粒子免疫ＢＡＬ Ｂ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有稀释法克隆,成功获得了２株ＢＢＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１：６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ ４４．７ｋＤ的外壳蛋白