西瓜未受精子房离体培养技术

西瓜未受精子房离体培养作为单倍体育种的有效方法,可极大提高育种效率。以西瓜‘早佳’未受精子房为试材,对西瓜未受精子房出胚率的影响因素进行了研究,并鉴定了再生植株倍性。试验结果表明,栽培季节对西瓜未受精子房离体培养有很重要的影响,在相同的培养条件下,秋季栽培出胚率可达21.33%,高出春季栽培约6%;取材当天的日最低、最高气温对西瓜未受精子房离体培养出胚率也有一定的影响,在21～35℃范围内日平均出胚率均可达10%,显著高于过低或过高气温下统计的出胚率;4℃低温预处理并不能提高西瓜胚状体诱导效率。利用染色体计数法与流式细胞仪鉴定36棵再生植株倍性,单倍体率为97%、二倍体率为3%。     

黄瓜未授粉子房离体培养的研究进展

根据近年来国内外黄瓜未授粉子房离体培养的最新研究进展,主要对离体培养至成苗过程中的主要影响因素进行了全面总结、对比和分析,讨论了目前该技术在黄瓜育种应用上存在的问题及展望,以期对黄瓜分子育种技术提供丰富的理论支持。     

影响瓜类作物未授粉子房或胚珠离体培养技术的几个因素

为了迅速获得纯系材料,缩短育种年限,进而提高育种效率,对获得单倍体植株的重要方式即未授粉子房或胚珠的离体培养进行了研究,发现影响其效果的主要因素有植株的基因型、生长季节、胚囊发育时期、接种前外植体的预处理方式、接种方式、培养基等,并对其进行详细阐述,且这些影响因素并不是孤立存在的,而是由多种因素共同作用、相互影响;因此,植物未授粉子房或胚珠离体培养虽取得了大量的研究成果,但仍需进一步完善。     

西瓜未受精胚珠的离体培养

以‘西农9号’和‘蜜桂’为供试材料进行了西瓜未受精胚珠的离体培养,研究了供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未受精离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d时效果最佳;CPPU处理3 d的胚珠诱导率最高;‘西农9号’在2.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点率最高为13.3%,‘蜜桂’在3.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.2/0.5 mg·L-1NAA,3.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点诱导率最高均为6.7%。     

提高春季西瓜未授粉子房胚状体诱导率的方法

为提高春季西瓜未授粉子房的胚状体诱导率、加速西瓜单倍体育种进程,以早佳8424西瓜未授粉子房为材料,对影响春季西瓜未授粉子房胚状体诱导率的因素进行了研究。结果表明:摘取子房时尽量保留最长果柄,然后将带果柄子房用0.02 mg·L~(-1)的TDZ溶液浸泡10 min,最后将其置于15℃恒温条件下预处理2 d,能够将春季西瓜未授粉子房的胚状体诱导率从3.5%提高到15.9%。     

草莓未受精子房离体雌核发育的研究

 将凤梨草莓（Fragaria × ananassa Duch.）品种‘明旭’未受精子房在适宜离体条件下培养,诱导其雌核发育。在雌核发育的不同时期采用爱氏苏木精整体染色—石蜡切片法、整体染色—冬青油透明—石蜡切片法、解剖—整体透明法观察研究,结果表明雌核发育有3种不同的现象：①卵细胞启动分裂形成原胚,即卵细胞孤雌生殖;②偶尔有反足细胞启动分裂形成细胞团,但进一步发育的方向不清楚,很难形成胚体,未发现助细胞的无配子生殖;③个别极核分裂形成少数类胚乳游离核、游离核集团或胚乳状细胞结构等自发胚乳。胚的形态表现多样,可划分为典型胚、具畸形细胞胚和愈伤组织化胚。但无论哪种胚均是卵细胞孤雌生殖的结果;典型胚的发育和体内正常胚胎发育途径相似;胚囊植株主要经典型胚发育而成。具畸形细胞胚和愈伤组织化的胚很难形成胚囊植株。     

西瓜未受精胚珠离体培养若干影响因素的研究

为探讨适宜的西瓜未受精胚珠离体培养方法,以‘大果黑美人’、‘早春翠玉’、‘中科6号’等为试材,研究了供体植株的基因型、4℃预处理时间、35℃高温预培养时间及植物生长调节剂对未受精胚珠的反应率和愈伤诱导率的影响。结果表明:不同材料(基因型)的胚珠反应率和愈伤诱导率都有显著性差异,愈伤诱导率最高的是‘中科6号’(92.3%),最低的是野生西瓜‘09005’(57.2%);4℃低温预处理没有显著提高胚珠反应率和愈伤诱导率,对于胚珠反应率和愈伤诱导率的影响因培养基不同而不同;35℃高温预培养可以提高胚珠反应率和愈伤诱导率,预培养3 d可以得到较高的愈伤诱导率和质量较好的愈伤组织;在诱导培养基MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 3 mg·L-1+TDZ0.05 mg·L-1上,愈伤诱导率最高为84.64%;植物生长调节剂TDZ相对于2,4-D和KT对西瓜未受精胚珠愈伤诱导的效果较好。     

