瓜实蝇性别决定基因tra——2的克隆及表达分析

本研究对瓜实蝇Bactrocera cucurbitae Coqillet的性别决定基因tra- 2的eDNA序列进行了克隆和分析。根据转录组数据库及序列同源性分析，分别克隆并获得瓜实蝇雌雄成虫tra- 2的基因片段，利用生物信息软件对所得序列进行分析;采用qPCR技术，研究该基因在瓜实蝇不同发育阶段的表达情况。研究结果表明，瓜实蝇ra-2基因的eDNA序列共1 450 bp,无性别特异性，含753 bp的开放阅读框，共编码250个氨基酸。 该基因在瓜实蝇不同发育阶段均有不同的表达量，瓜实蝇tra-2基因具有母体遗传表达特性，在胚胎期的表达量较高，雌成虫表达量显著高于雄成虫。     

茶尺蠖触角高丰度气味结合蛋白EoblOBP9、EoblOBP11的配基结合功能和模式差异研究

茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)是茶园重要的鳞翅目害虫,雄雌成虫能通过嗅觉系统感受和分辨外界环境的化学信息以助于其交尾和产卵地选择等行为.在此过程中,成虫触角高丰度表达的气味结合蛋白(Odorant-binding proteins,OBPs)可能发挥了重要作用.以茶尺蠖成虫触角高丰度表达的两个O...     

基于COⅠ基因片段的瓜实蝇遗传多样性分析

瓜实蝇是一种重要入侵害虫,广泛分布于热带和部分亚热带国家和地区,寄主广,危害性大。本研究对中国6个主要分布省份、19个地区瓜实蝇线粒体COⅠ基因中的部分序列进行了测定,分析了种群的遗传学关系并建立系统进化树。结果表明,在获得的640 bp的DNA序列中,可变位点16个,其中简约性信息位点7个,单变异位点9个。Fst值为0.107 88,Nm值为2.07,遗传距离为0~0.001 8。单倍型多样性云南、广西最高。聚类分析发现国内各地理种群间差异不显著。中国19个种群的瓜实蝇存在一定的遗传分化,但分化程度很低。     

南亚实蝇转录组及嗅觉相关基因的初步分析

南亚实蝇Bactrocera tau (Walker),是葫芦科、茄科蔬菜和多种热带、亚热带果树上的主要害虫,抗逆性强,繁殖速度快,防治难度大。为挖掘可用于生物防治的分子靶标和探讨副信息素类引诱剂对其作用的分子基础,本研究采用Illumina HiSeq2500 PE125 bp测序技术对其混合样进行转录组测序和生物信息学分析。经序列拼接获得36 109条Unigenes,进一步与七大公共数据库进行同源比对,注释了21 127条Unigenes,其中在Nr数据库中注释成功的Unigenes数目最多,20 948条。Nr数据库注释的南亚实蝇B. tau Unigenes与地中海实蝇Ceratitis capitata同源性最高,达59.80%;与模式昆虫黑腹果蝇Drosophila melanogaster的同源性次之,达14.86%。将Unigenes与GO数据库比对发现,14 029条Unigenes根据功能分为了3个大类57个亚类;而与KOG数据库比对结果为,13 479个Unigenes基因其功能属于25个类别;进一步KEGG数据库代谢分析表明,6442条Unigenes参与了5大类共152个代谢通路。基因注释进一步筛选鉴定获得了嗅觉相关基因528个,对其中气味结合蛋白基因氨基酸序列的分析表明,其大多为具有6个保守的半胱氨酸位点的典型气味结合蛋白,且与黑腹果蝇D. melanogaster、地中海实蝇C. Capicata、瓜实蝇B. cucuribitae、橘小实蝇B. dorsalis的气味结合蛋白基因具有很高的同源性。这为南亚实蝇对副信息素类引诱剂反应的相关功能基因的挖掘及从嗅觉上寻求科学的防治措施提供了基础数据。     

