重金属铅胁迫对不同烟草品种种子发芽的影响

以3个烟草品种（红大，K326和G28）的种子为材料，研究了不同浓度的铅溶液对烟草种子的发芽和活力指数的影响。结果表明，当铅浓度为100mg／L时，铅对烟草种子的发芽影响较小，但却大大降低了种子的活力；当铅浓度达200mg／L时，铅对烟草种子的发芽存在着明显的抑制作用，且其抑制程度随着浓度的提高而增加。不同品种种子对铅胁迫反应不一，K326种子忍受铅胁迫能力较强，G28种子最弱，红大居于中间。     

富氮控氧法对3种虫态烟草甲杀灭效果

富氮控氧法是一种环保、高效的新型烟叶养护方法,该方法通过充氮气方式调节贮烟密闭空间内的氧气浓度,从而实现杀灭烟虫和烟叶养护的目的。为探明富氮控氧法对烟草甲的控制效果,对烟叶养护过程中不同低氧浓度对卵、幼虫和成虫3种不同虫态烟草甲的致死效果运用Probit法进行了分析。结果表明,富氮控氧法杀灭3种不同虫态烟草甲所需时间均大大短于化学气调法;1.5%~2%低氧浓度环境对3种虫态烟草甲综合致死效果较好。富氮控氧法在烟叶养护过程中能够有效杀灭烟草甲。     

镉胁迫对烟草种子萌发和烟苗生长发育的影响

为探讨不同镉（Cd）胁迫对不同烟草品种种子萌发、幼苗生长的生理生态效应的影响,以吉烟9号、吉烟10号、延晒六号3个烟草品种为材料,研究了不同浓度的Cd溶液对烟草种子萌发以及烟苗生长发育的影响。结果表明,Cd胁迫下烟草种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、苗高均受到抑制;烟苗叶绿素含量降低,根冠比变小,生长受到抑制,CAT活性、SOD活性、可溶性糖含量随Cd浓度的增加呈先增后降的趋势,POD活性、MDA含量、Pro含量、Cd含量均随Cd浓度的增加而增加。可见Cd胁迫能不同程度地影响烟草种子萌发和烟苗生长发育,烟苗体内的抗氧化酶系统被破坏,多种酶活性不协调,生理生化过程紊乱,最终导致烟苗受害。     

转LEA基因烟草的NaHCO3抗性分析

本研究以转LEA基因烟草7个株系及非转基因对照烟草组培苗为材料,用不同浓度的NaHCO3处理,通过调查转基因烟草和对照烟草的相对电导率、POD活性、SOD活性、碱害指数、生根率等指标的变化,对LEA基因功能在NaHCO3的抗性方面进行初步探索性的研究。结果表明,在非碱胁迫条件下,各转基因株系与对照烟草的相对电导率差异不明显,各株系的相对电导率随着NaHCO3浓度的增加均呈上升趋势,但各转基因株系均小于对照烟草,当NaHCO3浓度在30mmol/L和40mmol/L时,转基因株系之间及转基因株系与对照间的差异达到了显著水平;在给予NaHCO3胁迫后,将各转基因株系各个处理POD活性、SOD活性取平均值后与对照烟草做比较,可以看出,对照烟草的POD活性、SOD活性变化较小,而转基因株系活性上升较为明显,且均在NaHCO3浓度为30mmol/L处达到活性最大值;在不同浓度NaHCO3胁迫下转基因烟草的受害程度明显小于对照;在相同浓度的NaHCO3胁迫下,转基因烟草生根较对照烟草早2￣3d,当NaHCO3浓度为30mmol/L时,转基因烟草碱害指数达到50%左右,且保持有10%￣30%左右生根率,而对照烟草受害程度较大,已经不能生根。综合以上分析结果表明,转基因烟草NaHCO3的耐受临界浓度为30mmol/L。在NaHCO3胁迫下,转基因烟草的碱害程度、膜损伤较对照烟草小,POD、SOD活性及生根率均高于对照烟草,说明LEA基因的导入提高了烟草的NaHCO3抗性。     