葫芦科植物未授粉子房培育单倍体研究进展

综述了近年来葫芦科植物未授粉子房培养单倍体状况,及葫芦科植物未授粉子房培养的取材、基因型、温度、激素等几个因素影响的研究进展,进而对其当前问题及前景进行了探讨。     

西瓜离体培养研究进展

本文综述了西瓜不定芽诱导、体细胞胚胎发生、花药培养、原生质体培养和体细胞杂交、体细胞无性系变异及转基因等方面取得的研究进展,并对西瓜离体培养、遗传转化与育种的前景作了展望。     

大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究

 以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L^-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。     

黄瓜未授粉子房诱导出胚和再生植株的研究

以7个不同黄瓜基因型为材料进行黄瓜未授粉子房的培养研究,结果表明,不同基因型出胚率差异显著,其中密刺型黄瓜北京102出胚率最高,达25.3%,鄂黄3号出胚率最低,为0.7%。以北京102、中农26号和津优1号为试材进一步研究热激诱导、外源激素、植株不同生长阶段对胚状体诱导产量的影响,发现35℃热激处理2d胚状体产量最高,分化培养基中NAA为0.20mg·L-1、6-BA为0.8mg·L-1时最易分化出胚,在植株第21~30节位采收的子房出胚量最高。再生培养基中GA浓度达到0.4~0.8mg·L-1时,可有效打破再生植株"花打顶"现象从而提高植株再生率。再生植株中二倍体植株比率为70.0%,二倍体植株中DH株比率为84%。     

西瓜组织培养的研究与应用

对西瓜组织培养的研究与应用进行了综述，西瓜组织培养的研究主要应用于快速繁殖和遗传转化。西瓜芽培养的研究较完善，花药培养也获得了花粉植株，但原生质体培养仅诱导出愈伤组织。     

生物技术在西瓜遗传育种研究中的应用

离体培养、基因工程与分子标记分析等生物技术应用于西瓜性状遗传改良研究取得重要进展。目前已建立了成熟的西瓜高效离体培养再生体系,主要应用于优良种苗快繁与重要性状遗传转化研究;染色体组水平的倍性操作已成功用于西瓜育种实践;在西瓜中已鉴定克隆多个重要性状基因;采用农杆菌介导或直接转化法,已将一些目的基因导入西瓜中,进行抗病、耐盐等重要性状改良;RAPD、RFLP、SSR、ISSR、AFLP等多种分子标记开始广泛应用于西瓜种质资源分析与系统演化、品种鉴定与倍性分析、遗传图谱构建、性状基因连锁标记与标记辅助育种等方面。     

保水剂在无土栽培西瓜中的应用效果研究

以"黑美人"西瓜为供试品种,研究不同用量保水剂在西瓜无土栽培中的节水节肥效果,结果表明:在无土栽培中通过适量地施用保水剂可以保证西瓜在缺水缺肥下能够正常生长,同时有一定的增产效果,且可以维持其品质,达到了节水及节肥的效果,其中以85%水肥 0.6%保水剂处理的效果最好,与正常肥水管理相比,不仅能达到节约15%水肥的效果,而且产量还能提高8.08%.另外,在水肥充足条件下,施用保水剂对西瓜不仅没有起到增产的效果,反而有降低产量及品质的负效应.     

抗微管除草剂胺磺灵诱导西瓜四倍体试验研究

以0.2%的秋水仙素为对照,用3种不同浓度的胺磺灵水溶液对10个西瓜自交系进行诱导加倍试验.结果表明:胺磺灵是一种完全可以取代秋水仙素的新型高效西瓜四倍体诱变剂,且诱变效果好,其适宜浓度为20,μmol/L左右.     

核桃花粉离体萌发的培养基研究

以6a生云新早实核桃的新鲜花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究了不同的培养基组分以及温度对核桃花粉萌发的影响。结果表明:1)在单因子试验中,蔗糖、H3BO3和CaCl2在一定质量浓度范围内,对核桃花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定质量浓度时则起抑制作用;而氮、镁和钾对核桃花粉萌发不显著。2)在正交试验中,蔗糖、H3BO3和CaCl2对核桃花粉萌发有极显著的影响,核桃花粉最适的培养基为100g/L蔗糖+10mg/LH3BO3+40mg/LCaCl2,花粉的萌发率可以达到45.24%。3)核桃花粉离体培养的最适温度为25℃,培养温度过高或过低都会抑制核桃花粉的萌发和花粉管生长。     

蛇莲离体培养研究

采用不同培养基对蛇莲不同的外植体进行离体培养,对其组培苗作细胞渗透性分析.结果表明:以MS为基本培养基优于、WV基本培养基;6-BA(0.5mg·L-1)利于顶端茎段外植体增殖,而抑制底端茎段外植体增殖,各类外植体以顶端茎段为最佳培养材料;添加6-BA的MS培养基上的组培苗表现出低的细胞膜渗透率,更能适应出苗后大田环境生长.