瓜实蝇对不同果香香精的趋向行为研究

本研究选取与瓜实蝇偏好寄主植物果实以及对其具有强引诱作用的非寄主果实相关的果香香精8种,研究了瓜实蝇对这些香精的趋向行为。结果表明,瓜实蝇对不同果香香精表现出不同的趋向行为。室内室外的初筛结果均表明瓜实蝇偏好榴莲香精和南瓜香精,且两种香精诱集的瓜实蝇雌雄虫数量并无显著差异。通过Y型嗅觉仪行为测定发现瓜实蝇最偏嗜10% (w/V)的榴莲香精和南瓜香精。基于本研究的结果,建议选择10%的榴莲香精和南瓜香精溶液用于瓜实蝇的监测和诱杀防治。     

不同诱捕处理在苦瓜地上对瓜实蝇和桔小实蝇的诱捕效果研究

研究引诱剂的5种不同诱捕处理在苦瓜地上对瓜实蝇和桔小实蝇的诱捕效果.结果发现,好粘主要诱捕桔小实蝇雄虫,稳得主要诱捕瓜实蝇雄虫,2种诱剂均可同时引诱小量其它实蝇；在用量1 g的条件下,引诱剂的5种不同诱捕处理中瓶内喷涂对2种实蝇的诱捕效果均明显好于瓶外喷涂,且好粘与稳得对2种实蝇雄虫的诱捕效果随着瓶内水量的增加先增强后逐渐减弱,加水50 mL时达最大值.研究还探讨了好粘与稳得2种引诱剂对苦瓜地外围瓜实蝇和桔小实蝇雄虫的诱捕效果,结果好粘与稳得2种引诱剂在寄主植物外围不同位点上均可诱捕瓜实蝇和桔小实蝇雄虫,且某一位点上虫量发生越大其诱捕量越大.     

2种瓜实蝇寄生蜂的研究进展

瓜实蝇(Bactrocera cucurbitae Coquillett)是危害多种蔬菜和水果的重要害虫,化学防治效果成效甚微,生物防治有望成为最有潜力的防治技术。本文主要对瓜实蝇的寄生性天敌阿里山潜蝇茧蜂(Fopius arisanus Sonan)和弗氏短背茧蜂(Psyttalia fletcheri Silvestri)的生物学特性、影响寄生蜂存活和雌雄性比的主要因素、寄主范围及寄主选择性、扩繁技术及其对实蝇的防治效果等方面进行综述,为2种蜂在瓜实蝇生物防治中的应用提供参考。     

大豆食心虫非典型气味受体基因克隆及发育期表达分析

非典型气味受体是昆虫嗅觉识别过程中重要的蛋白之一。本研究利用RT-PCR和巢式PCR的方法克隆了大豆食心虫非典型气味受体Olfactory co-receptor基因,命名为Lgly Orco,其编码区为1 419 bp,编码473个氨基酸,氨基酸序列中存在3个N位糖基化位点,分子量为53.5 k D,等电点为7.12,含7个跨膜结构以及4个位于细胞膜外的亲水区,符合气味受体的典型结构特征。与鳞翅目已知昆虫的Orco同源性达到89%以上。不同发育期Lgly Orco表达量分析表明,Lgly Orco在二龄和三龄幼虫中的表达量是一龄幼虫的4~5倍,在四龄和五龄幼虫中的表达量是一龄幼虫的70%和50%,而在雌性成虫中的表达量是雄性成虫中的11倍。本研究将为大豆食心虫的嗅觉识别系统和大豆食心虫防治技术研究提供理论依据。     