几种药剂对烟草甲的生物活性评价

利用烟草甲幼虫作试虫，测定了不同浓度的印楝素、甲基嘧啶磷及双氧威等3种药剂在48小时后及24天后对烟草甲幼虫的触杀作用和后效作用。发现甲基嘧啶磷的触杀作用最强，印楝素次之，双氧威最弱；但双氧威和印楝素有着明显的后效作用。     

三唑酮诱导对烟草几种防御酶活性的影响

不同浓度杀菌剂三唑酮处理烟草后,烟草植株叶片中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)等防御酶活性有所提高,其过氧化物酶同工酶也比对照活性增强。因此认为,三唑酮可以诱导烟草对TMV的系统获得性抗性(SAR),提高烟草的免疫能力。     

烟草Nt CIPK家族基因表达与其含钾量之间的关系分析

为探讨烟草NtCIPK家族基因的表达与烟草含钾量之间的关系,为烟草钾吸收的分子机制研究提供借鉴,对普通烟草品种K326、贵烟5号和云87进行3个不同钾浓度(6. 0,1. 0,0. 2 mmol/L)的溶液培养,并测定其干质量和钾含量;同时,运用qRT-PCR的方法,分析了NtCIPK家族11个基因对不同钾浓度处理的诱导表达模式。结果表明,随着培养液钾浓度的提高,各参试品种的单株干质量和钾含量都呈升高趋势,且处理间有显著差异,其中,云87在不同钾浓度(1. 0,0. 2 mmol/L)处理下,其单株干质量和钾含量均最高。NtCIPK家族11个基因的表达均受钾浓度变化的诱导,表现为随着K+浓度的下降而上调表达;只有K326的NtCIPK9和贵烟5号的NtCIPK24的表达呈现下调趋势。通径分析结果表明,在0. 2 mmol/L K+浓度处理下,NtCIPK3和NtCIPK5的表达分别与K326和贵烟5号的单株含钾量呈现显著正相关关系;而在6. 0 mmol/L K+浓度处理下,NtCIPK23的表达与云87的单株含钾量呈现显著负相关关系。烟草钾含量与其NtCIPK基因的表达密切相关,而NtCIPK基因的增强表达有助于烟草对钾的吸收和积累。     

空心莲子草浸提液对烟草种子萌发的化感作用研究

通过用空心莲子草根浸提液(4、0.8、0.4、0.08 g/L)处理烟草种子K326,并与蒸馏水对照相比,发现在4、0.8、0.08g/L 3个浓度的处理下烟草种子的萌发都得到了不同程度的促进,尤以0.08 g/L的促进效果最明显.用根状茎浸提液(4、0.8、0.4、0.08g/L)分别处理烟草种子K 326,与对照相比,4g/L浓度根状茎浸提液的处理对烟草种子的萌发表现出明显的抑制作用,廷缓了种子萌发达到最大值的时间,而其他3个浓度则表现出不同程度的促进.在4、0.08 g/L浓度根浸提液处理下,烟草种子的发芽率、发芽指数都显著高于对照.在0.08 ～4 g/L浓度范围内,促进效果:根浸提液＞根状茎浸提液.     

几丁寡糖对烟草种子萌发及有关酶活性的影响

在实验室条件下,测定了不同浓度的几丁寡糖溶液浸种处理对烟草K326种子发芽率和发芽势及有关酶活性的影响。结果表明,在0.2~1.0mg/mL浓度范围内,几丁寡糖溶液浸种处理能显著提高烟草种子发芽率和发芽势,最适浓度为0.4mg/mL;用0.4mg/mL几丁寡糖处理的烟草种子体内过氧化物酶（POD）活性显著高于对照,超氧化物歧化酶（SOD）和苯丙氨酸解氨酶（PLA）活性均显著高于不浸种对照。基于本研究结果,对几丁寡糖处理对烟草种子发芽率和发芽势影响的机制进行了讨论。     