不同生长期苦瓜对瓜实蝇产卵选择的影响

瓜实蝇(Bactrocera cucurbitae)是苦瓜(Momordica charantia)的一种重要入侵性害虫，评估其在不同生长期苦瓜上的产卵偏好，旨在摸清该虫的防治适期。本研究选取了不同生长期的苦瓜，通过设定选择性和非选择性测试，在室内研究了不同生长期损伤和未损伤的苦瓜对瓜实蝇产卵偏好的影响。结果表明：不同生长期的苦瓜显著影响了瓜实蝇的产卵偏好。针对无损伤的苦瓜，瓜实蝇偏好在谢花2～5和6～8 d后的苦瓜上产卵；针对损伤的苦瓜，除谢花1 d的苦瓜外，瓜实蝇在其它生长期苦瓜上的产卵偏好无显著性差异。基于本研究，对于无损伤的苦瓜，谢花2～8 d是预防和防治瓜实蝇的关键时期；而苦瓜一旦损伤，除谢花1 d外所有生长期均应提防瓜实蝇的为害。     

瓜实蝇DNA甲基化的MSAP体系建立与优化

瓜实蝇[Bactrocera cucurbitae (Coquillett)]是中国重要的蔬菜害虫,但其DNA甲基化研究尚未见报道。甲基化敏感扩增多态性是研究DNA甲基化的重要技术之一。通过对酶切反应、连接、PCR扩增和引物筛选等条件优化,建立瓜实蝇MSAP反应体系,即：①20 μL酶切体系中加入10 U的限制性内切酶与600 ng基因组DNA,于37℃酶切反应过夜;②20 μL连接体系中加入T4 连接酶1 U,HpaⅡ-MspⅠ-adapter接头50 pmol,EcoR I-adapter接头5 pmol,并于16℃反应12 h;③连接产物稀释后进行PCR预扩增和选择性扩增,再经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测结果。通过该体系筛选出适用于瓜实蝇基因组DNA甲基化多态性研究的6对引物;瓜实蝇MSAP体系为瓜实蝇的表观遗传学研究提供了技术支持。     

洋葱伯克霍尔德式菌CAS19产嗜铁素条件的研究

采用光谱吸收法,对一株分离自土壤的嗜铁细菌洋葱伯克霍尔德式菌Burkholderia cepacia CAS19产嗜铁素的条件进行研究。结果表明,MSA培养基最适于CAS19产嗜铁素,并且在320nm处有一个嗜铁素特异吸收峰;当铁离子浓度大于1μmol/L时,几乎完全抑制CAS19嗜铁素的产生;CAS19产嗜铁素的最适条件为:以蔗糖(sucrose)为C源,以脯氨酸(Pro)为N源,C/N比为10∶1,pH值为7.5,温度为30℃,通气量为20mL/250mL。     

土壤嗜铁细菌C19的筛选、分子鉴定及其对炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用

利用LB液体培养基进行生物富集,采用CAS(Chrome Azurol S)检测平板法.从海南岛橡胶树等作物根际土壤中分离获得43个产嗜铁索细菌菌株.通过室内平板对峙培养法研究其中嗜铁能力较强的菌株C19对12个常见炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用,结果表明.该菌株对Fusarium solani等9个菌株有不同程度的拮抗作用,显示该菌株具有较好的生防潜能.扩增菌株C19的16S rDNA序列,序列测定结果显示,该片段长度为1 525 bp,经Blastn搜索进行序列比对.该细菌为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia).     

苗期干旱对玉米产量和水分利用效率的影响

通过在防雨棚中进行的盆栽试验,以5个玉米杂交种(郑单958、郑单19、四单19、龙单13、鲁单981)为试材,研究了苗期轻度干旱和中度干旱对玉米产量和水分利用效率(wateruseefficiency,WUE)的影响。结果表明:5个品种的产量和耗水量均随干旱程度的加大而递减,四单19和龙单13的产量对干旱胁迫的敏感度小,耗水量对干旱胁迫的敏感度大(除四单19中度干旱)。轻度干旱提高了四单19和龙单13的WUE,中度干旱只提高了四单19的WUE,其它品种的WUE均随干旱程度的加大而递减。相关分析表明,WUE与抗旱指数呈显著正相关,WUE与产量呈显著正相关(除轻度干旱),但WUE与耗水量相关性不显著。四单19综合表现最好,在两种干旱胁迫处理下均同步实现了抗旱、节水、稳产的目标。     