Optimizaiton of IMP PCR System Applied in Tobacco

为满足烟草遗传分析的需求,建立稳定的IMP标记扩增方法,对IMP分子标记体系进行了优化。本研究以烟草DNA为模板,利用Li-cor 4300凝胶分离系统,优化了模板、Mg2+、dNTP、聚合酶浓度等IRD荧光引物扩增反应体系主要参数,建立分析IMP标记的平台。结果显示,影响烟草荧光引物扩增反应最大的因素是dNTPs和引物浓度,反应体系对Mg2+浓度的要求较宽泛,同时,不同的引物对各因素的浓度要求也有差异。最终确定20 μL反应体系中,模板DNA 70 ng,Mg2+浓度2.0 mmol/L,dNTPs为0.2 mmol/L,rTaq DNA聚合酶1.5 U,引物浓度均为1 μmol/L。该体系扩增条带稳定,重复性好,适合烟草遗传多样性分析。     

不同消毒剂对烟草种子消毒效果及萌发的影响

为探索烟草种子最佳消毒方法,本研究进行了不同消毒剂浓度及消毒时间对烟草种子带菌率及萌发的影响试验.结果表明,10％ H202消毒20 min、0.5‰HgCl2消毒15 min、1.0‰HgCl2消毒8 min、25％ NaClO消毒30 min以及30％NaClQ和40％ NaClQ处理烟草种子都可以得到无菌苗.同时,采用不同消毒剂与75％乙醇组合,对烟草种子的消毒效果也比较好.综合来看,30％NaClO处理烟草种子30 min,消毒效果较好,发芽率最高.     

转毕式海蓬子水通道蛋白基因SbPIP1烟草的抗旱生理机制分析

为了研究毕氏海蓬子中水通道蛋白基因的功能,利用RACE技术克隆了毕氏海蓬子经盐诱导后差异表达的水通道蛋白基因SbPIP1,并利用生物学软件对其编码的氨基酸序列进行了分析。进一步构建SbPIP1基因的植物高效表达载体pcAMBIA2301-SbPIP1,利用农杆菌介导法转化烟草NC89,通过Kan抗性、PCR及半定量RT-PCR筛选鉴定阳性转基因苗;对转基因烟草进行抗旱性分析,同时测定转基因烟草叶片原生质体在低渗溶液中破裂所需时间,以及在不同浓度PEG6000处理后转基因烟草叶片的相对含水量(RWC)、离子外渗率(IL)、丙二醛(MDA)含量和脯氨酸含量,研究毕式海蓬子SbPIP1基因的功能,分析转基因烟草的抗旱生理机制。结果表明,从毕氏海蓬子克隆的SbPIP1基因(Gen Bank登录号:DQ451602)c DNA全长1 268 bp,开放阅读框长度为858 bp,共编码285个氨基酸。生物信息学分析显示,SbPIP1编码的蛋白包含6个跨膜区、2个NPA(Asn-Pro-Ala)单元和2个典型的质膜信号肽序列。通过Kan抗性、PCR及半定量RT-PCR鉴定筛选,最终获得10个株系转基因烟草苗。转基因植株的抗旱性与对照相比明显提高。转基因烟草叶片原生质体在低渗溶液中的破裂时间明显短于对照烟草。在不同浓度PEG6000处理下,随着处理浓度的提高,转基因烟草和对照烟草叶片RWC均呈现逐渐下降趋势;但在相同浓度处理下,转基因烟草植株叶片的RWC与对照植株相比,下降幅度较小,具有较强的抗脱水能力。转基因烟草和对照烟草叶片MDA和IL随着PEG处理浓度的提高均呈现逐渐上升趋势,但转基因烟草MDA和IL增加幅度明显小于对照植株。转基因烟草和对照烟草叶片中脯氨酸含量随着PEG处理浓度的提高也呈现逐渐上升趋势,但与对照相比,转基因烟草植株叶片中脯氨酸含量增加的更快。     

多胺对烟草早期胚胎离体培养生长的促进作用

多胺是一大类重要的植物生长调节物质,在植物生长与发育过程中发挥着重要作用。烟草胚胎发生是烟草种子形成的关键过程,研究多胺对烟草胚胎生长的影响情况是探索多胺对植物种子形成所起作用的重要途径。本研究通过分离烟草早期胚胎并在体外对其进行离体培养,对比研究烟草早期胚胎在10μmol/L,100μmol/L及1000μmol/L不同浓度多胺处理下的离体生长状况。研究结果表明100μmol/L的亚精胺可以有效地促进烟草二胞原胚的生长和分裂。此外,实验还发现亚精胺有生长素对不同时期烟草胚胎离体生长相似的作用效果。     

外源一氧化氮对盐胁迫下烟草幼苗生理及抗氧化性的影响

为探究外源一氧化氮（NO）对盐胁迫下烟草幼苗的影响,为了解烟草抗盐机制和生产应用提供一定参考,以烟草品种K326为研究对象,使用硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）作为外源一氧化氮供体,研究不同处理烟草幼苗的生理及抗氧化性。试验结果表明,盐胁迫会显著抑制幼苗的正常生长发育,通过使用不同浓度的SNP预处理后,烟草幼苗叶片含水率明显上升,根系活力上升,提高了胁迫环境下的叶绿素含量,渗透物质含量显著增加,幼苗体内的多种抗氧化酶含量显著升高,过氧化氢含量和MDA含量下降,降低了膜脂过氧化的程度,保护细胞结构不被破坏,降低叶片细胞透性。试验结果说明,外源一氧化氮可以有效提高烟草幼苗的耐盐性,并且具有明显的浓度效应,0.10mmol/L SNP预处理的效果最好,试验结果为提高烟草的耐盐性提供一定依据。     

镉胁迫下不同品种烟草镉化学形态分布研究

为研究镉胁迫下不同品种烟草积累和忍耐镉的差异及机制问题,以烟草品种‘RG17’、‘贵烟11号’、‘Xanthi’为试验材料,采用土培试验方法对不同品种烟草镉化学形态分布特征进行了研究。结果表明,烟草根、茎、叶镉的各形态含量随土壤镉浓度的增加而增加,根部FHAC分配比率最高,占绝对优势,茎FHAC降低,FNaCl增加,而叶片FNaCl分配比率最高,占绝对优势,且随着镉浓度的加大,根、茎、叶镉的各形态分配比率有接近的趋势。同样各形态分配比率因品种而异,根部‘Xanthi’FHAC分配比率最高,而FW、FNaCl分配比率低;叶内FNaCl分配比率‘Xanthi’高于其他品种,而FW分配比率低,随着镉浓度的增加,这种趋势更加明显。推断高积累型烟草根内镉形成难溶于水的磷酸盐有利于其对镉的积累,而与蛋白质络合,从细胞质转移到液泡可能是烟草耐性品种忍耐镉的主要机制之一。     

盐胁迫对烟草幼苗生理活性的影响

为了探讨盐胁迫对烟草叶片生理生化的影响，用含不同浓度NaCl的营养液来对烟草幼苗进行胁迫培养4天后，测定相关的生理生化指标，结果表明：随着盐浓度的增大，叶片相对电导率增高，可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸和脱落酸（ABA）含量增加，而相对含水量则降低。当用ABA合成的抑制剂处理时，发现ABA含量降低，叶片受害症状加剧，相对电导率明显增加。当用外源ABA处理叶片时可以降低相对电导率，ABA在植物抗盐胁迫中起到一定的作用。     