转GmDREB1基因小麦新品系G19-349的抗旱特性

为明确转GmDREB1基因小麦G19-349的抗旱特性,以分子检测为阳性的转基因植株和受体对照济麦19为材料,利用小区试验测定和分析了浇二水和浇四水条件下小麦叶片叶绿素含量、气体交换、叶绿素荧光等光合参数,SOD、POD和CAT活性,以及MDA含量和籽粒产量,同时通过大区试验分析了在浇三水条件下小麦水分消耗特征参数和籽粒产量。对供试材料分子检测结果表明,目的基因已整合到小麦基因组中,并已正确转录。小区试验结果表明,在浇二水条件下,G19-349的旗叶叶绿素相对含量,气体交换参数P_n、G_s、T_r和C_i,叶绿素荧光参数F_v/F_m和Φ_(PSⅡ),以及三种抗氧化酶活性和产量均显著高于对照,而MDA含量显著低于对照;浇四水条件下,G19-349的各项指标与对照均无显著差异。大区试验结果表明,在浇三水条件下,G19-349较对照济麦19耗水量显著降低,而水分利用效率和产量均显著增加。说明转GmDREB1基因小麦G19-349在缺水条件下具有较高的抗氧化和光合能力,这是其在有限灌水条件下较受体济麦19具有较好水分利用特性的生理基础。     

重离子辐射玉米自交系田间性状的统计分析

利用7Li重离子辐射诱变永19玉米自交系, 跟踪记录从M1代到M3代植株的田间性状, 用生物统计学方法对当代植株的发芽率及后代植株的株高、穗位高、相对穗位等数据进行分析。结果表明, 重离子辐射永19玉米自交系后代植株变异较多, 其中10 Gy和40 Gy剂量处理得到的后代植株株高、穗位高与对照相比变异极显著;20 Gy、30 Gy和50 Gy剂量处理得到的后代植株株高、穗位高与对照相比变异明显;所有辐射后永19玉米自交系的相对穗位与穗位高呈线性相关, 与株高无明显相关, 且相对穗位与辐射剂量之间存在一定的线性相关, 但线性拟合优度较低。     

Chitin Degradation Machinery and Secondary Metabolite Profiles in the Marine Bacterium Pseudoalteromonas rubra S4059

Genome mining of pigmented Pseudoalteromonas has revealed a large potential for the production of bioactive compounds and hydrolytic enzymes. The purpose of the present study was to explore this bioactivity potential in a potent antibiotic and enzyme producer, Pseudoalteromonas rubra strain S4059. Proteomic analyses (data are available via ProteomeXchange with identifier PXD023249) indicated that a highly efficient chitin degradation machinery was present in the red-pigmented P. rubra S4059 when grown on chitin. Four GH18 chitinases and two GH20 hexosaminidases were significantly upregulated under these conditions. GH19 chitinases, which are not common in bacteria, are consistently found in pigmented Pseudoalteromonas, and in S4059, GH19 was only detected when the bacterium was grown on chitin. To explore the possible role of GH19 in pigmented Pseudoalteromonas, we developed a protocol for genetic manipulation of S4059 and deleted the GH19 chitinase, and compared phenotypes of the mutant and wild type. However, none of the chitin degrading ability, secondary metabolite profile, or biofilm-forming capacity was affected by GH19 deletion. In conclusion, we developed a genetic manipulation protocol that can be used to unravel the bioactive potential of pigmented pseudoalteromonads. An efficient chitinolytic enzyme cocktail was identified in S4059, suggesting that this strain could be a candidate with industrial potential.     

Efficient separation and reuse of CI Reactive Blue 19 from dyeing effluent by solvent extraction

In order to reduce environmental pollution from dyeing effluent, the cationic reverse micelles were prepared and used for removal of anionic Color Index (CI) Reactive Blue 19. The effect of surfactants, dyes, temperature and ultrasonic treatment on dye removal was investigated, respectively. The conductivity of CI Reactive Blue 19 aqueous solution was measured during removal process. In addition, the photograph of CI Reactive Blue 19 was also obtained. Finally, the removed dyes were backward extracted and reused for dyeing cotton fabrics. The results indicated that the removal of dyes was increased with increasing surfactants concentration and temperature, while the dye concentration exhibited the reverse trend. The higher removal of dyes could be caused by using ultrasonic treatment. The conductivity of dye aqueous solution was decreased with increasing surfactant concentration for the removal of dyes. The CI Reactive Blue 19 from backward extraction was reused for dyeing cotton fabrics, which exhibited the good property.     

黑龙江不同积温带水稻品种对不同时段低温冷害的适应性研究

以覆盖黑龙江省三个积温带的123个水稻品种(品系)为试材,将6月30日-7月29日每10天为1段分3个时段对水稻进行低温处理,以研究冷害发生规律。结果发现,水稻在6月30日-7月19日受低温易发生延迟型冷害,7月10日-7月19日受低温易发生障碍型冷害,证实了低温对水稻冷害的时段效应;第一积温带水稻在7月10日-7月19日受低温易发生延迟型冷害,第一积温带水稻在6月30日-7月9日受低温易发生障碍型冷害,第二、三积温带水稻在6月30日-7月19日受低温易发生延迟型冷害,第二、三积温带水稻在7月10日-7月19日受低温易发生障碍型冷害,体现了水稻应对低温的生态区效应。这对黑龙江省抗寒水稻品种的选育以及抗寒措施的提出具有指导意义。     

九个黄淮和长江中下游冬麦区的优质冬小麦品种在晋中麦区的生育及品质表现

为拓宽山西优质小麦品种资源,采用田间试验,分秋播(2010年9月28日)和春播(2011年2月28日)两个播种时期,研究了来自黄淮冬麦区和长江中下游冬麦区的9个优质小麦品种在晋中晚熟冬麦区的农艺、产量及品质性状表现。其中黄淮冬麦区品种为烟农19(冬性,强筋)、淮麦18(半冬性,中筋)和宁麦9号(冬性,弱筋),长江中下游冬麦区品种为镇麦168(春性,强筋)、皖麦33(春性,强筋)、宁麦13(春性,弱筋)、扬辐麦2号(春性,弱筋)、扬辐麦4号(春性,弱筋)和扬麦15(春性,弱筋)。结果表明,烟农19和淮麦18在晋中麦区秋播可正常越冬,并获得相当的产量,且烟农19的成穗数和产量高于淮麦18;9个引进小麦品种在晋中麦区春播均可抽穗成熟,但因2010-2011年度秋冬春三季连旱,所有品种在苗期到拔节期受旱,因而均未能获得较高的籽粒产量。烟农19和淮麦18的籽粒产量和品质秋播明显高于或优于春播。总体来看,在晋中麦区,烟农19和淮麦18适宜通过秋播种植加以利用,扬辐麦2号、宁麦9号有望通过春播种植加以利用。     

早熟烤烟品种PVH19的特征特性

为筛选适宜在云南种植的早熟烤烟品种,以云烟85和K 326为对照,对从巴西引进的烤烟品种PVH 19进行了连续两年的新品种示范试验。结果表明,PVH 19是一个典型的早熟品种,抗TM V和根结线虫病,中抗黑胫病和赤星病,综合抗性好,原烟外观质量较好,化学成分比例协调,各项指标都在适宜范围内,产量、产值略低于对照,但差异不显著。综合各示范点情况,PVH 19适合在云南省高海拔地区种植。