外源物质提高烟草抗非生物胁迫的研究进展

水分、盐碱、温度和重金属等非生物逆境因子胁迫烟草的生长发育，研究发现外源物质在烟草逆境缓解中扮演十分重要的角色。文章归纳了非生物胁迫对烟草生长的不利影响，总结了外源物质缓解非生物胁迫的作用途径，分析了外源物质施用的最佳浓度，指出施用外源物质可能对烟草产生的不利影响，并指出了多种外源物质复配效果优于单一外援物质影响，同时展望了今后烟草非生物逆境研究的前景，以期为挖掘和应用新的外源物质以及阐明其缓解逆境影响的调控机制提供理论依据。     

镧对烟草叶绿体光化学反应的影响

在荷格兰德氏(Hoagland)营养液中加入系列浓度的硝酸镧处理烟草苗，采用ICP-MS(电感耦合等离子体质谱)测定烟草中稀土含量，结果表明：(1)处理的烟草幼苗中稀土含量分布为根>叶>茎；(2)烟草体内各部位的稀土含量均随外源稀土量的增加而增加。La(NO3)3对烟草叶绿体光合作用中光化学反应的影响试验结果证实：La(NO3)3在低浓度范     

铝胁迫对烟草叶片光能利用、光保护系统及活性氧代谢的影响

为了揭示烟草叶片光能利用和光保护系统在铝诱导的活性氧代谢中的作用机理,以2个不同耐铝性的烟草品种云烟100(耐铝)和云烟105(敏感)为材料,采用水培法研究了不同铝浓度(0,50,100,200μmol/L)对烟草植株生长、叶片活性氧含量、光合特性、叶绿素荧光参数、光呼吸、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。结果表明,铝浓度的升高显著降低了烟草叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)、最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ光合电子传递量子效率(ΦPSⅡ)和光化学猝灭系数(q P),提高了反应中心PSⅡ过剩激发能,从而导致叶片O_2-·和H2O_2含量升高,植株生物量下降,其中对云烟105影响大于云烟100。随铝处理浓度的升高,烟草叶片非光化学猝灭系数(NPQ)、光呼吸速率、SOD和APX活性呈先升后降的趋势。与敏感品种云烟105相比,耐铝品种云烟100在不同铝浓度胁迫下表现出更高的ΦPSⅡ、q P、NPQ、光呼吸速率以及SOD和APX活性,说明低浓度铝胁迫下烟草叶片可通过提高光化学反应能力、热耗散、光呼吸以及抗氧化酶活性等途径来降低反应中心PSⅡ过剩激发能,防止或清除活性氧的积累,从而增强其对铝的耐性。     

植物提取物对烟草普通花叶病毒的抑制作用

为明确美洲商陆和绞股蓝提取物对烟草普通花叶病毒(TMV)的抑制效果,探索防治烟草病毒病防治的新思路,以期为开发植物源提取物防治烟草普通花叶病毒病提供理论依据,采用半枯叶法和大田直接喷施的方法,测定美洲商陆和绞股蓝的提取物对TMV的抑制作用和对大田TMV植株发病情况的影响,分析以上2种植物提取物对TMV的防治效果。半枯叶法的结果表明:化学防病毒药剂在25~200μg/m L浓度时均表现较好的抑制效果,其抑制率均在80%以上,与TMV不同混合时间后接种其抑制率在90%以上;美洲商陆和绞股蓝不同粗提物对TMV抑制率效果表现为甲醇提取物苯提取物石油醚提取物,美洲商陆对TMV抑制率显著高于绞股蓝,用200μg/m L浓度与TMV混合后,混合时间越长其对TMV抑制率越高;对大田烟草TMV防治效果表现为:复配制剂美洲商陆绞股蓝,且高浓度效果优于低浓度,同时,缓解了感病植株烟草农艺性状各项指标。结果表明这2种植物源提取物对TMV抑制作用显著,是防治烟草普通花叶病毒病较为理想的植物源药剂。